Automatización en bioquimica

2. TECNOLOGÍA SUPERIOR EN LABORATORIO CLÍNICO
DOCENTE:
MSC. LEONEL ZÚÑIGA ARREAGA, MD.
ASIGNATURA:
FUNDAMENTOS BASICOS DEL
LABORATORIO CLINICO

3. INTRODUCCIÓN
Rememoración de la clase anterior
1- Analizadores de flujo continuo. Inconvenientes.
2- Analizadores discontinuos y discretos. Ventajas.
3- Automatización de un proceso analítico.

4. INTRODUCCIÓN
Preguntas de control
1-Mencione los inconvenientes de los Analizadores
de flujo continuo.
2- Defina la Automatización de un proceso
analítico.

5. INTRODUCCIÓN
La selección de un método analítico está encaminada a la búsqueda de
un proceder que satisfaga las expectativas planteadas y de esta forma
apoyar al médico en su labor diagnóstica. El paciente será el principal
beneficiado al definirse la conducta a seguir ante el problema de salud
que lo llevó a solicitar ayuda médica.
Motivación

6. INTRODUCCIÓN
- Campo de la Bioquímica Clínica. Organización del Laboratorio de Bioquímica
Clínica. Analitos que se determinan.
- Agua como reactivo mas utilizado en el departamento de Bioquímica Clínica .
Pureza y conductividad. Diferentes tipos de agua que se utilizan.
- Control de calidad de los Reactivos.
- Concepto de soluciones. Soluciones normales, molares y porcentuales.
- Interferencias de las determinaciones de química clínica.
- Métodos utilizados en el laboratorio de Química Clínica. Principios de los mismos.
- Clasificación de los métodos analíticos
- Espectrofotometría de absorción. Principios que la rigen
- Tipos de equipos donde se aplican las leyes de la espectrofotometría:
foto colorímetros y espectrofotómetros. Características y diferencias.
Contenido

7. INTRODUCCIÓN
- Interpretar y utilizar los métodos, las técnicas y los procedimientos
analíticos utilizados en el laboratorio de Bioquímica Clínica.
- Realizar la preparación de soluciones normales, molares y porcentuales así
como la aplicación del control de la calidad de los mismos.
- Valorar los aspectos generales que influyen determinaciones bioquímicas
básicas, interpretando el método espectrofotométrico y los factores que
inciden en la confiabilidad del mismo.
Objetivos

8. INTRODUCCIÓN
Bibliografía
.
Alberto Gómez Gutiérrez & María Consuelo Casas Gómez 2014. Ángel
Interpretación Clínica del Laboratorio. 8ªed. Medica Internacional. Español

9. DESARROLLO
 El campo de acción de la Bioquímica Clínica es muy amplio ya que los
componentes presentes en los materiales biológicos a estudiar son muy
numerosos. Entre ellos tenemos: Carbohidratos, lípidos, electrolitos,
proteínas, enzimas, hormonas, vitaminas, minerales, anticuerpos.
 Química clínica Es la rama de las ciencias de laboratorio clínico dedicada
al estudio in vitro e in vivo de propiedades bioquímicas, con el propósito
de suministrar información para la prevención, el diagnostico, el
pronostico y tratamiento de enfermedades. Comprende un alto numero
de determinaciones de concentración circulantes de compuestos
orgánicos y enzimas implicados en una amplia variedad de procesos
metabólicos.

10. DESARROLLO
DETERMINACIONES DE QUIMICA
Sustratos
• Ácido Úrico
• Albúmina
• Bilirrubina Total
• Bilirrubina Directa
• Calcio
• Colesterol
• Colesterol HDL
• Colesterol LDL
• Creatinina
• Fósforo
• Frutosamina
• Glucosa
• Hierro
• Lactato
• Magnesio
• Proteínas Totales
• Proteínas Totales Orina
• Triglicéridos
• Urea
• Electrólitos
• Sodio
• Potasio
• Cloro

11. DESARROLLO
DETERMINACIONES. CONTINUACION
Enzimas
• Alfa-HBDH
• Amilasa Total
• Amilasa Pancreática
• CK MB
• CK NAC
• Colinesterasa
• Fosfatasa Ácida
• Fosfatasa Alcalina
• Gama GT
• LDH
• Lipasa
• TGO
• TGP
Proteínas Específicas
• Alfa 1-Glicoproteína Ácida
• APO A1
• APO B
• ASLO (Anti Streptolisina O)
• C3
• C4
• CRP (Proteína C Reactiva)
• HbA1C (Hemoglobina Glicosilada)
• IGA
• IGG
• IGM
• MAU (Albúmina Urinaria)
• RF (Factor Reumatoideo)
• Transferrina

12. DESARROLLO
Agua reactivo mas utilizado en el departamento de Bioquímica clínica.:
• Es solvente universal del laboratorio. Es de vital importancia que este lo
mas pura posible para evitar interferencia que afectarían la calidad de
las soluciones que se preparan con ella.
• Pureza y conductividad:
• Pureza: Se define por su conductividad eléctrica que disminuye al
aumentar la pureza o sea mientras mas pura menos conductividad.

13. DESARROLLO
Diferentes tipos de agua que se utilizan en el Laboratorio
Bioquímica.
• Agua cruda: es el agua que no tiene ningún tratamiento, ni físico ni
químico.
• Agua destilada: Consiste en someter al agua a ebullición, haciendo que el
vapor se condense y se recoge el líquido.
• Agua bidestilada: se obtiene sometiendo al agua a un segundo ciclo de
destilación.
• Agua Desionizada: se obtiene por pasaje de columnas de intercambio
iónico.
• Para el uso corriente debe utilizarse agua bidestilada.

14. DESARROLLO
.
Las causas que pueden afectar los reactivos son:
- CONSERVACIÓN
- ALMACENAMIENTO
- ROTACIÓN
- MANIPULACIÓN

15. DESARROLLO
Control de la calidad de los reactivos:
- Propiedades físico-químicas:
- Color, turbiedad, formación espontánea de precipitados, valor del pH,
absorbancia a longitudes de onda especificas.
- Características básicas del desempeño de la medición:
- El valor del blanco reactivo, forma, pendiente y linealidad de la curva
de calibración, cinética de la reacción global, limite de detención,
precisión.

16. DESARROLLO
SOLUCIONES
Se conocen como soluciones simples las mezclas que resultan de la
disolución de una sustancia llamada soluto la cual se dispersa en
diminutas partículas (moléculas) entre las moléculas de un solvente,
comúnmente el agua.

17. DESARROLLO
TIPOS DE SOLUCIONES
• Las soluciones porcentuales son aquellas cuya concentración de soluto viene
expresada por 100 mL de solución.
• Molares: Las soluciones molares son todas aquellas cuya concentración del soluto
viene expresada en moles por litro de solución. Entiéndase por mol la unidad
utilizada para medir la cantidad de una sustancia que contiene tanto partículas
(6,022·1023) bajo la forma de átomos, moléculas o iones, como átomos de carbono
hay en 0,012 kg de carbono
• Normales: el peso molecular expresado en gramos entre los equivalentes en
cantidad suficiente para 1000 ml de agua o solvente. En algunos casos coincide con
las molares.
• Saturadas: tiene una concentración mayor de la que es capaz de disolver el solvente.

18. DESARROLLO
PATRONES Y CALIBRADORES
Se conoce como Patrón a la solución que contiene una cantidad
determinada de componente que se va a analizar disuelto en agua.
Pueden ser primarios y secundario.
Se conoce como Calibrador cuando la disolución se realiza en suero,
plasma o algún material cuya composición se asemeja a cualquiera
de los dos mencionados. Ambos tienen un valor único del
componente

19. DESARROLLO
DEFINICIÓN DE BLANCO
Blanco: Determinación donde se utilicen los reactivos y no esté
presente la muestra (blanco de reactivos) ó cuando está presente la
muestra y no están algunos o todos los reactivos (blanco de
muestras).
Debemos conocer que el agua destilada es el blanco más
frecuentemente utilizado ya que se usa como norma para todas
aquellas reacciones que han mostrado no producir blancos
coloreados de una intensidad tal que interfieran los cálculos

20. DESARROLLO
CONTROLES
Son soluciones acuosas o séricas de uno o varios componentes y que se
utilizan como muestras con el principal objetivo de controlar la calidad
de los resultados en el laboratorio tienen para cada componente un
rango de valores, lo contrario a los calibradores que tienen un valor
puntual para cada componente.
La función fundamental del control es conocer las variaciones a que
están sometidos los resultados obtenidos en el método en cuestión.

21. DESARROLLO
INTERFERENCIAS
Interferencia analítica
Es la afectación que causan
determinadas sustancias que pueden
estar presentes en el material
biológico o muestra a la cual se le
analiza determinado componente. La
interferencia puede causar la
elevación o disminución de los valores
de los componentes objeto del
análisis. (hemolisis, lipemia,
hiperbilirrubinemia)

22. DESARROLLO
MÉTODOS ANALÍTICOS.
Los métodos analíticos se utilizan en
química clínica para conocer la
presencia o concentración de un
componente en el material biológico
analizado.
Y SE CLASIFICAN SEGÚN EL
• Tipo de resultados que brindan
• Tiempo de reacción y lectura
• Del equipo de lectura que utiliza,

23. DESARROLLO
Atendiendo al tipo de resultados que
brindan:
- Cuantitativos: cuando el resultado se ofrece
como cantidad del componente analizado.
- Semicuantitativo: cuando el resultado se
ofrece de forma aproximada.
- Cualitativo: cuando el resultado expresa si
hay presencia o no del compuesto analizado.

24. DESARROLLO
Atendiendo al volumen de muestra:
- Macrométodos: son aquellos que necesitan un
volumen de muestra y reactivos de mililitros (ml).
- Micrométodos: en cantidades entre 100 y 300 μL.
- Ultramicrométodos: por debajo de los 100 μL.

25. DESARROLLO
Por el tiempo de reacción y lectura:
•Punto final: Lee la muestra en un tiempo
predeterminado.
•Dos puntos: Lee la muestra en dos tiempos
predeterminados.
•Cinética: Lee la muestra en varios tiempos
predeterminados.
•Turbidimetría: Lee la muestra en dos tiempos
predeterminados.

26. DESARROLLO
Dependiendo del equipo de lectura utilizado:
- Fotometría y espectrofotometría de absorción.
- Espectrometría de emisión y de absorción atómica.
- Fluorimetría.
- Reflectometría.
- Equipos de inducción eléctrica.
- Osmometría.
- Radioinmunoensayo.
- Equipos de fraccionamiento o separación.

27. DESARROLLO
La selección del método comprende los aspectos
siguientes:
• Definición de los requisitos para el método.
• Revisión de la literatura técnica para conocer los métodos
disponibles.
• Selección del método que mejor se adapte a las condiciones
del laboratorio y los requerimientos clínicos.

28. DESARROLLO
ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN
Es el método de análisis óptico más usado en las
investigaciones biológicas. El espectrofotómetro es un
instrumento que permite comparar la radiación
absorbida o transmitida por una solución que contiene
una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene
una cantidad conocida de la misma sustancia.

29. DESARROLLO
LEYES QUE RIGEN LA ESPECTROFOTOMETRÍA
Las leyes que rigen la fotometría de absorción son las Leyes
de Beer y Lambert, las cuales se complementan y
fundamentan en el fenómeno de la fotometría.
La Ley de Lambert expresa: La absorción de la luz es
directamente proporcional al espesor del cuerpo.
La Ley de Beer expresa: La absorción de la luz es
directamente proporcional a la concentración de la
sustancia

30. DESARROLLO
• Uso: Diagnóstico de las
enfermedades renales
• Parámetros
• Ácido Úrico
• Creatinina
• Creatinina em orina
• Calcio
• Colesterol
• Fósforo
• Glucosa
• Magnesio
• Proteínas Totales
• Proteínas Totales en Orina
• Urea
• Sodio/Potasio/Cloro
• Examen de orina
Perfil Renal
Riñón Túbulos renales
Perfil

31. DESARROLLO
• Uso: Diagnóstico de las enfermedades hepáticas
• Parámetros
• Albumina
• Proteínas totales
• Bilirrubina Total
• Bilirrubina Direta e Indirecta
• Colesterol total
• Glucosa
• Hierro sérico
• Sodio/Potasio
• Fosfatasa Alcalina
• Gama GT
• LDH
• TGO
• TGP
• Factores de Coagulación
• Plaquetas
Perfil Hepático
Hígado
Perfil

32. DESARROLLO
• Uso: Diagnóstico de las
enfermedades pancreáticas
• Parámetros
• Calcio
• Glucosa
• Magnesio
• Amilasa
• Amilasa Pancreática
• Lipasa
Perfil Pancreático
Páncreas
Perfil

33. DESARROLLO
• Uso: Diagnóstico de las enfermedades
cardiovasculares
• Parámetros
• Colesterol total
• HDL-Colesterol
• LDL-Colesterol
• Magnesio
• Triglicéridos
• Sodio
• CK
• CKMB
• LDH
• Troponina I
• Pro-BNP
Perfil Cardíaco
Corazón
Perfil

34. DESARROLLO
• Uso: Diagnóstico de las enfermedades
asociadas a problemas
cardiovasculares
• Parámetros
• Colesterol total
• HDL-Colesterol
• LDL-Colesterol
• VLDL- Colesterol
• Trigliceridos
• Lípidos totales
Perfil Lipídico
Diferentes estadios
de la Ateroesclerosis
Perfil

35. DESARROLLO
• Uso: Diagnóstico de Diabetes
• Parámetros
• Frutosamina
• Glucosa en ayunas
• Hemoglobina Glucosilada
• Glucosa postprandial
• Curva de tolerância de la
glucosa.
Perfil Glucémico
Islote de Langerhans
Perfil

36. DESARROLLO
• Uso: Diagnóstico de las
enfermedades óseas
• Parámetros
• Fósforo
• Magnesio
• Fosfatasa Alcalina
• Calcio
• Calcio iónico
Perfil Óseo
Perfil

37. CONCLUSIONES
Preguntas de comprobación
1. Mencione los aspectos para la selección del método
analítico.
2. Mencione la clasificación de los materiales control.

38. CONCLUSIONES
Resumen de aspectos generales
- Interferencias de las determinaciones de química clínica.
- Métodos utilizados en el laboratorio de Química Clínica.
Principios de los mismos.
- Clasificación de los métodos analíticos

39. CONCLUSIONES
En la próxima conferencia trataremos sobre fase Preanalítica y
primera fase del proceso de trabajo en el laboratorio clínico.
Motivación