Este estudio utilizó la técnica RAPD para seleccionar, clonar y caracterizar marcadores de ADN que se amplifican diferencialmente entre un conjunto de parásitos viscerotrópicos. El análisis RAPD destacó perfiles polimórficos que fueron consistentes con estudios previos que enfatizan las relaciones cercanas entre los parásitos y su agrupación según el origen geográfico. Los marcadores también estaban asociados con secuencias complejas inter e intra taxonómicas y variaciones de microsat

1. DISCUSIÓN

2. RAPD como técnica de detección y un conjunto
geográficamente diverso de parásitos viscerotrópicos
Una selección de dichas bandas se extrajo de los geles de
agarosa.
Se clonó y se secuenció, solo se seleccionaron los cebadores
que generaban perfiles reproducibles y solo una persona
realizó las reacciones RAPD.
Para minimizar los artefactos de clonación, solo
seleccionamos insertos que tenían el tamaño esperado de los
geles RAPD.
Curiosamente, se identificaron marcadores nucleares y
cinetoplásticos en una proporción (15,79% del kDNA) que está
dentro del rango descrito para estos genomas en
Kinetoplastids (0,5-20 %)

3. Se hicieron observaciones similares en estudios previos donde los
marcadores analizados también se encontraron ubicados en
cromosomas grandes. Se encontró que cuatro cromosomas grandes
contenían 7 marcadores en total.
Anteriormente se planteó la hipótesis de que las diferencias en los
sitios de hibridación son responsables de la amplificación específica de
la especie de los fragmentos de ADN en Leishmania que de otro modo
se conservan a través de diferentes especies.
Otro estudio confirmó estas observaciones e identificó, mutaciones en
los 39final del sitio de cebado como causa de la
amplificación diferencial de RAPD

4. CONCLUSIÓ
N

5. Este estudio asoció el uso de la técnica RAPD al público
Leishmania recursos del genoma para seleccionar,
clonar y caracterizaren silicoMarcadores de ADN que se
amplifican diferencialmente entre un panel de
viscerotrópicos.
El análisis RAPD en este panel limitado destacó
perfiles polimórficos y fue congruente con estudios
previos que enfatizan las relaciones cercanas de los
parásitos y su agrupación según el origen geográfico,
Estos marcadores también están asociados con
secuencias complejas inter e intra taxonómicas y
variaciones de microsatélites.

6. Gracias!!