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UNIVERSIDAD CÉSAR VALLEJO
              FACULTAD CIENCIAS MÉDICAS
           ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICIÓN
  “EFECTO DE UNA DIETA A BASE DE CHENOPODIUM QUINOA “QUINUA”
     ENRIQUECIDA CON RETINOL, SOBRE LA CONCENTRACIÓN DE
  HEMOGLOBINA SÉRICA EN RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS CON
                       ANEMIA INDUCIDA”




     TESIS PARA OPTAR POR EL TITULO PROFESIONAL DE
                 LICENCIADA EN NUTRICIÓN
AUTORAS:
                    LILIANA MARISOL, GARCIA CRIOLLO
                    FIORELLA PARTICIA, VILLAR BIFFI

ASESOR:
                    Ms. C JORGE LUIS, DIAZ ORTEGA

                      TRUJILLO, JULIO 2010.
MIEMBROS DEL JURADO




Dr. Olivera Bocangelino, Gerónimo
            Presidente




 Dr. Correa Arangoitia, Alejandro
           Secretario




   Lic. Rodríguez Hidalgo, Lilia
           Vocal
AGRADECIMIENTOS



Agradecemos de manera especial al Profesor Jorge Luis Díaz Ortega, por permitir que ésta Tesis se

desarrolle bajo su dirección. Su apoyo y confianza en nuestro trabajo y su capacidad para orientar

nuestras ideas, han sido un aporte invaluable, no sólo en el desarrollo de la Tesis sino también en

nuestra formación como investigadoras.



Agradecemos también a nuestro pilar académico, la Escuela Profesional de Nutrición, dirigida por la

Mg. Nut. María Esther Amaya de Ronquillo, a quién agradecemos su apoyo incondicional para la

elaboración de éste proyecto, a la Mg. Nut. Zoila Mosqueira Figueroa, por el aprecio demostrado a lo

largo de nuestra vida universitaria.



Un agradecimiento muy especial a nuestras familias, por su apoyo, confianza y colaboración para

llevar a cabo éste proyecto que hoy culminamos satisfactoriamente.

A nuestros Padres y Hermanos por su ejemplo de capacidad, honestidad y superación.

                                  Por Ellos y para Ellos…!!!




                                                                     Liliana Marisol García Criollo

                                                                       Fiorella Patricia Villar Biffi
DEDICATORIA



Durante éstos años de lucha constante, de gratas vivencias, de momentos de éxito y también de
angustias, para poder cumplir mis objetivos y poder alcanzar mis mas grandes anhelos, culminar mi
carrera, los deseos de superarme y lograr mi meta eran tan grandes que logré vencer los obstáculos y es
por ello que debo dedicar éste triunfo a quienes en todo momento me llenaron de amor y apoyo, y que
sobre todo me brindaron su amistad:

A toda mi familia, a mis padres
Roberto y Graciela, quienes me han
enseñado       valores,       principios,
perseverancia y empeño para el logro
de mis metas y mis sueños.
                                                                 A mis hermanos Jessica, Roberto y
                                                                 Geovanni, quienes me han brindado
                                                                 todo    el     apoyo,      su   amistad
                                                                 incondicional y el ejemplo de
                                                                 fortaleza        para           culminar
                                                                 exitosamente        éste        proyecto
                                                                 académico.




A mis angelitos Elvira, Rodrigo,
Ariana, Gonzalo y Fabio, quienes
quizá sin saberlo me dan el aliento
para continuar luchando, gracias por
compartir momentos maravillosos en
mi vida, gracias por sus risas y
ocurrencias que me cautivan día a día.
A mi motivo, quién con una gran
                                  dosis de Tolerancia y Respeto me
                                  enseñó el significado de algo muy
                                              valioso:
                                              El Amor




A Dios por llenar mi vida de
 dicha, felicidad y permitir
  que la comparta con mis
       seres amados
  A mis abuelos: Eduardo y
 Ayelá, guárdalos en tu gloria.




                                         Fiorella Patricia Villar Biffi
Al Creador De Todas Las Cosas


Por su fidelidad, por amarme con amor eterno, por
darme una nueva oportunidad cada día.
Gracias porque en tu santa voluntad haces tuyos mis
sueños...y éste es uno de ellos.


                                                            A Luz y a Pedro, Mis Padres


                                                Por dejar que Dios sea Dios en sus vidas, por
                                                permitir que El lime sus limitaciones humanas
                                                para forjar en mí un espíritu correcto, esforzado y
                                                valiente.




A Ceci, María y Pedro, Mis hermanos


Por alegrar mi vida, soportar mis locuras,
temperamento, y sobre todo las ausencias forzadas en
los momentos más significativos de sus vidas.


                                                                              A mi familia y amigos


                                                 Aquellos que me incentivaron cuando el camino se
                                                ponía borrascoso y me recordaron que se puede
                                                tener paz en medio de la tormenta.




                                                                     Liliana Marisol García Criollo
PRESENTACION




Señores miembros del jurado calificador



Cumpliendo con las disposiciones vigentes emanadas por el Reglamento de Grados y Títulos de la

Universidad César Vallejo, Facultad de Ciencias Médicas, Escuela Profesional de Nutrición, sometemos a

vuestro criterio profesional la evaluación del presente trabajo de investigación titulado “Efecto de una

dieta a base de Chenopodium Quinoa “Quinua” enriquecida con Retinol, sobre la concentración de

hemoglobina sérica en Rattus rattus variedad albinus con anemia inducida”, elaborado con el propósito

de obtener el título profesional de Licenciado en Nutrición.



El presente estudio tuvo como objetivo Determinar el efecto de una dieta a base Chenopodium quinoa

(Quinua) enriquecida con Retinol, sobre la concentración de hemoglobina sérica en Rattus rattus variedad

albinus con anemia inducida.



Con la convicción de que se le otorgará el valor justo y mostrando apertura a sus observaciones, le

agradecemos por anticipado por las sugerencias y apreciaciones que se brinden a la investigación.




                                                                           Trujillo, 16 de Julio del 2010




  Br. García Criollo, Liliana M.                           Br. Villar Biffi, Fiorella P.
ÍNDICE

                                                                                                                                                      Pág.

I. INTRODUCCIÓN ................................................................................................................................ 1

    1.1 Antecedentes.............................................................................................................................. 4

    1.2 Justificación del Problema .......................................................................................................... 5

    1.3 Problema .................................................................................................................................... 6

    1.4 Hipótesis ..................................................................................................................................... 6

    1.5 Objetivos: Generales y Específicos ............................................................................................ 7


II. METODOLOGÍA ................................................................................................................................ 8

    2.1 Tipo de Investigación ................................................................................................................... 8

    2.2 Diseño de Investigación ............................................................................................................... 8

    2.3 Población – Muestra .................................................................................................................... 10

         2.3.1      Población .......................................................................................................................... 10

         2.3.2      Muestra: Mostrando el cálculo del tamaño de la muestra y los criterios de

                   inclusión y exclusión para la muestra................................................................................. 10

    2.4 Unidad de Análisis ....................................................................................................................... 11

    2.5 Descripción de las variables ........................................................................................................ 11

    2.6 Operacionalización de las variables ............................................................................................ 12

    2.7 Métodos, técnicas e instrumentos ............................................................................................... 13

           2.7.1 Método de Análisis de la información.................................................................................. 17



  III. RESULTADOS .................................................................................................................................. 18

    GRÁFICO Nº 01 Concentración promedio de hemoglobina basal, pre y post dieta a base de quinua

    enriquecida con retinol en los 6 ejemplares de rattus rattus variedad albinus, expresado en g/dL ... 18.

    GRÁFICO Nº 02. Concentración promedio de hemoglobina basal, pre y post dieta a base de quinua

    en los 6 ejemplares de rattus rattus variedad albinus, expresado en g/dL. ........................................ 19
TABLA Nº01 Resultados de pruebas estadísticas comparativas obtenidos con el SPSS ............ 20

 TABLA Nº 02 Prueba estadística para comparación de medias: Quinua (µ1) Quinua + Retinol (µ2)20

IV. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN ................................................................................................................. 21

V. CONCLUSIONES .............................................................................................................................. 26

   5.1.- Conclusiones ........................................................................................................................... 26

VI. SUGERENCIAS ............................................................................................................................... .27

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ............................................................................................... 28

VIII. ANEXOS.
RESUMEN



En el presente trabajo de investigación de tipo experimental, se buscó determinar el “Efecto de una dieta

a base de Chenopodium Quinoa (Quinua) y Retinol, sobre la concentración de hemoglobina en Rattus

rattus variedad Albinus con anemia inducida”, se trabajó con 12 ejemplares divididos en dos grupos

experimentales ; se les midió la hemoglobina basal, antes de administrar el tratamiento experimental

teniendo como promedio de 11.89 g/dL para el grupo experimental que recibió una dieta a base de

Chenopodium quinoa “Quinua” enriquecida con retinol y de 13.38 g/dL para el grupo que recibió la dieta a

base de Chenopodium quinoa “Quinua” .



Luego se procedió a inducir a la anemia a ambos grupos, con una dieta deficiente en hierro y retinol a

base de arroz, choclo, maíz morado y col, obteniéndose valores de hemoglobina promedio de 7.84 g/dL

de hemoglobina para el grupo experimental que recibió una dieta a base de Chenopodium quinoa

“Quinua” enriquecida con retinol, 8.34 g/dL para el grupo experimental que recibió una dieta a base de

Chenopodium quinoa “Quinua”.

Posteriormente se procedió a la experimentación administrando 60 gr de harina de quinua y 71.43 mg de

Retinol por 30 días al grupo al primer grupo experimental, y 60gr de harina de quinua al segundo grupo

experimental.   Al finalizar el tratamiento se midió nuevamente la hemoglobina a ambos grupos

obteniéndose valores promedios de 13.53 g/dL para el primer grupo experimental, y 11.52g/dL para el

segundo grupo experimentales.



Se Comparó el efecto del consumo de una dieta a base de Chenopodium quinoa (Quinua) enriquecida

con retinol sobre la concentración de hemoglobina sérica, con la dieta a base de Chenopodium quinoa

“Quinua” en rattus rattus variedad albinus con anemia inducida. Resultó que el efecto de la dieta a base

de quinua enriquecida con retinol es significativamente mayor que cuando se le aplica únicamente la dieta

a base de quinua, con un valor SIG= 0,00106349 y con una diferencia de la concentración de

hemoglobina sérica de 2,01 g/dL.
ABSTRACT




In this work, experimental research, we attempted to determine the "Effect of a diet of

Chenopodium quinoa (quinoa) and Retinol on the concentration of hemoglobin in Rattus rattus

variety Albinus induced anemia", we worked with 12 copies divided into two experimental groups,

was measured in baseline hemoglobin, before administering the experimental treatment with the

average 11.89 g / dL in the experimental group received a diet of Chenopodium quinoa "Quinoa"

enriched with retinol and 13.38 g / dL for the group receiving the diet of Chenopodium quinoa

"Quinoa".



He then proceeded to induce anemia in both groups, with a diet deficient in iron and retinol from

rice, corn, blue corn and cabbage, obtaining average hemoglobin 7.84 g / dL of hemoglobin for

the experimental group received a diet of Chenopodium quinoa "Quinoa" enriched with retinol,

and 8.34g/dL for the experimental group received a diet of Chenopodium quinoa "Quinoa".

After this, experiments by administering 60 grams of quinoa flour and 71.43 mg of retinol for 30

days this group the first experimental group and quinoa flour 60g of the second experimental

group. After treatment hemoglobin was measured again to both groups obtained mean values of

13.53g/ dL for the first experimental group, and 11.52g/dL for the second experimental group.



It compared the effect of consumption of a diet of Chenopodium quinoa (Quinoa) enriched with

retinol on serum hemoglobin concentration, with the diet of Chenopodium quinoa "Quinoa" in

rattus rattus variety albinus induced anemia. It turned out that the effect of the diet of quinoa

enriched with retinol was significantly higher than when applied to only the diet of quinoa, with a

value SIG = 0.00106349 and a difference in serum hemoglobin concentration of 2 , 01 g / dL.
I.- INTRODUCCIÓN

La anemia es el problema nutricional más grave y se extiende a lo largo de todos los países de la

región sin diferenciar estratos socio-económicos, mostrando prevalencias en niñas y niños

menores de 5 años de alrededor del 50%; este promedio es superior en Haití (65.8%) y en

países de la Sub-región Andina (Bolivia 51.6%; Perú 50.4%; y Ecuador 50.2%). (1)


La anemia por deficiencia de hierro es uno de los principales problemas nutricionales del país.

Los resultados de la ENDES 2000 y Continua 2005 nos muestran que a pesar de la reducción,

de 49.6% a 46.2% en niños menores de 5 años y de 31.6% a 28.6% en mujeres en edad fértil, la

prevalencia de anemia se mantiene alta. La anemia en niños es más frecuente en el área rural

(52.8%) que en el área urbana (40.4%).(2)Asimismo, la anemia se presenta a temprana edad

afectando al 63.9% y 71.1% de los niños de 6 a 11 meses y 12 a 23 meses respectivamente,

situación que demanda una atención inmediata por el efecto negativo en el desarrollo temprano.

Por otro lado, de los niños que presentan anemia el 25.4% es leve, 20.1% es moderada y el

0.7% es severa según ENDES Continua 2005. Por región natural, la anemia es más frecuente

entre los niños que residen en la Sierra (54.9%) y Selva (51.3%), prevalencia mayor que en la

Costa (39%). Una mayor prevalencia, de cualquier tipo de anemia, se presenta entre los niños

que pertenecen a los menores quintiles de riqueza (53%), que entre los del quintil superior

(32%).En relación a las mujeres en edad fértil la prevalencia de anemia, también es más alta

en el área rural (31.6%) que en el área urbana (27.1%). Asimismo, de las mujeres en edad

fértil que presentan anemia el 24% es leve, 4.3% es moderada y el 0.3% es severa según el

ENDES Continua 2005. (2)


En el Perú se logró reducir de 19% a 13% los casos de deficiencia subclínica de vitamina A

(Retinol) en niños menores de 5 años, en especial entre la población infantil de las zonas de la

Selva, Trapecio Andino y Lima; la deficiencia de vitamina A en los niños menores de cinco años
se debe al bajo consumo de alimentos de origen animal que son fuente de vitamina A, entre ellos

el hígado, huevos y lácteos fortificados. De igual manera no se consumen muchas verduras y

frutas de color verde oscuro, anaranjado o amarillo intenso como las acelgas, espinacas, brócoli,

mango, papaya, zanahoria, camote, aguaje, zapallo entre otros (3).



La anemia es un trastorno debido a una reducción en el número de eritrocitos, la cantidad de

hemoglobina o ambos, lo que da como resultado una disminución de la capacidad de la sangre

para transportar el oxígeno a los diversos tejidos y recoger el CO2 del organismo humano. La

Organización Mundial de la Salud define a la anemia como un nivel de Hemoglobina sanguínea

menor a 13,0 g/100 ml para varones y menor a 12.0 g/100 ml para las mujeres. Los signos y

síntomas varían con los factores etiológicos, pero los más comunes incluyen palidez, falta de

aire, fatiga, mareo, insomnio y falta de apetito. (4)



La anemia puede deberse a una perdida excesiva de sangre, a un defecto en la formación de la

sangre, defecto que puede ser de origen nutricional debido a la deficiencia de hierro, acido fólico,

vitamina B12, Vitamina C, Vitamina A entre otros o puede deberse a aplasia de médula ósea, el

bazo, hígado, o nódulos linfáticos.   (5)




La hemoglobina es una proteína tetramérica compleja, constituida por dos subunidades de

proteína α y dos subunidades de proteína β y cada subunidad α o β contiene una fracción Hem

conjugada con un hierro divalente; estos polipéptidos se conocen en conjunto como la porción

globulina de la molécula de la Hemoglobina. La porción Hem de la molécula de la hemoglobina

se sintetiza a partir de glicina y succinil coenzima A. Esta proteína tiene la función de transportar

oxígeno en los eritrocitos hacia las células del cuerpo.
El hierro es esencial para la formación de la hemoglobina, el pigmento rojo de la sangre presente

en los eritrocitos. El hierro de la hemoglobina se combina con el oxígeno y lo transporta a través

de la sangre a los órganos del cuerpo. El cuerpo humano contiene entre 3,5 y 4,5 gramos de

hierro, dos tercios del cual están presentes en la hemoglobina. El resto se almacena en el

hígado, el bazo y la médula de los huesos bajo la forma de ferritina y la hemosiderina. Una

cantidad pequeña está presente en forma de mioglobina, que actúa como depósito de oxígeno

en los músculos (6).


El eritrocito maduro deriva de una célula madre pluripotente que se diferencia en células

formadoras de colonias eritroides (CFU-E)y seguidamente a proeritroblastos, las primeras

células de la serie roja morfológicamente diferenciadas. Los proeritroblastos maduran a

normoblastos basófilos y luego a normoblastospolicromáticos en los que se inicia la síntesis de

hemoglobina. Al final del proceso, los normoblastospolicromáticos maduran a normoblastos

ortocromáticos que al perder el núcleo evolucionan a reticulocitos. Finalmente, los reticulocitos

desarrollan en 2-4 días los eritrocitos maduros que permanecen en la sangre durante unos 120

días. (7)


Debido a la necesidad continua de reponer los eritrocitos los nutrientes importantes para la

maduración de éstos son la Vitamina B12 (Cianocobalamina) y el Ácido Fólico (Vit B9), ambas

son esenciales entre otros nutrientes, para la síntesis de ADN por lo que su carencia produce

fallos y anormalidades en la maduración y división nuclear. (8)


Sin embargo la vitamina A juega participa de manera importante en el proceso de crecimiento y

diferenciación de las células de la serie roja Las formas activas de la vitamina A son el retinol, el

retinal y el ácido retinoico (9). No existe como un componente singular, sino más bien en diversas

formas. Tanto el retinol como el ácido retinoico se unen a receptores intracelulares específicos,

que se unen a continuación al ADN y afectan estimulando a la síntesis de proteínas implicadas
en la regulación del crecimiento y diferenciación celular. De ese modo se puede considerar que

   tanto el retinol como el ácido retinoico actúan bajo un mecanismo molecular similar al de las

   hormonas esteroides regulando el crecimiento y la diferenciación en especial de las células

   madres pluripotenciales en las células sanguíneas (9).


   También la carencia de vitamina A puede dar lugar a anemia provocada por la movilización

   defectuosa del hierro almacenado en el hígado, dado que el retinol y/o ácido retinoico son

   necesarios para la síntesis de proteína transportadora de hierro, la transferrina(9).


1.1 Antecedentes



   F. Okonofua realizó      tres estudios en el que se evaluó el efecto de la suplementación con

   vitamina A (Retinol) en los niveles de hemoglobina. Un estudio realizado en Indonesia demostró

   que la suplementación en mujeres anémicas (Hb< 11,0 g/dl) redujo la proporción de

   embarazadas anémicas. Después de la suplementación, la proporción de mujeres que revirtieron

   la anemia en el grupo suplementación con vitamina A fue del 35%, del 68% en el grupo de

   suplementación con hierro, del 97% en el grupo que recibía suplementación con hierro y vitamina

   A (Retinol) en comparación con el 16% que se observó en el grupo placebo. Estos resultados

   sugieren que la combinación de hierro y vitamina A puede resultar más efectiva que sólo hierro o

   sólo vitamina A en el tratamiento de la anemia moderada en el embarazo.



   Dos estudios llevados a cabo en Malawi también investigaron los efectos de la suplementación

   con vitamina A (Retinol) en el tratamiento de la anemia en el embarazo. Sin embargo, este

   estudio comparó la suplementación con vitamina A (Retinol) con el placebo en una cohorte de

   mujeres que ya utilizaban hierro y ácido fólico como parte del cuidado prenatal de rutina, en lugar

   de utilizar el diseño factorial que se empleó en el estudio de Indonesia. No se observaron
diferencias significativas en los niveles de hemoglobina entre las mujeres que recibían

suplementación con vitamina A (Retinol) y los controles. Este estudio también informó altos

índices de pérdidas de seguimiento (10).

Djoko y Muhilal realizaron un estudio en las mujeres embarazadas suplementadas de cuatro

formas diferentes, a) con hierro, b) con vitamina A, c) con hierro y vitamina A y d) con placebo.

Se encontró que la hemoglobina aumentó de 10,8 g/dL a 14,7 g/dL cuando se suplementó con

hierro y vitamina A (Retinol), la anemia se eliminó en 97%, y esta se eliminó en 68% cuando se

utilizó únicamente la suplementación con hierro (11).




Justificación del Problema


Muchos estudios relacionan la deficiencia de Retinol con la anemia, pues, la deficiencia de retinol

perjudica la utilización del hierro, dado que el retinol es necesario para la síntesis de proteína

transportadora de hierro, la transferrina, así como también contribuye de manera importante en

el proceso de la hematopoyesis.(9) El aporte de Vitamina A en la dieta de manera responsable

puede mejorar la condición hematológica de la población especialmente de los grupos más

vulnerables como es el caso de niños, adolescentes y gestantes.      (12).   Es por esta razón que el

presente trabajo de investigación pretende demostrar que Chenopodium quinoa “quinua”, un

alimento con importante contenido en hierro, (13) enriquecida con retinol tiene efectos favorables

en el estado nutricional a través de la concentración de hemoglobina en rattus rattus variedad

Albinus, especie con características fisiológicas y parámetros similares al ser Humano y en la

que se puede tener un mejor control en cuanto al consumo. Los resultados que se obtengan en

este trabajo, en caso de ser corroborados con otras investigaciones, servirán de apoyo a los

nutricionistas y demás profesionales capacitados como una herramienta sumada a todo un plan

para disminuir los porcentajes de anemia orientando a la población del consumo de alimentos
ricos en hierro y retinol o la suplementación de estos micronutrientes de manera conjunta,

especialmente en los grupos más vulnerables como: Los niños(as), preescolares y mujeres

embarazadas.


1.3 Problema



Formulación del problema

¿Cuál es el efecto una dieta a base de Chenopodium quinoa (Quinua) enriquecida con Retinol,

sobre la concentración de hemoglobina sérica en Rattus rattus variedad albinus con anemia

inducida?



1.2 Hipótesis

Se plantean las siguientes Hipótesis:



       Ha: La dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua” enriquecida con Retinol

       incrementa la concentración de hemoglobina sérica en Rattus rattus variedad albinus

       con anemia inducida



       H0: La dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua” enriquecida con Retinol no

       incrementa la concentración de hemoglobina en Rattus rattus variedad albinus con

       anemia inducida.

1.3 Objetivo General:



       Determinar el efecto de una dieta a base Chenopodium quinoa (Quinua) enriquecida con

       Retinol, sobre la concentración de hemoglobina sérica en Rattus rattus variedad albinus

       con anemia inducida.
Objetivos Específicos:

            Comparar la concentración de Hemoglobina en Rattus rattus variedad albinus

            anémicas pre y post dieta a base de Chenopodium quinoa (Quinua) enriquecida con

            Retinol.

            Comparar la concentración de Hemoglobina en Rattus rattus variedad albinus

            anémicas pre y post dieta a base de Chenopodium quinoa (Quinua) sin retinol.

            Comparar el efecto del consumo de una dieta a base de Chenopodium quinoa

            (Quinua) enriquecida con Retinol con la dieta a base de Chenopodium quinoa sobre

            la concentración de hemoglobina en Rattus rattus variedad albinus con anemia

            inducida.




I. METODOLOGÍA



2.1 Tipo de Investigación



El presente trabajo de investigación fue de tipo experimental, explicativo y corte longitudinal

desarrollado en el laboratorio de Bioquímica de la Universidad César Vallejo.



2.2 Diseño de Estudio
Diseño cuasi experimental con dos grupos experimentales




              G1                   X1
                                                          O1




              G2                   X2                     O2



Donde:

   G1: Grupo experimental de Rattus rattus variedad albinus con anemia inducida.

   G2: Grupo experimental de Rattus rattus variedad albinus con anemia inducida.

   X1 Estimulo que consiste en la dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua” enriquecida

         con Retinol

   X2: Estimulo que consiste en la dieta sólo a base de Chenopodium quinoa “Quinua”.

   O1: Medición de la concentración de hemoglobina en los ejemplares de rattus rattus variedad

         albinus del grupo experimental que consumió la dieta a base de Chenopodium quinoa

         “Quinua” enriquecida con Retinol.

   O2: Medición de la concentración de hemoglobina en los ejemplares de rattus rattus variedad

         albinus del grupo comparativo que consumió la dieta sólo a base de Chenopodium

         quinoa “Quinua”.

MATERIALES Y METODOS


Material Biológico
    Harina de Chenopodium Quinoa (Quinua) procedente de Cajamarca.
    Suplemento Vitamínico A (Retinol) con la marca comercial Arovit (Retinol)


Los especímenes de Experimentación.Seutilizaron 12 ejemplares machos de Rattus rattus
variedad Albinus, con edad promedio entre 2 a 4 meses, con peso de 250 a275 g, procedentes del
Bioterio de la Universidad Nacional de la Molina.


Materiales de Laboratorio
Material de Vidrio.
                           Tubos de Ensayo (Kahn)
                           pipetas de 2 y 5 ml (Pirex)
                           Probetas (Pirex)
                           Frasco color caramelo (para el reactivo de trabajo)
                           Desecador
Otros Materiales
                           Bisturí # 23
                           Capilares heparinizados
                           Gradilla de metal
                           Micropipeta
                           Algodón
                           Jeringas de Tuberculina
                           Tubos de reacción de 1.5ml
Reactivos:
                           Cloroformo
                           Agua destilada
                           Alcohol
                           Heparina sódica al 1%
Reactivo para determinar la Hemoglobina.
                           Hemoglobin liquid color (Human)


Equipos de Laboratorio
                           Espectrofotómetro
                           Balanza de 500 g



2.3 POBLACION - MUESTRA

2.3.1 Población
Ejemplares de rattusrattus variedad albinus del Bioterio del Instituto Nacional de Salud, Lima

(INS)



2.3.2 Muestra



Se consideraron a 18 ejemplares de Rattusrattus variedad albinus que cumplan con los criterios

de inclusión

Criterios de inclusión

                              Que presenten peso promedio entre 250 – 275 gr

                              Que tengan edad mayor de 1 mes.

                              Que sean machos



Criterios de exclusión:

                              Que fallezca durante el tratamiento

2.4 Unidad de Análisis



Cada una de los ejemplares de Rattus rattus variedad albinus con anemia inducida que cumplan

con los criterios de inclusión.




2.5 Descripción de la Variables e Indicadores



        V1: Dieta a base de Quinua enriquecida con Retinol–Variable       Independiente.

               Dieta constituida por 60gr de harina de Chenopodium quinoa “Quinua”, variedad

               perlada y enriquecida con 71.43 mg de Retinol (en su forma comercial AROVIT)
siendo disuelta en 80 ml de aceite.



V2: Concentración de Hemoglobina – Variable Dependiente

   Es la medición de hemoglobina expresada en g/dL presente en la sangre de rattus

   rattus variedad albinus, mediante el método de cianmetahemoglobina.
2.6 Definición Operacional



                     DEFINICION       DEFINICION OPERACIONAL             INDICADOR          TIPO DE
   VARIABLE         CONCEPTUAL                                                             VARIABLE


                                                                      1: Dieta a base de
                                          Se administró 60 gr de
                     Alimentación a                                   Chenopodium
                                       Chenopodium quinoa a los
 Dieta a base de                                                      quinoa “Quinua”
                        base de        ejemplares de Rattus rattus
                                                                      Y Retinol.
  Chenopodium                         variedad albinus con anemia.
                     Chenopodium
                                            De acuerdo a los
quinoa “Quinua”
                    quinoa “Quinua”   requerimientos de hierro en
    Y Retinol                          relación al peso del animal.                        Cualitativa
                       Y Retinol
                                                                                            Nominal
                                      También se enriqueció la
                                                                        2: Dieta a base
                                      dieta con 71.43 mg de
                                                                       unicamente de
                                      Retinol disuelta en 80 mL
                                                                        Chenopodium
                                      aceite.
                                                                       quinoa “Quinua”.




                                      Se cuantificó la concentración
                     Cantidad de       de la hemoglobina tomando
Concentración de     Hemoglobina       como base las absorbancias Concentración: g/dL      Cuantitativa
  hemoglobina       presente en un    de la reacción de las muestras                        Continua
                       volumen          con el reactivo Hemoglobin
                    determinado de    Liquid Color y transformadas
                        sangre.       en unidades de concentración
2.7 Métodos, técnicas e instrumentos de recolección de datos

     En la presente investigación cuasi experimental, se utilizó el método de la

     Cianmetahemoglobina que mide la hemoglobina total, para la determinación de la

     hemoglobina en sangre de rattus rattus variedad albinus. Este método se basa en que la

     hemoglobina de la muestra de sangre es liberada de los eritrocitos, y es oxidada por el

     hexocianoferrato de potasio (III) formando metahemoglobina. Esta reacción con el

     cianuro forma cianmetahemoglobina un cromógeno pardo que evidencia la presencia de

     hemoglobina, cuya concentración se obtiene en base a la medición de la absorbancia

     indicada por el espectrofotómetro. (14).



     La determinación de hemoglobina se realizó en los ejemplares Rattus rattus variedad

     albinus de los grupos experimentales, al inicio del experimento con una medición basal,

     la segunda medición se realizó 30 días después de la inducción a anemia y la última 45

     días después de la administración de las dietas experimentales.



     El trabajo cuasi experimental consistió en administrar, a los ejemplares de rattus rattus

     con anemia inducida, una dieta a base de quinua enriquecida con retinol presente en la

     forma comercial de Arovit (Laboratorio Bayer) durante 45 días al primer grupo

     experimental y medir su efecto sobre la concentración de hemoglobina en sangre; al

     segundo grupo experimental se le administró una dieta a base únicamente de

     Chenopodium quinoa “Quinua” durante 45 días, y posteriormente medir su efecto sobre

     la concentración de hemoglobina en sangre.



     Selección de ejemplares de Rattus rattus variedad albinus
Se seleccionaron 12 ejemplares de Rattus rattus variedad albinus procedentes del

     bioterio del Instituto Nacional de Salud (INS) de la ciudad de Lima y presentaban

     como características una edad entre 2 a 4 meses y 250 – 275 gr. de peso. Dichos

     ejemplares se clasificaron en dos grupos: grupo experimental que recibió dieta a

     base de quinua enriquecida con retinol y grupo experimental que recibió dieta a

     base solo de quinua.



A. Inducción de anemia en Rattus rattus variedad albinus.



     Para inducir a un estado de Anemia a los 12 ejemplares de Rattus rattus variedad

     albinus, se les sometió a una dieta deficiente en hierro y Vitamina A la cual

     estuvo compuesta por arroz con cáscara 20gr., choclo verde 20gr., hojas de col

     2gr., maíz morado 18 gr. (Ver anexo , tabla de composición de esos productos)



     Todos los ejemplares de rattus rattus variedad albinus se sometieron con esta

     dieta durante 30 días para provocar estados anémicos en ellos con contenido de

     hemoglobina en sangre menores de 11 g/dL determinado por el método de la

     cianmetahemoglobina.




     Una vez alcanzado el estado de anemia, las ratas fueron distribuidas al azar en 2

     grupos experimentales, cada uno con 6 ejemplares: El primer grupo experimental

     recibió por 45 días una dieta de 60 gr de Chenopodium quinoa “Quinua” (6.54 mg

     de Hierro aprox.) enriquecida con 71.43 mg de retinol disuelta en 80 mL de aceite.
Para ello elaboramos galletas de harina quinua utilizando como ingredientes:

     Harina de quinua, aceite, agua, azúcar y retinol. (Ver anexo 4.2)

     El segundo grupo experimental recibió una dieta a base sólo de 60 gr. de harina

     de Chenopodium quinoa “Quinua” (6.54 mg de Hierro aprox.) en forma de galletas

     elaboradas siguiendo el proceso anterior con la diferencia de que en este caso no

     se utilizó el retinol como ingrediente.



B. Determinación de la concentración de Hemoglobina en los ejemplares Rattus

   rattus variedad albinus



     Previo a la tomas de muestras sanguíneas se realizó la sedación en un desecador

     que contuvo algodones húmedos con cloroformo, colocando por 2 minutos a cada

     uno de los ejemplares en estudio.



     Se extrajeron aproximadamente 0.5 ml de sangre a cada ejemplar a nivel de la

     punta de la cola, con la ayuda de un bisturí haciendo un corte, acercando el capilar

     de heparina para recolectar la muestra de sangre. Al finalizar con la extracción de

     la muestra de sangre se desinfectó con alcohol la punta de la cola de cada

     ejemplar y se les llevó a un lugar ventilado para su pronta recuperación.

     La sangre obtenida de cada ejemplar se recolectó en tubos de reacción rotulados

     de acuerdo a su grupo y listo para la aplicación de la reacción por el método

     Cianmetahemoglobina.

     Se midió 5 uL de sangre de las muestras recolectadas de cada ejemplar y se

     colocaron en tubos de ensayo posteriormente se adicionó 1 ml del reactivo

     Hemoglobin liquid color y, se esperó 3 minutos para que se forme el cromógeno
pardo que evidencia la presencia de hemoglobina.



  Posteriormente se midió las absorbancia de las reacciones dadas en la muestra

  utilizando un espectrofotómetro a una longitud de onda de 505 nm y se obtuvo la

  concentración de la hemoglobina utilizando la siguiente fórmula.


               Concentración de Hemoglobina (g/dl)=29.4 x Absorbancia.




Este procedimiento se desarrolló durante la determinación de la concentración de

hemoglobina en los ejemplares de rattus rattus variedad albinus de los dos grupos

experimentales, para la toma de muestras basal (antes de la inducción a anemia),

post inducción a anemia y post dieta experimental de 45 días. (Ver anexo 4.1)
2.7.1   Método de análisis de la información



             Se realizó la Estadística “t” student, utilizando el programa Excel y el SPSS 15.0,

             para la comparación de los resultados que se obtuvieron de las concentraciones

             de hemoglobina de los grupos experimentales de rattus rattus variedad albinus

             después de la administración de las dietas experimetales. (Ver anexo2)
I.         RESULTADOS:



GRAFICO Nº 01.

CONCENTRACIÓN PROMEDIO DE HEMOGLOBINA BASAL, PRE Y POST DIETA A BASE DE

     QUINUA ENRIQUECIDA CON RETINOL EN LAS 6 RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS,

                                                        EXPRESADO EN g/dL.




                                                                             Concentracion de
                                                                             hemoglobina basal antes
                                                                13.53
                                                                             de la induccion a anemia
         CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA




                                        14.00   11.89                        en rattus rattus variedad
                                                                             albinus, expresado en g/dL
                                        12.00
                                                                             Concentracion de
                                        10.00            7.84                hemoglobina en estado de
                                                                             anemia en rattus rattus
                                         8.00
                                                                             variedad albinus,expresado
                                         6.00                                en g/dL
                                         4.00                                Concentracion de
                                                                             hemoglobina en rattus
                                         2.00                                rattus variedad albinus
                                         0.00                                post dieta de quinua
                                                                             enriquecida con
                                                 PROMEDIO                    retinol, expresado en g/dL


         Fuente: Resultados del experimento
GRAFICO Nº 02.

CONCENTRACIÓN PROMEDIO DE HEMOGLOBINA BASAL, PRE Y POST DIETA A BASE DE

QUINUA EN LOS 6 EJEMPLARES DE RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS, EXPRESADO

                                                             EN g/dL.




                                              13.38                     Concentracion de
      CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA




                                     14.00
                                                                        hemoglobina basal antes de
                                     12.00                   11.52      la induccion a anemia en
                                                                        rattus rattus variedad
                                     10.00                              albinus, expresado en g/dL
                                                      8.34
                                      8.00                              Concentracion de
                                                                        hemoglobina en estado de
                                      6.00                              anemia en rattus rattus
                                                                        variedad albinus, expresado
                                      4.00
                                                                        en g/dL
                                       2.00
                                                                        Concentracion de
                                       0.00                             hemolobina en rattus rattus
                                                                        variedad albinus post dieta
                                                 Promedio               experimental a base de
                                                                        quinua, expresado en g/dL


     Fuente: Resultados del experimento
TABLA Nº 01 RESULTADOS DE PRUEBAS ESTADISTICAS COMPARATIVAS

                       OBTENIDOS CON EL PROGRAMA SPSS (Q vs Q+R)



                                             Número de          Desv.          Diferencias de medias
     DIETAS            HB promedio
                                                ratas            St.                   relacionadas

     QUINUA                 11.52                   6           0.45

    QUINUA +                                                                             2,01 g/dl
                            13.53                   6           0.99
    RETINOL



 TABLA Nº 02 PRUEBA ESTADISTICA PARA COMPARACION DE MEDIAS: QUINUA (µ1) VS

                               QUINUA ENRIQUECIDA CON RETINOL (µ2)




                                                           Región
                 Nivel de.       Estadística de                          Valor crítico
HIPÓTESIS                                               aceptación o                        Decisión
               significancia        prueba                               o calculado
                                                          rechazo


 H 0: µ1-
  µ2=0                                                       Si -
                                                                                         RECHAZAR HO
                 α = 0.05                               2,228≤t0≤2,228    tc = -4,54
                                         1      2
                                  tn 2
                                         S .                                             Y ACEPTAR Ha
 H a: µ1-                                                 ACEPTE H0
                                          dif


  µ2 ≠0
  P= 0,00106349, como es menor que el nivel de significación α=0,05, corresponde rechazar la
hipótesis Ho. Lo que quiere decir que el promedio de la hemoglobina cuando se le aplica quinua
enriquecida con retinol es significativamente mayor que cuando se le aplica la dieta a base
únicamente de quinua.
II.       ANÁLISIS Y DISCUSIÓN



      El propósito de éste trabajo experimental fue reconocer el efecto de una dieta a base de

      Chenopodium Quinoa “Quinua” enriquecida con             retinol, sobre la concentración de

      hemoglobina sérica en rattus rattus variedad albinus con anemia inducida.

      En el grafico Nº01 se observa que los ejemplares de rattus rattus variedad albinus después

      de una dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua” enriquecida con retinol, aumentaron

      su concentración de hemoglobina de 7.84 a 13.53 g/dL, con un valor P= 0,0001877, lo que

      muestra una diferencia significativa en la concentración de hemoglobina después de

      aplicarse la dieta. En el Grafico Nº 02 también se observó un aumento de la concentración

      de hemoglobina en los ejemplares de rattus rattus variedad Albinus con anemia inducida

      después de la dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua” con valores promedio de 8.34

      a 11.52 g/dL, y con un valor P=         0,00000152, esto indica que la concentración de

      hemoglobina es significativamente mayor después de la aplicación de la dieta experimental a

      base únicamente de quinua.

      Sin embargo al comparar los resultados de ambos grupos El valor P= 0,00106349 obtenido

      entre estos indica que existe una diferencia significativa en la concentración de hemoglobina

      cuando se aplica la dieta a base de quinua enriquecida con retinol.

      El hierro inorgánico por acción del ácido clorhídrico del estómago pasa a su forma reducida,

      hierro ferroso (Fe2+),(6) que es la forma química soluble capaz de atravesar la membrana de

      la mucosa intestinal. Aunque el hierro puede absorberse a lo largo de todo el intestino, su

      absorción es más eficiente en el duodeno y la parte alta del yeyuno. La membrana de la

      mucosa intestinal tiene la facilidad de atrapar el hierro y permitir su paso al interior de la

      célula, debido a la existencia de un receptor específico en la membrana del borde en cepillo.

      La apotransferrina del citosol contribuye a aumentar la velocidad y eficiencia de la absorción
de hierro. En el interior del citosol del enterocito, la ceruloplasmina (endoxidasa I) oxida el

hierro ferroso a férrico para que sea captado por la apotransferrina que se transforma en

transferrina a nivel circulatorio. El hierro que excede la capacidad de transporte intracelular

es depositado como ferritina.



El hierro del enterocito ingresa a la circulación de acuerdo con las necesidades, de este

modo, condiciones como la deficiencia de hierro, la anemia, la hipoxia, conllevan un aumento

en la absorción y capacidad de transporte.



El hierro es transportado por la transferrina, una glicoproteína, que posee 2 dominios

homólogos de unión para el hierro férrico (Fe3+). Esta proteína toma el hierro liberado por los

macrófagos producto de la destrucción de los glóbulos rojos o el procedente de la mucosa

intestinal, se ocupa de transportarlo y hacerlo disponible a todos los tejidos que lo requieren.

Se le denomina apotransferrina a la proteína que no contiene hierro, transferrina monoférrica

cuando contiene un átomo de hierro y di férrica cuando contiene 2 átomos. Cuando todos los

sitios de transporte están ocupados se habla de transferrina saturada. En el caso de que

toda la transferrina esté saturada, el hierro que se absorbe no es fijado y se deposita en el

hígado.

Todos los tejidos y células poseen un receptor específico para la transferrina, a través de

cuya expresión en la superficie celular, regulan la captación del hierro de acuerdo con sus

necesidades. El receptor de la transferrina es una glicoproteína constituida por 2

subunidades. Cada subunidad posee un sitio de unión para la transferrina.




El receptor de transferrina desempeña un papel fundamental en el suministro de hierro a la
célula, puesto que la afinidad del receptor por el complejo hierro-transferrina al pH

ligeramente alcalino de la sangre, depende de la carga de hierro de la proteína. La afinidad

máxima se alcanza cuando la transferrina está en su forma diférrica. El complejo hierro-

transferrina-receptor es internalizado en la célula a través de un proceso de endocitosis. El

cambio del pH ligeramente alcalino al pH ácido del endosoma provoca un cambio en la

estabilidad del complejo que ocasiona la disociación espontánea de los átomos de hierro;

por su parte, la transferrina se mantiene unida al receptor hasta que un nuevo cambio de pH,

en sentido contrario, al nivel de la membrana, provoca la ruptura del complejo y la

consiguiente liberación de la transferrina que queda nuevamente disponible para la

captación y transporte del hierro circulante.

Cuando las necesidades de hierro de la célula aumentan, se produce un incremento en la

síntesis de receptores de transferrina y, en el caso contrario, cuando hay un exceso de

hierro, ocurre un aumento de la síntesis de ferritina. (6)

Sin embargo la concentración de Hemoglobina en el grupo experimental que recibió la dieta

a base de Chenopodium quinoa “Quinua” enriquecida con retinol en comparación con la del

grupo experimental que recibió únicamente Chenopodium quinoa “Quinua” tuvo mejores

resultados en la recuperación de la concentración de hemoglobina, existiendo una diferencia

significativa tal como se muestra en la tabla Nº 1 y Nº 2, esto se debe a que el retinol juega

un rol importante en la síntesis de proteína transportadora de hierro, la transferrina, y

receptores de transferrina, de ahí mejoran la movilización del hierro almacenado en el

hígado y el ingreso del hierro a los tejidos eritropoyéticos, además mejoran la absorción del

hierro en el yeyuno/íleon. (9,15).

Sistemáticamente se ha indicado que la deficiencia de vitamina A restringe la liberación de

hierro de los depósitos, dando lugar a la sobrecarga de hierro en la ferritina y, con el tiempo,

a la anemia ante la falta de mayor absorción de hierro       (14)   tal como se pudo observar en la
inducción a anemia a los ejemplares de rattus rattus variedad albinus tratadas con dieta

deficiente en hierro y retinol.

Las funciones sistémicas de la vitamina A incluyen los papeles esenciales de la vitamina en

la diferenciación y el crecimiento de las células epiteliales, en el crecimiento óseo y en el

crecimiento de los tejidos en general. En cada uno de estos papeles la función de la vitamina

A se asemeja a la de una hormona debido a las capacidades del acido retinoico todo trans

para regular la expresión de genes. La diferenciación celular inducida por el ácido retinoico

origina muchas proteínas que se supone son inducidas o activadas por este sistema. (17)


Tanto el retinol como el ácido retinoico se unen a receptores intracelulares específicos, que

se unen a continuación al ADN y afectan estimulando a la síntesis de proteínas implicadas

en la regulación del crecimiento y diferenciación celular. De ese modo se puede considerar

que tanto el retinol como el ácido retinoico actúan bajo un mecanismo molecular similar al

de las hormonas esteroides regulando el crecimiento y la diferenciación celular       (9).   Esto

explicaría por un lado la participación del retinol en la hemopoyesis, como es el caso de la

diferenciación de las células madres pluripotenciales de la medula ósea en las células

sanguíneas.


Por otro lado la acción hormonal del retinol estaría también implicada en la expresión del gen

de la transferrina.


Ensayos controlados en los cuales la suplementación con vitamina A produjo un aumento

significativo del nivel de hemoglobina se han llevado a cabo en varios países. Los mejores

resultados se obtuvieron cuando se usó la ingestión diaria de vitamina A en cantidades

cercanas a los niveles recomendados de ingesta. Los grupos especialmente vulnerables son

los niños pequeños y las mujeres en edad fértil. Estos grupos también están expuestos al

riesgo de deficiencia de vitamina A. (18)
Lo observado en nuestra investigación, a pesar de haberse realizado en ratas de laboratorio,

tiene analogía con los resultados arrojados de la investigación realizada por Djoko y Muhilal

en mujeres embarazadas, encontró que la hemoglobina aumentó de 10,8 g/dL a 14,7 g/dL

cuando se suplementó con hierro y vitamina A (Retinol), la anemia se eliminó en 97%, y esta

se eliminó en 68% cuando se utilizó únicamente la suplementación con hierro         (11).   Estos

resultados sumados a los resultados obtenidos en nuestra investigación, sugieren que la

combinación de hierro y vitamina A puede resultar más efectiva que sólo hierro o sólo

vitamina A en el tratamiento de la anemia.



Suharno evaluó el papel de la suplementación con hierro y vitamina A en el tratamiento de la

anemia a mitad de la gestación. La proporción de mujeres no anémicas fue del 35% en el

grupo vitamina A, 68% en el grupo hierro y 97% en el grupo combinado vitamina A y hierro.

La administración conjunta de vitamina A y hierro originó un aumento promedio de la

concentración de hemoglobina de 1.28 g/dl. La suplementación con hierro incrementó la

ferritina sérica y disminuyó la capacidad total de transporte de hierro. La suplementación con

vitamina A no afectó estas variables. (16)

En nuestro trabajo de investigación los resultados obtenidos con la dieta a base de Quinua y

Retinol, muestran un aumento promedio de la concentración de Hemoglobina de 5.69 g/dL

(Ver anexo 2; tabla Nº03).Lo que corrobora que el Retinol favorece de manera significativa la

absorción y movilización de hierro a las células.
V. CONCLUSIONES



     Una dieta a base Chenopodium quinoa (Quinua) enriquecida con retinol, tiene un efecto

     favorable   incrementando la concentración de hemoglobina sérica en rattus rattus

     variedad albinus con anemia inducida.



     Una dieta a base de Chenopodium quinoa (Quinua) enriquecida con retinol incrementa

     significativamente la concentración de hemoglobina sérica en rattus rattus variedad

     albinus con anemia inducida en comparación con la dieta a base únicamente de

     Chenopodium quinoa “Quinua”, con una diferencia de la concentración de hemoglobina

     sérica de 2,01 g/dL.
VI.   SUGERENCIAS



      o Los nutricionistas deben fomentar en la población sobre todo en los grupos

         vulnerables: niños, adolescentes y gestantes la utilización de la Quinua

         combinada con alimentos ricos en vitamina A en la prevención de la anemia.

      o En nuestro medio existe la Quinua en harina, grano tostado y molido, sugerimos

         la utilización de la Quinua en harina por la facilidad de ser empleada en diversas

         preparaciones sobre todo en postres, favoreciendo la aceptación en los niños.

      o Debería comprobarse si los efectos observados de la dieta de quinua

         enriquecida con retinol, en rattus rattus variedad albinus, son similares en

         humanos.
VII.- REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:



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      de Alimentos. (internet) 2007 junio.(acceso 03 de abril del 2010);3(2).Disponible en:

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   2. Ley aprobadaPlan Nacional Concertado de Salud. Ley 27657 /2007 de 20 de julio.

      Resolución Ministerial N°259 (21-07-2007).Disponible en:

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      Dávila Bolaños” enero- diciembre 2009(monografía de internet) Nicaragua: Ministerio de

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6. Du Defaix H. y Fernández N. Metabolismo del hierro. Rev cubana hematolinmunol

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8. Guyton A y Hall J. Tratado de Fisiología Médica.11a edición. Elsevier España; 2006.

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10. Okonofua F. Suplementación con vitamina A durante el embarazo: Comentario de la

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12. Gómez S. Efecto de la suplementacióndietética en pacientes con anorexia nerviosa:

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13. Instituto Nacional de Salud (Perú) Tablas peruanas de composición de alimentos – 8.ª

     ed. -- Lima: Ministerio de Salud, Instituto Nacional de Salud, 2009.Disponible en:


     www.ins.gob.pe/insvirtual/images/.../Tabla%20de%20Alimentos.pdf
14. Suardíaz J. Cruz C. Colina A. Editores Laboratorio Clínico. La Habana. Ciencias Médicas;

     2004. Disponible en: www.scribd.com/doc/.../lab-oratorio-clinico-y-pruebas-diagnostic-

     as




15. Quiroz P. Relación de la reserva de Hierro y la ingesta de Vitamina A en el rendimiento

    escolar de adolescentes. RENUT 2009 enero –marzo; 3(7):333-344.


16. McLaren, Donald S. Manual de VER Y VIVIR sobre los trastornos por deficiencia de

    vitamina A (VADD)/ Donald S. McLaren y Martin Frigg/ traducido por Organización

    Panamericana de la Salud – Washington, D.C.: OPS, ©2001.160 pp. Disponible en:


    http://www.paho.org/spanish/HPP/HPN/VADD_manual_7.pdf


17. Kathleen M. y Scott S., editores. Nutrición y Dietoterapia de Krause México: Diagráficos

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18. Broek N, Kulier R, Gülmezoglu AM, Villar J. Suplementación con vitamina A durante el

    embarazo. Base de Datos Cochrane de Revisiones Sistemáticas 2002, Issue 4. No.:

    CD001996. DOI: 10.1002/14651858. Disponible en:


    www.apps.who.int/rhl/reviews/CD001996sp.pdf
ANEXOS
ANEXO 1

                  TABLAS DE RESULTADOS DE LA EXPERIMENTACIÓN



TABLA Nº 01.- CONCENTRACIÓN PROMEDIO DE HEMOGLOBINA EN RATTUS RATTUS VARIEDAD

ALBINUS CON DIETA A BASE DE QUINUA Y RETINOL, EXPRESADO EN g/dL, DURANTE BASAL,

POST INDUCCIÓN A ANEMIA Y POST DIETA.




                                         Concentración de hemoglobina (HB) g / dl

          Grupo experimental

                  (Q+R)
                                 Basal        Con anemia        Con anemia inducida

                                                                      Post dieta.

                                     10,8            9                   12,5
                   E1

                   E2                13             7,2                  14,1

                                     13,5           7,8                  14,6
                   E3

                                     11,6           7,17                 13,5
                   E4

                   E5                13,1           8,02                 14,3


                   E6                9,43           7,87                 12,2


              PROMEDIOS             11,89           7,84                13,53

      Fuente: resultados experimentales Trujillo Oct2009.- Ene 2010
TABLA Nº 02. CONCENTRACIÓN PROMEDIO DE HEMOGLOBINA EN RATTUS RATTUS VARIEDAD

ALBINUS CON DIETA A BASE DE QUINUA, EXPRESADO EN g/dL, DURANTE BASAL, POST

INDUCCIÓN A ANEMIA Y POST DIETA.




                                        Concentración de Hemoglobina (HB) g/dL

          Grupo experimental (Q)


                                                 Anemia
                                    Basal
                                                 inducida          Post dieta.

                                        13.7                 8.9                  11.8
                    E1

                                        12.4                 7.7                  10.8
                    E2

                                            16               7.7                  11.2
                    E3

                                        14.7                  9                   11.8
                    E4

                                        11.6                8.23                  11.5
                    E5

                                        11.9                 8.5                   12
                    E6

                                       13.38                8.34                 11.52
                Promedio

           Fuente: resultados experimentales Trujillo Oct2009.- Ene 2010
TABLA Nº 03 COMPARACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA EN EJEMPLARES DE

RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS DE LOS DOS GRUPOS EXPERIMENTALES POST DIETA

EXPERIMENTAL A BASE DE CHENOPODIUM QUINOA ENRIQUECIDA CON RETINOL               Y

EXPERIMENTAL A BASE DE CHENOPODIUM QUINOA “QUINUA”.




                                                                 PROMEDIO DE

                 GRUPOS DE                                      CONCENTRACIÓN

                   TRABAJO                           DE HEMOGLOBINA EN RATTUS

                                                           RATTUS POST DIETA


         GRUPO EXPERIMENTAL (Q+R)                                   13.53

          GRUPO EXPERIMENTAL (Q)                                    11.52

Fuente: resultados experimentales Trujillo Oct2009.- Ene 2010
TABLA Nº 04

Cuadro Comparativo en La Variación de la Concentración de Hemoglobina en los dos Grupos

experimentales Pre y Post Dieta experimental.

                                                                         PROMEDIO

                                                    PROMEDIO          CONCENTRACION

                                                CONCENTRACION DE     DE HEMOGLOBINA
              GRUPOS DE TRABAJO
                                                  HEMOGLOBINA               POST

                                                PRE ADMINISTRACION ADMINISTRACION DE

                                                     DE DIETA               DIETA

         GRUPO EXPERIMENTAL (Q+R)                      7.84                 13.53


           GRUPO COMPARATIVO (Q)                       8.3                  11.52



   Fuente: resultados experimentales Trujillo Oct2009.- Ene 2010
ANEXO 2

                   TABLA Nº 01 RESULTADOS DE PRUEBAS ESTADISTICAS COMPARATIVAS

                                OBTENIDOS CON EL SPSS (Dieta a base de Quinua)

                                                                               Diferencias de

          QUINUA                                 Número de                        medias              Valor “P”

                              HB promedio             ratas        Desv. St.    relacionadas

     HB ANTES                    8.34                      6         0.57
                                                                                  3.178 g/L
                                                                                                    0.00000152
     HB DESPUES                  11.52                     6         0.45

               P = 0,00000152 , como es menor que el nivel de significación
                      α=0,05,corresponde rechazar la hipótesis Ho


         TABLA Nº.02.PRUEBA ESTADISTICA PARA MUESTRAS ANTES Y DESPUÉS (Dieta a base de

                                                               Quinua)




                  Nivel de.        Estadística de                 Región aceptación o         Valor crítico
HIPÓTESIS                                                                                                         Decisión
                significancia         prueba                           rechazo                o calculado

                                            d1        d2
H 0: d1-d2≤0                       tn                          Si -2,571≤t0≤2,571 ACEPTE                      RECHAZAR HO
                   α = 0.05                                                                   tc = -26,182
                                        1
                                                 Sd
                                                                            Ha                                Y ACEPTAR Ha
                                                  n
H a: d1-d2>0



    GRAFICO Nº 01 DIAGRAMA DE CAJAS PARA LA VARIACIÓN DEL HB (QUINUA)
TABLA Nº .03 RESULTADOS DE PRUEBAS

                                                          ESTADISTICAS

                       ESTADÍSTICOS OBTENIDOS CON EL SPSS (QUINUA+ RETINOL)

                                                                                                          Valor “P”
     QUINUA                                     Número de                         Diferencias de medias
                         HB promedio              ratas              Desv. St.         relacionadas
HB ANTES                      7.84                        6              0.67                             0.0001877
                                                                                        5,69 g/dL
HB DESPUES                   13.53                        6              0.99
                      P = 0,0001877, como es menor que el nivel de significación α=0,05,corresponde
                      rechazar la hipótesis Ho

     TABLA Nº 04 PRUEBA ESTADISTICA PARA MUESTRAS ANTES Y DESPUÉS (QUINUA + RETINOL)



    Ser rechaza Ho que significa que existe una diferencia significativa.



                                                                                              Valor
                      Nivel de.        Estadística de             Región aceptación o
     HIPÓTESIS                                                                               crítico o     Decisión
                    significancia         prueba                       rechazo
                                                                                            calculado

     H 0: d1-d2≤0                               d1        d2                                              RECHAZAR
                                       tn                       Si -2,571≤t0≤2,015 ACEPTE
                       α = 0.05                                                             tc = -9,807      HO Y
                                            1
                                                     Sd
                                                                             Ha
                                                      n                                                   ACEPTAR Ha
     H a: d1-d2>0

    GRAFICO Nº 02 DIAGRAMA DE CAJAS PARA LA VARIACIÓN DEL HB (QUINUA+RETINOL)
TABLA Nº 07 RESULTADOS DE PRUEBAS ESTADISTICAS

                                 ESTADÍSTICOS OBTENIDOS CON EL SPSS (Q VS Q+R)

                                                     Número de                    Diferencias de medias

             Dietas            HB promedio               ratas       Desv. St.        relacionadas                  Valor “P”

            QUINUA                   11.52                 6           0.45
                                                                                         2,02 g/dl
        QUINUA +RETINOL              13.53                 6           0.99                                       0.00106349

    P = 0,00106349, es menor que el nivel de significación α=0,05,corresponde
rechazar la hipótesis Ho


                TABLA Nº08.PRUEBA ESTADISTICA PARA COMPARACION DE MEDIAS: QUINUA (µ1) VS

                                                     QUINUA+RETINOL (µ2)


                                                                                              Valor
                     Nivel de.
                                             Estadística de        Región aceptación o       crítico o
          HIPÓTESIS significanci                                                                                 Decisión
                                                prueba                  rechazo              calculad
                         a
                                                                                                 o


            H 0: µ1-                                                                                         RECHAZA
             µ2=0                                                Si -2,228≤t0≤2,228 ACEPTE     tc = -         R HO Y
                          α = 0.05
                                                     1     2
                                              tn 2
                                                     S.
                                                     dif                      Ha                4,54         ACEPTAR
           H a: µ1- µ2                                                                                          Ha
                ≠0

             Se rechaza la igualdad lo que significa que existe una diferencia significativamente mayor sobre la

             concentración de hemoglobina cuando se aplica la dieta a base de quinua enriquecida con retinol.

           GRAFICO Nº04 DIAGRAMA DE CAJAS PARA LA VARIACIÓN DEL HB: QUINUA (µ1) VS QUINUA+RETINOL (µ2)

 12,0                                                                    15,0




 11,8                                                                    14,5




 11,6                                                                    14,0




 11,4                                                                    13,5




 11,2                                                                    13,0




 11,0                                                                    12,5




 10,8                                                                    12,0


                              DESPUESQ                                                               DESPUESQR
ANEXO 3



           TABLA Nº01. COMPOSICION DE LA DIETA DEFICIENTE EN HIERRO Y RETINOL

               PARA 60 gr DE ALIMENTO DE RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS.




  ALIMENTO
               ENERGIA    AGUA    PROTEINAS   GRASAS    CARBOHIDRATOS   CENIZAS   HIERRO   RETINOL

                (Kcal.)    g.        g.          g.          g.           g.       mg.      (ug)


 ARROZ CON
                  65      2.38      1.18        0.4         15.14         0.9       -         -
  CASCARA

    20gr

HOJAS DE COL

    2gr           3        1.8      0.05        0.01        0.15         0.02      0.00      0.1

MAIZ MORADO

    18gr          64      2.05      1.31        0.61        13.71         0.3      0.04      1.44

CHOCLO VERDE

    20gr          23      13.46     0.66        0.16        5.56         0.16      0.16       -
ANEXO 4
       IMÁGENES DE LA EXPERIMENTACIÓN CON RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS




FIG 1: EXTRACCION DE LA JAULA DE LAS ESPECIES

                                                         FIG 2: SEDACION CON CLOROFORMO




                            FIG 3: CORTE DE LA COLA UTILIZANDO BISTURI
IMÁGENES DE LA EXPERIMENTACIÓN CON RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS




            FIG 4: USO DE CAPILARES HEPARINIZADOS PARA EXTRACCIÓN DE MUESTRA DE SANGRE




                                                      FIG 6: EXPONEMOS A LA MUESTRA AL
                                                     REACTIVO HEMOGLOBIN LIQUID COLOR




FIG 5: USO DE LA MICROPIPETA PARA
     EXTRAER 5ug. DE SANGRE
IMÁGENES DE LA EXPERIMENTACIÓN CON RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS




                   FIG 7: SE COLOCA LA MUESTRA + EL
                       REACTIVO EN UNA CUBETA




                 FIG 8: SE COLOCA LA CUBETA EN EL
                ESPECTOFOMETRO PARA LA MEDICION
IMÁGENES DE                                       LA PREPARACION DE LA
                  DIETA A BASE DE QUINUA Y RETINOL
FIG 1: QUINUA PREVIAMENTE REMOJADA EN
         AGUA Y PUESTA A SECAR




                                                       FIG 2: SE PROCEDE A MOLER LA QUINUA




                                                               FIG 3: QUINUA MOLIDA EN HARINA




        IMÁGENES DE LA PREPARACION DE LA DIETA A BASE DE QUINUA Y RETINOL


                   FIG 4: AMAZAR LA QUINUA CON AGUA, ACEITE Y AZUCAR.
FIG 5: SE LE ADICIONA A LA MASA EL RETINOL EN SU
            FORMA COMERCIAL AROVIT.




          FIG 6: SE PROCEDE A ESTIRAR LA MASA CON LA AYUDA DE
                               UN RODILLO
IMÁGENES DE LA PREPARACIÓN DE LA DIETA A BASE DE QUINUA Y RETINOL




                                                    FIG 7: SE COLOCAN TROZOS DE LA MASA EN UNA FUENTE
                                                                PARA SER LLEVADA A HORNEAR




FIG 8: GALLETAS DE QUINUA CON RETINOL SALIDAS DEL
                      HORNO.




                                                             FIG 9: A DEGUSTAR..!!!!

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Efecto de una dieta a base de chenopodium quinoa “quinua” enriquecida con retinol, sobre la concentración de hemoglobina sérica en rattus rattus

  • 1. UNIVERSIDAD CÉSAR VALLEJO FACULTAD CIENCIAS MÉDICAS ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICIÓN “EFECTO DE UNA DIETA A BASE DE CHENOPODIUM QUINOA “QUINUA” ENRIQUECIDA CON RETINOL, SOBRE LA CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA SÉRICA EN RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS CON ANEMIA INDUCIDA” TESIS PARA OPTAR POR EL TITULO PROFESIONAL DE LICENCIADA EN NUTRICIÓN AUTORAS: LILIANA MARISOL, GARCIA CRIOLLO FIORELLA PARTICIA, VILLAR BIFFI ASESOR: Ms. C JORGE LUIS, DIAZ ORTEGA TRUJILLO, JULIO 2010.
  • 2. MIEMBROS DEL JURADO Dr. Olivera Bocangelino, Gerónimo Presidente Dr. Correa Arangoitia, Alejandro Secretario Lic. Rodríguez Hidalgo, Lilia Vocal
  • 3. AGRADECIMIENTOS Agradecemos de manera especial al Profesor Jorge Luis Díaz Ortega, por permitir que ésta Tesis se desarrolle bajo su dirección. Su apoyo y confianza en nuestro trabajo y su capacidad para orientar nuestras ideas, han sido un aporte invaluable, no sólo en el desarrollo de la Tesis sino también en nuestra formación como investigadoras. Agradecemos también a nuestro pilar académico, la Escuela Profesional de Nutrición, dirigida por la Mg. Nut. María Esther Amaya de Ronquillo, a quién agradecemos su apoyo incondicional para la elaboración de éste proyecto, a la Mg. Nut. Zoila Mosqueira Figueroa, por el aprecio demostrado a lo largo de nuestra vida universitaria. Un agradecimiento muy especial a nuestras familias, por su apoyo, confianza y colaboración para llevar a cabo éste proyecto que hoy culminamos satisfactoriamente. A nuestros Padres y Hermanos por su ejemplo de capacidad, honestidad y superación. Por Ellos y para Ellos…!!! Liliana Marisol García Criollo Fiorella Patricia Villar Biffi
  • 4. DEDICATORIA Durante éstos años de lucha constante, de gratas vivencias, de momentos de éxito y también de angustias, para poder cumplir mis objetivos y poder alcanzar mis mas grandes anhelos, culminar mi carrera, los deseos de superarme y lograr mi meta eran tan grandes que logré vencer los obstáculos y es por ello que debo dedicar éste triunfo a quienes en todo momento me llenaron de amor y apoyo, y que sobre todo me brindaron su amistad: A toda mi familia, a mis padres Roberto y Graciela, quienes me han enseñado valores, principios, perseverancia y empeño para el logro de mis metas y mis sueños. A mis hermanos Jessica, Roberto y Geovanni, quienes me han brindado todo el apoyo, su amistad incondicional y el ejemplo de fortaleza para culminar exitosamente éste proyecto académico. A mis angelitos Elvira, Rodrigo, Ariana, Gonzalo y Fabio, quienes quizá sin saberlo me dan el aliento para continuar luchando, gracias por compartir momentos maravillosos en mi vida, gracias por sus risas y ocurrencias que me cautivan día a día.
  • 5. A mi motivo, quién con una gran dosis de Tolerancia y Respeto me enseñó el significado de algo muy valioso: El Amor A Dios por llenar mi vida de dicha, felicidad y permitir que la comparta con mis seres amados A mis abuelos: Eduardo y Ayelá, guárdalos en tu gloria. Fiorella Patricia Villar Biffi
  • 6. Al Creador De Todas Las Cosas Por su fidelidad, por amarme con amor eterno, por darme una nueva oportunidad cada día. Gracias porque en tu santa voluntad haces tuyos mis sueños...y éste es uno de ellos. A Luz y a Pedro, Mis Padres Por dejar que Dios sea Dios en sus vidas, por permitir que El lime sus limitaciones humanas para forjar en mí un espíritu correcto, esforzado y valiente. A Ceci, María y Pedro, Mis hermanos Por alegrar mi vida, soportar mis locuras, temperamento, y sobre todo las ausencias forzadas en los momentos más significativos de sus vidas. A mi familia y amigos Aquellos que me incentivaron cuando el camino se ponía borrascoso y me recordaron que se puede tener paz en medio de la tormenta. Liliana Marisol García Criollo
  • 7. PRESENTACION Señores miembros del jurado calificador Cumpliendo con las disposiciones vigentes emanadas por el Reglamento de Grados y Títulos de la Universidad César Vallejo, Facultad de Ciencias Médicas, Escuela Profesional de Nutrición, sometemos a vuestro criterio profesional la evaluación del presente trabajo de investigación titulado “Efecto de una dieta a base de Chenopodium Quinoa “Quinua” enriquecida con Retinol, sobre la concentración de hemoglobina sérica en Rattus rattus variedad albinus con anemia inducida”, elaborado con el propósito de obtener el título profesional de Licenciado en Nutrición. El presente estudio tuvo como objetivo Determinar el efecto de una dieta a base Chenopodium quinoa (Quinua) enriquecida con Retinol, sobre la concentración de hemoglobina sérica en Rattus rattus variedad albinus con anemia inducida. Con la convicción de que se le otorgará el valor justo y mostrando apertura a sus observaciones, le agradecemos por anticipado por las sugerencias y apreciaciones que se brinden a la investigación. Trujillo, 16 de Julio del 2010 Br. García Criollo, Liliana M. Br. Villar Biffi, Fiorella P.
  • 8. ÍNDICE Pág. I. INTRODUCCIÓN ................................................................................................................................ 1 1.1 Antecedentes.............................................................................................................................. 4 1.2 Justificación del Problema .......................................................................................................... 5 1.3 Problema .................................................................................................................................... 6 1.4 Hipótesis ..................................................................................................................................... 6 1.5 Objetivos: Generales y Específicos ............................................................................................ 7 II. METODOLOGÍA ................................................................................................................................ 8 2.1 Tipo de Investigación ................................................................................................................... 8 2.2 Diseño de Investigación ............................................................................................................... 8 2.3 Población – Muestra .................................................................................................................... 10 2.3.1 Población .......................................................................................................................... 10 2.3.2 Muestra: Mostrando el cálculo del tamaño de la muestra y los criterios de inclusión y exclusión para la muestra................................................................................. 10 2.4 Unidad de Análisis ....................................................................................................................... 11 2.5 Descripción de las variables ........................................................................................................ 11 2.6 Operacionalización de las variables ............................................................................................ 12 2.7 Métodos, técnicas e instrumentos ............................................................................................... 13 2.7.1 Método de Análisis de la información.................................................................................. 17 III. RESULTADOS .................................................................................................................................. 18 GRÁFICO Nº 01 Concentración promedio de hemoglobina basal, pre y post dieta a base de quinua enriquecida con retinol en los 6 ejemplares de rattus rattus variedad albinus, expresado en g/dL ... 18. GRÁFICO Nº 02. Concentración promedio de hemoglobina basal, pre y post dieta a base de quinua en los 6 ejemplares de rattus rattus variedad albinus, expresado en g/dL. ........................................ 19
  • 9. TABLA Nº01 Resultados de pruebas estadísticas comparativas obtenidos con el SPSS ............ 20 TABLA Nº 02 Prueba estadística para comparación de medias: Quinua (µ1) Quinua + Retinol (µ2)20 IV. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN ................................................................................................................. 21 V. CONCLUSIONES .............................................................................................................................. 26 5.1.- Conclusiones ........................................................................................................................... 26 VI. SUGERENCIAS ............................................................................................................................... .27 VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ............................................................................................... 28 VIII. ANEXOS.
  • 10. RESUMEN En el presente trabajo de investigación de tipo experimental, se buscó determinar el “Efecto de una dieta a base de Chenopodium Quinoa (Quinua) y Retinol, sobre la concentración de hemoglobina en Rattus rattus variedad Albinus con anemia inducida”, se trabajó con 12 ejemplares divididos en dos grupos experimentales ; se les midió la hemoglobina basal, antes de administrar el tratamiento experimental teniendo como promedio de 11.89 g/dL para el grupo experimental que recibió una dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua” enriquecida con retinol y de 13.38 g/dL para el grupo que recibió la dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua” . Luego se procedió a inducir a la anemia a ambos grupos, con una dieta deficiente en hierro y retinol a base de arroz, choclo, maíz morado y col, obteniéndose valores de hemoglobina promedio de 7.84 g/dL de hemoglobina para el grupo experimental que recibió una dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua” enriquecida con retinol, 8.34 g/dL para el grupo experimental que recibió una dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua”. Posteriormente se procedió a la experimentación administrando 60 gr de harina de quinua y 71.43 mg de Retinol por 30 días al grupo al primer grupo experimental, y 60gr de harina de quinua al segundo grupo experimental. Al finalizar el tratamiento se midió nuevamente la hemoglobina a ambos grupos obteniéndose valores promedios de 13.53 g/dL para el primer grupo experimental, y 11.52g/dL para el segundo grupo experimentales. Se Comparó el efecto del consumo de una dieta a base de Chenopodium quinoa (Quinua) enriquecida con retinol sobre la concentración de hemoglobina sérica, con la dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua” en rattus rattus variedad albinus con anemia inducida. Resultó que el efecto de la dieta a base de quinua enriquecida con retinol es significativamente mayor que cuando se le aplica únicamente la dieta a base de quinua, con un valor SIG= 0,00106349 y con una diferencia de la concentración de hemoglobina sérica de 2,01 g/dL.
  • 11. ABSTRACT In this work, experimental research, we attempted to determine the "Effect of a diet of Chenopodium quinoa (quinoa) and Retinol on the concentration of hemoglobin in Rattus rattus variety Albinus induced anemia", we worked with 12 copies divided into two experimental groups, was measured in baseline hemoglobin, before administering the experimental treatment with the average 11.89 g / dL in the experimental group received a diet of Chenopodium quinoa "Quinoa" enriched with retinol and 13.38 g / dL for the group receiving the diet of Chenopodium quinoa "Quinoa". He then proceeded to induce anemia in both groups, with a diet deficient in iron and retinol from rice, corn, blue corn and cabbage, obtaining average hemoglobin 7.84 g / dL of hemoglobin for the experimental group received a diet of Chenopodium quinoa "Quinoa" enriched with retinol, and 8.34g/dL for the experimental group received a diet of Chenopodium quinoa "Quinoa". After this, experiments by administering 60 grams of quinoa flour and 71.43 mg of retinol for 30 days this group the first experimental group and quinoa flour 60g of the second experimental group. After treatment hemoglobin was measured again to both groups obtained mean values of 13.53g/ dL for the first experimental group, and 11.52g/dL for the second experimental group. It compared the effect of consumption of a diet of Chenopodium quinoa (Quinoa) enriched with retinol on serum hemoglobin concentration, with the diet of Chenopodium quinoa "Quinoa" in rattus rattus variety albinus induced anemia. It turned out that the effect of the diet of quinoa enriched with retinol was significantly higher than when applied to only the diet of quinoa, with a value SIG = 0.00106349 and a difference in serum hemoglobin concentration of 2 , 01 g / dL.
  • 12. I.- INTRODUCCIÓN La anemia es el problema nutricional más grave y se extiende a lo largo de todos los países de la región sin diferenciar estratos socio-económicos, mostrando prevalencias en niñas y niños menores de 5 años de alrededor del 50%; este promedio es superior en Haití (65.8%) y en países de la Sub-región Andina (Bolivia 51.6%; Perú 50.4%; y Ecuador 50.2%). (1) La anemia por deficiencia de hierro es uno de los principales problemas nutricionales del país. Los resultados de la ENDES 2000 y Continua 2005 nos muestran que a pesar de la reducción, de 49.6% a 46.2% en niños menores de 5 años y de 31.6% a 28.6% en mujeres en edad fértil, la prevalencia de anemia se mantiene alta. La anemia en niños es más frecuente en el área rural (52.8%) que en el área urbana (40.4%).(2)Asimismo, la anemia se presenta a temprana edad afectando al 63.9% y 71.1% de los niños de 6 a 11 meses y 12 a 23 meses respectivamente, situación que demanda una atención inmediata por el efecto negativo en el desarrollo temprano. Por otro lado, de los niños que presentan anemia el 25.4% es leve, 20.1% es moderada y el 0.7% es severa según ENDES Continua 2005. Por región natural, la anemia es más frecuente entre los niños que residen en la Sierra (54.9%) y Selva (51.3%), prevalencia mayor que en la Costa (39%). Una mayor prevalencia, de cualquier tipo de anemia, se presenta entre los niños que pertenecen a los menores quintiles de riqueza (53%), que entre los del quintil superior (32%).En relación a las mujeres en edad fértil la prevalencia de anemia, también es más alta en el área rural (31.6%) que en el área urbana (27.1%). Asimismo, de las mujeres en edad fértil que presentan anemia el 24% es leve, 4.3% es moderada y el 0.3% es severa según el ENDES Continua 2005. (2) En el Perú se logró reducir de 19% a 13% los casos de deficiencia subclínica de vitamina A (Retinol) en niños menores de 5 años, en especial entre la población infantil de las zonas de la Selva, Trapecio Andino y Lima; la deficiencia de vitamina A en los niños menores de cinco años
  • 13. se debe al bajo consumo de alimentos de origen animal que son fuente de vitamina A, entre ellos el hígado, huevos y lácteos fortificados. De igual manera no se consumen muchas verduras y frutas de color verde oscuro, anaranjado o amarillo intenso como las acelgas, espinacas, brócoli, mango, papaya, zanahoria, camote, aguaje, zapallo entre otros (3). La anemia es un trastorno debido a una reducción en el número de eritrocitos, la cantidad de hemoglobina o ambos, lo que da como resultado una disminución de la capacidad de la sangre para transportar el oxígeno a los diversos tejidos y recoger el CO2 del organismo humano. La Organización Mundial de la Salud define a la anemia como un nivel de Hemoglobina sanguínea menor a 13,0 g/100 ml para varones y menor a 12.0 g/100 ml para las mujeres. Los signos y síntomas varían con los factores etiológicos, pero los más comunes incluyen palidez, falta de aire, fatiga, mareo, insomnio y falta de apetito. (4) La anemia puede deberse a una perdida excesiva de sangre, a un defecto en la formación de la sangre, defecto que puede ser de origen nutricional debido a la deficiencia de hierro, acido fólico, vitamina B12, Vitamina C, Vitamina A entre otros o puede deberse a aplasia de médula ósea, el bazo, hígado, o nódulos linfáticos. (5) La hemoglobina es una proteína tetramérica compleja, constituida por dos subunidades de proteína α y dos subunidades de proteína β y cada subunidad α o β contiene una fracción Hem conjugada con un hierro divalente; estos polipéptidos se conocen en conjunto como la porción globulina de la molécula de la Hemoglobina. La porción Hem de la molécula de la hemoglobina se sintetiza a partir de glicina y succinil coenzima A. Esta proteína tiene la función de transportar oxígeno en los eritrocitos hacia las células del cuerpo.
  • 14. El hierro es esencial para la formación de la hemoglobina, el pigmento rojo de la sangre presente en los eritrocitos. El hierro de la hemoglobina se combina con el oxígeno y lo transporta a través de la sangre a los órganos del cuerpo. El cuerpo humano contiene entre 3,5 y 4,5 gramos de hierro, dos tercios del cual están presentes en la hemoglobina. El resto se almacena en el hígado, el bazo y la médula de los huesos bajo la forma de ferritina y la hemosiderina. Una cantidad pequeña está presente en forma de mioglobina, que actúa como depósito de oxígeno en los músculos (6). El eritrocito maduro deriva de una célula madre pluripotente que se diferencia en células formadoras de colonias eritroides (CFU-E)y seguidamente a proeritroblastos, las primeras células de la serie roja morfológicamente diferenciadas. Los proeritroblastos maduran a normoblastos basófilos y luego a normoblastospolicromáticos en los que se inicia la síntesis de hemoglobina. Al final del proceso, los normoblastospolicromáticos maduran a normoblastos ortocromáticos que al perder el núcleo evolucionan a reticulocitos. Finalmente, los reticulocitos desarrollan en 2-4 días los eritrocitos maduros que permanecen en la sangre durante unos 120 días. (7) Debido a la necesidad continua de reponer los eritrocitos los nutrientes importantes para la maduración de éstos son la Vitamina B12 (Cianocobalamina) y el Ácido Fólico (Vit B9), ambas son esenciales entre otros nutrientes, para la síntesis de ADN por lo que su carencia produce fallos y anormalidades en la maduración y división nuclear. (8) Sin embargo la vitamina A juega participa de manera importante en el proceso de crecimiento y diferenciación de las células de la serie roja Las formas activas de la vitamina A son el retinol, el retinal y el ácido retinoico (9). No existe como un componente singular, sino más bien en diversas formas. Tanto el retinol como el ácido retinoico se unen a receptores intracelulares específicos, que se unen a continuación al ADN y afectan estimulando a la síntesis de proteínas implicadas
  • 15. en la regulación del crecimiento y diferenciación celular. De ese modo se puede considerar que tanto el retinol como el ácido retinoico actúan bajo un mecanismo molecular similar al de las hormonas esteroides regulando el crecimiento y la diferenciación en especial de las células madres pluripotenciales en las células sanguíneas (9). También la carencia de vitamina A puede dar lugar a anemia provocada por la movilización defectuosa del hierro almacenado en el hígado, dado que el retinol y/o ácido retinoico son necesarios para la síntesis de proteína transportadora de hierro, la transferrina(9). 1.1 Antecedentes F. Okonofua realizó tres estudios en el que se evaluó el efecto de la suplementación con vitamina A (Retinol) en los niveles de hemoglobina. Un estudio realizado en Indonesia demostró que la suplementación en mujeres anémicas (Hb< 11,0 g/dl) redujo la proporción de embarazadas anémicas. Después de la suplementación, la proporción de mujeres que revirtieron la anemia en el grupo suplementación con vitamina A fue del 35%, del 68% en el grupo de suplementación con hierro, del 97% en el grupo que recibía suplementación con hierro y vitamina A (Retinol) en comparación con el 16% que se observó en el grupo placebo. Estos resultados sugieren que la combinación de hierro y vitamina A puede resultar más efectiva que sólo hierro o sólo vitamina A en el tratamiento de la anemia moderada en el embarazo. Dos estudios llevados a cabo en Malawi también investigaron los efectos de la suplementación con vitamina A (Retinol) en el tratamiento de la anemia en el embarazo. Sin embargo, este estudio comparó la suplementación con vitamina A (Retinol) con el placebo en una cohorte de mujeres que ya utilizaban hierro y ácido fólico como parte del cuidado prenatal de rutina, en lugar de utilizar el diseño factorial que se empleó en el estudio de Indonesia. No se observaron
  • 16. diferencias significativas en los niveles de hemoglobina entre las mujeres que recibían suplementación con vitamina A (Retinol) y los controles. Este estudio también informó altos índices de pérdidas de seguimiento (10). Djoko y Muhilal realizaron un estudio en las mujeres embarazadas suplementadas de cuatro formas diferentes, a) con hierro, b) con vitamina A, c) con hierro y vitamina A y d) con placebo. Se encontró que la hemoglobina aumentó de 10,8 g/dL a 14,7 g/dL cuando se suplementó con hierro y vitamina A (Retinol), la anemia se eliminó en 97%, y esta se eliminó en 68% cuando se utilizó únicamente la suplementación con hierro (11). Justificación del Problema Muchos estudios relacionan la deficiencia de Retinol con la anemia, pues, la deficiencia de retinol perjudica la utilización del hierro, dado que el retinol es necesario para la síntesis de proteína transportadora de hierro, la transferrina, así como también contribuye de manera importante en el proceso de la hematopoyesis.(9) El aporte de Vitamina A en la dieta de manera responsable puede mejorar la condición hematológica de la población especialmente de los grupos más vulnerables como es el caso de niños, adolescentes y gestantes. (12). Es por esta razón que el presente trabajo de investigación pretende demostrar que Chenopodium quinoa “quinua”, un alimento con importante contenido en hierro, (13) enriquecida con retinol tiene efectos favorables en el estado nutricional a través de la concentración de hemoglobina en rattus rattus variedad Albinus, especie con características fisiológicas y parámetros similares al ser Humano y en la que se puede tener un mejor control en cuanto al consumo. Los resultados que se obtengan en este trabajo, en caso de ser corroborados con otras investigaciones, servirán de apoyo a los nutricionistas y demás profesionales capacitados como una herramienta sumada a todo un plan para disminuir los porcentajes de anemia orientando a la población del consumo de alimentos
  • 17. ricos en hierro y retinol o la suplementación de estos micronutrientes de manera conjunta, especialmente en los grupos más vulnerables como: Los niños(as), preescolares y mujeres embarazadas. 1.3 Problema Formulación del problema ¿Cuál es el efecto una dieta a base de Chenopodium quinoa (Quinua) enriquecida con Retinol, sobre la concentración de hemoglobina sérica en Rattus rattus variedad albinus con anemia inducida? 1.2 Hipótesis Se plantean las siguientes Hipótesis: Ha: La dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua” enriquecida con Retinol incrementa la concentración de hemoglobina sérica en Rattus rattus variedad albinus con anemia inducida H0: La dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua” enriquecida con Retinol no incrementa la concentración de hemoglobina en Rattus rattus variedad albinus con anemia inducida. 1.3 Objetivo General: Determinar el efecto de una dieta a base Chenopodium quinoa (Quinua) enriquecida con Retinol, sobre la concentración de hemoglobina sérica en Rattus rattus variedad albinus con anemia inducida.
  • 18. Objetivos Específicos: Comparar la concentración de Hemoglobina en Rattus rattus variedad albinus anémicas pre y post dieta a base de Chenopodium quinoa (Quinua) enriquecida con Retinol. Comparar la concentración de Hemoglobina en Rattus rattus variedad albinus anémicas pre y post dieta a base de Chenopodium quinoa (Quinua) sin retinol. Comparar el efecto del consumo de una dieta a base de Chenopodium quinoa (Quinua) enriquecida con Retinol con la dieta a base de Chenopodium quinoa sobre la concentración de hemoglobina en Rattus rattus variedad albinus con anemia inducida. I. METODOLOGÍA 2.1 Tipo de Investigación El presente trabajo de investigación fue de tipo experimental, explicativo y corte longitudinal desarrollado en el laboratorio de Bioquímica de la Universidad César Vallejo. 2.2 Diseño de Estudio
  • 19. Diseño cuasi experimental con dos grupos experimentales G1 X1 O1 G2 X2 O2 Donde: G1: Grupo experimental de Rattus rattus variedad albinus con anemia inducida. G2: Grupo experimental de Rattus rattus variedad albinus con anemia inducida. X1 Estimulo que consiste en la dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua” enriquecida con Retinol X2: Estimulo que consiste en la dieta sólo a base de Chenopodium quinoa “Quinua”. O1: Medición de la concentración de hemoglobina en los ejemplares de rattus rattus variedad albinus del grupo experimental que consumió la dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua” enriquecida con Retinol. O2: Medición de la concentración de hemoglobina en los ejemplares de rattus rattus variedad albinus del grupo comparativo que consumió la dieta sólo a base de Chenopodium quinoa “Quinua”. MATERIALES Y METODOS Material Biológico  Harina de Chenopodium Quinoa (Quinua) procedente de Cajamarca.  Suplemento Vitamínico A (Retinol) con la marca comercial Arovit (Retinol) Los especímenes de Experimentación.Seutilizaron 12 ejemplares machos de Rattus rattus variedad Albinus, con edad promedio entre 2 a 4 meses, con peso de 250 a275 g, procedentes del
  • 20. Bioterio de la Universidad Nacional de la Molina. Materiales de Laboratorio Material de Vidrio. Tubos de Ensayo (Kahn) pipetas de 2 y 5 ml (Pirex) Probetas (Pirex) Frasco color caramelo (para el reactivo de trabajo) Desecador Otros Materiales Bisturí # 23 Capilares heparinizados Gradilla de metal Micropipeta Algodón Jeringas de Tuberculina Tubos de reacción de 1.5ml Reactivos: Cloroformo Agua destilada Alcohol Heparina sódica al 1% Reactivo para determinar la Hemoglobina. Hemoglobin liquid color (Human) Equipos de Laboratorio Espectrofotómetro Balanza de 500 g 2.3 POBLACION - MUESTRA 2.3.1 Población
  • 21. Ejemplares de rattusrattus variedad albinus del Bioterio del Instituto Nacional de Salud, Lima (INS) 2.3.2 Muestra Se consideraron a 18 ejemplares de Rattusrattus variedad albinus que cumplan con los criterios de inclusión Criterios de inclusión Que presenten peso promedio entre 250 – 275 gr Que tengan edad mayor de 1 mes. Que sean machos Criterios de exclusión: Que fallezca durante el tratamiento 2.4 Unidad de Análisis Cada una de los ejemplares de Rattus rattus variedad albinus con anemia inducida que cumplan con los criterios de inclusión. 2.5 Descripción de la Variables e Indicadores V1: Dieta a base de Quinua enriquecida con Retinol–Variable Independiente. Dieta constituida por 60gr de harina de Chenopodium quinoa “Quinua”, variedad perlada y enriquecida con 71.43 mg de Retinol (en su forma comercial AROVIT)
  • 22. siendo disuelta en 80 ml de aceite. V2: Concentración de Hemoglobina – Variable Dependiente Es la medición de hemoglobina expresada en g/dL presente en la sangre de rattus rattus variedad albinus, mediante el método de cianmetahemoglobina.
  • 23. 2.6 Definición Operacional DEFINICION DEFINICION OPERACIONAL INDICADOR TIPO DE VARIABLE CONCEPTUAL VARIABLE 1: Dieta a base de Se administró 60 gr de Alimentación a Chenopodium Chenopodium quinoa a los Dieta a base de quinoa “Quinua” base de ejemplares de Rattus rattus Y Retinol. Chenopodium variedad albinus con anemia. Chenopodium De acuerdo a los quinoa “Quinua” quinoa “Quinua” requerimientos de hierro en Y Retinol relación al peso del animal. Cualitativa Y Retinol Nominal También se enriqueció la 2: Dieta a base dieta con 71.43 mg de unicamente de Retinol disuelta en 80 mL Chenopodium aceite. quinoa “Quinua”. Se cuantificó la concentración Cantidad de de la hemoglobina tomando Concentración de Hemoglobina como base las absorbancias Concentración: g/dL Cuantitativa hemoglobina presente en un de la reacción de las muestras Continua volumen con el reactivo Hemoglobin determinado de Liquid Color y transformadas sangre. en unidades de concentración
  • 24. 2.7 Métodos, técnicas e instrumentos de recolección de datos En la presente investigación cuasi experimental, se utilizó el método de la Cianmetahemoglobina que mide la hemoglobina total, para la determinación de la hemoglobina en sangre de rattus rattus variedad albinus. Este método se basa en que la hemoglobina de la muestra de sangre es liberada de los eritrocitos, y es oxidada por el hexocianoferrato de potasio (III) formando metahemoglobina. Esta reacción con el cianuro forma cianmetahemoglobina un cromógeno pardo que evidencia la presencia de hemoglobina, cuya concentración se obtiene en base a la medición de la absorbancia indicada por el espectrofotómetro. (14). La determinación de hemoglobina se realizó en los ejemplares Rattus rattus variedad albinus de los grupos experimentales, al inicio del experimento con una medición basal, la segunda medición se realizó 30 días después de la inducción a anemia y la última 45 días después de la administración de las dietas experimentales. El trabajo cuasi experimental consistió en administrar, a los ejemplares de rattus rattus con anemia inducida, una dieta a base de quinua enriquecida con retinol presente en la forma comercial de Arovit (Laboratorio Bayer) durante 45 días al primer grupo experimental y medir su efecto sobre la concentración de hemoglobina en sangre; al segundo grupo experimental se le administró una dieta a base únicamente de Chenopodium quinoa “Quinua” durante 45 días, y posteriormente medir su efecto sobre la concentración de hemoglobina en sangre. Selección de ejemplares de Rattus rattus variedad albinus
  • 25. Se seleccionaron 12 ejemplares de Rattus rattus variedad albinus procedentes del bioterio del Instituto Nacional de Salud (INS) de la ciudad de Lima y presentaban como características una edad entre 2 a 4 meses y 250 – 275 gr. de peso. Dichos ejemplares se clasificaron en dos grupos: grupo experimental que recibió dieta a base de quinua enriquecida con retinol y grupo experimental que recibió dieta a base solo de quinua. A. Inducción de anemia en Rattus rattus variedad albinus. Para inducir a un estado de Anemia a los 12 ejemplares de Rattus rattus variedad albinus, se les sometió a una dieta deficiente en hierro y Vitamina A la cual estuvo compuesta por arroz con cáscara 20gr., choclo verde 20gr., hojas de col 2gr., maíz morado 18 gr. (Ver anexo , tabla de composición de esos productos) Todos los ejemplares de rattus rattus variedad albinus se sometieron con esta dieta durante 30 días para provocar estados anémicos en ellos con contenido de hemoglobina en sangre menores de 11 g/dL determinado por el método de la cianmetahemoglobina. Una vez alcanzado el estado de anemia, las ratas fueron distribuidas al azar en 2 grupos experimentales, cada uno con 6 ejemplares: El primer grupo experimental recibió por 45 días una dieta de 60 gr de Chenopodium quinoa “Quinua” (6.54 mg de Hierro aprox.) enriquecida con 71.43 mg de retinol disuelta en 80 mL de aceite.
  • 26. Para ello elaboramos galletas de harina quinua utilizando como ingredientes: Harina de quinua, aceite, agua, azúcar y retinol. (Ver anexo 4.2) El segundo grupo experimental recibió una dieta a base sólo de 60 gr. de harina de Chenopodium quinoa “Quinua” (6.54 mg de Hierro aprox.) en forma de galletas elaboradas siguiendo el proceso anterior con la diferencia de que en este caso no se utilizó el retinol como ingrediente. B. Determinación de la concentración de Hemoglobina en los ejemplares Rattus rattus variedad albinus Previo a la tomas de muestras sanguíneas se realizó la sedación en un desecador que contuvo algodones húmedos con cloroformo, colocando por 2 minutos a cada uno de los ejemplares en estudio. Se extrajeron aproximadamente 0.5 ml de sangre a cada ejemplar a nivel de la punta de la cola, con la ayuda de un bisturí haciendo un corte, acercando el capilar de heparina para recolectar la muestra de sangre. Al finalizar con la extracción de la muestra de sangre se desinfectó con alcohol la punta de la cola de cada ejemplar y se les llevó a un lugar ventilado para su pronta recuperación. La sangre obtenida de cada ejemplar se recolectó en tubos de reacción rotulados de acuerdo a su grupo y listo para la aplicación de la reacción por el método Cianmetahemoglobina. Se midió 5 uL de sangre de las muestras recolectadas de cada ejemplar y se colocaron en tubos de ensayo posteriormente se adicionó 1 ml del reactivo Hemoglobin liquid color y, se esperó 3 minutos para que se forme el cromógeno
  • 27. pardo que evidencia la presencia de hemoglobina. Posteriormente se midió las absorbancia de las reacciones dadas en la muestra utilizando un espectrofotómetro a una longitud de onda de 505 nm y se obtuvo la concentración de la hemoglobina utilizando la siguiente fórmula. Concentración de Hemoglobina (g/dl)=29.4 x Absorbancia. Este procedimiento se desarrolló durante la determinación de la concentración de hemoglobina en los ejemplares de rattus rattus variedad albinus de los dos grupos experimentales, para la toma de muestras basal (antes de la inducción a anemia), post inducción a anemia y post dieta experimental de 45 días. (Ver anexo 4.1)
  • 28. 2.7.1 Método de análisis de la información Se realizó la Estadística “t” student, utilizando el programa Excel y el SPSS 15.0, para la comparación de los resultados que se obtuvieron de las concentraciones de hemoglobina de los grupos experimentales de rattus rattus variedad albinus después de la administración de las dietas experimetales. (Ver anexo2)
  • 29. I. RESULTADOS: GRAFICO Nº 01. CONCENTRACIÓN PROMEDIO DE HEMOGLOBINA BASAL, PRE Y POST DIETA A BASE DE QUINUA ENRIQUECIDA CON RETINOL EN LAS 6 RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS, EXPRESADO EN g/dL. Concentracion de hemoglobina basal antes 13.53 de la induccion a anemia CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA 14.00 11.89 en rattus rattus variedad albinus, expresado en g/dL 12.00 Concentracion de 10.00 7.84 hemoglobina en estado de anemia en rattus rattus 8.00 variedad albinus,expresado 6.00 en g/dL 4.00 Concentracion de hemoglobina en rattus 2.00 rattus variedad albinus 0.00 post dieta de quinua enriquecida con PROMEDIO retinol, expresado en g/dL Fuente: Resultados del experimento
  • 30. GRAFICO Nº 02. CONCENTRACIÓN PROMEDIO DE HEMOGLOBINA BASAL, PRE Y POST DIETA A BASE DE QUINUA EN LOS 6 EJEMPLARES DE RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS, EXPRESADO EN g/dL. 13.38 Concentracion de CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA 14.00 hemoglobina basal antes de 12.00 11.52 la induccion a anemia en rattus rattus variedad 10.00 albinus, expresado en g/dL 8.34 8.00 Concentracion de hemoglobina en estado de 6.00 anemia en rattus rattus variedad albinus, expresado 4.00 en g/dL 2.00 Concentracion de 0.00 hemolobina en rattus rattus variedad albinus post dieta Promedio experimental a base de quinua, expresado en g/dL Fuente: Resultados del experimento
  • 31. TABLA Nº 01 RESULTADOS DE PRUEBAS ESTADISTICAS COMPARATIVAS OBTENIDOS CON EL PROGRAMA SPSS (Q vs Q+R) Número de Desv. Diferencias de medias DIETAS HB promedio ratas St. relacionadas QUINUA 11.52 6 0.45 QUINUA + 2,01 g/dl 13.53 6 0.99 RETINOL TABLA Nº 02 PRUEBA ESTADISTICA PARA COMPARACION DE MEDIAS: QUINUA (µ1) VS QUINUA ENRIQUECIDA CON RETINOL (µ2) Región Nivel de. Estadística de Valor crítico HIPÓTESIS aceptación o Decisión significancia prueba o calculado rechazo H 0: µ1- µ2=0 Si - RECHAZAR HO α = 0.05 2,228≤t0≤2,228 tc = -4,54 1 2 tn 2 S . Y ACEPTAR Ha H a: µ1- ACEPTE H0 dif µ2 ≠0 P= 0,00106349, como es menor que el nivel de significación α=0,05, corresponde rechazar la hipótesis Ho. Lo que quiere decir que el promedio de la hemoglobina cuando se le aplica quinua enriquecida con retinol es significativamente mayor que cuando se le aplica la dieta a base únicamente de quinua.
  • 32. II. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN El propósito de éste trabajo experimental fue reconocer el efecto de una dieta a base de Chenopodium Quinoa “Quinua” enriquecida con retinol, sobre la concentración de hemoglobina sérica en rattus rattus variedad albinus con anemia inducida. En el grafico Nº01 se observa que los ejemplares de rattus rattus variedad albinus después de una dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua” enriquecida con retinol, aumentaron su concentración de hemoglobina de 7.84 a 13.53 g/dL, con un valor P= 0,0001877, lo que muestra una diferencia significativa en la concentración de hemoglobina después de aplicarse la dieta. En el Grafico Nº 02 también se observó un aumento de la concentración de hemoglobina en los ejemplares de rattus rattus variedad Albinus con anemia inducida después de la dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua” con valores promedio de 8.34 a 11.52 g/dL, y con un valor P= 0,00000152, esto indica que la concentración de hemoglobina es significativamente mayor después de la aplicación de la dieta experimental a base únicamente de quinua. Sin embargo al comparar los resultados de ambos grupos El valor P= 0,00106349 obtenido entre estos indica que existe una diferencia significativa en la concentración de hemoglobina cuando se aplica la dieta a base de quinua enriquecida con retinol. El hierro inorgánico por acción del ácido clorhídrico del estómago pasa a su forma reducida, hierro ferroso (Fe2+),(6) que es la forma química soluble capaz de atravesar la membrana de la mucosa intestinal. Aunque el hierro puede absorberse a lo largo de todo el intestino, su absorción es más eficiente en el duodeno y la parte alta del yeyuno. La membrana de la mucosa intestinal tiene la facilidad de atrapar el hierro y permitir su paso al interior de la célula, debido a la existencia de un receptor específico en la membrana del borde en cepillo. La apotransferrina del citosol contribuye a aumentar la velocidad y eficiencia de la absorción
  • 33. de hierro. En el interior del citosol del enterocito, la ceruloplasmina (endoxidasa I) oxida el hierro ferroso a férrico para que sea captado por la apotransferrina que se transforma en transferrina a nivel circulatorio. El hierro que excede la capacidad de transporte intracelular es depositado como ferritina. El hierro del enterocito ingresa a la circulación de acuerdo con las necesidades, de este modo, condiciones como la deficiencia de hierro, la anemia, la hipoxia, conllevan un aumento en la absorción y capacidad de transporte. El hierro es transportado por la transferrina, una glicoproteína, que posee 2 dominios homólogos de unión para el hierro férrico (Fe3+). Esta proteína toma el hierro liberado por los macrófagos producto de la destrucción de los glóbulos rojos o el procedente de la mucosa intestinal, se ocupa de transportarlo y hacerlo disponible a todos los tejidos que lo requieren. Se le denomina apotransferrina a la proteína que no contiene hierro, transferrina monoférrica cuando contiene un átomo de hierro y di férrica cuando contiene 2 átomos. Cuando todos los sitios de transporte están ocupados se habla de transferrina saturada. En el caso de que toda la transferrina esté saturada, el hierro que se absorbe no es fijado y se deposita en el hígado. Todos los tejidos y células poseen un receptor específico para la transferrina, a través de cuya expresión en la superficie celular, regulan la captación del hierro de acuerdo con sus necesidades. El receptor de la transferrina es una glicoproteína constituida por 2 subunidades. Cada subunidad posee un sitio de unión para la transferrina. El receptor de transferrina desempeña un papel fundamental en el suministro de hierro a la
  • 34. célula, puesto que la afinidad del receptor por el complejo hierro-transferrina al pH ligeramente alcalino de la sangre, depende de la carga de hierro de la proteína. La afinidad máxima se alcanza cuando la transferrina está en su forma diférrica. El complejo hierro- transferrina-receptor es internalizado en la célula a través de un proceso de endocitosis. El cambio del pH ligeramente alcalino al pH ácido del endosoma provoca un cambio en la estabilidad del complejo que ocasiona la disociación espontánea de los átomos de hierro; por su parte, la transferrina se mantiene unida al receptor hasta que un nuevo cambio de pH, en sentido contrario, al nivel de la membrana, provoca la ruptura del complejo y la consiguiente liberación de la transferrina que queda nuevamente disponible para la captación y transporte del hierro circulante. Cuando las necesidades de hierro de la célula aumentan, se produce un incremento en la síntesis de receptores de transferrina y, en el caso contrario, cuando hay un exceso de hierro, ocurre un aumento de la síntesis de ferritina. (6) Sin embargo la concentración de Hemoglobina en el grupo experimental que recibió la dieta a base de Chenopodium quinoa “Quinua” enriquecida con retinol en comparación con la del grupo experimental que recibió únicamente Chenopodium quinoa “Quinua” tuvo mejores resultados en la recuperación de la concentración de hemoglobina, existiendo una diferencia significativa tal como se muestra en la tabla Nº 1 y Nº 2, esto se debe a que el retinol juega un rol importante en la síntesis de proteína transportadora de hierro, la transferrina, y receptores de transferrina, de ahí mejoran la movilización del hierro almacenado en el hígado y el ingreso del hierro a los tejidos eritropoyéticos, además mejoran la absorción del hierro en el yeyuno/íleon. (9,15). Sistemáticamente se ha indicado que la deficiencia de vitamina A restringe la liberación de hierro de los depósitos, dando lugar a la sobrecarga de hierro en la ferritina y, con el tiempo, a la anemia ante la falta de mayor absorción de hierro (14) tal como se pudo observar en la
  • 35. inducción a anemia a los ejemplares de rattus rattus variedad albinus tratadas con dieta deficiente en hierro y retinol. Las funciones sistémicas de la vitamina A incluyen los papeles esenciales de la vitamina en la diferenciación y el crecimiento de las células epiteliales, en el crecimiento óseo y en el crecimiento de los tejidos en general. En cada uno de estos papeles la función de la vitamina A se asemeja a la de una hormona debido a las capacidades del acido retinoico todo trans para regular la expresión de genes. La diferenciación celular inducida por el ácido retinoico origina muchas proteínas que se supone son inducidas o activadas por este sistema. (17) Tanto el retinol como el ácido retinoico se unen a receptores intracelulares específicos, que se unen a continuación al ADN y afectan estimulando a la síntesis de proteínas implicadas en la regulación del crecimiento y diferenciación celular. De ese modo se puede considerar que tanto el retinol como el ácido retinoico actúan bajo un mecanismo molecular similar al de las hormonas esteroides regulando el crecimiento y la diferenciación celular (9). Esto explicaría por un lado la participación del retinol en la hemopoyesis, como es el caso de la diferenciación de las células madres pluripotenciales de la medula ósea en las células sanguíneas. Por otro lado la acción hormonal del retinol estaría también implicada en la expresión del gen de la transferrina. Ensayos controlados en los cuales la suplementación con vitamina A produjo un aumento significativo del nivel de hemoglobina se han llevado a cabo en varios países. Los mejores resultados se obtuvieron cuando se usó la ingestión diaria de vitamina A en cantidades cercanas a los niveles recomendados de ingesta. Los grupos especialmente vulnerables son los niños pequeños y las mujeres en edad fértil. Estos grupos también están expuestos al riesgo de deficiencia de vitamina A. (18)
  • 36. Lo observado en nuestra investigación, a pesar de haberse realizado en ratas de laboratorio, tiene analogía con los resultados arrojados de la investigación realizada por Djoko y Muhilal en mujeres embarazadas, encontró que la hemoglobina aumentó de 10,8 g/dL a 14,7 g/dL cuando se suplementó con hierro y vitamina A (Retinol), la anemia se eliminó en 97%, y esta se eliminó en 68% cuando se utilizó únicamente la suplementación con hierro (11). Estos resultados sumados a los resultados obtenidos en nuestra investigación, sugieren que la combinación de hierro y vitamina A puede resultar más efectiva que sólo hierro o sólo vitamina A en el tratamiento de la anemia. Suharno evaluó el papel de la suplementación con hierro y vitamina A en el tratamiento de la anemia a mitad de la gestación. La proporción de mujeres no anémicas fue del 35% en el grupo vitamina A, 68% en el grupo hierro y 97% en el grupo combinado vitamina A y hierro. La administración conjunta de vitamina A y hierro originó un aumento promedio de la concentración de hemoglobina de 1.28 g/dl. La suplementación con hierro incrementó la ferritina sérica y disminuyó la capacidad total de transporte de hierro. La suplementación con vitamina A no afectó estas variables. (16) En nuestro trabajo de investigación los resultados obtenidos con la dieta a base de Quinua y Retinol, muestran un aumento promedio de la concentración de Hemoglobina de 5.69 g/dL (Ver anexo 2; tabla Nº03).Lo que corrobora que el Retinol favorece de manera significativa la absorción y movilización de hierro a las células.
  • 37. V. CONCLUSIONES Una dieta a base Chenopodium quinoa (Quinua) enriquecida con retinol, tiene un efecto favorable incrementando la concentración de hemoglobina sérica en rattus rattus variedad albinus con anemia inducida. Una dieta a base de Chenopodium quinoa (Quinua) enriquecida con retinol incrementa significativamente la concentración de hemoglobina sérica en rattus rattus variedad albinus con anemia inducida en comparación con la dieta a base únicamente de Chenopodium quinoa “Quinua”, con una diferencia de la concentración de hemoglobina sérica de 2,01 g/dL.
  • 38. VI. SUGERENCIAS o Los nutricionistas deben fomentar en la población sobre todo en los grupos vulnerables: niños, adolescentes y gestantes la utilización de la Quinua combinada con alimentos ricos en vitamina A en la prevención de la anemia. o En nuestro medio existe la Quinua en harina, grano tostado y molido, sugerimos la utilización de la Quinua en harina por la facilidad de ser empleada en diversas preparaciones sobre todo en postres, favoreciendo la aceptación en los niños. o Debería comprobarse si los efectos observados de la dieta de quinua enriquecida con retinol, en rattus rattus variedad albinus, son similares en humanos.
  • 39. VII.- REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS: 1. Banki- moon. La desnutrición Crónica en América Latina y el Caribe. Programa Mundial de Alimentos. (internet) 2007 junio.(acceso 03 de abril del 2010);3(2).Disponible en: www.onu.org.pe/upload/infocus/pma_desnutricioninfantil.pdf 2. Ley aprobadaPlan Nacional Concertado de Salud. Ley 27657 /2007 de 20 de julio. Resolución Ministerial N°259 (21-07-2007).Disponible en: www.bvs.minsa.gob.pe/local/MINSA/000_PNCS.pdf 3. Ministerio de Salud (sede web)*.Lugar: Oficina ejecutiva de prensa; 2004(acceso 15 de enero del 2010).Varios autores. Prensa. Disponible en:http://www.minsa.gob.pe/ocom/prensa/notadeprensa.asp?np_codigo=1873&mes=11& anio=2004 4. Marín G.Estudio transversal de prevalencia de anemia ferropénica en la plata y sus factores condicionantes. (proyecto de tesis salud pública).La Plata Universidad Nacional de la Plata; 2006. Disponible en: http://www.postgradofcm.edu.ar/ProduccionCientifica/TesisMagisters/4.pdf 5. Bolaños C. Factores de riesgo asociados a la prevalencia de anemia ferropénica en niños de 24 a 59 meses de edad atendidos en el Hospital Militar Escuela “Dr. Alejandro Dávila Bolaños” enero- diciembre 2009(monografía de internet) Nicaragua: Ministerio de Salud 2010.Disponible en: http://www.minsa.gob.ni/bns/monografias/2010/Pediat/02/Factores_Riesgo_asociados_p revalencia_Anemia_Ferropenica_ninos-24-59_meses_HMEADB_Ene-Dic2009.pdf
  • 40. 6. Du Defaix H. y Fernández N. Metabolismo del hierro. Rev cubana hematolinmunol hemoter 2000; 16(3):149 -60. Disponible en: http://scielo.sld.cu/pdf/hih/v16n3/hih01300.pdf 7. Córdova A. Fisiología dinámica. Elsevier España: Masson.S.A 2003.Disponible en: http://books.google.com.pe/books?id=DM 8. Guyton A y Hall J. Tratado de Fisiología Médica.11a edición. Elsevier España; 2006. 9. Thomas M. Devlin. Bioquímica vol 03. 4a edición. Barcelona: Editorial Reverté S.A.2004 Disponible en: http://books.google.com.pe/books 10. Okonofua F. Suplementación con vitamina A durante el embarazo: Comentario de la BSR (última revisión: 15 de diciembre de 2003). La Biblioteca de Salud Reproductiva de la OMS; Ginebra: Organización Mundial de la Salud.Disponible en:http://www.who.int/rhl/pregnancy_childbirth/antenatal_care/nutrition/focom/es/index.ht ml 11. Alfaro T. y Carvajal D. Influencia de la deficiencia de vitamina A sobre la anemia en niños(as) preescolares de Costa Rica. Acta pediátr. costarric. [online]. 2001, vol.15, no.2 [citado 16 Junio 2010], p.61-63. Disponible en la World Wide Web: |http://www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1409- 00902001000200004&lng=es&nrm=iso>. ISSN 1409-0090. 12. Gómez S. Efecto de la suplementacióndietética en pacientes con anorexia nerviosa: Evaluacion nutricional e inmunológica. (Tesis doctoral).Madrid. Biblioteca de la Universidad Complutence de Madrid; 2001. Disponible en: http://www.ucm.es/BUCM/tesis/far/ucm-t25662.pdf 13. Instituto Nacional de Salud (Perú) Tablas peruanas de composición de alimentos – 8.ª ed. -- Lima: Ministerio de Salud, Instituto Nacional de Salud, 2009.Disponible en: www.ins.gob.pe/insvirtual/images/.../Tabla%20de%20Alimentos.pdf
  • 41. 14. Suardíaz J. Cruz C. Colina A. Editores Laboratorio Clínico. La Habana. Ciencias Médicas; 2004. Disponible en: www.scribd.com/doc/.../lab-oratorio-clinico-y-pruebas-diagnostic- as 15. Quiroz P. Relación de la reserva de Hierro y la ingesta de Vitamina A en el rendimiento escolar de adolescentes. RENUT 2009 enero –marzo; 3(7):333-344. 16. McLaren, Donald S. Manual de VER Y VIVIR sobre los trastornos por deficiencia de vitamina A (VADD)/ Donald S. McLaren y Martin Frigg/ traducido por Organización Panamericana de la Salud – Washington, D.C.: OPS, ©2001.160 pp. Disponible en: http://www.paho.org/spanish/HPP/HPN/VADD_manual_7.pdf 17. Kathleen M. y Scott S., editores. Nutrición y Dietoterapia de Krause México: Diagráficos unión, S.A. de C.V.; 2001. 18. Broek N, Kulier R, Gülmezoglu AM, Villar J. Suplementación con vitamina A durante el embarazo. Base de Datos Cochrane de Revisiones Sistemáticas 2002, Issue 4. No.: CD001996. DOI: 10.1002/14651858. Disponible en: www.apps.who.int/rhl/reviews/CD001996sp.pdf
  • 43. ANEXO 1 TABLAS DE RESULTADOS DE LA EXPERIMENTACIÓN TABLA Nº 01.- CONCENTRACIÓN PROMEDIO DE HEMOGLOBINA EN RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS CON DIETA A BASE DE QUINUA Y RETINOL, EXPRESADO EN g/dL, DURANTE BASAL, POST INDUCCIÓN A ANEMIA Y POST DIETA. Concentración de hemoglobina (HB) g / dl Grupo experimental (Q+R) Basal Con anemia Con anemia inducida Post dieta. 10,8 9 12,5 E1 E2 13 7,2 14,1 13,5 7,8 14,6 E3 11,6 7,17 13,5 E4 E5 13,1 8,02 14,3 E6 9,43 7,87 12,2 PROMEDIOS 11,89 7,84 13,53 Fuente: resultados experimentales Trujillo Oct2009.- Ene 2010
  • 44. TABLA Nº 02. CONCENTRACIÓN PROMEDIO DE HEMOGLOBINA EN RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS CON DIETA A BASE DE QUINUA, EXPRESADO EN g/dL, DURANTE BASAL, POST INDUCCIÓN A ANEMIA Y POST DIETA. Concentración de Hemoglobina (HB) g/dL Grupo experimental (Q) Anemia Basal inducida Post dieta. 13.7 8.9 11.8 E1 12.4 7.7 10.8 E2 16 7.7 11.2 E3 14.7 9 11.8 E4 11.6 8.23 11.5 E5 11.9 8.5 12 E6 13.38 8.34 11.52 Promedio Fuente: resultados experimentales Trujillo Oct2009.- Ene 2010
  • 45. TABLA Nº 03 COMPARACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA EN EJEMPLARES DE RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS DE LOS DOS GRUPOS EXPERIMENTALES POST DIETA EXPERIMENTAL A BASE DE CHENOPODIUM QUINOA ENRIQUECIDA CON RETINOL Y EXPERIMENTAL A BASE DE CHENOPODIUM QUINOA “QUINUA”. PROMEDIO DE GRUPOS DE CONCENTRACIÓN TRABAJO DE HEMOGLOBINA EN RATTUS RATTUS POST DIETA GRUPO EXPERIMENTAL (Q+R) 13.53 GRUPO EXPERIMENTAL (Q) 11.52 Fuente: resultados experimentales Trujillo Oct2009.- Ene 2010
  • 46. TABLA Nº 04 Cuadro Comparativo en La Variación de la Concentración de Hemoglobina en los dos Grupos experimentales Pre y Post Dieta experimental. PROMEDIO PROMEDIO CONCENTRACION CONCENTRACION DE DE HEMOGLOBINA GRUPOS DE TRABAJO HEMOGLOBINA POST PRE ADMINISTRACION ADMINISTRACION DE DE DIETA DIETA GRUPO EXPERIMENTAL (Q+R) 7.84 13.53 GRUPO COMPARATIVO (Q) 8.3 11.52 Fuente: resultados experimentales Trujillo Oct2009.- Ene 2010
  • 47. ANEXO 2 TABLA Nº 01 RESULTADOS DE PRUEBAS ESTADISTICAS COMPARATIVAS OBTENIDOS CON EL SPSS (Dieta a base de Quinua) Diferencias de QUINUA Número de medias Valor “P” HB promedio ratas Desv. St. relacionadas HB ANTES 8.34 6 0.57 3.178 g/L 0.00000152 HB DESPUES 11.52 6 0.45 P = 0,00000152 , como es menor que el nivel de significación α=0,05,corresponde rechazar la hipótesis Ho TABLA Nº.02.PRUEBA ESTADISTICA PARA MUESTRAS ANTES Y DESPUÉS (Dieta a base de Quinua) Nivel de. Estadística de Región aceptación o Valor crítico HIPÓTESIS Decisión significancia prueba rechazo o calculado d1 d2 H 0: d1-d2≤0 tn Si -2,571≤t0≤2,571 ACEPTE RECHAZAR HO α = 0.05 tc = -26,182 1 Sd Ha Y ACEPTAR Ha n H a: d1-d2>0 GRAFICO Nº 01 DIAGRAMA DE CAJAS PARA LA VARIACIÓN DEL HB (QUINUA)
  • 48. TABLA Nº .03 RESULTADOS DE PRUEBAS ESTADISTICAS ESTADÍSTICOS OBTENIDOS CON EL SPSS (QUINUA+ RETINOL) Valor “P” QUINUA Número de Diferencias de medias HB promedio ratas Desv. St. relacionadas HB ANTES 7.84 6 0.67 0.0001877 5,69 g/dL HB DESPUES 13.53 6 0.99 P = 0,0001877, como es menor que el nivel de significación α=0,05,corresponde rechazar la hipótesis Ho TABLA Nº 04 PRUEBA ESTADISTICA PARA MUESTRAS ANTES Y DESPUÉS (QUINUA + RETINOL) Ser rechaza Ho que significa que existe una diferencia significativa. Valor Nivel de. Estadística de Región aceptación o HIPÓTESIS crítico o Decisión significancia prueba rechazo calculado H 0: d1-d2≤0 d1 d2 RECHAZAR tn Si -2,571≤t0≤2,015 ACEPTE α = 0.05 tc = -9,807 HO Y 1 Sd Ha n ACEPTAR Ha H a: d1-d2>0 GRAFICO Nº 02 DIAGRAMA DE CAJAS PARA LA VARIACIÓN DEL HB (QUINUA+RETINOL)
  • 49. TABLA Nº 07 RESULTADOS DE PRUEBAS ESTADISTICAS ESTADÍSTICOS OBTENIDOS CON EL SPSS (Q VS Q+R) Número de Diferencias de medias Dietas HB promedio ratas Desv. St. relacionadas Valor “P” QUINUA 11.52 6 0.45 2,02 g/dl QUINUA +RETINOL 13.53 6 0.99 0.00106349 P = 0,00106349, es menor que el nivel de significación α=0,05,corresponde rechazar la hipótesis Ho TABLA Nº08.PRUEBA ESTADISTICA PARA COMPARACION DE MEDIAS: QUINUA (µ1) VS QUINUA+RETINOL (µ2) Valor Nivel de. Estadística de Región aceptación o crítico o HIPÓTESIS significanci Decisión prueba rechazo calculad a o H 0: µ1- RECHAZA µ2=0 Si -2,228≤t0≤2,228 ACEPTE tc = - R HO Y α = 0.05 1 2 tn 2 S. dif Ha 4,54 ACEPTAR H a: µ1- µ2 Ha ≠0 Se rechaza la igualdad lo que significa que existe una diferencia significativamente mayor sobre la concentración de hemoglobina cuando se aplica la dieta a base de quinua enriquecida con retinol. GRAFICO Nº04 DIAGRAMA DE CAJAS PARA LA VARIACIÓN DEL HB: QUINUA (µ1) VS QUINUA+RETINOL (µ2) 12,0 15,0 11,8 14,5 11,6 14,0 11,4 13,5 11,2 13,0 11,0 12,5 10,8 12,0 DESPUESQ DESPUESQR
  • 50. ANEXO 3 TABLA Nº01. COMPOSICION DE LA DIETA DEFICIENTE EN HIERRO Y RETINOL PARA 60 gr DE ALIMENTO DE RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS. ALIMENTO ENERGIA AGUA PROTEINAS GRASAS CARBOHIDRATOS CENIZAS HIERRO RETINOL (Kcal.) g. g. g. g. g. mg. (ug) ARROZ CON 65 2.38 1.18 0.4 15.14 0.9 - - CASCARA 20gr HOJAS DE COL 2gr 3 1.8 0.05 0.01 0.15 0.02 0.00 0.1 MAIZ MORADO 18gr 64 2.05 1.31 0.61 13.71 0.3 0.04 1.44 CHOCLO VERDE 20gr 23 13.46 0.66 0.16 5.56 0.16 0.16 -
  • 51. ANEXO 4 IMÁGENES DE LA EXPERIMENTACIÓN CON RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS FIG 1: EXTRACCION DE LA JAULA DE LAS ESPECIES FIG 2: SEDACION CON CLOROFORMO FIG 3: CORTE DE LA COLA UTILIZANDO BISTURI
  • 52. IMÁGENES DE LA EXPERIMENTACIÓN CON RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS FIG 4: USO DE CAPILARES HEPARINIZADOS PARA EXTRACCIÓN DE MUESTRA DE SANGRE FIG 6: EXPONEMOS A LA MUESTRA AL REACTIVO HEMOGLOBIN LIQUID COLOR FIG 5: USO DE LA MICROPIPETA PARA EXTRAER 5ug. DE SANGRE
  • 53. IMÁGENES DE LA EXPERIMENTACIÓN CON RATTUS RATTUS VARIEDAD ALBINUS FIG 7: SE COLOCA LA MUESTRA + EL REACTIVO EN UNA CUBETA FIG 8: SE COLOCA LA CUBETA EN EL ESPECTOFOMETRO PARA LA MEDICION IMÁGENES DE LA PREPARACION DE LA DIETA A BASE DE QUINUA Y RETINOL
  • 54. FIG 1: QUINUA PREVIAMENTE REMOJADA EN AGUA Y PUESTA A SECAR FIG 2: SE PROCEDE A MOLER LA QUINUA FIG 3: QUINUA MOLIDA EN HARINA IMÁGENES DE LA PREPARACION DE LA DIETA A BASE DE QUINUA Y RETINOL FIG 4: AMAZAR LA QUINUA CON AGUA, ACEITE Y AZUCAR.
  • 55. FIG 5: SE LE ADICIONA A LA MASA EL RETINOL EN SU FORMA COMERCIAL AROVIT. FIG 6: SE PROCEDE A ESTIRAR LA MASA CON LA AYUDA DE UN RODILLO
  • 56. IMÁGENES DE LA PREPARACIÓN DE LA DIETA A BASE DE QUINUA Y RETINOL FIG 7: SE COLOCAN TROZOS DE LA MASA EN UNA FUENTE PARA SER LLEVADA A HORNEAR FIG 8: GALLETAS DE QUINUA CON RETINOL SALIDAS DEL HORNO. FIG 9: A DEGUSTAR..!!!!