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Cromatografía de líquidos HPLC
Técnico responsable
Marta Isabel Ozores Belmonte martaisabel.ozores@uva.es
Tlf: 983.184682
Campus de Valladolid
Principios de la técnica
En la cromatografía líquida, la fase móvil es un líquido que fluye a través de una columna
que contiene a la fase fija. La separación cromatográfica en HPLC es el resultado de las
interacciones específicas entre las moléculas de la muestra en ambas fases, móvil y
estacionaria
A diferencia de la cromatografía de gases, la cromatografía de líquidos de alto
rendimiento (HPLC, de high-performance liquid chromatography) no está limitada por la
volatilidad o la estabilidad térmica de la muestra.
La HPLC es capaz de separar macromoléculas y especies iónicas, productos naturales
lábiles, materiales poliméricos y una gran variedad de otros grupos polifuncionales de alto
peso molecular. Con una fase móvil líquida interactiva, otro parámetro se encuentra
disponible para la selectividad, en adición a una fase estacionaria activa.
La HPLC ofrece una mayor variedad de fases estacionarias, lo que permite una mayor
gama de estas interacciones selectivas y más posibilidades para la separación.
HPLC preparativa
Es la técnica escogida para aislamiento y purificación de productos de valor en las
industrias químicas y farmacéuticas así como en la biotecnología y la bioquímica. La
cromatografía preparativa comprende un amplio rango de aplicaciones, desde el
aislamiento de 1µg de muestra para identificación espectroscópica hasta el aislamiento
de un compuesto puro de una mezcla de 100 g.
Aplicaciones
Campos de Aplicación de HPLC
 Fármacos: Antibióticos, sedantes esteroides, analgésicos
 Bioquímica: Aminoácidos, proteínas, carbohidratos, lípidos
 Productos de alimentación: Edulcorantes artificiales, antioxidantes, aflatoxinas,
aditivos
 Productos de la industria química: Aromáticos condensados, tensoactivos, propulsores,
colorantes
 Contaminantes: fenoles, Pesticidas, herbicidas, PCB
 Química forense: Drogas, venenos, alcohol en sangre, narcóticos
 Medicinaclínica: Ácidos biliares, metabolitos de drogas, extractos de orina, estrógenos.
Algunas aplicaciones importantes de la HPLC preparativa
 Separación y purificación de metabolitos
 Separación y purificación de los metabolitos de las drogas procedentes de muestras de
orina
 Purificación y separación de enantiómeros
 Purificación de compuestos naturales
 Purificación y caracterización de enzimas y proteínas
Funcionamiento del servicio
Las muestras deben ir acompañadas de la hoja de solicitud de servicios generada en esta
página web una vez realizado el registro en la misma. El ususario debe rellenar todos los
campos de la solicitud de servicios que conozca, con el fin de obtener el mejor resultado
posible.
Equipos
HPLC analítico 1200 Series de Agilent Technologies
 Bomba cuaternaria G1311
 Detector de longitud de onda variable G1314B
 Detector de diodo y de longitud de onda variable G1315D
 Detector de índice de refracción G1362A
 Detector de fluorescencia G1321A
HPLC preparativo 1200 Series de Agilent Technologies
 Dos Bombas preparativas G1361A
 Detector de diodo y de longitud de onda variable G1315D
 Muestreador automático G1329A
 Colector de fracciones G1364B
SGS EN PERÚ
 SGS EN PERÚ
El año 1986 empezamos a operar en la ciudad de Lima con un pequeño equipo de 40
empleados. Hoy, la sede peruana de SGS es una de las más importantes, donde todas las
actividades de la región sudamericana son centralizadas y coordinadas.
En la actualidad, estamos presentes en 28 ciudades del Perú, con cerca de 2,000 empleados,
ofreciendo una rango amplio de soluciones a prácticamente todo sector e industria existente,
incluyendo medioambiente, agricultura, minería, industrial, pesca, certificación de sistemas de
gestión, productos de consumo, automotriz y, petróleo, gas y productos químicos.
INNOVACIÓN
Estamos dedicados a desarrollar nuestros servicios de tal modo que satisfaga las necesidades
del Mercado peruano. Por ejemplo, en el sector minero desarrollamos un sistema de
información que provee resultados de laboratorio a nuestros clientes en tiempo real, y hemos
creado el servicio de Monitoreo por Fertirriego en el sector agrícola. Estos servicios
innovadores han sido adoptados por toda la red global de SGS.
ACREDITACIONES Y CERTIFICACIONES
Para poder garantizar la calidad de nuestros servicios, somos constantemente evaluados por
organizaciones nacionales e internacionales. Como resultado, nuestras oficinas y laboratorios
cuentan con diversas certificaciones y acreditaciones incluyendo:
 ISO 9001
 ISO 14001
 OHSAS 18001
 NTP-ISO/IEC 17020
 NTP-ISO/IEC 17025
 NTP-ISO/IEC 17065
Todos nuestros métodos de ensayo se rigen bajo normativas locales y globales, y pueden
también adaptarse a los requerimientos específicos de cada cliente.
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  • 1. Cromatografía de líquidos HPLC Técnico responsable Marta Isabel Ozores Belmonte martaisabel.ozores@uva.es Tlf: 983.184682 Campus de Valladolid Principios de la técnica En la cromatografía líquida, la fase móvil es un líquido que fluye a través de una columna que contiene a la fase fija. La separación cromatográfica en HPLC es el resultado de las interacciones específicas entre las moléculas de la muestra en ambas fases, móvil y estacionaria A diferencia de la cromatografía de gases, la cromatografía de líquidos de alto rendimiento (HPLC, de high-performance liquid chromatography) no está limitada por la volatilidad o la estabilidad térmica de la muestra. La HPLC es capaz de separar macromoléculas y especies iónicas, productos naturales lábiles, materiales poliméricos y una gran variedad de otros grupos polifuncionales de alto peso molecular. Con una fase móvil líquida interactiva, otro parámetro se encuentra disponible para la selectividad, en adición a una fase estacionaria activa. La HPLC ofrece una mayor variedad de fases estacionarias, lo que permite una mayor gama de estas interacciones selectivas y más posibilidades para la separación. HPLC preparativa Es la técnica escogida para aislamiento y purificación de productos de valor en las industrias químicas y farmacéuticas así como en la biotecnología y la bioquímica. La cromatografía preparativa comprende un amplio rango de aplicaciones, desde el aislamiento de 1µg de muestra para identificación espectroscópica hasta el aislamiento de un compuesto puro de una mezcla de 100 g. Aplicaciones Campos de Aplicación de HPLC  Fármacos: Antibióticos, sedantes esteroides, analgésicos  Bioquímica: Aminoácidos, proteínas, carbohidratos, lípidos  Productos de alimentación: Edulcorantes artificiales, antioxidantes, aflatoxinas, aditivos  Productos de la industria química: Aromáticos condensados, tensoactivos, propulsores, colorantes  Contaminantes: fenoles, Pesticidas, herbicidas, PCB  Química forense: Drogas, venenos, alcohol en sangre, narcóticos  Medicinaclínica: Ácidos biliares, metabolitos de drogas, extractos de orina, estrógenos. Algunas aplicaciones importantes de la HPLC preparativa  Separación y purificación de metabolitos  Separación y purificación de los metabolitos de las drogas procedentes de muestras de orina  Purificación y separación de enantiómeros  Purificación de compuestos naturales  Purificación y caracterización de enzimas y proteínas Funcionamiento del servicio Las muestras deben ir acompañadas de la hoja de solicitud de servicios generada en esta página web una vez realizado el registro en la misma. El ususario debe rellenar todos los campos de la solicitud de servicios que conozca, con el fin de obtener el mejor resultado posible. Equipos
  • 2. HPLC analítico 1200 Series de Agilent Technologies  Bomba cuaternaria G1311  Detector de longitud de onda variable G1314B  Detector de diodo y de longitud de onda variable G1315D  Detector de índice de refracción G1362A  Detector de fluorescencia G1321A HPLC preparativo 1200 Series de Agilent Technologies  Dos Bombas preparativas G1361A  Detector de diodo y de longitud de onda variable G1315D  Muestreador automático G1329A  Colector de fracciones G1364B SGS EN PERÚ  SGS EN PERÚ El año 1986 empezamos a operar en la ciudad de Lima con un pequeño equipo de 40 empleados. Hoy, la sede peruana de SGS es una de las más importantes, donde todas las actividades de la región sudamericana son centralizadas y coordinadas. En la actualidad, estamos presentes en 28 ciudades del Perú, con cerca de 2,000 empleados, ofreciendo una rango amplio de soluciones a prácticamente todo sector e industria existente, incluyendo medioambiente, agricultura, minería, industrial, pesca, certificación de sistemas de gestión, productos de consumo, automotriz y, petróleo, gas y productos químicos. INNOVACIÓN Estamos dedicados a desarrollar nuestros servicios de tal modo que satisfaga las necesidades del Mercado peruano. Por ejemplo, en el sector minero desarrollamos un sistema de información que provee resultados de laboratorio a nuestros clientes en tiempo real, y hemos creado el servicio de Monitoreo por Fertirriego en el sector agrícola. Estos servicios innovadores han sido adoptados por toda la red global de SGS. ACREDITACIONES Y CERTIFICACIONES Para poder garantizar la calidad de nuestros servicios, somos constantemente evaluados por organizaciones nacionales e internacionales. Como resultado, nuestras oficinas y laboratorios cuentan con diversas certificaciones y acreditaciones incluyendo:  ISO 9001  ISO 14001  OHSAS 18001  NTP-ISO/IEC 17020  NTP-ISO/IEC 17025  NTP-ISO/IEC 17065 Todos nuestros métodos de ensayo se rigen bajo normativas locales y globales, y pueden también adaptarse a los requerimientos específicos de cada cliente.