Este documento describe los diferentes tipos de medios de cultivo para microorganismos, incluyendo medios naturales, sintéticos, semisintéticos, líquidos, sólidos y semisólidos. Explica cómo preparar medios de cultivo mediante la mezcla de agar y agua, y cómo realizar siembras en superficie utilizando cajas Petri. El objetivo es conocer los medios de cultivo adecuados para diferentes organismos microbianos y preparar caldos de cultivo.

1. FACULTAD DE INGENIERÍA MARÍTIMA Y
CIENCIAS DEL MAR
FICHA DE LA PRÁCTICA PARA LABORATORIO
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CÓDIGO
MATERIA Microbiología
NOMBRE David Quiñonez Acosta
PARALELO 1
TEMA DE LA PRÁCTICA Preparación y esterilización de materiales y medios de cultivo
OBJETIVOS GENERALES:
 Conocer lo medios de cultivo de los diferentes organismos microbianos.
 Realizar la preparación de caldo de cultivo.
 Identificar el medio de crecimiento de cada organismo microbiano.
INTRODUCCIÓN:
MEDIOS DE CULTIVO
Un medio de cultivo es un sustrato o una solución de nutrientes que permite el desarrollo de
microorganismos. En las condiciones de laboratorio para realizar un cultivo, se debe sembrar sobre el
mediode cultivoelegidolasmuestrasenlasque los microorganismos van a crecer y multiplicarse para dar
colonias. Los microorganismos son los seres más abundantes de la tierra, pueden vivir en condiciones
extremas de pH, temperatura y tensión de oxígeno, colonizando una amplia diversidad de nichos
ecológicos. Entre los requerimientos más importantes para su desarrollo están el carbono, el oxígeno,
nitrógeno, dióxido de carbono e hidrógeno. Muchas bacterias sin embargo necesitan del aporte extra de
factores de crecimiento específicos en forma de suero, sangre y extracto de levadura entre otros. (López
Tévez & Torres, 2006)
Clasificación de los medios de cultivo
Según su origen:
a) NATURALES: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen animal o vegetal como ser
extractos de tejidos o infusiones y cuya composición química no se conoce exactamente. (Ing. Eduardo
Santambrosio, 2009)

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b) SINTÉTICOS: son los medios que contienen una composición química definida cualitativamente y
cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados reproducibles. (Ing. Eduardo Santambrosio, 2009)
c) SEMISINTÉTICOS: sonlos sintéticosalosque se lesañadenfactoresde crecimientobajounaformade un
extracto orgánico complejo, como por ejemplo extracto de levadura. (Ing. Eduardo Santambrosio, 2009)
Según su consistencia:
a) LÍQUIDOS: se denominan caldos y contienen los nutrientes en solución acuosa. (sanitarios, 2007)
b) SÓLIDOS: se preparan añadiendo un agar a un medio líquido (caldo) a razón de 15g/litro. El agar es una
sustancia inerte polisacárida (hidrato de carbono) que se extrae de las algas. Como esta sustancia no es
digerida por las bacterias no constituye ningún elemento nutritivo. Este conjunto convenientemente
esterilizadopuede servertidoenplacasde Petri oentubosde ensayoy presentanla posibilidad de aislar y
diferenciar bacterias, "procesos que antes no eran posibles en medio líquido". (sanitarios, 2007)
c) SEMISÓLIDOS: contienen 7,5 g de agar /litro de caldo. Se utilizan para determinar la motilidad de las
especies en estudio. Actualmente se encuentran disponibles comercialmente con el agregado de agar.
(sanitarios, 2007)
Según su composición:
A causa de los requerimientos químicos del mundo microbiano, a veces es necesario agregar o eliminar
componentes químicos del medio. (López Tévez & Torres, 2006)
a) COMUNES O UNIVERSALES: su finalidad es el crecimiento de la mayor parte de los microorganismos
poco existentes. Es el medio más frecuentemente utilizado para mantener colonias microbianas. Por
ejemplo: agar común o caldo común. (López Tévez & Torres, 2006)
b) ENRIQUECIDOS: están compuestos de un medio base como apoyo del crecimiento al cual se le puede
agregar un gran exceso de nutrientes como suplementos nutritivos, por ejemplo: sangre, suero, líquido
ascítico, etc.Se utilizaparamicroorganismosque tienen grandes exigencias nutricionales. (López Tévez &
Torres, 2006)

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c) SELECTIVOS: son sólidos en los que la selectividad se consigue alterando las condiciones físicas del
mediooañadiendoosuprimiendocomponentesquímicosespecíficosconel finde inhibirel crecimientode
especies químicas cuyo crecimiento no interesa. Este tipo de medio sólo permite el crecimiento de un
grupode microorganismose inhibiendo el de otros. Se utiliza para seleccionar y aislar microorganismos a
partir de poblaciones mixtas. Por ejemplo Agar salado-manitol o Chapman (permite el crecimiento de
ciertos estafilococos). (López Tévez & Torres, 2006)
EQUIPOS Y MATERIALES:
 Caja Petri
 Pipeta de Pasteur
 Matraz
 Medio de agar dextrosa PDA
 Caldo nutritivo
 Mecheros Fisher
 H2O
 Hisopo de algodón
 Guantes
 Parrilla de calentamiento
PROCEDIMIENTO:
1. los tubos con medios de cultivo con agar, se colocar en una superficie Inclinada de tal forma que el
medio se solidifique a una distancia aproximada de 1-2 cm de la boca del tubo.
2. que los medios de cultivo en matraces que se han sacado de la autoclave se enfríen a una temperatura
aproximadade 40-50 0 C. que coincide conlaposibilidad de sostener el matraz en la palma de la mano sin
sentir un calor excesivo.
3. Cerca del mechero, etiquetar 3 cajas AN, 3 cajas con PDA Y 3 con MM. Los medios de cultivos se vacían
en las cajas de Petri (aproximadamente 25-30 ml) en zona aséptica cerca del mechero o en campana de
flujo laminar.
4. Dejar que solidifiquen los medios (por lo menos 30 minutos) y posteriormente envolver las cajas
cuidadosamente con papel estraza o acomodarlas en forma invertida en bolsa de plástico limpias.
5. Guardarlas en refrigeración hasta 24 horas antes de utilizarlas.
ANEXO:

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Observaciones:

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 Al momento de realizar el raspado en el agar hacerlo cuidadosamente recordando que es una capa
gelatinosa que puede romperse.
 Tener en cuenta que la gelatina no debe romperse puesto que el método que realizamos es en
superficie no en profundidad.
 Mantener todo el tiempo las cajas Petri cerca de los mecheros para mantener todo esterilizado y la
bacteria que queremos cultivar sea la correcta.
 Tener cuidado al momento de manipular los implementos, principalmente cuando trabajamos con fuego
Conclusión:
 La mezcla correcta de polvo (agar solido) y agua nos dio como producto final una gelatina de agar
deseada.
 El cultivode bacteriasfue correcto, ya que siempre mantuvimos esterilizado el perímetro de trabajo.
 Los medio de cultivo se clasifican de a su origen, composición y resistencia.
 El método que utilizamos fue siembra por superficie o extensión.
Bibliografía
Ing. Eduardo Santambrosio, I. M. (2009). http://www.frro.utn.edu.ar. Obtenido de
http://www.frro.utn.edu.ar:
http://www.frro.utn.edu.ar/repositorio/catedras/quimica/5_anio/biotecnologia/practicoI.
pdf
López Tévez, L., & Torres, C. (2006). http://www.biologia.edu.ar. Obtenido de
http://www.biologia.edu.ar: http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp4.pdf
sanitarios, T. s. (2007). http://perso.wanadoo.es. Obtenido de http://perso.wanadoo.es:
http://perso.wanadoo.es/sergioram1/medios_de_cultivo.htm