2. INTRODUCTION
Antibiotics and evolving of bacteria as a
public health issue in recent years.
- No authorization is needed to obtain
antibiotics in most countries.
- Not finishing treatments or not taking
antibiotics correctly.
- Taking antibiotics to treat viral
diseases.
- Natural evolving of certain types of
bacteria and antibiotic resistance.
5. MATERIALES Y MÉTODOS
NORTHERN BLOT
Se utiliza para detectar una secuencia de
ARN específica en un muestra. Las
moléculas de ARN en una muestra se
separan por tamaño mediante
electroforesis en gel. Los fragmentos de
ARN son transferidas del gel a la superficie
de una membrana. La membrana se expone
a una sonda de ADN marcada con una
etiqueta (radiactiva o química). Si la sonda
se une a la membrana, entonces la
secuencia complementaria de ARN está
presente en la muestra.
6. MATERIALES Y MÉTODOS
SONDAS
Secuencia de ADN o ARN de cadena
simple utilizada para encontrar su
secuencia complementaria en el genoma
de una muestra. Se coloca en contacto
con la muestra bajo condiciones que
permitan que la secuencia de la sonda se
hibriice con su secuencia
complementaria. La sonda está marcada
con un marcador radiactivo o químico que
permite visualizarla.
7. MATERIALES Y MÉTODOS
SÍNTESIS PROTÉICA
Proceso mediante el cual se crean proteínas a partir de los 20 aa
esenciales.
- Ocurre en los ribosomas del citoplasma.
- Replicación, transcripción y traducción
- RNAm, RNAt, RNAr
- Codones STOP
8. MATERIALES Y MÉTODOS
RNasa
- Ribonucleasa o RNasa, es una enzima
que cataliza la hidrólisis de ARN en
componentes más pequeños.
- Degradan algunos intermediarios
para reducir la formación neta de
subunidades ribosomales.
- Esenciales para la maduración de las
subunidades, estudiadas como blanco
de antibióticos.
9. RESULTADOS
En el Northern Blot los resultados se leen de
acuerdo a que tan intensa sea la banda que se
obtuvo después de los procesos de
hibridación, electroforesis y procesamiento de
la muestra.
- Se evalúa la presencia de diferentes subunidades utilizando
hibridación con: 16S, 5’ y 3’
- Se utilizan células tratadas con antibióticos para ver la posible
inhibición de los RNAr que pueden generar.
- Presencia de un grupo control (ND) sin administración de fármacos.
10. RESULTADOS
- En la imagen se observa la descripción de las enzimas, los precursores y subunidades que participan en
la biosíntesis del ribosoma bacteriano.
- La biosíntesis de la subunidad mayor (50S) requiere mecanismos mas complejos y un mayor cantidad de
precursores (23S y 5S), mientas que la subunidad menor (30S) solo requiere un precursor (16S) y
posteriormente un proceso de maduración.
11. RESULTADOS
- Rnasas entendidas como paso fundamental
de la maduración de subunidades.
- Se examinan células de E. coli con
mutaciones en las rnasas y se determina
cuantas subunidades ribosomales hay.
- Se administran medicamentos y se mide el
número de subunidades restantes en la
célula después del tratamiento.
- La subunidad mas afectada por los
antibióticos resulta ser la 50S que presenta
una drástica disminución a comparación de
la subunidad 30S de la misma célula
*Se mide la fragmentación de la subunidad
16S y la degradación del RNAr
12. RESULTADOS
VRC inhibe la
acción de las
RNasas y puede
potenciar su
acción en
combinación con
antibióticos.
- Lane 1 grupo control
- Lane 2 grupo VRC
- Lane 3 grupo Paramomicina y VRC
- Lane 4 grupo Azitromicina y VRC
- Se midieron subunidades 16S y 23S y se analizó su
fragmentación (Cantidad de fragmentos de rRNA.)
13. DISCUSSION
AUTHOR QUOTE WAS IT MENTIONED OR NOT
Kaczanowska M, Ryde´n-Aulin
M.
“This organelle is the site of cellular protein
biosynthesis in all living organisms.It functions in
mRNA translation in a similar fashion in all cells.”
talking about ribosomes
Karbstein K.
“Formation of both particles involves the
assistance of a large collection of chaperone
proteins with specific functions in the maturation
process.” referring to ribosome biogenesis
Davies J, Davies D.
Felden B, Cattoir V.
Strachan CR, Davies J.
“One of the most pressing medical issues today is
the continuing rise in antibiotic-resistant
microorganisms.”
14. CONCLUSIONS
• Antibiotics are an important tool to battle different infections caused by
bacteria and there are new techniques and researches focused on
improving current antibiotics and developing new ones that target
different parts of bacterial organisms and make treatments more
effective.
• The correct use of antibiotics is an important public health topic that
should be discussed with patients to assure the suitable treatment for
each illness and achieve health while preventing bacterial resitance.
