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Fermentación en estado
sólido del desecho generado
en la industria vinícola

• Manuel Vega Di Nezio
• Hernán Casas
• Fernando Alcazar
1
Objetivo

2
Evaluar el efecto de la aireación en el biorreactor
de lecho fijo semi sólido de bagazo de uva,
proveniente de la elaboración de vino, sobre los
parámetros indicadores de la biotransformación:
• Humedad

• Población microbiana
• Relación C/N
• Temperatura
• pH
Estos parámetros se evaluaron a diversos flujos de
aire y tiempos de aireación.
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

3
Problema
• Aumento de la cantidad de desechos producidos
por la industria en todo el mundo.

• Los desechos suelen estar constituidos por
sustancias biodegradables y pueden ser usados
para diversos fines mediante la aplicación de
biotecnología.

• Se debe mantener un manejo adecuado de estos
residuos para evitar problemas de contaminación.  
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

4
Solución
• Biodegradación aeróbica de compuestos
orgánicos. También conocida como “compostage”

• Los MO son los encargados de transformar el
material en nuevos productos.

• Se deben dar condiciones de humedad y
aireación adecuadas para poder obtener un
producto estable, libre de patógenos, que pueda
ser usado para acondicionamiento de suelos.
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

5
Antecedentes
•

Italia: Compostajes utilizando desechos de
tomates, residuos de corcho, cáscaras de olivo y
lodos de tenerías vegetales como sustrato.

• España: Debido al aumento de desechos de la
industria vitícola y de aceite de oliva  se
empezaron a estudiar compostajes en estos
residuos.
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

6
Materiales y métodos

7
• Bagazo de Uva: Bagazo recién
prensado, secado al sol recibiendo
volteos cada 3 horas.
En el procedimiento experimental
al bagazo se le agrego agua, para
aportar humedad a los MO.
Luego se colocó en el biorreactor.
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

8
Biorreactor usado: Tanque cilíndrico de acero
inoxidable, que posee una cámara de aire en la
parte inferior y una capacidad de operación de
98 litros.
El sistema de disposición del lecho consiste en un
soporte de plástico que posee una serie de
orificios, que garantizan la circulación de aire
uniformemente.
El aire es suministrado por un compresor.

Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

9
• Se realizaron corridas para flujos de aire
variables, de 30, 50, 80 y 140 l/min. y tiempos de
aireación de 2 y 3 horas.

• El pH, temperatura y humedad  se midieron a
diario.

• El contenido de C, N y el recuento de bacterias
se determinaron al principio y al final de la
operación.
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

10
Mediciones
• Temperatura: termómetro con termocupla
• Carbono: medición microanalítica de carbono
• Nitrógeno, humedad y pH: se determinaron por
microkjeldahl y mediante potenciómetro

• Número de colonias (hongos y bacterias): AN
para bacterias y extracto de malta para hongos.
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

11
Resultados

12
Resultados generales
Parámetros del bagazo de uva
pH

4,12

Humedad(%)

10

Nitrógeno(%)

2,18

Carbono(%)

50,18

Relación C/N

23,02

Porcentaje de hongos (UFC/ml de muestra)

2,8x10^5

Porcentaje de bacterias (UFC/ml de muestra)

2,8x10^5

Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

13
Humedad
La humedad en el compostaje es un
parámetro muy importante ya que es el
medio de transporte y disolución de
los nutrientes requeridos por los
microorganismos.
Se mantuvo entre el 30% y el 60%, valores
adecuados para llevar a cabo la biodegradación.

Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

14
pH
Días
 

Valores de pH
30 L/min.

 

2 Hrs.

50 L/min.

3 Hrs.

2 Hrs.

80 L/min.

3 Hrs.

2 Hrs.

140 L/min.

3 Hrs.

2 Hrs.

3 Hrs.

1

4,2

4,08

4,2

4,6

3,4

4,1

4,24

4,16

2

4,42

4,31

4,5

4,5

3,7

4,2

4,35

4,07

3

5,39

5,8

4,9

5,8

4,5

4,6

4,66

4,29

4

6,58

6,16

6,9

7,6

6,2

5,6

6,57

5,05

5

6,83

6,42

7,1

7,8

6,9

6,6

6,82

5,96

6

7,37

6,55

7

8

7,4

6,9

6,82

6,23

7

7,56

6,77

7,1

7,51

7,2

7,08

7,36

6,49

8

7,78

6,8

7,31

8,3

7,5

7,17

7,24

6,56

9

7,34

6,96

7,4

8,45

7,9

7

7,12

6,69

10

7,37

7,15

7,3

8,2

7,9

7,11

6,39

6,71

11

7,6

7,1

7,44

8,35

7,9

7,1

7,39

6,86

12

7,78

7,2

7,4

8,36

7,9

7,45

7,2

6,97

13

7,83

7,17

8

8,44

7,9

7,4

7,25

7,02

14

7,63

7,33

8,1

8,49

7,9

7,67

7,3

7,07

15

7,72

7,34

8,13

8,41

7,9

8,2

7,93

7,34

Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

15
El pH se mantuvo acido hasta el 6to día de
aireación y se fue incrementando hacia los
últimos días.

El incremento del pH puede deberse a la
perdida de ácidos orgánicos, a través de la
volatilización (altas temperaturas), y la
liberación de amoniaco por efecto de la
descomposición microbiana.
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

16
Crecimiento microbiano
Hongos
Flujo de aireación UFC - 2 hrs. UFC - 3 hrs.
(L/min.)
aireación aireación
30 20x10^6

1,86x10^6

50 7,5x10^6

1,21x10^6

80 13,5x10^6

1,78x10^6

140 15x10^6

8,9x10^6

Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

17
Bacterias
Flujo de aireación UFC - 2 hrs. UFC - 3 hrs..
(L/min.)
aireación aireación
30 6,8x10^5

24x10^6

50 1,9x10^5

28,3x10^6

80 4,0x10^5

25x10^5

140 6,5x10^5

22x10^6

La concentración de m.o fue menor al finalizar el
experimento, quizás debido a los factores bióticos
(actividad protozoarios en el desecho) o factores
abióticos como la luz UV.
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

18
Temperatura
Días
 

Valores de pH
30 L/min.

 

2 Hrs.

50 L/min.

3 Hrs.

2 Hrs.

80 L/min.

3 Hrs.

2 Hrs.

140 L/min.

3 Hrs.

2 Hrs.

3 Hrs.

1

24

24

26

27

23

26

23,7

23

2

25

27

41

27

24

27

26,7

23

3

36

34,81

41

40

34

40

37,5

25

4

42

39,5

40

46

37

40

37,6

29,3

5

44

41,06

40

38

46

40

37,6

33,7

6

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41,69

37

37

48

40

30,17

34,74

7

37

41,89

35

37,5

52

41

32

35,65

8

40

31,2

3234

38,5

48

41

28

45,39

9

37

30,77

31

37,4

37

43

30,25

45,38

10

37

29,3

29

34,3

32

34

31,3

46,25

11

38

28,54

28

32,38

30

37

35,3

35,48

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28,06

28

30,22

30

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36,7

29,27

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29,2

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34,6

28,3

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27,5

29

30,7

30

32

27,2

25

15

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27

28

31,3

30

29

26

25

Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

19
En todos los casos la temperatura experimentó
un incremento desde el rango mínimo de 23º27º hasta valores máximos de 37,6º.
El incremento de la temperatura es un
indicador del desarrollo de la actividad
microbiana en un proceso aeróbico y esta
determinado por el calor de reacción que se
libera en la reacciones bioquímicas llevadas a
cabo.
Las altas temperaturas alcanzadas en este
proceso reducen el riesgo de crecimiento
microbiano patógeno (Nº optima:20
35º-55º)
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013
Nitrógeno
inicial: 2.18
final: 2.58 – 3.34
- Síntesis protoplasma celular.
- Aumenta la concentración de N reciclado
con la muerte de los microorganismos.
- Temperatura inferior a 90°C – no se
producen pérdidas de N volátil, ni NH3.
Conservación de Nutrientes.
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

21
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

22
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

23
Carbono
inicial: 50,18%
final: 40,56% - 47,29%
- Degradación del Carbono y su posterior
formación de CO2.

Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

24
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

25
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

26
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

27
Relación C/N
Inicial 23.02
Final 13.13 - 17.03
Los valores finales se deben al descenso de
la cantidad de Carbono y al aumento de
la cantidad de Nitrógeno.
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

28
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

29
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

30
Conclusiones

31
•

El flujo de aire usado y los tiempos de aireación
afectan el contenido de nitrógeno en el abono
orgánico, pero el efecto causado por el flujo de
aire sobre el contenido de nitrógeno no dependió
del tiempo de aireación seleccionado.

• El flujo de aire empleado afecto la relación C/N
en el abono orgánico, no siendo así el tiempo de
aireación sobre la relación C/N. Sin embargo, el
efecto causado por el flujo de aire no dependió del
tiempo de aireación seleccionado.
Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

32
Condiciones optimas:

Flujo de aire de 50 L/min.
Tiempo de aireación de 2 horas.

Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013

33
FIN

34

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Fermentacion en estado solido del desecho vitivinicola

  • 1. Fermentación en estado sólido del desecho generado en la industria vinícola • Manuel Vega Di Nezio • Hernán Casas • Fernando Alcazar 1
  • 3. Evaluar el efecto de la aireación en el biorreactor de lecho fijo semi sólido de bagazo de uva, proveniente de la elaboración de vino, sobre los parámetros indicadores de la biotransformación: • Humedad • Población microbiana • Relación C/N • Temperatura • pH Estos parámetros se evaluaron a diversos flujos de aire y tiempos de aireación. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 3
  • 4. Problema • Aumento de la cantidad de desechos producidos por la industria en todo el mundo. • Los desechos suelen estar constituidos por sustancias biodegradables y pueden ser usados para diversos fines mediante la aplicación de biotecnología. • Se debe mantener un manejo adecuado de estos residuos para evitar problemas de contaminación.   Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 4
  • 5. Solución • Biodegradación aeróbica de compuestos orgánicos. También conocida como “compostage” • Los MO son los encargados de transformar el material en nuevos productos. • Se deben dar condiciones de humedad y aireación adecuadas para poder obtener un producto estable, libre de patógenos, que pueda ser usado para acondicionamiento de suelos. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 5
  • 6. Antecedentes • Italia: Compostajes utilizando desechos de tomates, residuos de corcho, cáscaras de olivo y lodos de tenerías vegetales como sustrato. • España: Debido al aumento de desechos de la industria vitícola y de aceite de oliva  se empezaron a estudiar compostajes en estos residuos. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 6
  • 8. • Bagazo de Uva: Bagazo recién prensado, secado al sol recibiendo volteos cada 3 horas. En el procedimiento experimental al bagazo se le agrego agua, para aportar humedad a los MO. Luego se colocó en el biorreactor. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 8
  • 9. Biorreactor usado: Tanque cilíndrico de acero inoxidable, que posee una cámara de aire en la parte inferior y una capacidad de operación de 98 litros. El sistema de disposición del lecho consiste en un soporte de plástico que posee una serie de orificios, que garantizan la circulación de aire uniformemente. El aire es suministrado por un compresor. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 9
  • 10. • Se realizaron corridas para flujos de aire variables, de 30, 50, 80 y 140 l/min. y tiempos de aireación de 2 y 3 horas. • El pH, temperatura y humedad  se midieron a diario. • El contenido de C, N y el recuento de bacterias se determinaron al principio y al final de la operación. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 10
  • 11. Mediciones • Temperatura: termómetro con termocupla • Carbono: medición microanalítica de carbono • Nitrógeno, humedad y pH: se determinaron por microkjeldahl y mediante potenciómetro • Número de colonias (hongos y bacterias): AN para bacterias y extracto de malta para hongos. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 11
  • 13. Resultados generales Parámetros del bagazo de uva pH 4,12 Humedad(%) 10 Nitrógeno(%) 2,18 Carbono(%) 50,18 Relación C/N 23,02 Porcentaje de hongos (UFC/ml de muestra) 2,8x10^5 Porcentaje de bacterias (UFC/ml de muestra) 2,8x10^5 Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 13
  • 14. Humedad La humedad en el compostaje es un parámetro muy importante ya que es el medio de transporte y disolución de los nutrientes requeridos por los microorganismos. Se mantuvo entre el 30% y el 60%, valores adecuados para llevar a cabo la biodegradación. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 14
  • 15. pH Días   Valores de pH 30 L/min.   2 Hrs. 50 L/min. 3 Hrs. 2 Hrs. 80 L/min. 3 Hrs. 2 Hrs. 140 L/min. 3 Hrs. 2 Hrs. 3 Hrs. 1 4,2 4,08 4,2 4,6 3,4 4,1 4,24 4,16 2 4,42 4,31 4,5 4,5 3,7 4,2 4,35 4,07 3 5,39 5,8 4,9 5,8 4,5 4,6 4,66 4,29 4 6,58 6,16 6,9 7,6 6,2 5,6 6,57 5,05 5 6,83 6,42 7,1 7,8 6,9 6,6 6,82 5,96 6 7,37 6,55 7 8 7,4 6,9 6,82 6,23 7 7,56 6,77 7,1 7,51 7,2 7,08 7,36 6,49 8 7,78 6,8 7,31 8,3 7,5 7,17 7,24 6,56 9 7,34 6,96 7,4 8,45 7,9 7 7,12 6,69 10 7,37 7,15 7,3 8,2 7,9 7,11 6,39 6,71 11 7,6 7,1 7,44 8,35 7,9 7,1 7,39 6,86 12 7,78 7,2 7,4 8,36 7,9 7,45 7,2 6,97 13 7,83 7,17 8 8,44 7,9 7,4 7,25 7,02 14 7,63 7,33 8,1 8,49 7,9 7,67 7,3 7,07 15 7,72 7,34 8,13 8,41 7,9 8,2 7,93 7,34 Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 15
  • 16. El pH se mantuvo acido hasta el 6to día de aireación y se fue incrementando hacia los últimos días. El incremento del pH puede deberse a la perdida de ácidos orgánicos, a través de la volatilización (altas temperaturas), y la liberación de amoniaco por efecto de la descomposición microbiana. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 16
  • 17. Crecimiento microbiano Hongos Flujo de aireación UFC - 2 hrs. UFC - 3 hrs. (L/min.) aireación aireación 30 20x10^6 1,86x10^6 50 7,5x10^6 1,21x10^6 80 13,5x10^6 1,78x10^6 140 15x10^6 8,9x10^6 Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 17
  • 18. Bacterias Flujo de aireación UFC - 2 hrs. UFC - 3 hrs.. (L/min.) aireación aireación 30 6,8x10^5 24x10^6 50 1,9x10^5 28,3x10^6 80 4,0x10^5 25x10^5 140 6,5x10^5 22x10^6 La concentración de m.o fue menor al finalizar el experimento, quizás debido a los factores bióticos (actividad protozoarios en el desecho) o factores abióticos como la luz UV. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 18
  • 19. Temperatura Días   Valores de pH 30 L/min.   2 Hrs. 50 L/min. 3 Hrs. 2 Hrs. 80 L/min. 3 Hrs. 2 Hrs. 140 L/min. 3 Hrs. 2 Hrs. 3 Hrs. 1 24 24 26 27 23 26 23,7 23 2 25 27 41 27 24 27 26,7 23 3 36 34,81 41 40 34 40 37,5 25 4 42 39,5 40 46 37 40 37,6 29,3 5 44 41,06 40 38 46 40 37,6 33,7 6 45 41,69 37 37 48 40 30,17 34,74 7 37 41,89 35 37,5 52 41 32 35,65 8 40 31,2 3234 38,5 48 41 28 45,39 9 37 30,77 31 37,4 37 43 30,25 45,38 10 37 29,3 29 34,3 32 34 31,3 46,25 11 38 28,54 28 32,38 30 37 35,3 35,48 12 37 28,06 28 30,22 30 35 36,7 29,27 13 37 29,2 29 32,7 30 34 34,6 28,3 14 36 27,5 29 30,7 30 32 27,2 25 15 35 27 28 31,3 30 29 26 25 Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 19
  • 20. En todos los casos la temperatura experimentó un incremento desde el rango mínimo de 23º27º hasta valores máximos de 37,6º. El incremento de la temperatura es un indicador del desarrollo de la actividad microbiana en un proceso aeróbico y esta determinado por el calor de reacción que se libera en la reacciones bioquímicas llevadas a cabo. Las altas temperaturas alcanzadas en este proceso reducen el riesgo de crecimiento microbiano patógeno (Nº optima:20 35º-55º) Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013
  • 21. Nitrógeno inicial: 2.18 final: 2.58 – 3.34 - Síntesis protoplasma celular. - Aumenta la concentración de N reciclado con la muerte de los microorganismos. - Temperatura inferior a 90°C – no se producen pérdidas de N volátil, ni NH3. Conservación de Nutrientes. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 21
  • 22. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 22
  • 23. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 23
  • 24. Carbono inicial: 50,18% final: 40,56% - 47,29% - Degradación del Carbono y su posterior formación de CO2. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 24
  • 25. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 25
  • 26. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 26
  • 27. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 27
  • 28. Relación C/N Inicial 23.02 Final 13.13 - 17.03 Los valores finales se deben al descenso de la cantidad de Carbono y al aumento de la cantidad de Nitrógeno. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 28
  • 29. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 29
  • 30. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 30
  • 32. • El flujo de aire usado y los tiempos de aireación afectan el contenido de nitrógeno en el abono orgánico, pero el efecto causado por el flujo de aire sobre el contenido de nitrógeno no dependió del tiempo de aireación seleccionado. • El flujo de aire empleado afecto la relación C/N en el abono orgánico, no siendo así el tiempo de aireación sobre la relación C/N. Sin embargo, el efecto causado por el flujo de aire no dependió del tiempo de aireación seleccionado. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 32
  • 33. Condiciones optimas: Flujo de aire de 50 L/min. Tiempo de aireación de 2 horas. Vega Di Nezio-Casas-Alcazar. Biorreactores 2013 33