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  • 1. APLICACIONES IG ADN e INGENIERÍA GENÉTICA (parte 1) @profesorjano Victor Vitoriaprofesorjano@gmail.com
  • 2. OBTENCIÓN de PRODUCTOS FARMACÉUTICOS OBTENCIÓN DE PRODUCTOS FARMACEÚTICOS Enfermedades por falta de proteínas Ej: insulina, hormona del crecimiento, factor VIII coag. Insulina: síntesis de las dos cadenas por separado y fusión posterior MEDICINA FORENSE ADN humanos 99,9 % igual Hay que buscar diferencias Son: marcadores genéticos SRT: repeticiones cortas en tandem (Huella genética) Método: southern blot 1 2
  • 3. 1) Clonar gen causante 2) PCR 3) Secuenciar gen 4) (sonda) DETECTAR: genes responsables de enfermedades Anemia falciforme Hemofilia E. de Huntington Fibrosis quístina Distrofia Duchenne Diagnóstico de enfermedades para ejemplos secuencia 3
  • 4. TERAPIA GÉNICA CÉLULAS GERMINALES Se transmite a la descendencia Modifica acervo genético Bioética Eugenesia Técnica mediante la cual se inserta un gen funcional correcto para corregir un defecto genético congénito o adquirido CÉLULAS SOMÁTICAS sobre GENES RECESIVOS Fácil extracción Larga vida SCID - 1990 Hepatocitos Cel. médula ósea ADA Adenosin desaminasa 4
  • 5. In vivo ❖ Necesita vector ❖ (virus) ❖ Inyección del vector al torrente sanguíneo Ex vivo In situ ❖ Extracción células ❖ Corrección ❖ Inyección células ❖ Introducción de genes directa en el órgano diana ❖ En órganos de células de difícil extracción CÉLULAS SOMÁTICAS
  • 6. Aplicación a la AGRICULTURA 5 OBJETIVO Mejora del rendimiento ¿cómo? PLANTAS TRANGÉNICAS Resistencia a herbicidas, p.ej. GLIFOSATO E. coli: EPSP sintasa resistente a glifosato Mejora de productos: arroz dorado (vitamina A) Plantas farmacéuticas: producen proteínas humanas ventaja son EUCARIOTAS y llevan a cabo mecanismos postraduccionales
  • 7. Aquí se inserta el gen de E. coli de EPSP resistente a glifosato El Plásmido Ti se añade a un cultivo de protoplastos (células vegetales sin pared celular) de la especie vegetal en cuestión a partir de los cuales se obtendrán plántulas para el cultivo.
  • 8.
  • 9. BIOBALÍSTICA Plásmido en Au o W Se dispara a tejido Monocotiledóneas ELECTROPORACIÓN Apertura de poros en pared celular por corrientes eléctricas SUSPENSIÓN LÍQUIDA Plásmido se inserta en Agrobacterium y se infectan protoplastos. Introducción Plásmido Ti para ejemplos secuencia 3
  • 10. Aplicación a la GANADERÍA 6 OBJETIVO Mejora del rendimiento y síntesis de productos ejemplos PRODUCTOS α1-antitripsina: tratamiento de enfisema hereditario Activador tisular del plasminógeno: disolución de trombos Factor VIII de la coagulación En leche ya que los genes introducidos se expresan junto al del gen de la leche materna A partir de células ováricas de hámster chino (CHO)
  • 11. (recordar cómo se clona un gen… )
  • 12. También llamada clonación somática (para diferenciarla de la clonación embrionaria)
  • 13. proyecto GENOMA HUMANO •Sitúa los genes en el cromosoma •Fragmentación de cada gen en fragmentos de restricción y ordenarlos físicamente •Secuenciar cada fragmento de restricción (y de otros animales) METODOLOGÍA