practica de laboratorio de bacteriologia médica universidad de sonora

1. Práctica 12. Coprocultivo
Laboratorio de Bacteriología Médica
Maestra: Maritza Lizeth Alvarez Ainza
Alumna: María Alejandra Aquina Torua
Objetivo general
● Aplicar un método microbiológico con el fin de detectar e identificar especies
de salmonella o shigella.
Material, reactivos, procedimiento y diagrama de flujo
Materiales Reactivos
● Asa en punta y redonda
● Mechero
● Portaobjetos
● Tubos de 18 x 150 ml.
● Cristal Violeta
● Lugol
● Alcohol -cetona
● Safranina
● Aceite de inmersión
● Solución salina 0.85 %
● Rojo de metilo
● Reactivo de Erlich o Kovacs
● KOH
● α-Naftol
Para la toma de muestra:
1. En un frasco de boca ancha y tapa hermética, estéril colocar cuidadosamente
una porción de la muestra de copro sin que sea contaminada con agua.
Para el cultivo
1. Tomar 1 gr aproximadamente de la materia fecal con un a plicador de madera
2. Introducirlo en un tubo con caldo selenito y otro gramo en un tubo con agua
peptonada se rompe el palillo dentro del tubo para evitar contaminaciones y
etiquetar los tubos
3. Se incuba a 36°C por 24 horas.
4. Después tomar 2 o 3 asadas del caldo selenito y sembrar en agar SS con el
método de estría para obtener colonias aisladas.
5. Tomar una asada de agua peptonada alcalina y sembrar en agar TCBS.
6. Se incuba las placas de SS y TCBS a 36°C por 24 horas y hacer
observaciones.

2. Resultados y discusión
Agar XLD AgarSalmonella-Shigella

3. ➔ Citrato (+)
➔ TSI (alk/ac, gas, H2S)
➔ LIA (+)
➔ MIO (movilidad +, indol -, ornitina +)
➔ RM (+)
➔ VP (-)
➔ Malonato (+)
Observe que en agar XLD podemos ver colonias carácteristicas de E.coli y lo mismo
en agar SS observamos colonias mucosas de color rosado, carácteristico de E.coli.
por lo que pudimos concluir que hubo contaminación en nuestras placas.
Con los resultados de las pruebas bioquímicas que realizamos deducimos que si se
encontraba presencia de salmonella, pero el resultado es inconcluso ya que en
malonato sí se observó un poco de cambio de coloración (característica de
klebsiella y género enterobacter.
Conclusión
El coprocultivo es uno de los métodos tradicionalmente realizados en el laboratorio
de bacteriología que nos ayudan a establecer un diagnóstico de certeza
identificando al agente causal, permiten conocer la sensibilidad de dichos patógenos
y confirman la causa bacteriológica.
Cualquier intento por aislar bacterias patógenas de las heces implica la separación
de las especies patógenas, usualmente a través del uso de medios selectivos,
diferenciales y de cultivos de pre enriquecimiento.

4. Bibliografía
● Salmonella Shigella Agar. (s. f.). Britania Lab.
https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_6070900c78db
3.pdf
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