formacion de films de proteinas

1. Formación de Films:
El Quitosano puede ser solubilizado en soluciones diluidas de ácidos minerales como el
clorhídrico o ácidos orgánicos como el acético, láctico y cítrico. Una vez disueltos, los
films de Qo se forman simplemente mediante la evaporación del solvente. Esta capacidad
se debe a la formación de puentes de hidrógeno intra e intermoleculares en las cadenas de
Qo [RITTHIDEJ ET AL., 2002]. Sin embargo, las características y calidad de los films
resultantes varían de acuerdo a la fuente de Qo empleada, el solvente utilizado, la
metodología de preparación de los films y tipo y cantidad, si existiera, de copolímeros y
plastificantes utilizados [CERVERA ET AL., 2003].
Preparación Films
Se disolvieron 0,5 g en 50 solución de ácido acético acuoso ml (0,5% en peso) La mezcla
se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas, y la solución se desgasificó por
centrifugación a 1500 rpm durante 30 min. La solución resultante era clara y de color
amarillento.
Las películas de quitosano investigados se prepararon por inversión de fase seca, es decir,
la solución se vertió en moldes de Teflón y se dejó durante la evaporación en una cámara
de termostato a 50 ◦C durante 24 horas.
Preparacion de las soluciones de quitosano .
Se prepararon soluciones de Qo al 1% p/v en solución de ácido láctico al, disolviendo el
Qo con agitación constante [AGITADOR MAGNÉTICO durante 3 horas. Las soluciones
se dejaron a temperatura ambiente durante la noche y luego se microfiltraron en un filtro a
una presión de 70 psi o 4,8 atm, a través de un prefiltro/filtro absoluto de microfibra de
borosilicato nitrato de celulosa de tamaño de poro de 0,45 Se determinó pH y la turbidez
de las soluciones filtradas . Las soluciones se dejaron en reposo en un refrigerador a 4ºC
durante al menos 24 horas antes de ser utilizadas con el fin de eliminar las burbujas.
Preparación de los Films de Quitosano
Se agregaron exactamente 25 mL de solución filtrada de Qo sobre placas de acero
inoxidable con medidas de 10x10x0,3 cm3 que luego fueron dejadas en una estufa a 40ºC
durante 16 horas hasta evaporar el agua, obteniéndose los films
Neutralización de los Films de Quitosano
Fueron sumergidos en un recipiente de vidrio con medidas de 20x20x5 cm3 , durante 5
minutos en 100 mL de una solución de hidróxido de sodio 0,1 M y luego lavados 2 veces y
durante 10 minutos cada vez con 100 mL de una solución de agua – etanol (60:40) para
eliminar el exceso de álcali. Los filmsfueron cuidadosamente estirados y puestos entre

2. papeles filtro [WHATMAN 50, INGLATERRA] y se les dejó secar durante 24 horas en
una sala con humedad y temperatura controladas (50% HR; 23ºC).
Alginato.
Este polisacárido hidrofílico tiene un alto peso molecular (90.000 – 290.000 Da), es
soluble en soluciones acuosas y es estable entre los pH 4 – 10 [BECKER ET AL., 2001].
Las películas de alginato pueden ser de dos tipos con diferentes propiedades: películas
solubles en agua utilizando alginato de sodio y películas solubles en aceite utilizando
alginato de calcio. Las películas solubles en agua se pueden formar por evaporación de una
solución de alginato o por extrusión de una solución de alginato en un no-disolvente que se
mezcla con agua, tal como acetona o etanol. Estas películas son impermeables a la grasa y
ceras, pero permiten que el vapor de agua pase a través de ellas; son quebradizas cuando
están secas, pero pueden ser plastificadas con glicerol, sorbitol o urea. Cuando se necesita
una película con alto contenido en sólidos, se debe utilizar un alginato de muy baja
viscosidad y cuando se necesita una película con mayor resistencia se requiere el uso de
alginatos de viscosidad más alta con un mayor grado de polimerización. Para formar
películas más suaves y flexibles se utiliza alginato y trietanolamina (McHugh, 1987). De la
misma manera, la formación de películas insolubles en agua se puede lograr mediante el
tratamiento de una película soluble en agua con un catión di-o trivalente y ácido.
Preparación de las Soluciones de Alginato
Se prepararon soluciones de Alg3500 y Alg14000 al 1% p/v en agua destilada, disolviendo
el Alg con agitación constantedurante 1 hora y a temperatura ambiente. La formación de los
films se hizo de acuerdo con lo descrito en el punto anterior
Formación de films de zeína de maíz.
Técnicamente, las películas hechas de una proteína soluble en alcohol como el zein, tienen
propiedades de barrera relativamente altos en comparación con otras proteínas. Zeína tiene
excelente propiedades formadoras de película y se puede utilizar para la fabricación de
películas biodegradables. Zeína película se forma mediante el desarrollo de hidrófobo,
hidrógeno y enlaces disulfuro entre las cadenas limitados zeína (Guilbert, 1986). Las
películas resultantes son frágiles y por lo tanto requieren la adición de plastificante para
aumentar la flexibilidad.

3. Para realizar la película o recubrimiento de zeína; se procedió a diluir la proteína en alcohol
para formar el gel, se preparó una solución acuosa al 10% de alcohol, la mezcla se mantuvo
en agitación constante hasta la total homogenización de los componentes. La emulsión
formada de zeína fue aplicada sobre una superficie plana de plástico rígido,
aproximadamente se vertieron de 2 a 3 ml y se extendieron con una brocha. Se dejaron
secar en condiciones ambientales de 22 – 260C. Una vez formadas las películas fueron
retiradas de las superficies plásticas, cortadas en pequeñas secciones de aproximadamente 3
cm. Y almacenadas dentro de desecadores. Posteriormente se evaluó visualmente su
resistencia, porosidad y transparencia.
Formación de films de proteina soya .
Las películas se prepararon dispersando la proteína y glicerol en agua destilada.
Las dispersiones se formaron mezclando, por un lado 5 g de SPI y concentraciones
variables de glicerol o sorbitol (utilizados como plastificantes, 15, 20,30, 40, 50 y 60 g
plastificante/100 g SPI) en 80 ml de agua destilada con agitación magnética a temperatura
ambiente (≈ 30 min), ajustando el pH de la dispersión a 2, 7 ó 10,5 con HCl (2N) o NaOH
(2 N). se centrifugaron a 1000 rpm durante 5 minutos a temperatura ambiente con el fin de
eliminar las burbujas. Finalmente, 10 ml de las dispersiones filmogénicas, se colocaron en
cajas de Petri de poliestireno (64 cm2) y se secaron en una estufa con convección forzada
a 60 °C durante 3 horas. Las películas resultantes se acondicionaron a 20 °C y 58 % HR (en
desecador con una solución saturada de NaBr) durante 48 horas previo a su caracterización.