El documento describe los diferentes tipos de medios de cultivo utilizados en microbiología, incluyendo medios sintéticos, complejos y los métodos para el aislamiento de cultivos puros. También explica factores que afectan el crecimiento microbiano como la temperatura, pH y necesidades nutricionales, así como métodos para controlar el crecimiento como la esterilización térmica, filtración y agentes químicos.

1. Medios de cultivo

2. • Gran parte de la microbiología depende de la capacidad de
cultivar y mantener microorganismos en un laboratorio y
esto es posible si se dispone de los medios de cultivo
adecuados.
• Los medios especiales son imprescindibles para aislar e
identificar los microorganismos, evaluar la sensibilidad a los
antibióticos, analizar agua y alimentos.

3. • Aunque todos los microorganismos necesitan fuentes de
energía, carbono, nitrógeno, fosforo, azufre y varios
minerales, la composición precisa de un medio adecuado
dependerá de la especie que se quiera cultivar, porque las
necesidades nutricionales varían considerablemente.
• El conocimiento del hábitat normal de un microorganismos
es a menudo útil para elegir un medio de cultivo apropiado,
porque sus necesidades de nutrientes reflejan su ambiente
natural.

4. Medios sintéticos o definidos
• La clase de medios en que se conoce todos los
componentes, se les denomina medios sintéticos o medios
definidos.
• Los medios definidos se emplean ampliamente en
investigación, pues a menudo se quiere conocer.

6. Medios complejos
• Los medios que contienen ingredientes cuya composición
química se desconoce, se denominan medios complejos.
• Estos medios son muy útiles, pues un único medio complejo
puede ser suficientemente rico para satisfaces las
necesidades nutricionales de diversos microorganismos.
• Estos medios se necesitan usan porque a menudo se
desconoce los requerimientos nutricionales de un
microorganismo en particular.
• Estos medios contienen componentes como peptonas,
extracto de carne y de levadura.

7. • Los medios complejos utilizados comúnmente son:
 Caldo nutritivo
 Caldo de soya triptonado
 Agar Mac-Conkey

9. Aislamiento de cultivos puros
• En los hábitats, los microorganismos crecen en poblaciones
mixtas y complejas que contienen varias especies. Esto
representa un problema para la microbiología porque no se
puede estudiar adecuadamente un único tipo de
microorganismo en un medio mixto.

10. Siembra en placa por extensión
• Se extiende una mezcla de células en una superficie de agar, de manera
que cada célula crece formando una colonia independiente, cada
colonia representa un cultivo puro.
• TECNICA: Se Pasa un volumen pequeño de una mezcla microbiana
diluida al centro de una placa de agar y se extiende uniformemente
sobre la superficie con una varilla doblada.

11. Siembra en placa por estrías
• Por este método también se pueden obtener cultivos puros.
• TECNICA: Se pasa la mezcla microbiana a un extremo de placa de agar
con una asa bacteriológica y se extiende formando estrías sobre la
superficie siguiendo uno de los posibles patrones recomendados.

12. Siembra en profundidad
• Se emplea ampliamente con bacterias y hongos y puede
también generar colonias aisladas.
• TECNICA: La muestra general se diluye varias veces para
obtener una población microbiana, con el fin de obtener
colonias separadas cuando se siembran. A continuación se
mezclan volúmenes pequeños de varias muestras diluidas
con agar liquido, que se han enfriado hasta
aproximadamente 45˚C, y la mezcla se vierte
inmediatamente en placas. Después de endurecer el agar,
cada célula se fija a un lugar y forma una colonia individual.

14. Crecimiento microbiano
• El crecimiento microbiano se define como un incremento
en el numero de células.

15. Fisión binaria
• Es el mecanismo por medio del cual los microorganismo utilizan
para dividirse.

16. Ciclo de crecimiento de poblaciones

17. • FASE LATENCIA: Es el tiempo que se tardan los microorganismos para
adaptarse al medio, para iniciar su crecimiento.
• FASE EXPONENCIAL: Esta dado por el numero de duplicaciones de un
microorganismo en un tiempo determinado.
• FASE ESTACIONARIA: En esta fase las bacterias han dejado de
duplicarse, tal vez por la falta de nutrientes esenciales en el medio de
cultivo. En esta fase no hay incremento ni decremento del numero de
células.
• FASE MUERTE: En esta fase los microorganismos entran a una etapa de
lisis celular, esta etapa es mucho mas lenta que el crecimiento
exponencial.

18. Medición del crecimiento
• Conteo directo

19. • Conteo por diluciones: Se puede contar el numero de
microorganismos realizando una serie de diluciones
seriadas en base 10, utilizando 9 del diluyente con 1 ml del
cultivo; en esta dilución el numero de colonias se multiplica
por 10, pueden hacerse diluciones sucesivas hasta 10 veces.

21. • Medida de masa y turbidez: Para obtener una estimación
del numero de células, consiste en la utilización de medidas
de turbidez. Una suspensión celular aparece turbia porque
las células dispersan la luz que atraviesa la suspensión.
Cuantas mas células haya mas luz se dispersa y mas turbia
aparece la suspensión, la cual es medida en un
fotocolorímetro, espectrofotómetro.

23. Influencia de los factores ambientales sobre
el crecimiento.
• El crecimiento de los microorganismos esta influido
notablemente por la naturaleza química y física de su
ambiente.
• El conocimiento de estas influencias ambientales permite
controlar el crecimiento microbiano y estudiar la
distribución ecológica de los microorganismos.

24. Necesidades gaseosas
1. AEROBIAS OBLIGADAS: Son bacterias que necesitan del oxigeno para
crecer.
2. ANAEROBIAS ESTRICTAS: Son bacterias que necesitan un ambiente
libre de oxigeno para crecer.
3. ANAEROBIAS FACULTATIVAS: Son bacterias que no necesitan del
oxigeno para crecer, pero pueden crecer mejor en presencia de el.
4. MICROAEROFILAS: Son bacterias que requieren una baja concentración
del nivel atmosférico de oxigeno, alrededor del 20% de la presión de
oxigeno.
5. AEROTOLERANTES: Son bacterias que pueden crecer bien en presencia
o ausencia de oxigeno.

26. pH. Acidez o alcalinidad
• El pH es una medida de la actividad de los iones de Hidrogeno de una
solución. La escala de pH se extiende de 0.0 a 14,0.
• El pH afecta intensamente el crecimiento bacteriano. Cada especie
tiene un rango definido de pH para su crecimiento y un pH optimo de
crecimiento.
1. ACIDOFILOS: Tienen un valor de pH optimo de crecimiento
entre 0 a 5.5
2. ALCALOFICLOS: Prefieren un rango de pH entre 8.5 a 9.5
3. ALCALOFILOS EXTREMOS: Tienen un pH optimo de crecimiento
mayor de 10
4. NEUTROFILOS: pH optimo de 7

27. Temperatura
1. PSICROFILOS: Crecen bien a 0˚C y tienen una temperatura optima de
15˚C o inferior; la máxima de 20˚C. Se aíslan fácilmente de hábitats del
Ártico y Antártico.
2. PSICROTROFOS: Muchas especies pueden crecer a 0˚C aunque su
temperatura optima sea de 20˚C a 30˚C y la máxima casi de 35˚C. Son
los principales causantes de la putrefacción de los alimentos.
3. MESOFILOS: Crecen a una temperatura optima de 20˚C a 45˚C, siendo
la mínima de 15˚C a 20˚C y la máxima de 45˚C y la optima de 37˚C. Casi
todos los microorganismos patógenos para el hombre son mesófilos.
4. TERMOFILOS: Crecen a temperatura optima de 55 a 65C, con una
mínima de 45˚C y una máxima de 80˚C.
5. HIPERTERMOFILOS: La temperatura óptima es entre 80˚C a 90˚C, con
una mínima de 70˚C y una máxima de 115˚C

29. Control del crecimiento bacteriano
• El control del crecimiento bacteriano se puede realizar por 2
mecanismos:
1. INHIBICION: Es la reducción del crecimiento bacteriano a causa de
una diminución del numero de organismos presentes o alteración
en el entorno microbiano.
2. ESTERILIZACION: Es la muerte o eliminación del medio de cultivo.
Los agentes que inhiben el crecimiento bacteriano se llaman
bacteriostáticos.
Los agentes que destruyen o matan a las bacterias son bactericidas.

30. Métodos físicos de esterilización
• ESTERILIZACION POR CALOR: Una manera de caracterizar la sensibilidad
de un microorganismo al calor es determinar el tiempo en el cual
mueren todas as bacterias a una temperatura dada (tiempo de muerte
térmica).
• El tiempo de muerte térmica se determina por medio de diferentes
tiempos a temperaturas dadas en que son sometidas las mezclas
bacterias e incubándolas.
• El tiempo de muerte depende del tamaño de la población ensayada,
porque se necesita mas tiempo para matar una gran población que una
población pequeña.

31. Autoclave
• Es un aparato hermético que permite a entrada de vapor de agua a
presión. El uso de calor húmedo facilita la muerte de todos los
microorganismos, incluidas las endosporas resistentes al calor.
• El procedimiento usual es calentar a 15 lb/in2 de presión de vapor, lo
que proporciona una temperatura de 121 ˚C por un tiempo de 10 a 20
minutos.

32. Pasteurización
• Es un proceso que reduce las poblaciones microbianas de la
leche y de otros alimentos sensibles al calor.
• La pasteurización no es un sinónimo de esterilización,
porque no mata a todos los microorganismos
• Originalmente se utilizo para matar bacterias patógenas,
especialmente las causantes de la tuberculosis, brucelosis y
la fiebre tifoidea.

33. • Habitualmente la pasteurización de la leche se consigue pasando a la
leche por un intercambiador de calor
• PASTEURIZACION EN FLASH:. Un cuidadoso control de la velocidad de
flujo, del tamaño y temperatura de calor, hace que la temperatura de la
leche se eleve a 71 ˚C durante 15 segundos, a continuación se enfría
rápidamente.
• PASTEURIZACION EN MASA: Puede calentarse la leche en grandes
tanques a 63-66 ˚C durante 30 minutos, y es menos satisfactorio que la
pasteurización en flash.

34. Esterilización por radiación
• Bajo condiciones apropiadas, las radiaciones
electromagnéticas controlan eficazmente el crecimiento
microbiano.
1. RADIACION ULTRAVIOLETA: Es útil para descontaminar
superficies y materiales que no absorben la luz, tales
como el aire y el agua.
2. RADIACION IONIZANTE: Es necesaria para penetrar en
materiales solidos o que absorben la luz.
Bajo condiciones adecuadas, la radiación ionizante es
muy efectiva para la esterilización y descontaminación.

35. Esterilización por filtración
• Esta técnica se utiliza cuando el liquido es sensible al calor o al gas.
• Un filtro es un dispositivo con poros demasiado pequeños para que los
microorganismos no puedan pasar, pero suficientemente grandes para
que pasen los líquidos.
• Existen tres tipos principales de filtros:
1. FILTROS DE PROFUNDIDAD
2. FILTRO DE MEMBRANA
3. FILTRO NUCLEO-PORE

36. Filtro de profundidad
• Es una hoja fibrosa o una capa hecha por amontonamiento
al azar de papel absorbente o fibras de vidrio.

37. Filtro de membrana
• Es un disco duro, generalmente compuesto de acetato de celulosa o
de nitrato de celulosa, que esta fabricado de tal manera que tenga
una gran cantidad de agujeros diminutos.

38. Filtro nucleo-pore
• Estos filtros se crean al atrapar películas finas de
policarbonato (10 a 0.2 μm) con radiación nuclear y
tratando luego la película con un producto químico.
• Se utiliza para la microscopia de barrido de los
microorganismos, permite recoger partículas sobre un
plano uniforme aplicado para el estudio de organismos de
interés y también aplicable a la virología.

39. Control químico del crecimiento
• Con frecuencia se utilizan productos químicos para
controlar el crecimiento microbiano:
1. MICROBICIDAS: Son los productos que matan a los
microorganismos.
2. MICROBIOSTATICOS: Son los productos que inhiben el
crecimiento de los microorganismos.