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Esterilización y desinfección.pptx
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- 2. ESTERILIZACION DESINFECCIÓN se destruyen oremueven todas las formas de vida microbiana mediante el uso de agentes físicos o químicos destrucción o inhibición de los microorganismos mediante el uso de agentes químicos Cuál es la finalidad de esterilizar y/o desinfectar el laboratorio
- 3. ¿Desinfectantes y Antisépticos? Actúansobre objetos inertes Actúan sobre tejidos vivos Menos tóxicos ¿efecto Bactericida y Bacteriostático? Destruye o mata una bacteria Inhibe o detiene el crecimiento de una bacteria
- 4. Métodos de Esterilizacióny Desinfección Métodos FISICOS Métodos QUIMICOS Calor Filtración Radiación Agentes Esterilizantes Agentes Desinfectantes
- 5. Métodos de Esterilizacióny Desinfección Calor Húmedo (mayor poder de penetración) Ebullición Pasteurización Vapor Fluente Vapor Saturado a Presión Calor Seco (menor poder de penetración) Flameado Hornos o estufas Desnaturalización de las biomoléculas (pierden su estructura y función) Métodos Físicos: CALOR
- 6. Calor Húmedo -Ebullición • A 100°C durante 30 minutos • Elimina formas vegetativas pero no las estructuras de resistencia Métodos Físicos: CALOR
- 7. • REDUCE poblacionesmicrobianas en alimentos (ej. leche) • Destruye microorganismo patógenos presentes en los alimentos • No elimina estructuras de resistencia ni microorganismos termófilos • Diferentes métodos - Clásico: calentamiento a 63°C durante 30 minutos - HTST: calentamiento a 72°C durante 15 segundos - UHT: calentamiento a 140-150°C durante 3 segundos Calor Húmedo - Pasteurización Enfriamiento rápido Métodos Físicos: CALOR
- 8. • Esterilización fraccionada •Se esterilizan medios cuyos componentes pueden alterarse a temperaturas superiores a los 100°C. Ej: mosto de uva 1° calienta hasta 90°C durante 30 minutos eliminan las formas vegetativas 2° Incuba a 37°C durante 24 horas germinan esporas microbianas 3° Repite el ciclo 3 días consecutivos eliminan todas las formas de vida microbiana Calor Húmedo – Vapor fluente: Tindalización Métodos Físicos: CALOR
- 9. Calor Húmedo –Vapor fluente: Tindalización Métodos Físicos: CALOR
- 10. • Una delas técnicas mas utilizadas para la destrucción de todas las formas de vida microbiana • Medios de cultivo, agua, jeringas, material de vidrio, objetos de goma y tela • Produce la desnaturalización de proteínas, fusión y coagulación de membranas celulares • Parámetros de esterilización Temperatura: 121°C Presión: 2 atm. (1 atm. de sobre presión) Tiempo: 15 – 20 minutos Calor Húmedo – Vapor saturado a presión: Autoclave Métodos Físicos: CALOR
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- 12. Manómetro Nivel de agua Calentador Vasijainterna Válvula de vacío Válvula de seguridad principal Válvula de salida de aire Válvula de seguridad Tornillo para ajustar la tapa Cierre manual soporte Métodos Físicos: CALOR
- 13. Calor Húmedo –Vapor saturado a presión: Autoclave La sobre presión NO es lo que mata al microorganismo, sino la temperatura elevada que se alcanza cuando el vapor de agua se somete a presión 1. Colocar agua hasta la parrilla 2. Colocar los materiales 3. Cerrar la tapa 4. Abrir la válvula de desagote (espita) 5. Encender la fuente de calor 6. Desagotar el aire (purgado) 7. Cerrar la espita 8. Vigilar la presión, hasta llegar a 2 atm. 9. Mantener a fuego lento 20 min. 10.Apagar y esperar a que baje la presión 11.Abrir la espita, luego la tapa 12.Sacar el material Métodos Físicos: CALOR
- 14. • Se empleapara esterilizar materiales metálicos o de vidrio como ansas, espátulas, bocas de tubos, pinzas, etc. • Consiste en someter en la llama de un mechero de Bunsen durante unos segundos los utensilios a esterilizar • Técnica rápida y eficaz para materiales termo-resistentes Calor Seco – Flameado Métodos Físicos: CALOR
- 15. Calor Seco –Flameado Métodos Físicos: CALOR
- 16. • Se esterilizamaterial de vidrio, porcelana y objetos metálicos como pipetas, cajas de Peri, tubos, matraces, etc. • Proceso lento con alto consumo de energía • Produce la oxidación de componentes intracelulares • Parámetros de esterilización Temperatura: 160-180°C Tiempo: 2 horas Calor Seco – Hornos o Estufas Métodos Físicos: CALOR
- 17. Calor Seco –Hornos o Estufas Métodos Físicos: CALOR
- 18. • Se utilizapara esterilizar sustancias líquidas termosensibles • Se hace pasar una solución a través de una membrana que presenta poros de diferentes tamaños, reteniendo así los microorganismos • Filtros de acetato de celulosa con poros de 0,2 a 0,45 µm • Ej. Vitaminas, antibióticos • El sistema de filtración se esteriliza independientemente del filtro y, en condiciones asépticas, se ensambla al momento de realizar la filtración Métodos Físicos: FILTRACION
- 19. Discos de membrana MétodosFísicos: FILTRACION
- 20. Discos de membrana MétodosFísicos: FILTRACION
- 21. • Cámaras deseguridad biológica • Filtros HEPA (alta eficiencia de retención de partículas de aire) • Partículas mayores a 0,3 µm Cámara de flujo laminar Métodos Físicos: FILTRACION
- 22. Cámara de flujolaminar Cámara de flujo horizontal Métodos Físicos: FILTRACION
- 23. • Afecta lasmoléculas de ADN, inhibiendo su síntesis • Tienen poco poder de penetración • Se utilizan para esterilizar superficies y cabinas de bioseguridad Rayos Ultravioletas Métodos Físicos: RADIACION
- 24. • Método deesterilización que se basa en la modificación irreversible de la estructura funcional de ácidos nucleicos, proteínas y lípidos de los microorganismos • Se aplica a productos termolábiles a nivel industrial como antibióticos, vacunas, materiales plásticos • Alto poder de penetración Rayos Gamma Métodos Físicos: RADIACION
- 25. Métodos de Esterilizacióny Desinfección Métodos FISICOS Métodos QUIMICOS Calor Húmedo Filtración Radiación Agentes Esterilizantes Agentes Desinfectantes
- 26. Métodos Químicos Agentes Esterilizantes •Formaldehído Gas alquilante Esteriliza materiales termolábiles • Glutaraldehído Líquido alquilante Esteriliza material plástico y de goma • Oxido de etileno Gas alquilante con alto poder de penetración Esteriliza jeringas, cajas de Petri descartables Ventajas: no requieren altas temperaturas ni aparatos costosos Desventajas: sustancias inflamables y muy tóxicas
- 27. Métodos Químicos Agentes Desinfectantes •Alcohol etílico Desinfectante y antiséptico Limpiar mesadas y manos antes de trabajar • Detergentes catiónicos Desinfectante y antiséptico • Cloro Desinfectante Limpiar pisos y paredes del laboratorio • Peróxido de hidrógeno Desinfectante y antiséptico Limpieza de heridas
- 28. Medidas de controlde esterilización Control Biológico Cintas adhesivas impregnadas con una sustancia química no tóxica que cambia de color blanco a negro al ser sometido a la técnica de esterilización empleada (esterilización correcta) Control Químico Viales que contienen esporas de bacterias resistentes a altas temperaturas. Si la espora crece, el medio de cultivo cambia de color (esterilización incorrecta)
- 29. Preparación de materialespara esterilizar • Las cajas de Petri de vidrio se envuelven en papel de a pares, con la tapa hacia arriba y la base hacia abajo • Los tubos y erlenmeyers se tapan con algodón y se cubren con papel para evitar la entrada o salida de microorganismos • En el caso de las pipetas de vidrio, se coloca en la boquilla algodón que funciona como filtro de aire, evitando la contaminación. Luego se introducen en un estuche metálico • El material de plástico (tips, microtubos, racks, etc.) se coloca en frascos de vidrio con la tapa semi-abierta El material que se va a esterilizar debe prepararse de tal manera que se conserve sin contaminar una vez esterilizado
- 30. Preparación de materialespara esterilizar
- 31. Preparación de materialespara esterilizar TAPA BASE
- 32. Preparación de materialespara esterilizar