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Evaluación del estado secretor en una muestra de estudiantes universitarios de Lima
RESUMEN
Los antígenos del sistema sanguíneo ABO se encuentran de forma soluble en mucosas, esta
característica es llamada estado secretor y ha sido asociada con diversas condiciones
patológicas. El objetivo del presente estudio fue generar el primer reporte del estado secretor
en una población peruana. Se seleccionó 102 estudiantes universitarios, solicitando su
consentimiento informado para verificar su grupo sanguíneo mediante hemaglutinación directa
y se les solicitó una muestra de saliva. El estado secretor fue determinado aplicando inhibición
de la hemaglutinación con la saliva, identificándose un 5% de individuos no secretores.
Respecto al sistema ABO, el 76% presentó grupo O (antígeno soluble H); el 19%, grupo A y el
5%, grupo B. Se encontró una alta frecuencia del fenotipo secretor, por lo que se sugiere
estudios para determinar la heterocigosidad y la susceptibilidad a infecciones en función al tipo
de antígeno secretado.
Palabras clave: hemagglutination inhibition tests, ABO blood group, saliva
ABSTRACT
Antigens of ABO blood system are found in soluble form in the mucosa, this characteristic is
called secretory state and has been associated with various pathological conditions. The aim of
the present study was to generate the first report of the secretory state in a Peruvian population.
102 undergraduate students were selected, requesting their informed consent to verify their
blood group through direct hemagglutination and a saliva sample was requested. Secretory
status was determined by inhibiting haemagglutination with saliva, with 5% of non-secreting
individuals being identified. Regarding the ABO system, 76% presented group O (soluble
antigen H); 19%, group A and 5%, group B. A high frequency of the secretory phenotype was
found, suggesting studies to determine heterozygosity and susceptibility to infections
depending on the type of secreted antigen.
INTRODUCCIÓN
La clasificación de grupos sanguíneos permite desarrollar actividades hospitalarias básicas
como las transfusiones sanguíneas y la hemoterapia, además de ser utilizada en la identificación
de personas. El sistema ABO evalúa la presencia de los antígenos A y B en la superficie de los
glóbulos rojos; sin embargo, estos carbohidratos no están restrictos a la superficie de los
eritrocitos, sino que también pueden hallarse en fluidos corporales como saliva, jugo gástrico,
leche y semen de acuerdo al estado secretor de la persona e independiente del grupo sanguíneo
(1).
El fenotipo secretor está definido por el gen FUT2, el cual codifica la enzima fucosiltransferasa-
2 (FUT2), que cataliza la adición de residuos de fucosa terminales a cadenas glucídicas de la
superficie celular y es esencial en la síntesis del antígeno H soluble, sobre el cual la transferasa
ABO puede adicionar grupos glucosil dependiendo del tipo sanguíneo del individuo (2). Existe
un polimorfismo de FUT2 que inhibe la actividad de la enzima en las poblaciones humanas y
es responsable de un fenotipo conocido como “estado no secretor” (3). En poblaciones
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caucásicas se ha encontrado una mayor presencia de individuos secretores (75%). En dicha
población, también se ha encontrado una asociación significante entre el estado secretor de
grupos sanguíneos y la composición bifidobacteria intestinal (4).
Estudios iniciales, encontraron una presencia significativa del estado secretor en pacientes con
espondilitis anquilosante (5). Así mismo, se ha reportado que individuos no secretores,
presentan una mayor predisposición a ciertos tipos de cánceres que son más prevalentes en tipos
particulares de grupos sanguíneos (6). Otros estudios, han mostrado que el estado secretor
puede ser un factor influyente en el desarrollo de ciertas enfermedades orales potencialmente
malignas (7). Particularmente, se encontró una predisposición a lesiones orales cancerosas
debido a la presencia del polimorfismo G428A en el gen FUT2 (8); sin embargo, también se le
atribuye a este genotipo una resistencia a la infección por norovirus (9).
En adición, se ha evaluado la relación de la secreción de los antígenos sanguíneos y la presencia
de lesiones gástricas generadas por la infección por Helicobacter pylori. En algunas
poblaciones europeas y de África occidental no se encontró relación aparente (10), en contraste
con la relación encontrada en pacientes paquistaníes (11).
No existen reportes del estado secretor en poblaciones peruanas, por ello, la finalidad del
presente trabajo fue determinar las frecuencias fenotípicas del sistema ABO, Rh y secretor ABH
en una muestra de estudiantes universitarios.
MATERIALES Y MÉTODOS
Muestras
Se evaluó 102 individuos, estudiantes universitarios de la Universidad Nacional Mayor de San
Marcos (UNMSM). El grupo de individuos incluyó a 49 (48%) mujeres y 53 (52%) varones
con una edad media de 19.97±2.3 años. A todos los individuos se les informó y solicitó el
consentimiento para su participación en el estudio, aceptaron de manera voluntaria y
consecuente, aportando información de sexo, edad y grupo sanguíneo.
Hemaglutinación directa
Una pequeña muestra de sangre entera obtenida mediante punción capilar se utilizó para la
confirmación del grupo sanguíneo ABO-Rh mediante aglutinación con anticuerpos
monoclonales ABO-Rh (Immucor).
Obtención de antígenos solubles
Se colectó aproximadamente 3 mL de saliva por individuo en un frasco estéril. Se transfirió una
parte de la saliva colectada a tubos de centrífuga de 2 mL. Para denaturar las enzimas salivales,
se sometió a baño maría a 95 °C por 15 minutos, luego, se centrifugó a 750 g por 10 minutos.
Se trasladó el sobrenadante en un nuevo tubo de centrífuga para la prueba de inhibición de la
hemaglutinación.
Inhibición de la hemaglutinación
Para los grupos sanguíneos A y B se añadió una gota de saliva del individuo a evaluar y una
gota del anticuerpo correspondiente (anti-A o anti-B). Se incubó a temperatura ambiente por 10
minutos, se agregó 1 gota de glóbulos rojos humanos (GRH) al 2% y centrifugó a 100 g por 1
minuto. Para el grupo sanguíneo O, se añadió dos gotas de saliva y dos gotas de lectina anti-H
(Immucor). Se incubó a temperatura ambiente por 10 minutos, se agregó una gota de GRH al
3. 3
4% e incubó por 5 minutos según indicación del fabricante. Finalmente, se procedió con una
centrifugación a 1000 g por 15 minutos y se observó la reacción, donde la hemaglutinación
indica que la saliva no contiene el antígeno correspondiente (estado no secretor), mientras que
la ausencia de esta sería explicada por la presencia de antígenos solubles, bloqueando los sitios
de unión de los anticuerpos y evitando su combinación con los glóbulos rojos (Figura 1).
RESULTADOS
Se conoce que la población total de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos está
conformada por un aproximado de 30 mil estudiantes (12), una muestra de 102 individuos
constituye una fracción representativa con un margen de error igual a 12.7 y un intervalo de
confianza de 99%. En dicha muestra se encontró que un 76% presentó grupo sanguíneo O; 19%,
grupo A y 5%, grupo B. Debido a que la segregación de grupos sanguíneos es polialélica, no
podríamos inferir las frecuencias alélicas para dicho caso. En tanto, se encontraron 2 individuos
(2%) que no presentan el antígeno D (Rh negativo), lo que significa una frecuencia teórica de
14% para el alelo recesivo “d”; asimismo, se reporta ausencia del fenotipo secretor en 5
individuos participantes (4 hombres y 1 mujer), la ausencia del fenotipo secretor establece un
alelo recesivo con una frecuencia teórica del 22% en la muestra analizada. Un resumen de estos
resultados se muestra en la Tabla 1.
Característica (Gen Asociado) Frecuencia
Sistema ABO (ABO)
A 19
B 5
O 78
Antígeno Rh (RHD)
Rh+ 100
Rh- 2
Condición Secretora (FUT2)
Secretor 97
No secretor 5
Total 102
Figura 1. Controles para la prueba de inhibición de la
hemaglutinación. El control positivo representa la
presencia de antígenos solubles que reaccionan con los
anticuerpos evitando la aglutinación de los glóbulos rojos,
a diferencia del control negativo, donde los anticuerpos
reaccionan con los hematíes correspondientes.
Tabla 1. Resumen de las frecuencias obtenidas según marcador. Se muestran los valores
fenotípicos hallados en el análisis inmunoquímico y los genes implicados.
4. 4
DISCUSIÓN
La ausencia del fenotipo secretor fue hallada en 5% de los individuos participantes, con esta
información se establece una frecuencia alélica del alelo recesivo del gen FUT2 igual a 0.22;
para este caso, la frecuencia del alelo menos frecuente (minor allele frequency, MAF) difiere
con la reportada en estudios genómicos de poblaciones peruanas (MAF= 0.124) (13). Respecto
a la ausencia del antígeno Rh, se estima la frecuencia del alelo menos frecuente en 0.14, lo cual
coincide con lo encontrado en la literatura (13). En una comparación regional, las frecuencias
poblacionales para grupos sanguíneos varían con la ubicación geográfica, encontrando
frecuencias similares en una muestra de individuos mexicanos (14), y diferentes de aquellas
reportadas en Turquía (15), donde el grupo predominante presenta el antígeno A en sus glóbulos
rojos.
Adicionalmente, encontramos diferencias en la frecuencia de individuos no secretores en la
comparación con poblaciones en Grecia (16) o Islandia (17), donde se encuentra un mayor
número de individuos no secretores, siendo asociados a condiciones periodontales como
gingivitis (15); adicionalmente, se expresa una asociación entre la información de antígenos
ABO, estado secretor y factor Rh que podrían conducir a la susceptibilidad a desarrollar las
características descritas en la introducción (4,5,7,9,10,17).
No existen reportes en el país que permitan caracterizar la presencia de estos antígenos y evaluar
la asociación con infecciones virales o microbianas; por ello, se presenta este trabajo como una
intención de realizar trabajos a mayor escala en esta temática, considerando la realización de
un genotipado directo por técnicas basadas en la reacción en cadena de la polimerasa y la
realización de estudios de asociación con dolencias asociadas a mucosas.
CONCLUSIONES
El tipo sanguíneo O del sistema ABO y la presencia del factor Rh predominan en la muestra
estudiada. El estado secretor se presenta en la gran mayoría de individuos evaluados, lo que se
interpretaría como una baja frecuencia del alelo mutante no secretor.
AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen el apoyo de la Blga. Margarita Velásquez Reinoso del Laboratorio de
Genética Humana de la Facultad de Ciencias Biológicas (UNMSM) por brindar el espacio y
facilitar el uso de equipos para la realización del proyecto.
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