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DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y DE
LA AGRICULTURA
CARRERA DE INGENIERÍA AGROPECUARIA
TESIS PREVIO A LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE
INGENIERO AGROPECUARIO
TEMA: ELABORACIÓN Y EVALUACIÓN DE LA HARINA DE
GRILLO (Acheta domesticus) COMO SUSTITUTO DE HARINA
DE PESCADO EN DOS LÍNEAS DE TRUCHA ARCOÍRIS
(Oncorhynchus mykiss) DURANTE LA ETAPA DE ALEVINAJE
AUTORES: CHÁVEZ ALCÍVAR, BEXCI ESTEFANÍA
UBIDIA LUGO, DAVID JOSUÉ
DIRECTOR: ING. PAZMIÑO, JULIO
CODIRECTOR: ING. TIGRERO, JUAN
SANGOLQUÍ
2015
ii
CERTIFICADO
iii
AUTORÍA DE RESPONSABILIDAD
iv
AUTORIZACIÓN
v
DEDICATORIA
A aquellos profesores que sembraron y cultivaron en nuestras mentes el espíritu de
investigación e innovación, que nos llevaron a desarrollar la autoría de esta
investigación, que inicio como una idea y se concretó con la culminación de nuestras
carreras.
A nuestros padres, hermanos y demás familiares que han sido un pilar fundamental
para nosotros.
Estefanía Chávez
David Ubidia
vi
AGRADECIMIENTO
Al personal docente de la carrera en ciencias agropecuarias de la Universidad de las
Fuerzas Armadas – ESPE, por las experiencias vividas y enseñanzas que dejan una
huella imborrable en nuestras vidas.
A nuestro director Ing. Julio Pazmiño y codirector Ing. Juan Tigrero que con su
sabiduría y espíritu de investigación nos han guiado en cada paso que dimos para la
culminación de este proyecto.
A la Ing. Daysi Muñoz por su incondicional apoyo y asesoramiento en los momentos
más difíciles de este proyecto.
Al doctor Diego Almeida por su aporte mediante la empresa SARgrillo como
proveedor de información y grillos para el estudio.
Al doctor Fabio Sala por su apoyo técnico, personal y mediante ECUA-BIOMIX,
como proveedor del balanceado utilizado.
A nuestras familias fuente de apoyo constante a lo largo de nuestra vida y más aún en
los duros años de carrera profesional, en especial queremos expresar el más grande
agradecimiento a nuestros padres quienes sin su ayuda no hubiese sido posible lograr
esta meta.
Estefanía Chávez
David Ubidia
vii
ÍNDICE DE CONTENIDO
CERTIFICADO....................................................................................................... ii
AUTORÍA DE RESPONSABILIDAD ................................................................... iii
AUTORIZACIÓN .................................................................................................. iv
DEDICATORIA...................................................................................................... v
AGRADECIMIENTO ............................................................................................ vi
ÍNDICE DE CONTENIDO.................................................................................... vii
ÍNDICE DE TABLAS ............................................................................................. x
ÍNDICE DE FIGURAS.......................................................................................... xii
RESUMEN........................................................................................................... xiii
ABSTRACT ......................................................................................................... xiv
CAPÍTULO I
INTRODUCCIÓN ................................................................................................. 1
1.1 Objetivos..................................................................................................... 2
1.1.1 Objetivo general.......................................................................................... 2
1.1.2 Objetivos específicos................................................................................... 2
CAPÍTULO II
REVISIÓN DE LITERATURA ............................................................................ 3
2.1 Producción de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) en el Ecuador ........... 3
2.1.1 Origen de la trucha ...................................................................................... 3
2.2 Parámetros de manejo.................................................................................. 3
2.2.1 Factor físico ambiental ................................................................................ 3
2.2.2 Factores intrínsecos ..................................................................................... 5
2.3 Etapas en el proceso de producción ............................................................. 5
2.4 Fisiología de la digestión............................................................................. 6
2.5 Nutrición en trucha...................................................................................... 6
viii
2.5.1 Requerimientos nutricionales en alevines .................................................... 7
2.6 Uso de harina de pescado ............................................................................ 8
2.7 Uso de harina de insecto.............................................................................. 9
2.7.1 Grillo doméstico (Acheta domesticus).........................................................12
2.7.2 Obtención de grillos para la zootecnia ........................................................14
CAPÍTULO III
MATERIALES Y MÉTODOS.............................................................................15
3.1 Ubicación del lugar de investigación ..........................................................15
3.1.1 Ubicación política ......................................................................................15
3.1.2 Ubicación geográfica..................................................................................15
3.1.3 Ubicación ecológica ...................................................................................16
3.2 Materiales...................................................................................................16
3.3 Métodos .....................................................................................................17
3.3.1 Diseño experimental...................................................................................17
3.3.1.1 Factores a probar........................................................................................17
3.3.1.2 Tratamientos a comparar ............................................................................17
3.3.1.3 Tipo de diseño............................................................................................17
3.3.1.4 Repeticiones...............................................................................................18
3.3.1.5 Características de las unidades experimentales (UE)...................................18
3.3.2 Análisis estadístico.....................................................................................18
3.3.2.1 Esquema de análisis de variancia................................................................18
3.3.2.2 Distribución en el campo ............................................................................19
3.3.2.3 Análisis funcional.......................................................................................19
3.3.2.4 Análisis económico ....................................................................................20
3.3.2.5 Variables a medir .......................................................................................20
3.3.3 Métodos específicos de manejo del experimento.........................................23
ix
CAPÍTULO IV
RESULTADOS .....................................................................................................26
4.1 Parámetros evaluados ................................................................................26
4.1.1 Peso ...........................................................................................................26
4.1.2 Largo.........................................................................................................27
4.1.3 Ancho ........................................................................................................28
4.1.4 Relación Ancho-Largo ...............................................................................28
4.1.5 Mortalidad..................................................................................................29
4.1.6 Conversión alimenticia...............................................................................29
4.1.7 Pruebas de glucosa .....................................................................................31
4.2 Evacuación de órganos post mortem...........................................................32
4.3 Análisis económico ....................................................................................33
CAPÍTULO V
DISCUSIÓN..........................................................................................................35
CAPÍTULO VI
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ...................................................39
6.1 Conclusiones..............................................................................................39
6.2 Recomendaciones.......................................................................................40
6.3 Bibliografía ................................................................................................41
x
ÍNDICE DE TABLAS
TABLA 1 Parámetros fundamentales para el cultivo de
trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss)................................................. 4
TABLA 2 Requerimiento porcentual de nutrientes en
alevines de trucha................................................................................ 7
TABLA 3 Requerimiento de aminoácidos en etapa de alevinaje
de trucha arcoíris ................................................................................. 8
TABLA 4 Composición nutricional de la harina de pescado................................. 9
TABLA 5 Taxonomía de grillo común................................................................12
TABLA 6 Características químicas del grillo común
(Acheta domesticus) ...........................................................................13
TABLA 7 Esquema ANOVA..............................................................................18
TABLA 8 Tabla de alimentación guía de Leitritz .................................................21
TABLA 9 Ajuste nutricional de dietas experimentales. ........................................24
TABLA 10 Descripción y nomenclatura de las dietas en estudio............................25
TABLA 11 Análisis de variancia del Peso (g) de alevines a lo largo de
los ensayos en semanas, entre dos líneas y cuatro
niveles de sustitución..........................................................................26
TABLA 12 Análisis de variancia de la largo (cm) de alevines
a lo largo del ensayo en semanas, entre dos líneas
y cuatro niveles de sustitución ............................................................27
TABLA 13 Análisis de variancia del Ancho (cm) de alevines
a lo largo del ensayo en semanas, entre dos líneas y
cuatro niveles de sustitución ...............................................................28
TABLA 14 Análisis de variancia de Relación Ancho Largo de alevines
a lo largo del ensayo en semanas, entre
dos líneas y cuatro niveles de sustitución............................................29
TABLA 15 Análisis de variancia de Conversión Alimenticia (cm)
de alevines, entre tres bloques, dos líneas
y cuatro niveles de sustitución ............................................................30
xi
TABLA 16 Análisis de variancia de Glucosa en alevines, entre tres bloques, dos
líneas y cuatro niveles de sustitución ..................................................31
TABLA 17 Análisis de variancia de Ciegos Pilóricos de alevines,
entre tres bloques, dos líneas
y cuatro niveles de sustitución ............................................................33
TABLA 18 Análisis económico en base al presupuesto parcial
del balanceado comercial y los experimentales ...................................34
xii
ÍNDICE DE FIGURAS
FIGURA 1 Distribución de los tratamientos en la Repetición I.............................19
FIGURA 2 Distribución de los tratamientos en la Repetición II ...........................19
FIGURA 3 Distribución de los tratamientos en la Repetición III ..........................19
FIGURA 4 Curva de crecimiento .........................................................................26
FIGURA 5 Largo en el tiempo.............................................................................27
FIGURA 6 Ancho en el tiempo ............................................................................28
FIGURA 7 Relación ancho largo en el tiempo......................................................29
FIGURA 8 Conversión alimenticia en tratamientos..............................................30
FIGURA 9 Conversión Alimenticia entre Líneas .................................................31
FIGURA 10 Hígado...............................................................................................32
FIGURA 11 Riñón.................................................................................................32
FIGURA 12 Ciegos pilóricos .................................................................................33
xiii
RESUMEN
La harina de insecto como sustituto de harina de pescado para alimentos
balanceados acuícolas a largo plazo. El objetivo fue establecer el porcentaje
adecuado de sustitución de harina de pescado por harina de grillo común (Acheta
domesticus) en alevines de dos líneas de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) hasta
un peso de 10 gramos de peso vivo. El estudio se realizó entre octubre del 2014 y
marzo del 2015 en la piscícola “El Plata” en la Comunidad El Corazón de Mundo
Nuevo, Carchi, Ecuador. Se usó un diseño de bloques completos al azar con tres
repeticiones. Los resultados no presentaron diferencias estadísticas significativas
entre tratamientos, entre líneas se observaron diferencias en los parámetros
productivos más no en los análisis post mortem. Los tratamientos aplicados tuvieron
niveles bajos de sustitución de 5%, 10% y 15%, lo que pudo influir a que no se
observen comportamientos relevantes de los animales, la línea española con mayor
rendimiento fue más agresiva al consumo de alimento, lo que no se observó en la
línea nacional. Por lo tanto la harina de grillo es un sustituto parcial para la harina de
pescado en las dos líneas estudiadas.
PALABRAS CLAVES:
- SUSTITUCIÓN
- HARINA DE INSECTO
- HARINA DE PESCADO
- Acheta domesticus L.
- Oncorhynchus mykiss Walbaum
xiv
ABSTRACT
Insect flour substitute for fishmeal balanced long-term aquaculture food. The
objective was to determine the appropriate percentage of fishmeal replacement for
flour common cricket (Acheta domesticus) by juvenile rainbow trout two lines
(Oncorhynchus mykiss) weighing up to 10 grams of body weight. The study was
conducted between October 2014 and March 2015 on the fish "El Plata" in the
Community's Corazon del Mundo Nuevo, Carchi, Ecuador. A design randomized
complete block with three replications was used. The results showed no statistically
significant differences between treatments, between the lines differences in growth
performance but not in the post mortem were observed. The treatments had low
levels of substitution of 5%, 10% and 15%, which could influence not relevant
animal behaviors, Spanish line with higher performance was more aggressive to feed
intake are observed, which it was not seen in national line. Therefore flour cricket is
a partial substitute for fishmeal in both lines studied.
KEYWORDS:
- REPLACEMENT
- BUG FLOUR
- FISH MEAL
- Acheta domesticus L.
- Oncorhynchus mykiss Walbaum
1
CAPÍTULO I
INTRODUCCIÓN
La producción de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss Walbaum) en el país se
viene dando desde el siglo XIX, con la primera importación de ovas de trucha de
origen estadounidense, que con el tiempo se ha convertido en la trucha común o
nacional (Dávila, 2007). En la actualidad se importan ovas de trucha de origen
Español que son preferidas por los productores por su genética mejorada (Andes,
2013).
Según (Ramos & Pino, 2014), el uso de insectos como fuentes alternativas en
dietas para acuicultura y otras producciones pecuarias son posibles, ya que el aporte
proteico es similar al de la harina de pescado.
Los estudios dirigidos a la obtención de harina de insecto son aún escasos, es
importante resaltar que los ensayos llevados a cabo en lubina (Dicentrarchus labrax
L.) no presentaron diferencias en cuanto a la preferencia por harina de pescado frente
a la de insecto y tampoco hubo diferencias en cuanto a la apariencia, sabor o textura
de carne entre los peces alimentados con distintas dietas (Ratliff, 2007).
Se ha estudiado el valor nutritivo del saltamontes (Acrida cinérea L.) llegando a
los valores nutritivos de: proteína bruta (65%), grasa (8%), quitina (9%) y cenizas
(4%), valores similares a la harina de pescado en cuanto a proteína (60%) (Wang,
Zhai, Zhang, Zhang, & Hui, 2007).
La presente investigación está dirigida a elaborar, valorar y evaluar la sustitución
de 5%, 10%, 15% de harina de pescado por harina de grillo común (Acheta
domesticus L.) en el balanceado para etapas iniciales de dos líneas de trucha arcoíris
(Oncorhynchus mykiss Walbaum).
2
1.1 Objetivos
1.1.1 Objetivo general
- Establecer el porcentaje adecuado de sustitución de harina de pescado por
harina de grillo común (Acheta domesticus) en alevines de dos líneas de
trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) hasta un peso de 10 g.
1.1.2 Objetivos específicos
- Obtener harina de grillo común (Acheta domesticus) y valoración de sus
características físico – químicas.
- Comparación de tres niveles de sustitución (5%, 10% y 15%) de harina de
grillo (Acheta domesticus) sobre el porcentaje de harina de pescado presente
en el balanceado comercial, durante la etapa de alevinaje de dos líneas de
trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss).
- Evaluación de parámetros morfométricos y fisiológicos de alevines de dos
líneas de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) expuestos a los tres niveles
de sustitución (5%, 10%, 15%) y el control.
- Realizar un análisis económico de la utilización de harina de grillo común
(Acheta domesticus).
- Difundir los resultados y la metodología a los interesados para su
conocimiento y aplicación.
3
CAPÍTULO II
REVISIÓN DE LITERATURA
2.1 Producción de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) en el Ecuador
La acuicultura a nivel nacional ha sido importante debido a sus condiciones
climáticas, priorizando la producción de camarón y tilapia en la costa, especies de
agua dulce en la sierra como la trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss), y en el oriente
varias especies nativas.
(Moscoso, 2005), indica que Jorge Ubidia en 1928 importó 60.000 ovas de
trucha al Ecuador desde Estados Unidos, las eclosionó y sus alevines fueron
sembrados en el río Machángara de Quito; luego construyó salas de incubación en
los sectores de: Punyaru en Otavalo, Federico Intriago Arrata en Cotopaxi y
Chirimanchay en el Azuay. Con el desarrollo de la trucha se formaron los clubes de
caza y pesca, que jugaron un papel importante en la siembra de ríos y lagunas de la
región interandina.
2.1.1 Origen de la trucha
La trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) es originaria de la región del río
Sacramento, en la costa oeste de los EEUU (Piedrahita, 1988). Posteriormente fue
introducida desde EEUU a Escocia en los años 80 con la empresa Golden Sea
Product, se expande a Francia, a las instalaciones de la Ferme Marine de Douhet en
la isla de Oleron. En España se establece la primera granja piscícola INSUIÑA SL en
Galicia en el año de 1983 (Trouw España S.A, 2003)
2.2 Parámetros de manejo
2.2.1 Factor físico ambiental
Dentro del manejo de una piscicultura existen una serie de factores que influyen
el desarrollo de una buena respuesta de los peces, o por lo contrario hacen que se
depriman. Estos se clasifican en: los factores extrínsecos, como la temperatura, los
cambios de estación, los parámetros abióticos del agua, y los factores intrínsecos o
4
aquellos inherentes al pez como la edad y el estado sanitario (Olabuenaga, 2000).
Los factores extrínsecos son los que mandan una serie de estímulos hacia un
organismo, en el cual puede actuar de forma negativa originando una reacción
subsecuente, produciendo así el estrés, los peces pueden responder a estos estímulos
mediante reacciones fisiológicas y de comportamiento para adaptarse a una nueva
situación. Se incluyen sub factores como son: precipitación, horas luz, calidad y
cantidad de agua, oxígeno disuelto, concentración de metales pesados, temperatura,
entre otras (Rodriguez & Anzola, 2009), estos factores pueden afectar en el
metabolismo de los peces disminuyendo así su tasa de supervivencia lo que afecta la
producción.
Según (Blanco, 1995) las condiciones generales medioambientales que se
requieren para el cultivo de trucha arcoíris se muestran en la Tabla 1.
Tabla 1
Parámetros fundamentales para el cultivo de trucha arcoíris (Oncorhynchus
mykiss)
PELIGROSO DUDOSO NORMAL UNIDADES FACTORES
22 y mas 20 – 22 < 20 ºC Temperatura del Agua
50 50 – 70 =< 80 % Oxígeno Disuelto
<5.5 / >9.5 <6.0/ > 9.2 6<pH<9 Ph pH
> 600 500 – 600 20 - 500 uS/cm Conductividad a 20 ºC
Débil 8 - 60
Fuerte > 400
mg/l Alcalinidad en (HCO3)
Fuerte 60 – 200 mg/l Calcio
> 100 50 100 0 – 50 mg/l Sulfatos en (SO4)
++ + - Ácido Sulfhídrico
> ++
Débil 0 - 10
Fuerte 11 o mas
mg/l Nitratos en (NO3)
=>1 0.1 0 - indicios 0.001 mg/l Nitritos en (NO2)
=> 1 0.01 - 0.4 0 - indicios 0.001 mg/l Amoniaco
> 50 20-50 indicios -20 mg/l
Cloruros en (CL) sin
influencia de mar
> 70 30 – 70 > 30 mg/l Materias en suspensión
> 20 12 – 20 > 20 mg/l
Anhídrido Carbónico
(CO2)
> 5 2 – 5 1 – 2 mg/l Oxibilidad en frio, en 4h
Fuente: (Blanco, 1995) ºC: grados centígrados; %: porcentaje; pH: potencial hidrogeno; uS/cm: micro
siemens por centímetro; mg/l: miligramos por litro.
5
Durante la etapa de alevinaje, es importante tener en cuenta que la densidad de
siembra no debe ser superior a los 5 kg/m3
. La profundidad de la piscina debe ser de
máximo 50 cm y con circulación continua de agua sin necesidad de ser excesiva. La
luminosidad intensa es causante de estrés por lo que se recomienda que en las
primeras cuatro semanas de los animales estén bajo techo o cobertura parcial del
33% de la piscina. La oxigenación del agua deberá estar cerca de la saturación con
un recambio hídrico total cada 30 minutos (Sala, 2011).
2.2.2 Factores intrínsecos
Estos son los factores que tienen que ver con el estado del pez como la edad, el
estado sanitario, entre otras (Olabuenaga, 2000). Los peces de piscifactorías están
sujetos a múltiples situaciones de manejo, transporte y confinamiento que es
responsable de la aparición de estrés, causante también del desarrollo de
enfermedades infecciosas causadas por patógenos primarios u oportunistas afectando
a la producción acuícola (Davis, Okihiro, & Hinton, 2002).
2.3 Etapas en el proceso de producción
El desarrollo biológico de la trucha consta de cinco etapas (Bastidas &
Cartagena, 2002):
- Ovas.- Son los huevos fecundados que permanecen por 30 días en promedio, para
luego eclosionar y convertirse en alevines (Bastidas & Cartagena, 2002).
- Alevines.- Son peces pequeños que miden de 3 a 10 cm, con un pesos que van de
1.5 a 20 gramos (Bastidas & Cartagena, 2002).
- Juveniles.- Son peces que miden de 10 a 15 cm, con pesos que van de 20 a 100
gramos (Bastidas & Cartagena, 2002).
- Comerciales.- Son peces que miden 15 a 22 cm con un peso de 100 a 200 gramos
(Bastidas & Cartagena, 2002).
- Adultos.- Son peces que han llegado al desarrollo gonadal y poseen características
morfológicas marcadas, con edad de 2 años y pesan de promedio un kilogramo
(Bastidas & Cartagena, 2002).
6
2.4 Fisiología de la digestión
El sistema digestivo en trucha arcoíris inicia desde la boca con mandíbula
superior e inferior unidas por una membrana, está dotada de hileras de dientes que no
solo están en la mandíbula sino también en lengua y paladar, no mastica el alimento
sino que lo traga, seguido se encuentra la faringe que también posee dientes, a
continuación un esófago de longitud corta, luego el esfínter cardiaco que controla la
entrada del alimento al estómago, mismo que es de fuerte musculatura y tiene forma
de U. sigue el esfínter pilórico que regula la entrada de alimento al intestino, al
extremo de este esfínter se encuentran los ciegos pilóricos que son proyecciones
digitoformes ciegas del tubo digestivo, variando en número hasta 70, presentan una
mucosa provista de numerosos pliegues con glándulas secretoras de enzimas (lactasa,
sacarasa, lipasa) y se rodean de depósitos lipídicos de reserva, al final se encuentra el
intestino que es acortado y termina en el recto, donde los pliegues de la mucosa son
cortos, la pared muscular es gruesa y de gran capacidad expansiva (Universidad de
Granada, 2015).
2.5 Nutrición en trucha
Los métodos de alimentación en truchas, dependen del tamaño de los animales
bajo cultivo. El primer alimento ofrecido a las larvas debe ser colocado en pequeñas
cantidades de forma manual y por lo menos, ofrecido entre 8 y 10 veces d-1
(por día);
hasta que se observe que todos los peces estén comiendo. Este es el período de
mayor atención, puesto que si desde el comienzo, los peces son bien alimentados, los
animales responderán en cuanto a crecimiento durante la producción. Pasado este
período y de acuerdo a la producción mantenida, se podrán utilizar otros métodos
mecánicos y disminuir las raciones diarias de alimento. De todas formas, es
conveniente que el productor, ofrezca 2 o 3 veces d-1
alimento en forma manual;
observando así, la actividad de los pequeños peces (Choquehuayta, 2008).
La frecuencia de la alimentación disminuye, hasta cerca de 5 veces d-1
, en el
transcurso de la etapa de alevinaje y a medida que los animales crecen. La trucha
puede almacenar hasta el 1% de su peso en alimento seco en cada toma, por lo que la
7
frecuencia debe ajustarse de acuerdo a ello (Choquehuayta, 2008).
Los pequeños peces ganan peso, por lo que deben monitorearse de forma
simultánea pasadas las 4 a 6 primeras semanas de vida, la ración será ajustada, de
acuerdo al peso promedio obtenido. Mientras los peces sean menores a los 2 cm de
talla, el alimento se distribuirá en los 2/3 de la superficie del agua, asegurándose de
esta forma que todos accedan al mismo, posibilitando la mayor uniformidad de tallas
en los lotes bajo cultivo. El alimento que se hunde es ignorado por las pequeñas
truchas y su exceso deteriora la calidad del agua y promueve enfermedades, por ello
debe procederse además a una limpieza normal diaria (Choquehuayta, 2008).
2.5.1 Requerimientos nutricionales en alevines
La trucha necesita energía para crecer y desarrollarse, que se obtiene de
nutrientes como las proteínas, de los lípidos y carbohidratos. Asimismo necesita
complementar con otros elementos vitales como son las vitaminas y los minerales.
La concentración de cada nutriente varía en la dieta de acuerdo al tamaño de la
trucha. En estadio de alevines y pre juveniles necesitará mayor cantidad de proteína
que en peces de mayor tamaño. Asimismo el requerimiento de la grasa será mayor a
medida que el pez vaya desarrollándose (Choquehuayta, 2008).
Tabla 2
Requerimiento porcentual de nutrientes en alevines de trucha
NUTRIENTE ALEVINES
Proteínas (mín.) 45.0
Carbohidratos (máx.) 22.0
Grasa (mín.) 10.0
Minerales (máx.) 10.0
Humedad (máx.) 10.0
Fibra (máx.) 2.0
Calcio (mín.) 1.5
Fosforo (mín.) 1.0
Fuente: (Choquehuayta, 2008) mín.: mínimo; máx.; máximo
En cuanto a proteínas hay que especificar el requerimiento de aminoácidos que
se describe en la Tabla 3:
8
Tabla 3
Requerimiento de aminoácidos en etapa de alevinaje de trucha arcoíris
AMINOACIDOS
CANTIDAD
(%)
Arginina 1.4-3.5
Fenilalanina 2.5-6.5
Histidina 0.6-1.6
Isoleucina 1.0-2.4
Leucina 1.8-4.4
Lisina 2.1-5.3
Metionina 0.5-0.6
Treonina 1.4-3.4
Triptófano 0.2-0.5
Valina 1.2-3.1
Fuente: Choquehuayta (2008) %: porcentaje
2.6 Uso de harina de pescado
Los piensos acuícolas en la actualidad se encuentran entre los más costosos del
mercado, debido a que su fabricación es por métodos como el extruzado y peletizado
a vapor. El contenido de nutrientes debe ser muy alto para lo que se suele utilizar
materia prima de libre uso como el aceite y harina de pescado (Tabla 4), entre otros
que hacen que su valor aumente innecesariamente (Bureau, 2000).
La harina de pescado resulta de la captura de peces de poco o ningún interés para
el consumo humano y de desechos generados por el procesamiento de pescado para
la industria alimenticia, entre un 10% y 15% a nivel mundial. Los animales enteros
son en su mayoría pequeños, huesudos, no comestibles pero con aceite en su carne
como la anchoveta, capelán, lanzón, entre otros (Mariño, 2012).
La harina de pescado es una fuente proteica de bastante uso en la preparación de
raciones para consumo animal, rica en aminoácidos esenciales como Cisteína.
Metionina y Cistina, los cuales son limitantes en animales monogástricos.
Según (Mariño, 2012), la harina de pescado es un polvo o harina marrón y está
compuesta por porcentajes de proteína entre 60 y 72%, humedad como máxima de
14%, grasa entre 5 y 12%, y ceniza con un 10 a 20%. Debido a su alto contenido de
9
proteína, la harina de pescado ocupa un lugar preferencial como materia prima para
uso animal y por ser fuentes de vitamina del grupo B. Así también tiene un balance
de aminoácidos esenciales muy bueno.
Tabla 4
Composición nutricional de la harina de pescado
COMPOSICIÓN NUTRICIONAL UNIDAD CANTIDAD
Materia seca % 90.00
Energía metabolizable (aves) Mcal/kg 3.10
Energía digestible (cerdos) Mcal/kg 3.20
Proteína % 50.00
Metionina % 1.80
Metionina+ cistina % 1.95
Lisina % 4.00
Calcio % 7.50
Fósforo disponible % 3.80
Ácido linoléico % 0.15
Grasa % 14.00
Fibra % 1.20
Ceniza % 16.50
Fuente: (Mariño, 2012) %: porcentaje; Mcal/kg: mega caloría por kilogramo
Toda la harina de pescado se utiliza como ingrediente de alto valor proteico en la
alimentación de animales terrestres de crianza y para peces de criadero. Estas harinas
suponen una buena fuente de energía en la alimentación de aves, cerdos, vacas,
ovejas y en la piscicultura (Mariño, 2012).
2.7 Uso de harina de insecto
Al iniciar la actividad comercial acuícola, la industria productora de alimentos
balanceados para salmones y trucha priorizó la formulación de dietas con altos
porcentajes de aceite y harina de pescado siendo una dieta ideal para peces de mar,
con el aumento de la demanda por este insumo y el estancamiento de la captura en
los últimos tiempos la industria se ve obligada a explorar nuevas alternativas de
reemplazo nutricional (FIA, 2007).
10
En estudios sobre alimentación de salmones y truchas en condiciones naturales
en la etapa de alevinaje en agua dulce, se ha demostrado que no se alimentan de
peces. Su actividad de alimentación la realizan más bien sobre distintos estados de
desarrollo de insectos acuáticos (larvas y ninfas) y diferentes estados de desarrollo de
pequeños crustáceos como los gamáridos, todos los organismos presentes en los ríos
donde los peces se desarrollan hasta alcanzar la etapa de smoltificación (FIA, 2007).
Los estudios dirigidos al uso harina de insecto como sustituto de harina de
pescado en alimentación de peces se han demostrado en lubina (Dicentrarchus
labrax) que no hubo preferencia por ninguna harina en especial y no se observó
diferencias en la estructura y características de la carne de los animales a prueba
(Ratliff, 2007).
Estudios en juveniles de carpa japonesa (Carassius auratus) dirigidos al uso de
harina de ninfas de cucaracha (Periplaneta americana) como sustituto de harina de
pescado no encuentran diferencias estadísticas significativas entre los peces
alimentados con la dieta control (alimento comercial API- Tilapia) y la dieta con
sustitución al 30% (Hernández, Ramos, Pino, & Acosta, 2008).
Estudios en Tilapia del Nilo (Orechromis niloticus) dirigidos al uso de harina de
larvas de Tenebrio molitor como alternativa proteica a la harina de pescado
concluyen que la dieta basada en harina de insectos induce en menor medida el estrés
oxidativo (Villacreces, 2011).
Estudios en trucha arco iris dirigidos al uso de harina de lombriz como sustituto
parcial a la harina de pescado en dietas iniciales concluyen que la harina de lombriz
puede sustituir en un 25% a la harina de pescado en las primeras etapas de desarrollo
de la trucha (Bianchi, Bastardo, & Medina, 2007).
Se ha estudiado el valor nutritivo del saltamontes (Acrida cinérea) llegando a los
valores nutritivos de: proteína bruta (65%), grasa (8%), quitina (9%) y cenizas (4%),
valores similares a la harina de pescado en cuanto a proteína (60%) (Wang, Zhai,
11
Zhang, Zhang, & Hui, 2007).
Otras especies de insectos analizadas han sido el grillo mormón (Anabrus
simplex) con contenidos nutricionales de proteína bruta de 58% (DeFoliart et al.,
1982), el grillo doméstico (Acheta domesticus) con proteína bruta de 62% (Nakagaki
et al., 1987), y seis especies de larvas de lepidópteros en los cuales el valor de
proteína bruta varía de 49% a 58% (Landry, DeFoliart, & Sundae, 1986). Como
puede observarse, aunque estos valores sean inferiores a los obtenidos por (Wang,
Zhai, Zhang, Zhang, & Hui, 2007), para el saltamontes (Acrida cinérea), se puede
decir que el porcentaje de proteína en estos insectos es similar a los valores de la
harina de pescado con una proteína bruta de 60%.
También se ha reportado que el contenido de aminoácidos es similar al de la
harina de pescado que tiene valores de metionina de 2%, lisina de 1% y cisteína de
2%, es el de la harina del saltamontes (Acrida cinérea) con valores de metionina de
2%, lisina de 0.7% y cisteína de 3.8% (Wang, Zhai, Zhang, Zhang, & Hui, 2007). Sin
embargo se ha determinado que el grillo mormón y el grillo común son deficientes
en cuanto a metionina (DeFoliart, Finke, & Sunde, 1982).
Se ha demostrado que el contenido de grasa y por ende la contribución
energética de insectos puede variar entre especies (Cerda, y otros, 1999). El grado de
instauración de grasas es parecido a la instauración de aves de corral y pescado, con
la diferencia que el contenido de ácido linoléico es mayor en insectos (DeFoliart,
Finke, & Sunde, 1982).
(Wang, Zhai, Zhang, Zhang, & Hui, 2007), llegaron a determinar que (Acrida
cinérea) tiene alto contenido de ácidos grasos insaturados, con mayores valores en
los ácidos oleico de 31%, linoléico de 41% y linolénico de 12% de los ácidos grasos
totales, con lo que se concluye que el aceite de saltamontes podría ser de gran
importancia para la industria alimenticia.
12
A escala comercial, son diversas la empresas que surten de insectos vivos para
alimentación de mascotas exóticas. La empresa norteamericana “Grubco” vende
varias especies de insectos con la siguiente composición: grillos (6% lípidos; 21%
proteína bruta; 69 % humedad); larvas de la harina (13% lípidos; 21% proteína bruta;
62 % humedad).
Aunque son limitados, existen algunos trabajos que han valorado la harina de
grillos en la alimentación de diversas especies ganaderas. Varios autores coinciden
que al probar harina de grillo en alimentación de pollos broiler no se vio diferencias
significativas con el control en cuanto a ganancia de peso (Wang, Zhai, Zhang,
Zhang, & Hui, 2007).
(Nakagaki, Sunde, & DeFoliart, 1987), en su estudio indicaron que la ganancia
de peso en relación al alimento mejoraba cuando se complementaba la alimentación
a base de insectos con aminoácidos como metionina y arginina.
2.7.1 Grillo doméstico (Acheta domesticus)
- Taxonomía.- La taxonomía del grillo común o doméstico (Acheta domesticus)
que es la especie de grillo más usada en la zootecnia, es la Tabla 5:
Tabla 5
Taxonomía de grillo común
REINO: Animalia
PHYLUM: Arthropoda
CLASE: Insecta
ORDEN: Orthoptera
SUBORDEN: Ensifera
FAMILIA: Achrididae (Grillydae)
GÉNERO: Acheta
ESPECIE: Acheta domesticus L.
- Anatomía.- El cuerpo del grillo común (Acheta domesticus) se divide en tres
segmentos principales que son: cabeza, tórax, abdomen con una medida de 25
a 30 mm.
Este grillo tiene: dos ojos simples, dos ojos compuestos, dos antenas, una
boca, palpos junto a la boca, espiráculos en los costados de su abdomen para
13
respirar, las hembras tienen un ovopositor en su extremo caudal, dos cercis,
dos alas para volar, dos alas covertoras, cuatro patas caminadoras, y dos patas
saltadoras para escapar del peligro, en total los grillos tienen seis patas. Todas
las seis patas del grillo están unidas al tórax, que es la parte central de los tres
segmentos de su cuerpo (Garibay, 2007).
Las hembras ponen un promedio de 30 huevos por puesta su incubación dura
aproximadamente 2 semanas. Cada grillo tarda 7 semanas en ser adulto y
durante por este tiempo pasa por 7 mudas, es recomendado que se tenga en
cultivo una relación de 1 macho por 10 hembras (Territorio salvaje, 2009).
- Características químicas.- (Nakagaki, Sunde, & DeFoliart, 1987), realizaron
un estudio profundo acerca de los contenidos nutricionales que pueden tener
este tipo de grillos mediante análisis de laboratorio (Tabla 6).
Tabla 6
Características químicas del grillo común (Acheta domesticus)
% ANALISIS PROXIMAL
62.00 Proteína Cruda
7.50 Extracto etéreo
4.60 Ceniza
7.00 Fibra cruda
5.20 Agua
% ANALISIS MINERAL
0.99 Fosforo
1.28 Potasio
0.19 Calcio
0.11 Magnesio
0.59 Azufre
Ppm
254.00 Zinc
64.00 Manganeso
155.00 Hierro
25.00 Cobre
34.00 Aluminio
9.21 Sodio
Fuente: (Nakagaki, Sunde, & DeFoliart, 1987) %:
porcentaje; ppm: partes por millón.
14
2.7.2 Obtención de grillos para la zootecnia
Los grillos aceptables para ser usados dentro de la zootecnia son los grillos
nacidos en cautiverio, obtenidos de una granja comercial de grillos asegurándose así
que estén libres de enfermedades. Estos son ideales para este fin ya que son fáciles
de adaptarse a condiciones de cautiverio, y puede producir entre seis a siete
generaciones por año (Nakagaki, Sunde, & DeFoliart, 1987).
15
CAPÍTULO III
MATERIALES Y MÉTODOS
3.1 Ubicación del lugar de investigación
3.1.1 Ubicación política
El área de estudio se encuentra ubicada en la provincia del Carchi, Cantón
Espejo, Parroquia El Gualtal, Comunidad El Corazón de Mundo Nuevo, vía San
Lorenzo km 116, en el proyecto “Piscícola y pesca deportiva el Plata”.
Los análisis de laboratorio fueron realizados en: Laboratorio de Recursos
Bioacuáticos y Laboratorio de Química de la Carrera en Ingeniería Agropecuaria
IASA I, hacienda El Prado.
3.1.2 Ubicación geográfica
Longitud: 0.721497
Latitud: 78.153104
Altitud: 1545 m.s.n.m
Fuente: Bing maps
Piscícola
Rio Plata
16
3.1.3 Ubicación ecológica
El proyecto se encuentra en una región Sub-tropical húmeda, presentándose una
humedad relativa del 50%, la precipitación es 2500 mm, temperatura media 22.9 º C.
3.2 Materiales
Grillos (Acheta domesticus) semi - adultos.
Estufa
Molino ultra centrífugo
Molino de carne
Refrigeradora
Harina de Grillo (Acheta domesticus)
Piscina de alevinaje de 1.8 m 3
Termómetro
8 jaulas de malla plástica con capacidad de 36 l cada una
PROFI TEST, Kit medidor de oxígeno disuelto en el agua
Bandas colorimétricas indicadoras de pH, Nitritos, Nitratos
Balanza digital
Balanza analítica
Balanceado iniciador de ECUA- BIOMIX # 2 y #3
Alevines de línea Española y Nacional
Malla plástica negra
Fundas plásticas de 0.60 m x 1.2 m
Bomba de aire manual
Implementos de manejo acuícola
Eugenol
Jeringuillas de 3 ml
Bisturí
Heparina Sódica
Alcohol
Tubos eppendorf
Microcentrífuga
17
Micropipetas
Incubadora
Espectrofotómetro
Refrigeradora
Materiales de oficina (lápices, hojas, computadora, entre otros.)
3.3 Métodos
3.3.1 Diseño experimental
Diseño de bloques completamente al azar (DBCA). Los datos fueron analizados
con el programa estadístico R y respaldo de (Ulloa, 2015).
3.3.1.1 Factores a probar
Dietas con 0%, 5%, 10% y 15% de sustitución de harina de grillo común (Acheta
domesticus) sobre el porcentaje de harina de pescado, en dietas diseñadas para
alevines y dos líneas de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss), española (Línea 1) y
nacional (Línea 2).
3.3.1.2 Tratamientos a comparar
Perfil aminoácidico y tipología de la harina de grillo común (Acheta domesticus).
Cuatro niveles de sustitución, dos líneas y tres repeticiones a distinto tiempo.
3.3.1.3 Tipo de diseño
El ensayo se realizó con un Diseño de Bloques Completo al Azar (DBCA); con
tres repeticiones, el factor de bloqueo fue el tiempo, el arreglo factorial fue de 2
líneas x 4 niveles de sustitución = 8 unidades experimentales por repetición. Con
modelo matemático:
Yij = u + Ti + ßj+ εij
Yij = Variable
u = Media
18
Ti = Efecto del tipo del tratamiento
ßj = Efecto del bloque j
εij= Error experimental de la unidad experimental i,j
3.3.1.4 Repeticiones
Las repeticiones fueron 3 cada una en diferentes tiempos, en la etapa de alevinaje
(7 semanas).
3.3.1.5 Características de las unidades experimentales (UE)
Se tuvo 24 unidades experimentales, cada unidad estuvo conformada por una
jaula de 35 x 40 x 30 cm con 20 alevines de Trucha Arcoíris.
Se obtuvieron 9 animales escogidos al azar, como muestra por tratamiento para
los análisis en laboratorio mediante el cálculo:
Nivel de confianza 95%
N = 480 total de animales
e = 5%
p = 0.5
= 214 /14 = 8.9 = 9 alevines que fueron tomados al azar por UE
N: Población total; e: Error; p: Prevalencia; n: número de muestra
3.3.2 Análisis estadístico
3.3.2.1 Esquema de análisis de variancia
El esquema final del análisis de variancia de describe en la Tabla 7:
Tabla 7
Esquema ANOVA
Fuentes de Variación Grados de libertad
NIVELES DE SUSTITUCIÓN 3
LÍNEAS 1
BLOQUES 2
ERROR 7
TOTAL 13
19
3.3.2.2 Distribución en el campo
Figura 1. Distribución de los tratamientos en la Repetición I
Figura 2. Distribución de los tratamientos en la Repetición II
Figura 3. Distribución de los tratamientos en la Repetición III
3.3.2.3 Análisis funcional
Realizamos pruebas de comparación de medias según Tukey, al 5% de
significancia para tratamientos, intervalos e interacciones.
Repetición I
Repetición II
Repetición III
T0L1 T1L1
T0L2 T1L2 T2L1
T2L2
T3L1
T3L2
T2L1 T1L1
T3L2 T2L2 T3L1
T1L2
T0L1
T0L2
20
3.3.2.4 Análisis económico
El análisis económico se realizó con el presupuesto parcial tomando en cuenta
los costos variables y beneficio bruto de cada tratamiento (Reyes, 2001)
3.3.2.5 Variables a medir
- Análisis bromatológico de la harina de grillo común (Acheta domesticus): Se
realizó en los Laboratorios de Química de la Carrera en Ingeniería
Agropecuaria IASA I y laboratorios NOVAGESTION, para conocer la
cantidad de proteína, cenizas, perfil de aminoácidos esenciales, perfil de
ácidos grasos y grasas totales.
- Peso: Los 20 animales de cada jaula (unidad experimental), fueron pesados
en una balanza digital, encerada con 800 ml de agua, con lo obtenido se
calculó la biomasa de cada unidad experimental. Esta medida se tomó al
inicio de cada repetición y luego semanalmente.
- Ancho: Se tomó en una regla adaptada para medir peces vivos con precisión
de 1 mm, desde la aleta dorsal hasta la aleta ventral, a 9 animales por jaula, al
inicio de repetición y luego semanalmente.
- Largo: Fue tomada con una regla adaptada para peces vivos desde la cabeza
hasta el final de la aleta caudal, a 9 animales por jaula, al inicio de cada
repetición y luego semanalmente.
- Relación ancho-largo: Fue calculada semanalmente, a partir de los datos
obtenidos de largo y ancho.
R = A/L
R = Relación ancho-largo
A = Ancho
L = Largo
21
- Mortalidad: Se calculó tomando en cuenta todos los animales muertos a lo
largo de las tres repeticiones. Representa la relación entre el número de
animales muertos con el número total de animales.
M = # animales muertos/ # animales totales x 100
M = Mortalidad
- Conversión alimenticia: Fue calculada semanalmente tomando en cuenta el
alimento consumido en dicha semana, mismo que se suministró de acuerdo a
la fórmula:
(Biomasa *% de ración)/100
Biomasa= Peso de animales totales
% de ración= valor tomado de la tabla de Leitritz tomando en cuenta la
temperatura promedio semanal y el peso de los animales.
Tabla 8
Tabla de alimentación guía de Leitritz
Talla (cm) Peso (g)
Temperatura (0
C)
7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17
2-5 -0.18 3.9 4.2 4.5 5.2 5.0 5.7 6.2 6.7 7.3 7.7 8.3 Tasadealimentación(%depesocorporal)(TA%)
2.5-5.0 1.18-1.5 3.2 3.5 3.8 4.3 4.5 4.8 5.2 5.6 6.0 6.4 6.8
5.0-7.5 1.5-5.0 2.6 2.8 3.1 3.4 3.6 3.9 4.2 4.5 5.0 5.2 5.6
7.5-10.0 5.0-12.0 2 2.2 2.4 2.7 2.8 3.0 3.2 3.5 3.7 4.1 4.4
10.0-12.5 12.0-23.0 1.6 1.7 1.8 2.0 2.1 2.3 2.4 2.6 2.8 3.1 3.3
12.5-15.0 23.0-40.0 1.3 1.4 1.5 1.7 1.7 1.8 2.0 2.1 2.3 2.5 2.7
15.0-17.5 40.0-60.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 2.0 2.1
17.5-20.0 60.0-90.0 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9
20.0-22.5 90.0-130.0 0.8 0.9 1.0 1.1 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7
22.5-25 130.0-180.0 0.8 0.8 0.9 1.0 1.0 1.1 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5
25.0 + 180 + 0.7 0.7 0.8 0.9 0.9 1.0 1.1 1.2 1.2 1.3 1.4
Fuente:http://www.bvcooperacion.pe/biblioteca/bitstream/
123456789/2806/2/BVCI0002905 _2.pdf
22
La conversión alimenticia es la relación entre el alimento consumido y el
peso ganado por el animal.
C = W alimento / W animal
C= Índice de conversión
W= Ganancia del peso del animal
W= Alimento consumido
- La prueba de glucosa se realizó con el fin de observar un posible incremento
de glucosa en plasma por influencia del contenido nutricional de las dietas
experimentales, se llevaron a cabo en la muestra (9 animales escogidos al
azar) por jaula, al final de cada repetición con el kit de Human en el
espectrofotómetro del Laboratorio de Recursos Bioacuáticos de la Carrera en
Ingeniería Agropecuaria IASA I, hacienda El Prado. Para lo que se anestesió
a los animales en una solución de cinco gotas de eugenol al 70% por litro de
agua, se obtuvo las muestras de sangre con jeringuillas de 3 ml y aguja de 21
G x ½” previamente heparinizadas, lo mínimo a obtener de sangre debe ser de
0,1 ml para al momento de extraer el suero luego de microcentrífugar 10 m. a
6000 rpm, obtener 10 ul de suero en tubos eppendorf sin heparinizar, que se
almacenan a 4ºC, por un tiempo máximo de 24 horas hasta realizar la prueba
colorimétrica con el kit de glucosa de Human siguiendo su protocolo: a
temperatura ambiente tomar los tubos de ensayo necesarios para hacer las
muestras de cada tratamiento por vez, se coloran 10 tubos, con micropipetas
se coloca en un tubo 1000 µl de reactivo RGT (reactivo enzimático), en un
segundo tubo 1000 µl de reactivo RGT y 10 µl de reactivo STD (reactivo
estándar), en el resto de tubos se coloca 1000 µl de reactivo RGT y 10 µl de
suero sanguíneo por animal en estudio, se mezcla bien, incuba por 10 minutos
a 25 0
C, se coloca las muestras en cubas numeradas para la medición en el
espectrofotómetro, primero se coloca la cuba de blanco, luego se mide la
absorbancia de la muestra STD y a continuación el resto de muestras una tras
otra.
- Evaluación de órganos se realizaron con el fin de encontrar depósitos de
grasa en la periferia de los órganos importantes a nivel nutricional. Luego de
23
haber extraído sangre a los 9 animales se procedió a cortar la piel del pez de
manera longitudinal con bisturí número 20 desde el orificio anal hacia el
tórax, se extrajo el riñón, hígado y se contabilizó los ciegos pilóricos, para
evaluar posibles afecciones nutricionales como: hígado graso, cálculos
renales, alteración numérica de los ciegos pilóricos.
En hígado se evaluó el color y hepatomegalia (hinchazón de hígado) causado
principalmente por lipidósis hepática (hígado graso) por dietas ricas en grasa.
Se establecieron cuatro categorías de observación: apariencia normal, color
anormal, manchas y tumores. En riñones se determinó la existencia de
acumulación de grasa periférica y en ciegos pilóricos se observó abundancia e
inserción de grasa efecto de las dietas ricas en grasa (Bastardo, Scorza, &
Sara, 2006).
3.3.3 Métodos específicos de manejo del experimento
Una vez adquiridos los grillos en la granja SARgrillo se procedió al sacrificio
con agua a 60 ºC por 30 segundos y luego un shock térmico con agua al ambiente
13ºC (Nakagaki, Sunde, & DeFoliart, 1987), se tamizó el producto para retirar el
exceso de agua, se colocó en un desecador a 50 ºC por 60 h, una vez comprobada la
pérdida del 70% de humedad, se procedió a moler en el molino ultra centrifugo con
grosor de partícula de 0.5 mm y se almacenó el producto en congelación hasta el
momento de la formulación de balanceado.
Se procedió a enviar una muestra de 30 g de harina al laboratorio
NOVAGESTIÓN para determinar el perfil de: aminoácidos y ácidos grasos, otra
muestra de 20 g para realizar el análisis bromatológico proximal en el Laboratorio de
Química de la Carrera en Ingeniería Agropecuaria IASA I.
El resultado del laboratorio en cuanto a aminoácidos en gAA/100g tenemos,
leucina con 9.33, acido glutámico 7.77, tirosina con 6.93, histidina con 3.74, lisina
con 2.90, treonina 2.85 y metionina 0.55.
24
Los resultados del análisis bromatológico proximal en porcentaje son de 51.81%
de proteína verdadera, 19.8% grasas verdaderas, 4.24% cenizas y 7.37% de fibra.
Los resultados obtenidos para ácidos grasos en mg/g son de 2.07 en total de
omega 3, 51.28 total de omega 6, 45.83 total de saturados, 114.57 total de
insaturados, 61.22 total mono insaturados y 53.35 total de poli insaturados.
Con los resultados obtenidos se procedió a realizar la sustitución al 5%, 10% y
15% de harina de pescado por harina de grillo común en la formulación de
balanceado iniciador para trucha arco iris con granulometría comercial # 2 y #3.
Obtenidas las mezclas de los balanceados experimentales en polvo, se peletizó de
manera artesanal; humedeciendo con agua el 10% de la mezcla, se pasó la mezcla
por un molino de carne, se dejó secar a temperatura ambiente, trituró con una botella
vidrio, tamizó con coladores plásticos de diferente espaciado para obtener así las dos
granulometrías deseadas, para finalizar el proceso se dividió cada balanceado en tres
partes iguales y almacenó en congelación para cada una de las repeticiones.
El porcentaje nutricional de cada balanceado se detalla en la Tabla 9.
Tabla 9
Ajuste nutricional de dietas experimentales.
Alimento
Proteína
% mín.
Fibra
% máx.
Grasa
% mín.
Ceniza
% máx.
Energía
Digestible
kcal/kg
TESTIGO 50 1.0 10.0 10.0 4100
TRATAMIENTO 1 50 1.0 10.0 10.0 4100
TRATAMIENTO 2 50 1.0 10.0 10.0 4100
TRATAMIENTO 3 50 1.0 10.0 10.0 4100
Simbología: %: porcentaje; mín.: mínimo; máx.: máximo; kcal/kg: kilocalorías por
kilogramo.
Teniendo en cuenta que el total de proteína en el balanceado comercial es de
50%, el porcentaje de harina de pescado que será sustituido por harina de grillo
común (Acheta domesticus) se detalla en la Tabla 10.
25
Tabla 10
Descripción y nomenclatura de las dietas en estudio
DESCRIPCIÓN NOMENCLATURA Nº DE
TRATAMIENTO
Fórmula comercial, 0% harina de grillo T0 TESTIGO
Fórmula comercial con sustitución de
5% harina de grillo
T1 TRATAMIENTO 1
Fórmula comercial con sustitución de
10% harina de grillo
T2 TRATAMIENTO 2
Fórmula comercial con sustitución de
15% harina de grillo
T3 TRATAMIENTO 3
Una vez llegados los animales a la granja se realizó la primera semana de
cuarentena con una profilaxis (oxitetraciclina al 98% a razón de 6 g por kilogramo
de alimento balanceado) y adaptación de los animales de las dos líneas a las jaulas
cubiertas con malla plástica negra como protección, a partir de la segunda semana se
comenzó el suministro de las dietas.
La ración alimenticia a suministrar fue calculada semanalmente en base a la
biomasa de cada jaula. Con una balanza analítica se pesó la cantidad de alimento
calculado para suministrar a diario. Las tres primeras semanas de cada ensayo se
suministró alimento 6 veces d-1
, las tres siguientes semanas 4 veces d-1
y la última
semana 3 veces d-1
.
Los parámetros físico-químicos del agua fueron tomados diariamente a la misma
hora esperando que el pH se encuentre entre 6 y 9, procurando que la temperatura no
sobrepase los 20 0
C, el oxígeno disuelto esté cerca de la saturación, nitritos y nitratos
sean 0 ml/l. Mientras el agua estuvo altamente turbia no se suministró el alimento.
Las medidas de peso, largo y ancho de animales se tomó al inicio de cada repetición
y luego semanalmente en horas de la mañana para evitar estrés en los alevines. Los
parámetros post mortem, glucosa, y observación de órganos se realizaron al final de
cada repetición.
26
CAPÍTULO IV
RESULTADOS
4.1 Parámetros evaluados
4.1.1 Peso
Descripción del análisis estadístico para esta variable se detalla en la Tabla 11:
Tabla 11
Análisis de variancia del Peso (g) de alevines a lo largo de los ensayos en
semanas, entre dos líneas y cuatro niveles de sustitución
Df SC CM F value Pr(>F)
Línea 1 61.8 61.8 35.331 1.14e-08***
Nivel de sustitución 3 1.0 0.3 0.186 0.906
Semana 7 2447.0 349.6 199.946 <2e-16***
Línea:N.de sustitución 21 1.8 0.1 0.048 1.000
Remanente 157 274.5 1.7
Significado: 0 ‘***’ 0.001 ‘**’ 0.01 ‘*’ 0.05 ‘.’ 0.1 ‘ ’ 1
Los datos descritos por la Tabla 11 se observan de manera gráfica en la Figura 4:
Figura 4. Curva de crecimiento
27
4.1.2 Largo
En la Tabla 12 se detalla el análisis de variancia para este parámetro.
Tabla 12
Análisis de variancia de la largo (cm) de alevines a lo largo del ensayo en
semanas, entre dos líneas y cuatro niveles de sustitución
Df SC CM F value Pr(>F)
Línea 1 40.5 40.53 118.063 <2e-16***
Niveles de sustitución 3 2.7 0.90 262.061 0.0529
Semana 7 629.7 89.95 262.061 <2e-16***
Línea:N.de sustitución 21 1.2 0.06 0.163 1.0000
Remanente 159 54.6 0.34
Significado: 0 ‘***’ 0.001 ‘**’ 0.01 ‘*’ 0.05 ‘.’ 0.1 ‘ ’ 1
Entre líneas se encontraron diferencias mínimas significativas como lo muestra
la Figura 5.
Figura 5. Largo en el tiempo
Largo(cm)
28
4.1.3 Ancho
En la Tabla 13 se observa el análisis de variancia.
Tabla 13
Análisis de variancia del Ancho (cm) de alevines a lo largo del ensayo en
semanas, entre dos líneas y cuatro niveles de sustitución
Df SC CM F value Pr(>F)
Línea 1 0.64 0.636 35.472 1.61e-08***
Niveles de sustitución 3 0.06 0.019 1.038 0.377
Semana 7 36.04 5.148 287.174 < 2e-16***
Línea:N.de sustitución 21 0.10 0.005 0.267 1.0000
Remanente 159 2.85 0.018
Significado: 0 ‘***’ 0.001 ‘**’ 0.01 ‘*’ 0.05 ‘.’ 0.1 ‘ ’ 1
En el análisis se encontró diferencias significativas entre líneas como lo muestra
la Figura 6:
Figura 6. Ancho en el tiempo
4.1.4 Relación Largo-Ancho
El análisis estadístico de este parámetro se describe en la Tabla 14.
29
Tabla 14
Análisis de variancia de Relación Largo-Ancho de alevines durante del ensayo
en semanas, entre dos líneas y cuatro niveles de sustitución
Df SC CM F value Pr(>F)
Línea 1 0.005924 0.005924 55.065 6.62e-12***
Niveles de sustitución 3 0.000570 0.000190 1.766 0.156
Semana 7 0.019093 0.002728 25.355 <2e-16***
N. de sustitución : Semana 21 0.000707 0.000034 0.313 0.998
Remanente 159 0.017104 0.000108
Significado: 0 ‘***’ 0.001 ‘**’ 0.01 ‘*’ 0.05 ‘.’ 0.1 ‘ ’ 1
En la tabla 14 se observan diferencias significativas entre líneas, como se detalla
en la Figura 7:
Figura 7. Relación largo-ancho en el tiempo
4.1.5 Mortalidad
La mortalidad obtenida a lo largo de las tres repeticiones fue de 1.7%.
4.1.6 Conversión alimenticia
Se presenta en el análisis de variancia para este parámetro en la Tabla 15:
30
Tabla 15
Análisis de variancia de Conversión Alimenticia de alevines, entre tres bloques,
dos líneas y cuatro niveles de sustitución
Df SC CM F value Pr(>F)
Bloque
Línea
Niveles de sustitución
Línea:N de Sustitución
Remanente
2
1
3
3
14
0.0033
0.2307
0.1748
0.0353
0.5023
0.00164
0.23066
0.05828
0.01176
0.03588
0.046
6.429
1.624
0.328
0.9553
0.0238 *
0.2286
0.8054
Significado: 0 ‘***’ 0.001 ‘**’ 0.01 ‘*’ 0.05 ‘.’ 0.1 ‘ ’ 1
En la Tabla 15, no se observó diferencias significativas entre niveles de
sustitución, como se observa en la Figura 8:
Figura 8. Conversión Alimenticia en tratamientos
En la Tabla 15, se obtuvo diferencias significativas entre líneas, como se observa
en la Figura 9:
31
Figura 9. Conversión Alimenticia entre Líneas
4.1.7 Pruebas de glucosa
El análisis estadístico se describe en la Tabla 16:
Tabla 16
Análisis de variancia de Glucosa en alevines, entre tres bloques, dos líneas y
cuatro niveles de sustitución
Df SC CM F value Pr(>F)
Bloque 2 521 260.6 0.644 0.540
Línea 1 12 11.6 0.029 0.868
Niveles de sustitución 3 2858 592.6 2.355 0.116
Línea:N.de sustitución 3 1799 599.8 1.483 0.262
Remanente 14 5663 404.5
Significado: 0 ‘***’ 0.001 ‘**’ 0.01 ‘*’ 0.05 ‘.’ 0.1 ‘ ’ 1
Como se observa en la Tabla 16, no hubo diferencias significativas entre niveles
de sustitución y entre líneas.
32
4.2 Evacuación de órganos post mortem
- Hígado
En la observación de este órgano no encontró diferencias entre niveles de
sustitución ni entre líneas, en todos los casos fue de apariencia normal, sin manchas,
tumoraciones ni depósitos de grasa periférica.
Figura 10. Hígado
- Riñón
En la presente investigación al observar de este órgano no se encontró
diferencias entre niveles de sustitución ni entre líneas, en todos los casos no se
encontraron depósitos de grasa periférica.
Figura 11. Riñón
- Ciegos Pilóricos
En esta investigación no se encontró alteración alguna en cuanto a la cantidad,
siendo el promedio de 39 ciegos pilóricos por animal, como se muestra en el análisis
estadístico de la Tabla 17:
33
Figura 12. Ciegos pilóricos
Tabla 17
Análisis de variancia de Ciegos Pilóricos de alevines, entre tres bloques, dos
líneas y niveles de sustitución
Df SC CM F value Pr(>F)
Bloque 2 20.58 10.292 1.845 0.1944
Línea 1 15.04 15.042 2.697 0.1228
Niveles de sustitución 3 19.79 6.597 1.183 0.3518
Línea:N.de sustitución 3 42.46 14.153 2.538 0.0987
Remanente 14 78.08 5.577
Significado: 0 ‘***’ 0.001 ‘**’ 0.01 ‘*’ 0.05 ‘.’ 0.1 ‘ ’ 1
En la tabla no se hay diferencias significativas en cuanto a la cantidad de ciegos
pilóricos entre niveles de sustitución ni entre líneas.
4.3 Análisis económico
Se determinaron los costos por kilogramo de elaboración de la harina de grillo
como alimento para truchas lista para ser incorporada a la dieta alimenticia a
formular, así como el costo por kilogramo de formulación del alimento balanceado
comercial.
Para los beneficios brutos se tomó el peso de los 480 animales por el precio de
cada kilogramo, también se describen los costos variables de forma descendente
ordenados de acuerdo al análisis de dominancia, el tratamiento dominado es aquel
que al igual o menor beneficio neto presenta un mayor costo variable lo que se puede
apreciar en la Tabla 18.
34
Tabla 18
Análisis económico en base al presupuesto parcial del balanceado comercial y
los experimentales
TRATAMIENTO BENEFICIO BRUTO COSTO VARIABLE BENEFICIO NETO
T0 1.91 0.51 1.40
T1 6.58 4.77 1.81
T2 11.26 9.54 1.72
T3 15.93 14.31 1.62
35
CAPÍTULO V
DISCUSIÓN
La aceptación por los alevines al balanceado experimental en este estudio se
tomó en cuenta la etiología de la trucha en estado natural, que se alimenta de
distintos estados de desarrollo de insectos acuáticos que pueden ser larvas, ninfas y
diferentes estados de desarrollo de pequeños crustáceos como los Gammarus spp.,
(FIA, 2007).
Los valores bromatológicos de la harina de grillo obtenidos en la presente
investigación en cuanto a proteína bruta fueron de 51.8%, que se acerca a los valores
de 49% a 58% con el uso de varios insectos descrito por (Landry, DeFoliart, &
Sundae, 1986). Según datos compilados en estudios de valores nutricionales de 236
insectos consumidos por humanos en diferentes partes del mundo presentan valores
similares (Rumpold & Schlüte, 2013), y con los reportados por la casa comercial de
venta de insectos (Frank & Carine, 2015).
La metionina obtenida de 0.55% se considera deficiente en cuanto a porcentaje
de aminoácido presente como lo describe (DeFoliart, Finke, & Sunde, 1982). Al
comparar este valor con el 1.80% de harina de pescado (Mariño, 2012), se confirma
que la harina de grillo es deficiente en este aminoácido, pero se ajusta al
requerimiento nutricional de alevines de trucha arcoíris que es de 0.5%-0.6%
(Choquehuayta, 2008).
Para los resultados en cuanto a ácidos grasos y perfil de aminoácidos no se ha
encontrado valores similares. Estos valores se consideran estimativos ya que varían
en función de la dieta, etapa de desarrollo, condiciones de cría de los insectos y
sensibilidad del equipo utilizado (Nakagaki, Sunde, & DeFoliart, 1987).
En esta investigación se determinó que la harina de grillo común puede ser un
sustituto de la harina de pescado en piensos para acuacultura, lo que es confirmado
por (Ratliff, 2007), ya que el porcentaje de proteína es similar al contenido de la
harina de pescado.
36
Los niveles de sustitución aplicados en la presente investigación no mostraron
diferencias significativas con relación al balanceado comercial en cuanto a peso, lo
mismo ocurrió en estudios realizados en pollos broiler (Wang, Zhai, Zhang, Zhang,
& Hui, 2007). Según (Ratliff, 2007), en su estudio realizado en Lubina
(Dicentrarchus labrax) se encontraron resultados similares corroborando nuestra
investigación.
Los pesos alcanzados por las dos líneas al final de los ensayos fue de promedio
12.63 g en Línea 1, que según OVAPISCIS, se alcanza en 8 semanas a partir de la
etapa de alevinaje. La Línea 2 llegó a los 10.02 g promedio al final de las 7 semanas
de tratamiento.
Entre la Línea española y la Línea nacional se encontraron diferencias mínimas
significativas, demostrando así que, la Línea española en condiciones ideales de
cultivo tiene mejor crecimiento y ganancia de peso ya que en su comportamiento
presenta agresividad marcada hacia el alimento con tasas de crecimiento óptimas. La
Línea nacional mostró un comportamiento poco agresivo e inferior hacia el alimento,
en condiciones adversas de clima expresó su resistencia demostrando así que son
animales adaptados a nuestro medio (Sala, 2011).
Las medidas de ancho y largo al no presentar diferencias significativas entre
niveles de sustitución pero si entre líneas, demuestran el desarrollo normal de cada
línea, presentando la Línea española mayor largo y menos ancho que la Línea
nacional, lo que concuerda con lo mencionado por (Sala, 2011).
La relación entre Largo y Ancho demostró un comportamiento similar a todas las
variables siendo la media encontrada en esta investigación para alevines de 0.21 cm,
catalogado como normal según (Morales & Quirós, 2007) que reporta valores de
0.95 cm para animales juveniles, valor corroborado por (Ortiz, 2008) que presenta
valores entre 0.19 y 1.40 cm para alevines y juveniles.
Los valores de conversión alimenticia encontrados en esta investigación para la
Línea española fue de 1.12 y para la Línea nacional de 1.31, se asemejan a 1.32
37
reportado por (Morales & Quirós, 2007).
Los valores de glucosa obtenidos en la presente investigación son de 64.055
mg/ml, que concuerda con el 98.7 mg/ml según (Legate, Bonen, & Moon, 2001).
Este dato puede variar de acuerdo a la dieta y al momento en que fueron tomadas las
muestras. Según (Novoa, y otros, 2004) con estudios in vivo han demostrado que el
incremento de la glucosa en trucha arcoíris es proporcional al contenido de
carbohidratos de la dieta. La glucosa plasmática aumentada durante la ingesta del
alimento tiene como destino principal tejidos como el músculo blanco, músculo rojo
e hígado (Blasco, Marimon, Viaplana, & Fernandez-Borras, 2001).
La mortalidad fue de 1.7% en toda la investigación, debido al tratamiento
profiláctico este valor no aumento, siendo aceptable para un cultivo intensivo de
trucha arcoíris en etapa de alevinaje el 10% de mortalidad (Ortiz, 2008).
En la presente investigación al observar hígado post mortem se obtuvo que en su
totalidad los órganos fueron de color rojizo, estipulado como normal para la especie
según (Mancini, 2002), quien manifiesta que el hígado es un órgano blando, de gran
tamaño, de color pardo rojizo, en ocasiones puede ser de color rosa-crema sin
necesidad de ser patológico.
Los salmónidos como la trucha arcoíris son susceptibles a la hepatomegalia
(hinchazón de hígado) causado principalmente por lipidósis hepática (hígado graso)
que es la acumulación de grasa en su mayoría grasa neutra como los triglicéridos, en
consecuencia de esta afección ocasiona disminución en el crecimiento de los
animales y deficiente conversión alimenticia (Rosenthal, Sandoval, Gavidia, &
Tabacchi, 2013).
En esta investigación la observación del riñón fue en su totalidad riñones fue de
color negruzco sin depósito de grasa periférica, la coloración encontrada es
determinada como normal (Chiroque, 2014).
38
En cuanto a Ciegos Pilóricos en la presente investigación se encontró un
promedio de 39 ciegos por animal, lo que está dentro del rango de hasta 70 ciegos en
salmónidos descrito por (Gill, Ayala, & López), por lo que se determinó que no hubo
afecciones nutricionales ya que los ciegos pilóricos son una extensión del estómago y
su función en la absorción de nutrientes.
En el análisis económico se determinó que el único tratamiento no dominado es
el del balanceado comercial por lo que se determina como la mejor alternativa
económica en la actualidad.
(Ramón, 2014); En su estudio de creación de empresa productora de harina de
insectos para consumo animal, determina que los procesos de elaboración de harina
de pescado y harina de insecto son similares lo que facilitaría la industrialización de
esta alternativa; los estudios de factibilidad y proyecciones para esta harina fueron
realizados en Valencia-España, con datos que la determinan como una alternativa
efectiva para la sustitución de harina de pescado en la producción animal en especial
para acuacultura por los altos requerimientos de proteína.
39
CAPÍTULO VI
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
6.1 Conclusiones
- Se concluye que desde el punto de vista nutricional, la harina de grillo puede ser
sustituto para la harina de pescado en dietas para trucha arcoíris en etapa de
alevinaje, ya que presentó contenidos nutricionales semejantes a los de la harina de
pescado, principalmente en cuanto a proteína.
- La Línea española en las medidas morfométricas superó a la Línea nacional, por lo
que se concluye que para las condiciones en las que se realizó el ensayo la Línea
española es la más adecuada para el cultivo.
- La relación Largo y Ancho nos permite observar un comportamiento entre las
semanas 5, 6,7 en las dos líneas, similar pero más marcado en la Línea nacional por
lo que se concluye que son animales anchos debido a la acumulación de grasa para
su posterior crecimiento longitudinal.
- El balanceado experimental con el balanceado comercial no son diferentes de
manera estadística en los parámetros evaluados en la presente investigación.
- Los parámetros productivos en cuanto a conversión alimenticia no se vieron
afectados significativamente por los niveles de sustitución aplicados. Entre líneas se
obtuvo una diferencia mínima significativa de 0.17, siendo la Línea española
superior a la nacional al aprovechar mejor el alimento suministrado con CA de 1.12.
- La glucosa presente en sangre no muestra alteraciones fuera del rango con la
aplicación de los niveles de sustitución y tampoco se vio influenciada por la línea.
- Los ciegos pilóricos no se vieron afectados por los niveles de sustitución y líneas en
estudio, ya que sus valores se encuentran dentro de los límites normales de la
especie.
40
- La mortalidad fue de 1.7% en todo el ensayo, indicador reflejado por el tratamiento
profiláctico realizado antes de cada repetición lo que permitió tener animales
estables durante el ensayo.
- El análisis económico realizado muestra una clara superioridad del costo por
kilogramo de los alimentos balanceados experimentales eso se debe al alto costo
unitario del insecto, valores que pueden ser reducidos si se realiza una actividad de
cría a gran escala.
6.2 Recomendaciones
- Se recomienda continuar con el balanceado comercial debido a que en la actualidad
es la mejor alternativa económica.
- Se recomienda utilizar la Línea española en el lugar del estudio, dado que tuvo mejor
rendimiento en los parámetros evaluados en la presente investigación.
- Se recomienda realizar estudios con sustituciones parciales mayores y en otras
etapas de producción, ya que la harina de grillo es una alternativa viable como
sustituto de la harina de pescado.
41
6.3 Bibliografía
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Evaluación de harina de grillo en alevines de trucha

  • 1. DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y DE LA AGRICULTURA CARRERA DE INGENIERÍA AGROPECUARIA TESIS PREVIO A LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE INGENIERO AGROPECUARIO TEMA: ELABORACIÓN Y EVALUACIÓN DE LA HARINA DE GRILLO (Acheta domesticus) COMO SUSTITUTO DE HARINA DE PESCADO EN DOS LÍNEAS DE TRUCHA ARCOÍRIS (Oncorhynchus mykiss) DURANTE LA ETAPA DE ALEVINAJE AUTORES: CHÁVEZ ALCÍVAR, BEXCI ESTEFANÍA UBIDIA LUGO, DAVID JOSUÉ DIRECTOR: ING. PAZMIÑO, JULIO CODIRECTOR: ING. TIGRERO, JUAN SANGOLQUÍ 2015
  • 5. v DEDICATORIA A aquellos profesores que sembraron y cultivaron en nuestras mentes el espíritu de investigación e innovación, que nos llevaron a desarrollar la autoría de esta investigación, que inicio como una idea y se concretó con la culminación de nuestras carreras. A nuestros padres, hermanos y demás familiares que han sido un pilar fundamental para nosotros. Estefanía Chávez David Ubidia
  • 6. vi AGRADECIMIENTO Al personal docente de la carrera en ciencias agropecuarias de la Universidad de las Fuerzas Armadas – ESPE, por las experiencias vividas y enseñanzas que dejan una huella imborrable en nuestras vidas. A nuestro director Ing. Julio Pazmiño y codirector Ing. Juan Tigrero que con su sabiduría y espíritu de investigación nos han guiado en cada paso que dimos para la culminación de este proyecto. A la Ing. Daysi Muñoz por su incondicional apoyo y asesoramiento en los momentos más difíciles de este proyecto. Al doctor Diego Almeida por su aporte mediante la empresa SARgrillo como proveedor de información y grillos para el estudio. Al doctor Fabio Sala por su apoyo técnico, personal y mediante ECUA-BIOMIX, como proveedor del balanceado utilizado. A nuestras familias fuente de apoyo constante a lo largo de nuestra vida y más aún en los duros años de carrera profesional, en especial queremos expresar el más grande agradecimiento a nuestros padres quienes sin su ayuda no hubiese sido posible lograr esta meta. Estefanía Chávez David Ubidia
  • 7. vii ÍNDICE DE CONTENIDO CERTIFICADO....................................................................................................... ii AUTORÍA DE RESPONSABILIDAD ................................................................... iii AUTORIZACIÓN .................................................................................................. iv DEDICATORIA...................................................................................................... v AGRADECIMIENTO ............................................................................................ vi ÍNDICE DE CONTENIDO.................................................................................... vii ÍNDICE DE TABLAS ............................................................................................. x ÍNDICE DE FIGURAS.......................................................................................... xii RESUMEN........................................................................................................... xiii ABSTRACT ......................................................................................................... xiv CAPÍTULO I INTRODUCCIÓN ................................................................................................. 1 1.1 Objetivos..................................................................................................... 2 1.1.1 Objetivo general.......................................................................................... 2 1.1.2 Objetivos específicos................................................................................... 2 CAPÍTULO II REVISIÓN DE LITERATURA ............................................................................ 3 2.1 Producción de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) en el Ecuador ........... 3 2.1.1 Origen de la trucha ...................................................................................... 3 2.2 Parámetros de manejo.................................................................................. 3 2.2.1 Factor físico ambiental ................................................................................ 3 2.2.2 Factores intrínsecos ..................................................................................... 5 2.3 Etapas en el proceso de producción ............................................................. 5 2.4 Fisiología de la digestión............................................................................. 6 2.5 Nutrición en trucha...................................................................................... 6
  • 8. viii 2.5.1 Requerimientos nutricionales en alevines .................................................... 7 2.6 Uso de harina de pescado ............................................................................ 8 2.7 Uso de harina de insecto.............................................................................. 9 2.7.1 Grillo doméstico (Acheta domesticus).........................................................12 2.7.2 Obtención de grillos para la zootecnia ........................................................14 CAPÍTULO III MATERIALES Y MÉTODOS.............................................................................15 3.1 Ubicación del lugar de investigación ..........................................................15 3.1.1 Ubicación política ......................................................................................15 3.1.2 Ubicación geográfica..................................................................................15 3.1.3 Ubicación ecológica ...................................................................................16 3.2 Materiales...................................................................................................16 3.3 Métodos .....................................................................................................17 3.3.1 Diseño experimental...................................................................................17 3.3.1.1 Factores a probar........................................................................................17 3.3.1.2 Tratamientos a comparar ............................................................................17 3.3.1.3 Tipo de diseño............................................................................................17 3.3.1.4 Repeticiones...............................................................................................18 3.3.1.5 Características de las unidades experimentales (UE)...................................18 3.3.2 Análisis estadístico.....................................................................................18 3.3.2.1 Esquema de análisis de variancia................................................................18 3.3.2.2 Distribución en el campo ............................................................................19 3.3.2.3 Análisis funcional.......................................................................................19 3.3.2.4 Análisis económico ....................................................................................20 3.3.2.5 Variables a medir .......................................................................................20 3.3.3 Métodos específicos de manejo del experimento.........................................23
  • 9. ix CAPÍTULO IV RESULTADOS .....................................................................................................26 4.1 Parámetros evaluados ................................................................................26 4.1.1 Peso ...........................................................................................................26 4.1.2 Largo.........................................................................................................27 4.1.3 Ancho ........................................................................................................28 4.1.4 Relación Ancho-Largo ...............................................................................28 4.1.5 Mortalidad..................................................................................................29 4.1.6 Conversión alimenticia...............................................................................29 4.1.7 Pruebas de glucosa .....................................................................................31 4.2 Evacuación de órganos post mortem...........................................................32 4.3 Análisis económico ....................................................................................33 CAPÍTULO V DISCUSIÓN..........................................................................................................35 CAPÍTULO VI CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ...................................................39 6.1 Conclusiones..............................................................................................39 6.2 Recomendaciones.......................................................................................40 6.3 Bibliografía ................................................................................................41
  • 10. x ÍNDICE DE TABLAS TABLA 1 Parámetros fundamentales para el cultivo de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss)................................................. 4 TABLA 2 Requerimiento porcentual de nutrientes en alevines de trucha................................................................................ 7 TABLA 3 Requerimiento de aminoácidos en etapa de alevinaje de trucha arcoíris ................................................................................. 8 TABLA 4 Composición nutricional de la harina de pescado................................. 9 TABLA 5 Taxonomía de grillo común................................................................12 TABLA 6 Características químicas del grillo común (Acheta domesticus) ...........................................................................13 TABLA 7 Esquema ANOVA..............................................................................18 TABLA 8 Tabla de alimentación guía de Leitritz .................................................21 TABLA 9 Ajuste nutricional de dietas experimentales. ........................................24 TABLA 10 Descripción y nomenclatura de las dietas en estudio............................25 TABLA 11 Análisis de variancia del Peso (g) de alevines a lo largo de los ensayos en semanas, entre dos líneas y cuatro niveles de sustitución..........................................................................26 TABLA 12 Análisis de variancia de la largo (cm) de alevines a lo largo del ensayo en semanas, entre dos líneas y cuatro niveles de sustitución ............................................................27 TABLA 13 Análisis de variancia del Ancho (cm) de alevines a lo largo del ensayo en semanas, entre dos líneas y cuatro niveles de sustitución ...............................................................28 TABLA 14 Análisis de variancia de Relación Ancho Largo de alevines a lo largo del ensayo en semanas, entre dos líneas y cuatro niveles de sustitución............................................29 TABLA 15 Análisis de variancia de Conversión Alimenticia (cm) de alevines, entre tres bloques, dos líneas y cuatro niveles de sustitución ............................................................30
  • 11. xi TABLA 16 Análisis de variancia de Glucosa en alevines, entre tres bloques, dos líneas y cuatro niveles de sustitución ..................................................31 TABLA 17 Análisis de variancia de Ciegos Pilóricos de alevines, entre tres bloques, dos líneas y cuatro niveles de sustitución ............................................................33 TABLA 18 Análisis económico en base al presupuesto parcial del balanceado comercial y los experimentales ...................................34
  • 12. xii ÍNDICE DE FIGURAS FIGURA 1 Distribución de los tratamientos en la Repetición I.............................19 FIGURA 2 Distribución de los tratamientos en la Repetición II ...........................19 FIGURA 3 Distribución de los tratamientos en la Repetición III ..........................19 FIGURA 4 Curva de crecimiento .........................................................................26 FIGURA 5 Largo en el tiempo.............................................................................27 FIGURA 6 Ancho en el tiempo ............................................................................28 FIGURA 7 Relación ancho largo en el tiempo......................................................29 FIGURA 8 Conversión alimenticia en tratamientos..............................................30 FIGURA 9 Conversión Alimenticia entre Líneas .................................................31 FIGURA 10 Hígado...............................................................................................32 FIGURA 11 Riñón.................................................................................................32 FIGURA 12 Ciegos pilóricos .................................................................................33
  • 13. xiii RESUMEN La harina de insecto como sustituto de harina de pescado para alimentos balanceados acuícolas a largo plazo. El objetivo fue establecer el porcentaje adecuado de sustitución de harina de pescado por harina de grillo común (Acheta domesticus) en alevines de dos líneas de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) hasta un peso de 10 gramos de peso vivo. El estudio se realizó entre octubre del 2014 y marzo del 2015 en la piscícola “El Plata” en la Comunidad El Corazón de Mundo Nuevo, Carchi, Ecuador. Se usó un diseño de bloques completos al azar con tres repeticiones. Los resultados no presentaron diferencias estadísticas significativas entre tratamientos, entre líneas se observaron diferencias en los parámetros productivos más no en los análisis post mortem. Los tratamientos aplicados tuvieron niveles bajos de sustitución de 5%, 10% y 15%, lo que pudo influir a que no se observen comportamientos relevantes de los animales, la línea española con mayor rendimiento fue más agresiva al consumo de alimento, lo que no se observó en la línea nacional. Por lo tanto la harina de grillo es un sustituto parcial para la harina de pescado en las dos líneas estudiadas. PALABRAS CLAVES: - SUSTITUCIÓN - HARINA DE INSECTO - HARINA DE PESCADO - Acheta domesticus L. - Oncorhynchus mykiss Walbaum
  • 14. xiv ABSTRACT Insect flour substitute for fishmeal balanced long-term aquaculture food. The objective was to determine the appropriate percentage of fishmeal replacement for flour common cricket (Acheta domesticus) by juvenile rainbow trout two lines (Oncorhynchus mykiss) weighing up to 10 grams of body weight. The study was conducted between October 2014 and March 2015 on the fish "El Plata" in the Community's Corazon del Mundo Nuevo, Carchi, Ecuador. A design randomized complete block with three replications was used. The results showed no statistically significant differences between treatments, between the lines differences in growth performance but not in the post mortem were observed. The treatments had low levels of substitution of 5%, 10% and 15%, which could influence not relevant animal behaviors, Spanish line with higher performance was more aggressive to feed intake are observed, which it was not seen in national line. Therefore flour cricket is a partial substitute for fishmeal in both lines studied. KEYWORDS: - REPLACEMENT - BUG FLOUR - FISH MEAL - Acheta domesticus L. - Oncorhynchus mykiss Walbaum
  • 15. 1 CAPÍTULO I INTRODUCCIÓN La producción de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss Walbaum) en el país se viene dando desde el siglo XIX, con la primera importación de ovas de trucha de origen estadounidense, que con el tiempo se ha convertido en la trucha común o nacional (Dávila, 2007). En la actualidad se importan ovas de trucha de origen Español que son preferidas por los productores por su genética mejorada (Andes, 2013). Según (Ramos & Pino, 2014), el uso de insectos como fuentes alternativas en dietas para acuicultura y otras producciones pecuarias son posibles, ya que el aporte proteico es similar al de la harina de pescado. Los estudios dirigidos a la obtención de harina de insecto son aún escasos, es importante resaltar que los ensayos llevados a cabo en lubina (Dicentrarchus labrax L.) no presentaron diferencias en cuanto a la preferencia por harina de pescado frente a la de insecto y tampoco hubo diferencias en cuanto a la apariencia, sabor o textura de carne entre los peces alimentados con distintas dietas (Ratliff, 2007). Se ha estudiado el valor nutritivo del saltamontes (Acrida cinérea L.) llegando a los valores nutritivos de: proteína bruta (65%), grasa (8%), quitina (9%) y cenizas (4%), valores similares a la harina de pescado en cuanto a proteína (60%) (Wang, Zhai, Zhang, Zhang, & Hui, 2007). La presente investigación está dirigida a elaborar, valorar y evaluar la sustitución de 5%, 10%, 15% de harina de pescado por harina de grillo común (Acheta domesticus L.) en el balanceado para etapas iniciales de dos líneas de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss Walbaum).
  • 16. 2 1.1 Objetivos 1.1.1 Objetivo general - Establecer el porcentaje adecuado de sustitución de harina de pescado por harina de grillo común (Acheta domesticus) en alevines de dos líneas de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) hasta un peso de 10 g. 1.1.2 Objetivos específicos - Obtener harina de grillo común (Acheta domesticus) y valoración de sus características físico – químicas. - Comparación de tres niveles de sustitución (5%, 10% y 15%) de harina de grillo (Acheta domesticus) sobre el porcentaje de harina de pescado presente en el balanceado comercial, durante la etapa de alevinaje de dos líneas de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss). - Evaluación de parámetros morfométricos y fisiológicos de alevines de dos líneas de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) expuestos a los tres niveles de sustitución (5%, 10%, 15%) y el control. - Realizar un análisis económico de la utilización de harina de grillo común (Acheta domesticus). - Difundir los resultados y la metodología a los interesados para su conocimiento y aplicación.
  • 17. 3 CAPÍTULO II REVISIÓN DE LITERATURA 2.1 Producción de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) en el Ecuador La acuicultura a nivel nacional ha sido importante debido a sus condiciones climáticas, priorizando la producción de camarón y tilapia en la costa, especies de agua dulce en la sierra como la trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss), y en el oriente varias especies nativas. (Moscoso, 2005), indica que Jorge Ubidia en 1928 importó 60.000 ovas de trucha al Ecuador desde Estados Unidos, las eclosionó y sus alevines fueron sembrados en el río Machángara de Quito; luego construyó salas de incubación en los sectores de: Punyaru en Otavalo, Federico Intriago Arrata en Cotopaxi y Chirimanchay en el Azuay. Con el desarrollo de la trucha se formaron los clubes de caza y pesca, que jugaron un papel importante en la siembra de ríos y lagunas de la región interandina. 2.1.1 Origen de la trucha La trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) es originaria de la región del río Sacramento, en la costa oeste de los EEUU (Piedrahita, 1988). Posteriormente fue introducida desde EEUU a Escocia en los años 80 con la empresa Golden Sea Product, se expande a Francia, a las instalaciones de la Ferme Marine de Douhet en la isla de Oleron. En España se establece la primera granja piscícola INSUIÑA SL en Galicia en el año de 1983 (Trouw España S.A, 2003) 2.2 Parámetros de manejo 2.2.1 Factor físico ambiental Dentro del manejo de una piscicultura existen una serie de factores que influyen el desarrollo de una buena respuesta de los peces, o por lo contrario hacen que se depriman. Estos se clasifican en: los factores extrínsecos, como la temperatura, los cambios de estación, los parámetros abióticos del agua, y los factores intrínsecos o
  • 18. 4 aquellos inherentes al pez como la edad y el estado sanitario (Olabuenaga, 2000). Los factores extrínsecos son los que mandan una serie de estímulos hacia un organismo, en el cual puede actuar de forma negativa originando una reacción subsecuente, produciendo así el estrés, los peces pueden responder a estos estímulos mediante reacciones fisiológicas y de comportamiento para adaptarse a una nueva situación. Se incluyen sub factores como son: precipitación, horas luz, calidad y cantidad de agua, oxígeno disuelto, concentración de metales pesados, temperatura, entre otras (Rodriguez & Anzola, 2009), estos factores pueden afectar en el metabolismo de los peces disminuyendo así su tasa de supervivencia lo que afecta la producción. Según (Blanco, 1995) las condiciones generales medioambientales que se requieren para el cultivo de trucha arcoíris se muestran en la Tabla 1. Tabla 1 Parámetros fundamentales para el cultivo de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) PELIGROSO DUDOSO NORMAL UNIDADES FACTORES 22 y mas 20 – 22 < 20 ºC Temperatura del Agua 50 50 – 70 =< 80 % Oxígeno Disuelto <5.5 / >9.5 <6.0/ > 9.2 6<pH<9 Ph pH > 600 500 – 600 20 - 500 uS/cm Conductividad a 20 ºC Débil 8 - 60 Fuerte > 400 mg/l Alcalinidad en (HCO3) Fuerte 60 – 200 mg/l Calcio > 100 50 100 0 – 50 mg/l Sulfatos en (SO4) ++ + - Ácido Sulfhídrico > ++ Débil 0 - 10 Fuerte 11 o mas mg/l Nitratos en (NO3) =>1 0.1 0 - indicios 0.001 mg/l Nitritos en (NO2) => 1 0.01 - 0.4 0 - indicios 0.001 mg/l Amoniaco > 50 20-50 indicios -20 mg/l Cloruros en (CL) sin influencia de mar > 70 30 – 70 > 30 mg/l Materias en suspensión > 20 12 – 20 > 20 mg/l Anhídrido Carbónico (CO2) > 5 2 – 5 1 – 2 mg/l Oxibilidad en frio, en 4h Fuente: (Blanco, 1995) ºC: grados centígrados; %: porcentaje; pH: potencial hidrogeno; uS/cm: micro siemens por centímetro; mg/l: miligramos por litro.
  • 19. 5 Durante la etapa de alevinaje, es importante tener en cuenta que la densidad de siembra no debe ser superior a los 5 kg/m3 . La profundidad de la piscina debe ser de máximo 50 cm y con circulación continua de agua sin necesidad de ser excesiva. La luminosidad intensa es causante de estrés por lo que se recomienda que en las primeras cuatro semanas de los animales estén bajo techo o cobertura parcial del 33% de la piscina. La oxigenación del agua deberá estar cerca de la saturación con un recambio hídrico total cada 30 minutos (Sala, 2011). 2.2.2 Factores intrínsecos Estos son los factores que tienen que ver con el estado del pez como la edad, el estado sanitario, entre otras (Olabuenaga, 2000). Los peces de piscifactorías están sujetos a múltiples situaciones de manejo, transporte y confinamiento que es responsable de la aparición de estrés, causante también del desarrollo de enfermedades infecciosas causadas por patógenos primarios u oportunistas afectando a la producción acuícola (Davis, Okihiro, & Hinton, 2002). 2.3 Etapas en el proceso de producción El desarrollo biológico de la trucha consta de cinco etapas (Bastidas & Cartagena, 2002): - Ovas.- Son los huevos fecundados que permanecen por 30 días en promedio, para luego eclosionar y convertirse en alevines (Bastidas & Cartagena, 2002). - Alevines.- Son peces pequeños que miden de 3 a 10 cm, con un pesos que van de 1.5 a 20 gramos (Bastidas & Cartagena, 2002). - Juveniles.- Son peces que miden de 10 a 15 cm, con pesos que van de 20 a 100 gramos (Bastidas & Cartagena, 2002). - Comerciales.- Son peces que miden 15 a 22 cm con un peso de 100 a 200 gramos (Bastidas & Cartagena, 2002). - Adultos.- Son peces que han llegado al desarrollo gonadal y poseen características morfológicas marcadas, con edad de 2 años y pesan de promedio un kilogramo (Bastidas & Cartagena, 2002).
  • 20. 6 2.4 Fisiología de la digestión El sistema digestivo en trucha arcoíris inicia desde la boca con mandíbula superior e inferior unidas por una membrana, está dotada de hileras de dientes que no solo están en la mandíbula sino también en lengua y paladar, no mastica el alimento sino que lo traga, seguido se encuentra la faringe que también posee dientes, a continuación un esófago de longitud corta, luego el esfínter cardiaco que controla la entrada del alimento al estómago, mismo que es de fuerte musculatura y tiene forma de U. sigue el esfínter pilórico que regula la entrada de alimento al intestino, al extremo de este esfínter se encuentran los ciegos pilóricos que son proyecciones digitoformes ciegas del tubo digestivo, variando en número hasta 70, presentan una mucosa provista de numerosos pliegues con glándulas secretoras de enzimas (lactasa, sacarasa, lipasa) y se rodean de depósitos lipídicos de reserva, al final se encuentra el intestino que es acortado y termina en el recto, donde los pliegues de la mucosa son cortos, la pared muscular es gruesa y de gran capacidad expansiva (Universidad de Granada, 2015). 2.5 Nutrición en trucha Los métodos de alimentación en truchas, dependen del tamaño de los animales bajo cultivo. El primer alimento ofrecido a las larvas debe ser colocado en pequeñas cantidades de forma manual y por lo menos, ofrecido entre 8 y 10 veces d-1 (por día); hasta que se observe que todos los peces estén comiendo. Este es el período de mayor atención, puesto que si desde el comienzo, los peces son bien alimentados, los animales responderán en cuanto a crecimiento durante la producción. Pasado este período y de acuerdo a la producción mantenida, se podrán utilizar otros métodos mecánicos y disminuir las raciones diarias de alimento. De todas formas, es conveniente que el productor, ofrezca 2 o 3 veces d-1 alimento en forma manual; observando así, la actividad de los pequeños peces (Choquehuayta, 2008). La frecuencia de la alimentación disminuye, hasta cerca de 5 veces d-1 , en el transcurso de la etapa de alevinaje y a medida que los animales crecen. La trucha puede almacenar hasta el 1% de su peso en alimento seco en cada toma, por lo que la
  • 21. 7 frecuencia debe ajustarse de acuerdo a ello (Choquehuayta, 2008). Los pequeños peces ganan peso, por lo que deben monitorearse de forma simultánea pasadas las 4 a 6 primeras semanas de vida, la ración será ajustada, de acuerdo al peso promedio obtenido. Mientras los peces sean menores a los 2 cm de talla, el alimento se distribuirá en los 2/3 de la superficie del agua, asegurándose de esta forma que todos accedan al mismo, posibilitando la mayor uniformidad de tallas en los lotes bajo cultivo. El alimento que se hunde es ignorado por las pequeñas truchas y su exceso deteriora la calidad del agua y promueve enfermedades, por ello debe procederse además a una limpieza normal diaria (Choquehuayta, 2008). 2.5.1 Requerimientos nutricionales en alevines La trucha necesita energía para crecer y desarrollarse, que se obtiene de nutrientes como las proteínas, de los lípidos y carbohidratos. Asimismo necesita complementar con otros elementos vitales como son las vitaminas y los minerales. La concentración de cada nutriente varía en la dieta de acuerdo al tamaño de la trucha. En estadio de alevines y pre juveniles necesitará mayor cantidad de proteína que en peces de mayor tamaño. Asimismo el requerimiento de la grasa será mayor a medida que el pez vaya desarrollándose (Choquehuayta, 2008). Tabla 2 Requerimiento porcentual de nutrientes en alevines de trucha NUTRIENTE ALEVINES Proteínas (mín.) 45.0 Carbohidratos (máx.) 22.0 Grasa (mín.) 10.0 Minerales (máx.) 10.0 Humedad (máx.) 10.0 Fibra (máx.) 2.0 Calcio (mín.) 1.5 Fosforo (mín.) 1.0 Fuente: (Choquehuayta, 2008) mín.: mínimo; máx.; máximo En cuanto a proteínas hay que especificar el requerimiento de aminoácidos que se describe en la Tabla 3:
  • 22. 8 Tabla 3 Requerimiento de aminoácidos en etapa de alevinaje de trucha arcoíris AMINOACIDOS CANTIDAD (%) Arginina 1.4-3.5 Fenilalanina 2.5-6.5 Histidina 0.6-1.6 Isoleucina 1.0-2.4 Leucina 1.8-4.4 Lisina 2.1-5.3 Metionina 0.5-0.6 Treonina 1.4-3.4 Triptófano 0.2-0.5 Valina 1.2-3.1 Fuente: Choquehuayta (2008) %: porcentaje 2.6 Uso de harina de pescado Los piensos acuícolas en la actualidad se encuentran entre los más costosos del mercado, debido a que su fabricación es por métodos como el extruzado y peletizado a vapor. El contenido de nutrientes debe ser muy alto para lo que se suele utilizar materia prima de libre uso como el aceite y harina de pescado (Tabla 4), entre otros que hacen que su valor aumente innecesariamente (Bureau, 2000). La harina de pescado resulta de la captura de peces de poco o ningún interés para el consumo humano y de desechos generados por el procesamiento de pescado para la industria alimenticia, entre un 10% y 15% a nivel mundial. Los animales enteros son en su mayoría pequeños, huesudos, no comestibles pero con aceite en su carne como la anchoveta, capelán, lanzón, entre otros (Mariño, 2012). La harina de pescado es una fuente proteica de bastante uso en la preparación de raciones para consumo animal, rica en aminoácidos esenciales como Cisteína. Metionina y Cistina, los cuales son limitantes en animales monogástricos. Según (Mariño, 2012), la harina de pescado es un polvo o harina marrón y está compuesta por porcentajes de proteína entre 60 y 72%, humedad como máxima de 14%, grasa entre 5 y 12%, y ceniza con un 10 a 20%. Debido a su alto contenido de
  • 23. 9 proteína, la harina de pescado ocupa un lugar preferencial como materia prima para uso animal y por ser fuentes de vitamina del grupo B. Así también tiene un balance de aminoácidos esenciales muy bueno. Tabla 4 Composición nutricional de la harina de pescado COMPOSICIÓN NUTRICIONAL UNIDAD CANTIDAD Materia seca % 90.00 Energía metabolizable (aves) Mcal/kg 3.10 Energía digestible (cerdos) Mcal/kg 3.20 Proteína % 50.00 Metionina % 1.80 Metionina+ cistina % 1.95 Lisina % 4.00 Calcio % 7.50 Fósforo disponible % 3.80 Ácido linoléico % 0.15 Grasa % 14.00 Fibra % 1.20 Ceniza % 16.50 Fuente: (Mariño, 2012) %: porcentaje; Mcal/kg: mega caloría por kilogramo Toda la harina de pescado se utiliza como ingrediente de alto valor proteico en la alimentación de animales terrestres de crianza y para peces de criadero. Estas harinas suponen una buena fuente de energía en la alimentación de aves, cerdos, vacas, ovejas y en la piscicultura (Mariño, 2012). 2.7 Uso de harina de insecto Al iniciar la actividad comercial acuícola, la industria productora de alimentos balanceados para salmones y trucha priorizó la formulación de dietas con altos porcentajes de aceite y harina de pescado siendo una dieta ideal para peces de mar, con el aumento de la demanda por este insumo y el estancamiento de la captura en los últimos tiempos la industria se ve obligada a explorar nuevas alternativas de reemplazo nutricional (FIA, 2007).
  • 24. 10 En estudios sobre alimentación de salmones y truchas en condiciones naturales en la etapa de alevinaje en agua dulce, se ha demostrado que no se alimentan de peces. Su actividad de alimentación la realizan más bien sobre distintos estados de desarrollo de insectos acuáticos (larvas y ninfas) y diferentes estados de desarrollo de pequeños crustáceos como los gamáridos, todos los organismos presentes en los ríos donde los peces se desarrollan hasta alcanzar la etapa de smoltificación (FIA, 2007). Los estudios dirigidos al uso harina de insecto como sustituto de harina de pescado en alimentación de peces se han demostrado en lubina (Dicentrarchus labrax) que no hubo preferencia por ninguna harina en especial y no se observó diferencias en la estructura y características de la carne de los animales a prueba (Ratliff, 2007). Estudios en juveniles de carpa japonesa (Carassius auratus) dirigidos al uso de harina de ninfas de cucaracha (Periplaneta americana) como sustituto de harina de pescado no encuentran diferencias estadísticas significativas entre los peces alimentados con la dieta control (alimento comercial API- Tilapia) y la dieta con sustitución al 30% (Hernández, Ramos, Pino, & Acosta, 2008). Estudios en Tilapia del Nilo (Orechromis niloticus) dirigidos al uso de harina de larvas de Tenebrio molitor como alternativa proteica a la harina de pescado concluyen que la dieta basada en harina de insectos induce en menor medida el estrés oxidativo (Villacreces, 2011). Estudios en trucha arco iris dirigidos al uso de harina de lombriz como sustituto parcial a la harina de pescado en dietas iniciales concluyen que la harina de lombriz puede sustituir en un 25% a la harina de pescado en las primeras etapas de desarrollo de la trucha (Bianchi, Bastardo, & Medina, 2007). Se ha estudiado el valor nutritivo del saltamontes (Acrida cinérea) llegando a los valores nutritivos de: proteína bruta (65%), grasa (8%), quitina (9%) y cenizas (4%), valores similares a la harina de pescado en cuanto a proteína (60%) (Wang, Zhai,
  • 25. 11 Zhang, Zhang, & Hui, 2007). Otras especies de insectos analizadas han sido el grillo mormón (Anabrus simplex) con contenidos nutricionales de proteína bruta de 58% (DeFoliart et al., 1982), el grillo doméstico (Acheta domesticus) con proteína bruta de 62% (Nakagaki et al., 1987), y seis especies de larvas de lepidópteros en los cuales el valor de proteína bruta varía de 49% a 58% (Landry, DeFoliart, & Sundae, 1986). Como puede observarse, aunque estos valores sean inferiores a los obtenidos por (Wang, Zhai, Zhang, Zhang, & Hui, 2007), para el saltamontes (Acrida cinérea), se puede decir que el porcentaje de proteína en estos insectos es similar a los valores de la harina de pescado con una proteína bruta de 60%. También se ha reportado que el contenido de aminoácidos es similar al de la harina de pescado que tiene valores de metionina de 2%, lisina de 1% y cisteína de 2%, es el de la harina del saltamontes (Acrida cinérea) con valores de metionina de 2%, lisina de 0.7% y cisteína de 3.8% (Wang, Zhai, Zhang, Zhang, & Hui, 2007). Sin embargo se ha determinado que el grillo mormón y el grillo común son deficientes en cuanto a metionina (DeFoliart, Finke, & Sunde, 1982). Se ha demostrado que el contenido de grasa y por ende la contribución energética de insectos puede variar entre especies (Cerda, y otros, 1999). El grado de instauración de grasas es parecido a la instauración de aves de corral y pescado, con la diferencia que el contenido de ácido linoléico es mayor en insectos (DeFoliart, Finke, & Sunde, 1982). (Wang, Zhai, Zhang, Zhang, & Hui, 2007), llegaron a determinar que (Acrida cinérea) tiene alto contenido de ácidos grasos insaturados, con mayores valores en los ácidos oleico de 31%, linoléico de 41% y linolénico de 12% de los ácidos grasos totales, con lo que se concluye que el aceite de saltamontes podría ser de gran importancia para la industria alimenticia.
  • 26. 12 A escala comercial, son diversas la empresas que surten de insectos vivos para alimentación de mascotas exóticas. La empresa norteamericana “Grubco” vende varias especies de insectos con la siguiente composición: grillos (6% lípidos; 21% proteína bruta; 69 % humedad); larvas de la harina (13% lípidos; 21% proteína bruta; 62 % humedad). Aunque son limitados, existen algunos trabajos que han valorado la harina de grillos en la alimentación de diversas especies ganaderas. Varios autores coinciden que al probar harina de grillo en alimentación de pollos broiler no se vio diferencias significativas con el control en cuanto a ganancia de peso (Wang, Zhai, Zhang, Zhang, & Hui, 2007). (Nakagaki, Sunde, & DeFoliart, 1987), en su estudio indicaron que la ganancia de peso en relación al alimento mejoraba cuando se complementaba la alimentación a base de insectos con aminoácidos como metionina y arginina. 2.7.1 Grillo doméstico (Acheta domesticus) - Taxonomía.- La taxonomía del grillo común o doméstico (Acheta domesticus) que es la especie de grillo más usada en la zootecnia, es la Tabla 5: Tabla 5 Taxonomía de grillo común REINO: Animalia PHYLUM: Arthropoda CLASE: Insecta ORDEN: Orthoptera SUBORDEN: Ensifera FAMILIA: Achrididae (Grillydae) GÉNERO: Acheta ESPECIE: Acheta domesticus L. - Anatomía.- El cuerpo del grillo común (Acheta domesticus) se divide en tres segmentos principales que son: cabeza, tórax, abdomen con una medida de 25 a 30 mm. Este grillo tiene: dos ojos simples, dos ojos compuestos, dos antenas, una boca, palpos junto a la boca, espiráculos en los costados de su abdomen para
  • 27. 13 respirar, las hembras tienen un ovopositor en su extremo caudal, dos cercis, dos alas para volar, dos alas covertoras, cuatro patas caminadoras, y dos patas saltadoras para escapar del peligro, en total los grillos tienen seis patas. Todas las seis patas del grillo están unidas al tórax, que es la parte central de los tres segmentos de su cuerpo (Garibay, 2007). Las hembras ponen un promedio de 30 huevos por puesta su incubación dura aproximadamente 2 semanas. Cada grillo tarda 7 semanas en ser adulto y durante por este tiempo pasa por 7 mudas, es recomendado que se tenga en cultivo una relación de 1 macho por 10 hembras (Territorio salvaje, 2009). - Características químicas.- (Nakagaki, Sunde, & DeFoliart, 1987), realizaron un estudio profundo acerca de los contenidos nutricionales que pueden tener este tipo de grillos mediante análisis de laboratorio (Tabla 6). Tabla 6 Características químicas del grillo común (Acheta domesticus) % ANALISIS PROXIMAL 62.00 Proteína Cruda 7.50 Extracto etéreo 4.60 Ceniza 7.00 Fibra cruda 5.20 Agua % ANALISIS MINERAL 0.99 Fosforo 1.28 Potasio 0.19 Calcio 0.11 Magnesio 0.59 Azufre Ppm 254.00 Zinc 64.00 Manganeso 155.00 Hierro 25.00 Cobre 34.00 Aluminio 9.21 Sodio Fuente: (Nakagaki, Sunde, & DeFoliart, 1987) %: porcentaje; ppm: partes por millón.
  • 28. 14 2.7.2 Obtención de grillos para la zootecnia Los grillos aceptables para ser usados dentro de la zootecnia son los grillos nacidos en cautiverio, obtenidos de una granja comercial de grillos asegurándose así que estén libres de enfermedades. Estos son ideales para este fin ya que son fáciles de adaptarse a condiciones de cautiverio, y puede producir entre seis a siete generaciones por año (Nakagaki, Sunde, & DeFoliart, 1987).
  • 29. 15 CAPÍTULO III MATERIALES Y MÉTODOS 3.1 Ubicación del lugar de investigación 3.1.1 Ubicación política El área de estudio se encuentra ubicada en la provincia del Carchi, Cantón Espejo, Parroquia El Gualtal, Comunidad El Corazón de Mundo Nuevo, vía San Lorenzo km 116, en el proyecto “Piscícola y pesca deportiva el Plata”. Los análisis de laboratorio fueron realizados en: Laboratorio de Recursos Bioacuáticos y Laboratorio de Química de la Carrera en Ingeniería Agropecuaria IASA I, hacienda El Prado. 3.1.2 Ubicación geográfica Longitud: 0.721497 Latitud: 78.153104 Altitud: 1545 m.s.n.m Fuente: Bing maps Piscícola Rio Plata
  • 30. 16 3.1.3 Ubicación ecológica El proyecto se encuentra en una región Sub-tropical húmeda, presentándose una humedad relativa del 50%, la precipitación es 2500 mm, temperatura media 22.9 º C. 3.2 Materiales Grillos (Acheta domesticus) semi - adultos. Estufa Molino ultra centrífugo Molino de carne Refrigeradora Harina de Grillo (Acheta domesticus) Piscina de alevinaje de 1.8 m 3 Termómetro 8 jaulas de malla plástica con capacidad de 36 l cada una PROFI TEST, Kit medidor de oxígeno disuelto en el agua Bandas colorimétricas indicadoras de pH, Nitritos, Nitratos Balanza digital Balanza analítica Balanceado iniciador de ECUA- BIOMIX # 2 y #3 Alevines de línea Española y Nacional Malla plástica negra Fundas plásticas de 0.60 m x 1.2 m Bomba de aire manual Implementos de manejo acuícola Eugenol Jeringuillas de 3 ml Bisturí Heparina Sódica Alcohol Tubos eppendorf Microcentrífuga
  • 31. 17 Micropipetas Incubadora Espectrofotómetro Refrigeradora Materiales de oficina (lápices, hojas, computadora, entre otros.) 3.3 Métodos 3.3.1 Diseño experimental Diseño de bloques completamente al azar (DBCA). Los datos fueron analizados con el programa estadístico R y respaldo de (Ulloa, 2015). 3.3.1.1 Factores a probar Dietas con 0%, 5%, 10% y 15% de sustitución de harina de grillo común (Acheta domesticus) sobre el porcentaje de harina de pescado, en dietas diseñadas para alevines y dos líneas de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss), española (Línea 1) y nacional (Línea 2). 3.3.1.2 Tratamientos a comparar Perfil aminoácidico y tipología de la harina de grillo común (Acheta domesticus). Cuatro niveles de sustitución, dos líneas y tres repeticiones a distinto tiempo. 3.3.1.3 Tipo de diseño El ensayo se realizó con un Diseño de Bloques Completo al Azar (DBCA); con tres repeticiones, el factor de bloqueo fue el tiempo, el arreglo factorial fue de 2 líneas x 4 niveles de sustitución = 8 unidades experimentales por repetición. Con modelo matemático: Yij = u + Ti + ßj+ εij Yij = Variable u = Media
  • 32. 18 Ti = Efecto del tipo del tratamiento ßj = Efecto del bloque j εij= Error experimental de la unidad experimental i,j 3.3.1.4 Repeticiones Las repeticiones fueron 3 cada una en diferentes tiempos, en la etapa de alevinaje (7 semanas). 3.3.1.5 Características de las unidades experimentales (UE) Se tuvo 24 unidades experimentales, cada unidad estuvo conformada por una jaula de 35 x 40 x 30 cm con 20 alevines de Trucha Arcoíris. Se obtuvieron 9 animales escogidos al azar, como muestra por tratamiento para los análisis en laboratorio mediante el cálculo: Nivel de confianza 95% N = 480 total de animales e = 5% p = 0.5 = 214 /14 = 8.9 = 9 alevines que fueron tomados al azar por UE N: Población total; e: Error; p: Prevalencia; n: número de muestra 3.3.2 Análisis estadístico 3.3.2.1 Esquema de análisis de variancia El esquema final del análisis de variancia de describe en la Tabla 7: Tabla 7 Esquema ANOVA Fuentes de Variación Grados de libertad NIVELES DE SUSTITUCIÓN 3 LÍNEAS 1 BLOQUES 2 ERROR 7 TOTAL 13
  • 33. 19 3.3.2.2 Distribución en el campo Figura 1. Distribución de los tratamientos en la Repetición I Figura 2. Distribución de los tratamientos en la Repetición II Figura 3. Distribución de los tratamientos en la Repetición III 3.3.2.3 Análisis funcional Realizamos pruebas de comparación de medias según Tukey, al 5% de significancia para tratamientos, intervalos e interacciones. Repetición I Repetición II Repetición III T0L1 T1L1 T0L2 T1L2 T2L1 T2L2 T3L1 T3L2 T2L1 T1L1 T3L2 T2L2 T3L1 T1L2 T0L1 T0L2
  • 34. 20 3.3.2.4 Análisis económico El análisis económico se realizó con el presupuesto parcial tomando en cuenta los costos variables y beneficio bruto de cada tratamiento (Reyes, 2001) 3.3.2.5 Variables a medir - Análisis bromatológico de la harina de grillo común (Acheta domesticus): Se realizó en los Laboratorios de Química de la Carrera en Ingeniería Agropecuaria IASA I y laboratorios NOVAGESTION, para conocer la cantidad de proteína, cenizas, perfil de aminoácidos esenciales, perfil de ácidos grasos y grasas totales. - Peso: Los 20 animales de cada jaula (unidad experimental), fueron pesados en una balanza digital, encerada con 800 ml de agua, con lo obtenido se calculó la biomasa de cada unidad experimental. Esta medida se tomó al inicio de cada repetición y luego semanalmente. - Ancho: Se tomó en una regla adaptada para medir peces vivos con precisión de 1 mm, desde la aleta dorsal hasta la aleta ventral, a 9 animales por jaula, al inicio de repetición y luego semanalmente. - Largo: Fue tomada con una regla adaptada para peces vivos desde la cabeza hasta el final de la aleta caudal, a 9 animales por jaula, al inicio de cada repetición y luego semanalmente. - Relación ancho-largo: Fue calculada semanalmente, a partir de los datos obtenidos de largo y ancho. R = A/L R = Relación ancho-largo A = Ancho L = Largo
  • 35. 21 - Mortalidad: Se calculó tomando en cuenta todos los animales muertos a lo largo de las tres repeticiones. Representa la relación entre el número de animales muertos con el número total de animales. M = # animales muertos/ # animales totales x 100 M = Mortalidad - Conversión alimenticia: Fue calculada semanalmente tomando en cuenta el alimento consumido en dicha semana, mismo que se suministró de acuerdo a la fórmula: (Biomasa *% de ración)/100 Biomasa= Peso de animales totales % de ración= valor tomado de la tabla de Leitritz tomando en cuenta la temperatura promedio semanal y el peso de los animales. Tabla 8 Tabla de alimentación guía de Leitritz Talla (cm) Peso (g) Temperatura (0 C) 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 2-5 -0.18 3.9 4.2 4.5 5.2 5.0 5.7 6.2 6.7 7.3 7.7 8.3 Tasadealimentación(%depesocorporal)(TA%) 2.5-5.0 1.18-1.5 3.2 3.5 3.8 4.3 4.5 4.8 5.2 5.6 6.0 6.4 6.8 5.0-7.5 1.5-5.0 2.6 2.8 3.1 3.4 3.6 3.9 4.2 4.5 5.0 5.2 5.6 7.5-10.0 5.0-12.0 2 2.2 2.4 2.7 2.8 3.0 3.2 3.5 3.7 4.1 4.4 10.0-12.5 12.0-23.0 1.6 1.7 1.8 2.0 2.1 2.3 2.4 2.6 2.8 3.1 3.3 12.5-15.0 23.0-40.0 1.3 1.4 1.5 1.7 1.7 1.8 2.0 2.1 2.3 2.5 2.7 15.0-17.5 40.0-60.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 2.0 2.1 17.5-20.0 60.0-90.0 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 20.0-22.5 90.0-130.0 0.8 0.9 1.0 1.1 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 22.5-25 130.0-180.0 0.8 0.8 0.9 1.0 1.0 1.1 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 25.0 + 180 + 0.7 0.7 0.8 0.9 0.9 1.0 1.1 1.2 1.2 1.3 1.4 Fuente:http://www.bvcooperacion.pe/biblioteca/bitstream/ 123456789/2806/2/BVCI0002905 _2.pdf
  • 36. 22 La conversión alimenticia es la relación entre el alimento consumido y el peso ganado por el animal. C = W alimento / W animal C= Índice de conversión W= Ganancia del peso del animal W= Alimento consumido - La prueba de glucosa se realizó con el fin de observar un posible incremento de glucosa en plasma por influencia del contenido nutricional de las dietas experimentales, se llevaron a cabo en la muestra (9 animales escogidos al azar) por jaula, al final de cada repetición con el kit de Human en el espectrofotómetro del Laboratorio de Recursos Bioacuáticos de la Carrera en Ingeniería Agropecuaria IASA I, hacienda El Prado. Para lo que se anestesió a los animales en una solución de cinco gotas de eugenol al 70% por litro de agua, se obtuvo las muestras de sangre con jeringuillas de 3 ml y aguja de 21 G x ½” previamente heparinizadas, lo mínimo a obtener de sangre debe ser de 0,1 ml para al momento de extraer el suero luego de microcentrífugar 10 m. a 6000 rpm, obtener 10 ul de suero en tubos eppendorf sin heparinizar, que se almacenan a 4ºC, por un tiempo máximo de 24 horas hasta realizar la prueba colorimétrica con el kit de glucosa de Human siguiendo su protocolo: a temperatura ambiente tomar los tubos de ensayo necesarios para hacer las muestras de cada tratamiento por vez, se coloran 10 tubos, con micropipetas se coloca en un tubo 1000 µl de reactivo RGT (reactivo enzimático), en un segundo tubo 1000 µl de reactivo RGT y 10 µl de reactivo STD (reactivo estándar), en el resto de tubos se coloca 1000 µl de reactivo RGT y 10 µl de suero sanguíneo por animal en estudio, se mezcla bien, incuba por 10 minutos a 25 0 C, se coloca las muestras en cubas numeradas para la medición en el espectrofotómetro, primero se coloca la cuba de blanco, luego se mide la absorbancia de la muestra STD y a continuación el resto de muestras una tras otra. - Evaluación de órganos se realizaron con el fin de encontrar depósitos de grasa en la periferia de los órganos importantes a nivel nutricional. Luego de
  • 37. 23 haber extraído sangre a los 9 animales se procedió a cortar la piel del pez de manera longitudinal con bisturí número 20 desde el orificio anal hacia el tórax, se extrajo el riñón, hígado y se contabilizó los ciegos pilóricos, para evaluar posibles afecciones nutricionales como: hígado graso, cálculos renales, alteración numérica de los ciegos pilóricos. En hígado se evaluó el color y hepatomegalia (hinchazón de hígado) causado principalmente por lipidósis hepática (hígado graso) por dietas ricas en grasa. Se establecieron cuatro categorías de observación: apariencia normal, color anormal, manchas y tumores. En riñones se determinó la existencia de acumulación de grasa periférica y en ciegos pilóricos se observó abundancia e inserción de grasa efecto de las dietas ricas en grasa (Bastardo, Scorza, & Sara, 2006). 3.3.3 Métodos específicos de manejo del experimento Una vez adquiridos los grillos en la granja SARgrillo se procedió al sacrificio con agua a 60 ºC por 30 segundos y luego un shock térmico con agua al ambiente 13ºC (Nakagaki, Sunde, & DeFoliart, 1987), se tamizó el producto para retirar el exceso de agua, se colocó en un desecador a 50 ºC por 60 h, una vez comprobada la pérdida del 70% de humedad, se procedió a moler en el molino ultra centrifugo con grosor de partícula de 0.5 mm y se almacenó el producto en congelación hasta el momento de la formulación de balanceado. Se procedió a enviar una muestra de 30 g de harina al laboratorio NOVAGESTIÓN para determinar el perfil de: aminoácidos y ácidos grasos, otra muestra de 20 g para realizar el análisis bromatológico proximal en el Laboratorio de Química de la Carrera en Ingeniería Agropecuaria IASA I. El resultado del laboratorio en cuanto a aminoácidos en gAA/100g tenemos, leucina con 9.33, acido glutámico 7.77, tirosina con 6.93, histidina con 3.74, lisina con 2.90, treonina 2.85 y metionina 0.55.
  • 38. 24 Los resultados del análisis bromatológico proximal en porcentaje son de 51.81% de proteína verdadera, 19.8% grasas verdaderas, 4.24% cenizas y 7.37% de fibra. Los resultados obtenidos para ácidos grasos en mg/g son de 2.07 en total de omega 3, 51.28 total de omega 6, 45.83 total de saturados, 114.57 total de insaturados, 61.22 total mono insaturados y 53.35 total de poli insaturados. Con los resultados obtenidos se procedió a realizar la sustitución al 5%, 10% y 15% de harina de pescado por harina de grillo común en la formulación de balanceado iniciador para trucha arco iris con granulometría comercial # 2 y #3. Obtenidas las mezclas de los balanceados experimentales en polvo, se peletizó de manera artesanal; humedeciendo con agua el 10% de la mezcla, se pasó la mezcla por un molino de carne, se dejó secar a temperatura ambiente, trituró con una botella vidrio, tamizó con coladores plásticos de diferente espaciado para obtener así las dos granulometrías deseadas, para finalizar el proceso se dividió cada balanceado en tres partes iguales y almacenó en congelación para cada una de las repeticiones. El porcentaje nutricional de cada balanceado se detalla en la Tabla 9. Tabla 9 Ajuste nutricional de dietas experimentales. Alimento Proteína % mín. Fibra % máx. Grasa % mín. Ceniza % máx. Energía Digestible kcal/kg TESTIGO 50 1.0 10.0 10.0 4100 TRATAMIENTO 1 50 1.0 10.0 10.0 4100 TRATAMIENTO 2 50 1.0 10.0 10.0 4100 TRATAMIENTO 3 50 1.0 10.0 10.0 4100 Simbología: %: porcentaje; mín.: mínimo; máx.: máximo; kcal/kg: kilocalorías por kilogramo. Teniendo en cuenta que el total de proteína en el balanceado comercial es de 50%, el porcentaje de harina de pescado que será sustituido por harina de grillo común (Acheta domesticus) se detalla en la Tabla 10.
  • 39. 25 Tabla 10 Descripción y nomenclatura de las dietas en estudio DESCRIPCIÓN NOMENCLATURA Nº DE TRATAMIENTO Fórmula comercial, 0% harina de grillo T0 TESTIGO Fórmula comercial con sustitución de 5% harina de grillo T1 TRATAMIENTO 1 Fórmula comercial con sustitución de 10% harina de grillo T2 TRATAMIENTO 2 Fórmula comercial con sustitución de 15% harina de grillo T3 TRATAMIENTO 3 Una vez llegados los animales a la granja se realizó la primera semana de cuarentena con una profilaxis (oxitetraciclina al 98% a razón de 6 g por kilogramo de alimento balanceado) y adaptación de los animales de las dos líneas a las jaulas cubiertas con malla plástica negra como protección, a partir de la segunda semana se comenzó el suministro de las dietas. La ración alimenticia a suministrar fue calculada semanalmente en base a la biomasa de cada jaula. Con una balanza analítica se pesó la cantidad de alimento calculado para suministrar a diario. Las tres primeras semanas de cada ensayo se suministró alimento 6 veces d-1 , las tres siguientes semanas 4 veces d-1 y la última semana 3 veces d-1 . Los parámetros físico-químicos del agua fueron tomados diariamente a la misma hora esperando que el pH se encuentre entre 6 y 9, procurando que la temperatura no sobrepase los 20 0 C, el oxígeno disuelto esté cerca de la saturación, nitritos y nitratos sean 0 ml/l. Mientras el agua estuvo altamente turbia no se suministró el alimento. Las medidas de peso, largo y ancho de animales se tomó al inicio de cada repetición y luego semanalmente en horas de la mañana para evitar estrés en los alevines. Los parámetros post mortem, glucosa, y observación de órganos se realizaron al final de cada repetición.
  • 40. 26 CAPÍTULO IV RESULTADOS 4.1 Parámetros evaluados 4.1.1 Peso Descripción del análisis estadístico para esta variable se detalla en la Tabla 11: Tabla 11 Análisis de variancia del Peso (g) de alevines a lo largo de los ensayos en semanas, entre dos líneas y cuatro niveles de sustitución Df SC CM F value Pr(>F) Línea 1 61.8 61.8 35.331 1.14e-08*** Nivel de sustitución 3 1.0 0.3 0.186 0.906 Semana 7 2447.0 349.6 199.946 <2e-16*** Línea:N.de sustitución 21 1.8 0.1 0.048 1.000 Remanente 157 274.5 1.7 Significado: 0 ‘***’ 0.001 ‘**’ 0.01 ‘*’ 0.05 ‘.’ 0.1 ‘ ’ 1 Los datos descritos por la Tabla 11 se observan de manera gráfica en la Figura 4: Figura 4. Curva de crecimiento
  • 41. 27 4.1.2 Largo En la Tabla 12 se detalla el análisis de variancia para este parámetro. Tabla 12 Análisis de variancia de la largo (cm) de alevines a lo largo del ensayo en semanas, entre dos líneas y cuatro niveles de sustitución Df SC CM F value Pr(>F) Línea 1 40.5 40.53 118.063 <2e-16*** Niveles de sustitución 3 2.7 0.90 262.061 0.0529 Semana 7 629.7 89.95 262.061 <2e-16*** Línea:N.de sustitución 21 1.2 0.06 0.163 1.0000 Remanente 159 54.6 0.34 Significado: 0 ‘***’ 0.001 ‘**’ 0.01 ‘*’ 0.05 ‘.’ 0.1 ‘ ’ 1 Entre líneas se encontraron diferencias mínimas significativas como lo muestra la Figura 5. Figura 5. Largo en el tiempo Largo(cm)
  • 42. 28 4.1.3 Ancho En la Tabla 13 se observa el análisis de variancia. Tabla 13 Análisis de variancia del Ancho (cm) de alevines a lo largo del ensayo en semanas, entre dos líneas y cuatro niveles de sustitución Df SC CM F value Pr(>F) Línea 1 0.64 0.636 35.472 1.61e-08*** Niveles de sustitución 3 0.06 0.019 1.038 0.377 Semana 7 36.04 5.148 287.174 < 2e-16*** Línea:N.de sustitución 21 0.10 0.005 0.267 1.0000 Remanente 159 2.85 0.018 Significado: 0 ‘***’ 0.001 ‘**’ 0.01 ‘*’ 0.05 ‘.’ 0.1 ‘ ’ 1 En el análisis se encontró diferencias significativas entre líneas como lo muestra la Figura 6: Figura 6. Ancho en el tiempo 4.1.4 Relación Largo-Ancho El análisis estadístico de este parámetro se describe en la Tabla 14.
  • 43. 29 Tabla 14 Análisis de variancia de Relación Largo-Ancho de alevines durante del ensayo en semanas, entre dos líneas y cuatro niveles de sustitución Df SC CM F value Pr(>F) Línea 1 0.005924 0.005924 55.065 6.62e-12*** Niveles de sustitución 3 0.000570 0.000190 1.766 0.156 Semana 7 0.019093 0.002728 25.355 <2e-16*** N. de sustitución : Semana 21 0.000707 0.000034 0.313 0.998 Remanente 159 0.017104 0.000108 Significado: 0 ‘***’ 0.001 ‘**’ 0.01 ‘*’ 0.05 ‘.’ 0.1 ‘ ’ 1 En la tabla 14 se observan diferencias significativas entre líneas, como se detalla en la Figura 7: Figura 7. Relación largo-ancho en el tiempo 4.1.5 Mortalidad La mortalidad obtenida a lo largo de las tres repeticiones fue de 1.7%. 4.1.6 Conversión alimenticia Se presenta en el análisis de variancia para este parámetro en la Tabla 15:
  • 44. 30 Tabla 15 Análisis de variancia de Conversión Alimenticia de alevines, entre tres bloques, dos líneas y cuatro niveles de sustitución Df SC CM F value Pr(>F) Bloque Línea Niveles de sustitución Línea:N de Sustitución Remanente 2 1 3 3 14 0.0033 0.2307 0.1748 0.0353 0.5023 0.00164 0.23066 0.05828 0.01176 0.03588 0.046 6.429 1.624 0.328 0.9553 0.0238 * 0.2286 0.8054 Significado: 0 ‘***’ 0.001 ‘**’ 0.01 ‘*’ 0.05 ‘.’ 0.1 ‘ ’ 1 En la Tabla 15, no se observó diferencias significativas entre niveles de sustitución, como se observa en la Figura 8: Figura 8. Conversión Alimenticia en tratamientos En la Tabla 15, se obtuvo diferencias significativas entre líneas, como se observa en la Figura 9:
  • 45. 31 Figura 9. Conversión Alimenticia entre Líneas 4.1.7 Pruebas de glucosa El análisis estadístico se describe en la Tabla 16: Tabla 16 Análisis de variancia de Glucosa en alevines, entre tres bloques, dos líneas y cuatro niveles de sustitución Df SC CM F value Pr(>F) Bloque 2 521 260.6 0.644 0.540 Línea 1 12 11.6 0.029 0.868 Niveles de sustitución 3 2858 592.6 2.355 0.116 Línea:N.de sustitución 3 1799 599.8 1.483 0.262 Remanente 14 5663 404.5 Significado: 0 ‘***’ 0.001 ‘**’ 0.01 ‘*’ 0.05 ‘.’ 0.1 ‘ ’ 1 Como se observa en la Tabla 16, no hubo diferencias significativas entre niveles de sustitución y entre líneas.
  • 46. 32 4.2 Evacuación de órganos post mortem - Hígado En la observación de este órgano no encontró diferencias entre niveles de sustitución ni entre líneas, en todos los casos fue de apariencia normal, sin manchas, tumoraciones ni depósitos de grasa periférica. Figura 10. Hígado - Riñón En la presente investigación al observar de este órgano no se encontró diferencias entre niveles de sustitución ni entre líneas, en todos los casos no se encontraron depósitos de grasa periférica. Figura 11. Riñón - Ciegos Pilóricos En esta investigación no se encontró alteración alguna en cuanto a la cantidad, siendo el promedio de 39 ciegos pilóricos por animal, como se muestra en el análisis estadístico de la Tabla 17:
  • 47. 33 Figura 12. Ciegos pilóricos Tabla 17 Análisis de variancia de Ciegos Pilóricos de alevines, entre tres bloques, dos líneas y niveles de sustitución Df SC CM F value Pr(>F) Bloque 2 20.58 10.292 1.845 0.1944 Línea 1 15.04 15.042 2.697 0.1228 Niveles de sustitución 3 19.79 6.597 1.183 0.3518 Línea:N.de sustitución 3 42.46 14.153 2.538 0.0987 Remanente 14 78.08 5.577 Significado: 0 ‘***’ 0.001 ‘**’ 0.01 ‘*’ 0.05 ‘.’ 0.1 ‘ ’ 1 En la tabla no se hay diferencias significativas en cuanto a la cantidad de ciegos pilóricos entre niveles de sustitución ni entre líneas. 4.3 Análisis económico Se determinaron los costos por kilogramo de elaboración de la harina de grillo como alimento para truchas lista para ser incorporada a la dieta alimenticia a formular, así como el costo por kilogramo de formulación del alimento balanceado comercial. Para los beneficios brutos se tomó el peso de los 480 animales por el precio de cada kilogramo, también se describen los costos variables de forma descendente ordenados de acuerdo al análisis de dominancia, el tratamiento dominado es aquel que al igual o menor beneficio neto presenta un mayor costo variable lo que se puede apreciar en la Tabla 18.
  • 48. 34 Tabla 18 Análisis económico en base al presupuesto parcial del balanceado comercial y los experimentales TRATAMIENTO BENEFICIO BRUTO COSTO VARIABLE BENEFICIO NETO T0 1.91 0.51 1.40 T1 6.58 4.77 1.81 T2 11.26 9.54 1.72 T3 15.93 14.31 1.62
  • 49. 35 CAPÍTULO V DISCUSIÓN La aceptación por los alevines al balanceado experimental en este estudio se tomó en cuenta la etiología de la trucha en estado natural, que se alimenta de distintos estados de desarrollo de insectos acuáticos que pueden ser larvas, ninfas y diferentes estados de desarrollo de pequeños crustáceos como los Gammarus spp., (FIA, 2007). Los valores bromatológicos de la harina de grillo obtenidos en la presente investigación en cuanto a proteína bruta fueron de 51.8%, que se acerca a los valores de 49% a 58% con el uso de varios insectos descrito por (Landry, DeFoliart, & Sundae, 1986). Según datos compilados en estudios de valores nutricionales de 236 insectos consumidos por humanos en diferentes partes del mundo presentan valores similares (Rumpold & Schlüte, 2013), y con los reportados por la casa comercial de venta de insectos (Frank & Carine, 2015). La metionina obtenida de 0.55% se considera deficiente en cuanto a porcentaje de aminoácido presente como lo describe (DeFoliart, Finke, & Sunde, 1982). Al comparar este valor con el 1.80% de harina de pescado (Mariño, 2012), se confirma que la harina de grillo es deficiente en este aminoácido, pero se ajusta al requerimiento nutricional de alevines de trucha arcoíris que es de 0.5%-0.6% (Choquehuayta, 2008). Para los resultados en cuanto a ácidos grasos y perfil de aminoácidos no se ha encontrado valores similares. Estos valores se consideran estimativos ya que varían en función de la dieta, etapa de desarrollo, condiciones de cría de los insectos y sensibilidad del equipo utilizado (Nakagaki, Sunde, & DeFoliart, 1987). En esta investigación se determinó que la harina de grillo común puede ser un sustituto de la harina de pescado en piensos para acuacultura, lo que es confirmado por (Ratliff, 2007), ya que el porcentaje de proteína es similar al contenido de la harina de pescado.
  • 50. 36 Los niveles de sustitución aplicados en la presente investigación no mostraron diferencias significativas con relación al balanceado comercial en cuanto a peso, lo mismo ocurrió en estudios realizados en pollos broiler (Wang, Zhai, Zhang, Zhang, & Hui, 2007). Según (Ratliff, 2007), en su estudio realizado en Lubina (Dicentrarchus labrax) se encontraron resultados similares corroborando nuestra investigación. Los pesos alcanzados por las dos líneas al final de los ensayos fue de promedio 12.63 g en Línea 1, que según OVAPISCIS, se alcanza en 8 semanas a partir de la etapa de alevinaje. La Línea 2 llegó a los 10.02 g promedio al final de las 7 semanas de tratamiento. Entre la Línea española y la Línea nacional se encontraron diferencias mínimas significativas, demostrando así que, la Línea española en condiciones ideales de cultivo tiene mejor crecimiento y ganancia de peso ya que en su comportamiento presenta agresividad marcada hacia el alimento con tasas de crecimiento óptimas. La Línea nacional mostró un comportamiento poco agresivo e inferior hacia el alimento, en condiciones adversas de clima expresó su resistencia demostrando así que son animales adaptados a nuestro medio (Sala, 2011). Las medidas de ancho y largo al no presentar diferencias significativas entre niveles de sustitución pero si entre líneas, demuestran el desarrollo normal de cada línea, presentando la Línea española mayor largo y menos ancho que la Línea nacional, lo que concuerda con lo mencionado por (Sala, 2011). La relación entre Largo y Ancho demostró un comportamiento similar a todas las variables siendo la media encontrada en esta investigación para alevines de 0.21 cm, catalogado como normal según (Morales & Quirós, 2007) que reporta valores de 0.95 cm para animales juveniles, valor corroborado por (Ortiz, 2008) que presenta valores entre 0.19 y 1.40 cm para alevines y juveniles. Los valores de conversión alimenticia encontrados en esta investigación para la Línea española fue de 1.12 y para la Línea nacional de 1.31, se asemejan a 1.32
  • 51. 37 reportado por (Morales & Quirós, 2007). Los valores de glucosa obtenidos en la presente investigación son de 64.055 mg/ml, que concuerda con el 98.7 mg/ml según (Legate, Bonen, & Moon, 2001). Este dato puede variar de acuerdo a la dieta y al momento en que fueron tomadas las muestras. Según (Novoa, y otros, 2004) con estudios in vivo han demostrado que el incremento de la glucosa en trucha arcoíris es proporcional al contenido de carbohidratos de la dieta. La glucosa plasmática aumentada durante la ingesta del alimento tiene como destino principal tejidos como el músculo blanco, músculo rojo e hígado (Blasco, Marimon, Viaplana, & Fernandez-Borras, 2001). La mortalidad fue de 1.7% en toda la investigación, debido al tratamiento profiláctico este valor no aumento, siendo aceptable para un cultivo intensivo de trucha arcoíris en etapa de alevinaje el 10% de mortalidad (Ortiz, 2008). En la presente investigación al observar hígado post mortem se obtuvo que en su totalidad los órganos fueron de color rojizo, estipulado como normal para la especie según (Mancini, 2002), quien manifiesta que el hígado es un órgano blando, de gran tamaño, de color pardo rojizo, en ocasiones puede ser de color rosa-crema sin necesidad de ser patológico. Los salmónidos como la trucha arcoíris son susceptibles a la hepatomegalia (hinchazón de hígado) causado principalmente por lipidósis hepática (hígado graso) que es la acumulación de grasa en su mayoría grasa neutra como los triglicéridos, en consecuencia de esta afección ocasiona disminución en el crecimiento de los animales y deficiente conversión alimenticia (Rosenthal, Sandoval, Gavidia, & Tabacchi, 2013). En esta investigación la observación del riñón fue en su totalidad riñones fue de color negruzco sin depósito de grasa periférica, la coloración encontrada es determinada como normal (Chiroque, 2014).
  • 52. 38 En cuanto a Ciegos Pilóricos en la presente investigación se encontró un promedio de 39 ciegos por animal, lo que está dentro del rango de hasta 70 ciegos en salmónidos descrito por (Gill, Ayala, & López), por lo que se determinó que no hubo afecciones nutricionales ya que los ciegos pilóricos son una extensión del estómago y su función en la absorción de nutrientes. En el análisis económico se determinó que el único tratamiento no dominado es el del balanceado comercial por lo que se determina como la mejor alternativa económica en la actualidad. (Ramón, 2014); En su estudio de creación de empresa productora de harina de insectos para consumo animal, determina que los procesos de elaboración de harina de pescado y harina de insecto son similares lo que facilitaría la industrialización de esta alternativa; los estudios de factibilidad y proyecciones para esta harina fueron realizados en Valencia-España, con datos que la determinan como una alternativa efectiva para la sustitución de harina de pescado en la producción animal en especial para acuacultura por los altos requerimientos de proteína.
  • 53. 39 CAPÍTULO VI CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 6.1 Conclusiones - Se concluye que desde el punto de vista nutricional, la harina de grillo puede ser sustituto para la harina de pescado en dietas para trucha arcoíris en etapa de alevinaje, ya que presentó contenidos nutricionales semejantes a los de la harina de pescado, principalmente en cuanto a proteína. - La Línea española en las medidas morfométricas superó a la Línea nacional, por lo que se concluye que para las condiciones en las que se realizó el ensayo la Línea española es la más adecuada para el cultivo. - La relación Largo y Ancho nos permite observar un comportamiento entre las semanas 5, 6,7 en las dos líneas, similar pero más marcado en la Línea nacional por lo que se concluye que son animales anchos debido a la acumulación de grasa para su posterior crecimiento longitudinal. - El balanceado experimental con el balanceado comercial no son diferentes de manera estadística en los parámetros evaluados en la presente investigación. - Los parámetros productivos en cuanto a conversión alimenticia no se vieron afectados significativamente por los niveles de sustitución aplicados. Entre líneas se obtuvo una diferencia mínima significativa de 0.17, siendo la Línea española superior a la nacional al aprovechar mejor el alimento suministrado con CA de 1.12. - La glucosa presente en sangre no muestra alteraciones fuera del rango con la aplicación de los niveles de sustitución y tampoco se vio influenciada por la línea. - Los ciegos pilóricos no se vieron afectados por los niveles de sustitución y líneas en estudio, ya que sus valores se encuentran dentro de los límites normales de la especie.
  • 54. 40 - La mortalidad fue de 1.7% en todo el ensayo, indicador reflejado por el tratamiento profiláctico realizado antes de cada repetición lo que permitió tener animales estables durante el ensayo. - El análisis económico realizado muestra una clara superioridad del costo por kilogramo de los alimentos balanceados experimentales eso se debe al alto costo unitario del insecto, valores que pueden ser reducidos si se realiza una actividad de cría a gran escala. 6.2 Recomendaciones - Se recomienda continuar con el balanceado comercial debido a que en la actualidad es la mejor alternativa económica. - Se recomienda utilizar la Línea española en el lugar del estudio, dado que tuvo mejor rendimiento en los parámetros evaluados en la presente investigación. - Se recomienda realizar estudios con sustituciones parciales mayores y en otras etapas de producción, ya que la harina de grillo es una alternativa viable como sustituto de la harina de pescado.
  • 55. 41 6.3 Bibliografía Andes. (20 de Diciembre de 2013). www.andes.info.ec. Obtenido de http://www.andes.info.ec/es/economia/truchas-economia-turismo-frontera- colombia-ecuador.html Bastardo, H., Scorza, C., & Sara, S. (2006). Variables hematológicas y bioquímicas en la trucha arcoíris, relacionadas con la condición hepática y la edad. Revista Zootecnia Tropical, 24(1), 1-15. Bastidas, F., & Cartagena, J. (2002). Evaluación del crecimiento de la trucha arco iris en su etapa juvenil, mediante alimentos alternativos, a 2880 msnm. Tesis de Ingeniería Agropecuaria, Escuela Politécnica Del Ejercito, Sangolquí. Bianchi, G., Bastardo, H., & Medina, A. (2007). Utilizacion de proteina no convensional en dietas para iniciador de trucha arcoiris, Oncorhynchus mykiss. Sitio Argentino de Produccion Animal, 4. Blanco. (1995). La Trucha. Cría industrial. (Sedunda edición ed.). Madrid, España: Ediciones Mundi Prensa. Blasco, J., Marimon, I., Viaplana, I., & Fernandez-Borras, J. (2001). Fate of plasma glucose in tissues of brown trout in vivo: effects of fasting and glucose loading. Fish Physiology and Biochemistry, 24, 781-787. Bureau, D. (2000). Utilización de harinas de origen animal en la nutrición de peces. Universidad de Guelph, Fish Nutrition Research Laboratory., Guelph. Cerda, H., Martínez, R., Briceño, N., Pizzoferrato, L., Hermoso, D., & Paoletti, M. (1999). Cría, análisis nutricional y sensorial del picudo del cocotero Rhynchophorus palmarum (coleóptera: curculionidae), insecto de la dieta tradicional indígena amazónica. Ecotrópicos. 12(1). Ecotrópicos, 12(1), 25- 32. Chiroque, T. (2014). cybertesis.unmsm.edu.pe. Recuperado el 1 de Abril de 2015, de http://cybertesis.unmsm.edu.pe/bitstream/cybertesis/3941/1/Chiroque_lt.pdf Choquehuayta, A. (2008). Manual de crianza de truchas en estanques y lombricultura. Puno, Cusco, Perú. Dávila. (2007). Optimización de tres protocolos de extracción de ADN en las especies Oncorhynchus mykiss y Astroblepus ubidiai y su cuantificación con técnicas moleculares para la acuicultura. Pichincha, Ecuador.
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