Este documento presenta cálculos para determinar la concentración de proteínas y la actividad enzimática de la fosfatasa en el hígado de pollo. Se realizó una curva de calibración y se midió la absorbancia de muestras en blanco y repeticiones para calcular las concentraciones de proteínas (0.571 mg/ml) y la velocidad de reacción enzimática (2.3835x10-7 mol/ml.min). La actividad específica de la fosfatasa en el hígado de pollo se determinó en 0.

1. CALCULO DE CONCENTRACION DE PROTEINA:
CURVA DECALIBRACION
A= 0.2305C + 0.0633
0.00
0.05
0.10
0.15
0.20
0.25
0.30
0.17 0.33 0.50 0.67 0.83
CONCENTRACION (mg/ml)
ABSORBANCIA
0.195=0.2305x(X)+0.0633
X=0.571 mg/ml
BLANCO MUESTRA REPET. 1
LECTURA DE ABSOR. (540nm) 0.085 0.189 0.201
ABSORBANCIA NETO … 0.104 0.116
COEF. VARIABILIDAD (%) … 5.45
LECTURA PROMEDIO … 0.195
CONCENTRACION (mg/ml) … 0.571

2. El peso del hígado fue 6.0 gr. y se utilizo 24ml. de buffer acetato el
sobrenadante que resulto fue de 11.5ml.
CALCULOS DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA:
A = a * b * c
Donde:
• a = 18400 Lmol-1
cm-1
• b = 1 cm
• c = mg/L
Concentración de la muestra blanco:
0.134 = (18400 Lmol-1
cm-1
) x (1 cm) x c
c = 7.283 x 10-6
mol/L
7.283 x 10-6
mol  1000 mL
X  4.3 mL
X = 3.132 x 10-8
mol
3.132 x 10-8
mol  0.1 mL de extracto crudo
X  11.5 mL de extracto crudo
X = 3.601 x 10-6
mol
3.601 x 10-6
mol  11.5 mL
X mol  1000 mL
X = 3.132 x 10-4
mol/L
Concentración de la muestra 1:
0.199 = (18400 Lmol-1
cm-1
) x (1 cm) x c
c = 1.082x 10-5
mol/L
1.082x 10-5
mol  1000 mL
X  4.3 ml
X =4.651 x 10-8
mol

3. 4.651 x 10-8
mol  0.1 mL de extracto crudo
X  11.5 mL de extracto crudo
X = 5.348x 10-6
mol
5.348x 10-6
mol  11.5 mL
X mol  1000 mL
X =4.650 x 10-4
mol/L
Concentración de la muestra 2:
0.209 = (18400 Lmol-1
cm-1
) x (1 cm) x c
c = 1.136x 10-5
mol/L
1.136x 10-5
mol  1000 mL
X  4.3 ml
X =4.884 x 10-8
mol
4.884 x 10-8
mol  0.1 mL de extracto crudo
X  11.5 mL de extracto crudo
X = 5.617x 10-6
mol
5.617x 10-6
mol  11.5 mL
X mol  1000 mL
X =4.884 x 10-4
mol/L
Velocidad de reacción de la muestra 1:
4.650 x 10-4
mol/L  2 min.
X  1 min.
X = 2.325 x 10-4
mol/L
X = 2.325 x 10-7
mol /ml.min.

4. Velocidad de reacción de la muestra 2:
4.884 x 10-4
mol/L  2 min.
X  1 min.
X = 2.442 x 10-4
mol/L
X = 2.442 x 10-7
mol/ml.min.
Blanco Muestra 1 Muestra 2
CONCENTRACIONES
3.132 x 10-4
mol
4.650 x 10-4
mol
4.884 x 10-4
mol
CONCENTRACION SIN EL
BLANCO …
1.518x 10-4
mol
1.752x10-4
mol
COEFICIENTE DE VARIABILIDAD
(%) … 5.131
VELOCIDAD DE Rx (mol/ml.min) … 2.325 x 10-7 2.442 x 10-7
VELOCIDAD PROMEDIO
(mol/ml.min) … 2.3835x10-7
CALCULO DE LA ACTIVIDAD ESPECIFICA DE LA FOSFATASA:
actividad específica = Actividad Enzimatica / Concentracion proteica
= 2.3835 x 10-7 / 0.571
= 0.4174 umol/mg.min

5. Conclusiones:
• Para ambos experimentos el coeficiente de variacion resulto ligeramente
mayor a 5%, por lo cual nuestros resultados no deben ser tomados con una
confiabilidad al 100%, son medianamente confiables.
• Como resultado obtuvimos 0.571mg/ml de proteina, lo cual nos indica que
el higado de pollo contiene una alta concentrracion de proteina, entonces
es importate su consumo como fuente de proteinas.
• De acuerdo a la actividad enzimatica de la fosfatasa observamos que el
higado de pollo no tiene a detiorarse con tanta rapidez como seria en el
pescado.
• Por medio de la actividad especifica vemos que la concentracion de las
proteinas en el higado de pollo tampoco tienden a deteriorase con tanta
rapidez,pero si requieren de un almacenamiento a bajas te,mperaturas
para que la pardida en proteinas no sea tanta.
Discusines:
• Un error al moemento de calcular los tiempos puede haber sido uno de los
motivos por el cual el coeficiente de variabilidad resulto ligeramente mayor
a 5%.
• El error en la medida de las cantidades del reactivo de biuret son otros
factores que también pueden haber ocasionado una variacion ligeramente
myor de lo aceptado (5%).