Este documento describe el procedimiento para preparar medios de cultivo microbiológico. Se elaboraron 16 medios de cultivo usando agar nutriente esterilizado en autoclave. Cada medio fue expuesto en diferentes ambientes por 24 horas y luego analizado, mostrando mayor crecimiento microbiano en áreas con más contaminación como baños versus dormitorios.

1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL
INFORME N°2: PREPARACIÓN DE MEDIO DE
CULTIVO MICROBIOLÓGICO
PRESENTADO POR:
OBANDO OVIEDO, FLAVIA LISSETH
CICLO:
VII
CURSO:
BIOTECNOLOGÍA
DOCENTE:
SOTO GONZALES, HEBERT HERNAN
ILO – 2022

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ÍNDICE
1. INTRODUCCIÓN......................................................................................................................... 3
2. OBJETIVOS.................................................................................................................................. 3
3. MARCO TEÓRICO...................................................................................................................... 3
3.1. FUNCIONAMIENTO DE EQUIPOS DEL LABORATORIO DE AGUAS ........................ 3
3.1.1. AUTOCLAVE ..................................................................................................................... 3
3.1.2. CÁMARA DE FLUJO LAMINAR.................................................................................... 5
3.1.3. SISTEMA DE PURIFICACIÓN DE AGUAS.................................................................. 7
4. UBICACIÓN DEL LABORATORIO DE CALIDAD DE AGUA – UNAM ........................... 8
5. MATERIALES Y EQUIPOS ....................................................................................................... 9
5.1. MATERIALES...................................................................................................................... 9
5.2. EQUIPOS............................................................................................................................... 9
6. PROCEDIMIENTO.................................................................................................................... 10
7. RESULTADOS............................................................................................................................ 13
8. DISCUSIÓN DE RESULTADOS .............................................................................................. 14
9. CONCLUSIONES....................................................................................................................... 15
10. RECOMENDACIONES......................................................................................................... 15
11. BIBLIGRAFÍA........................................................................................................................ 16

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1. INTRODUCCIÓN
Un medio de cultivo es aquel que ofrece las condiciones ambientales necesarias para que se
puedan desarrollar o propagar los microorganismos, existen factores que pueden afectar o
influir en su desarrollo, como es el caso de la temperatura, humedad, presión, pH, radiación,
entre otros; lo cual determina la capacidad que tienen estos microorganismos para
propagarse en un medio específico.
En relación a los cultivos, un cultivo que tiene solo una clase de microrganismos se conoce
como cultivo puro, mientras que el que presenta más de una clase, se conoce como cultivo
mixto; en el análisis de estos microorganismos se tiene en cuenta la forma, la cual es una
forma de clasificación, y la cantidad, que en cierta medida determina la carga de
microorganismos que están presentes en un lugar determinado.
La presente práctica de laboratorio tiene como finalidad elaborar y distribuir medios de
cultivos, las cuales serán sometidas a distintos espacios o lugares, según la elección de cada
estudiante, bajo condiciones distintas, con ello se podrá observar, analizar y cuantificar los
microrganismos presentes en cada medio de cultivo, pudiendo de esta manera hacer una
comparación entre una placa y otra y determinar los posibles elementos influyentes en la
variación del desarrollo ya sea de bacterias y hongos.
2. OBJETIVOS
• Elaborar y distribuir un medio de cultivos en placas Petri.
• Ver el funcionamiento de los equipos de laboratorio de aguas.
3. MARCO TEÓRICO
3.1. FUNCIONAMIENTO DE EQUIPOS DEL LABORATORIO DE AGUAS
3.1.1. AUTOCLAVE
Es un equipo que sirve para esterilizar material de laboratorio y médico, utilizando
vapor de agua a alta presión y temperatura, evitando con las altas presiones que el
agua llegue a ebullir a pesar de su alta temperatura. (YB VALDIVIAS)

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Especificaciones Generales:
• La unidad completa está hecha de acero inoxidable.
• Compuerta de sellado hermético tipo mecánico de giro.
• Seguro de apertura de tapa con anclaje.
• Panel de control digital (display).
• Pulsadores de configuración de parámetros de temperatura y tiempo.
• Totalmente automático, no necesita supervisión, fácil de usar.
• Apagado automáticamente con sonido recordatorio después de la
esterilización.
Figura 01: Autoclave, Fuente: Elaboración propia
Las partes del autoclave son las siguientes:
• Perilla: esta parte es fundamental para la seguridad de la puerta, permite
abrir y cerrar con movimientos rotativos.
• Puerta: sin esta parte el proceso de esterilización no se llevará a cabo, la
puerta es la encargada de sellar de forma hermética el autoclave.
• Tanque de agua destilada: el autoclave cuenta con su propio contenedor
de agua destilada.
• Cámara: este es el lugar donde se colocan los elementos en el autoclave,
esta zona interior es de acero inoxidable, lo cual es muy importante para
evitar daños.
• Tanque de agua: este es un recipiente que viene integrado al autoclave, en
esta parte caerá el agua utilizada en la destilación.

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• Panel de control: Para facilitarte el control en todo el proceso. En el panel
podrás ajustar las distintas funciones que debe desempeñar el autoclave.
• Pantalla led: te enseñará todo lo que debes saber sobre el status del
autoclave en funcionamiento, encendido o apagado.
• Filtro bacteriológico: esta parte es muy importante y fundamental, este
filtro se encarga de retener todos los microorganismos, bacterias y posibles
virus.
3.1.2. CÁMARA DE FLUJO LAMINAR
La campana de flujo laminar o cabina de flujo laminar, es un instrumento que se
emplea para poder tener ambientes libres de contaminación, este equipo permite
proteger la muestra que se manipula.
Se le llama flujo laminar debido que es un flujo de aire constante con una dirección
y velocidad uniforme, mediante este proceso se evitan las turbulencias y se reduce
el riesgo de contaminación cruzada.
Características del modelo Telstar:
• El flujo laminar está monitorizado mediante un sensor de velocidad que
mantiene un flujo constante en toda la superficie del trabajo.
• La cabina está dotada de unos sistemas de alarma que alertan de forma tanto
visual como acústica cualquier anomalía.
• La junta de silicona permite el cierre hermético de la cámara ofreciendo una
mayor protección para el usuario y la muestra o producto.
• La junta previene la introducción de partículas del ambiente al interior de la
cámara, reduciendo la contaminación de las muestras.
• Los bordes redondeados del interior de la cabina facilitan la desinfección y
maximizan la prevención de la contaminación.

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Figura 02: Cabina de flujo laminar, Fuente: Elaboración propia
Panel de control
La cabina de flujo laminar, dispone de una pantalla en color que permite comprobar
los parámetros de seguridad. Es útil para optimizar el servicio, la velocidad de flujo
y para controlar en todo momento el estado de la cabina.
• Pantalla verde: Cabina en condiciones seguras.
• Pantalla roja: Cabina fuera de especificaciones.
• Pantalla amarilla: Cabina en proceso de descontaminación.
Figura 03: Pantalla de control, Fuente: Elaboración propia

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Partes de la cabina de flujo laminar:
Figura 04: Partes de la cabina, Fuente: (Instrumentación Científico Técnica)
Figura 05: Partes de la cabina, Fuente: (Aspelab)
3.1.3. SISTEMA DE PURIFICACIÓN DE AGUAS
El sistema de purificación del agua tiene la finalidad de eliminar contaminantes
del agua, ya sean productos químicos, minerales, sólidos y bacterias. En algunos
casos, se pueden usar purificadores de agua para reducir los contaminantes que
son insípidos, inodoros e invisibles.
El sistema de purificación de agua se compone de los siguientes elementos o
partes:
• Sistema de ósmosis inversa: En un equipo de ósmosis inversa, al aplicar
una presión suficientemente alta al agua, se le fuerza a pasar a través de
una membrana porosa que rechaza a más del 99% de las sales.

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• Ablandador de agua: disminuyen de forma importante los minerales
(calcio y magnesio) que causan la dureza en el agua y que pueden llegar a
formar sarro e incrustaciones en tuberías, calentadores, maquinaria,
accesorios y depósitos.
• Tanque de agua potable
• Agua osmotizada: agua que es obtenida mediante el proceso de ósmosis
inversa.
• Agua tipo II: El agua pura se almacena en el innovador sistema cerrado
Arium ® Bagtank. Aquí, el agua pura preparada está protegida de forma
segura contra la contaminación secundaria. (Sartorius)
• Purificar de agua Arium advance: El Arium® advance cuenta con la más
alta retención de iones a velocidades de hasta 24 I/h. Conectado
directamente a la fuente de alimentación de agua potable, este sistema
produce agua pura de la más alta calidad. (Sartorius)
• Dispensador
Figura 06: Partes del purificador de agua, Fuente: Elaboración propia
4. UBICACIÓN DEL LABORATORIO DE CALIDAD DE AGUA – UNAM
El laboratorio de calidad de agua se encuentra en la Universidad Nacional de Moquegua sede
Ilo.
A continuación, se muestra una imagen satelital, extraída de Google Earth, con las
respectivas coordenadas de ubicación.

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Figura 07: Ubicación del laboratorio, Fuente: Elaboración propia
Tabla 01: Coordenadas de ubicación
COORDENADAS DEL LABORATORIO
ESTE NORTE
251799.13 m E 8052318.82 m S
5. MATERIALES Y EQUIPOS
5.1. MATERIALES
- Placa Petri
- Agar nutriente
- Papel fill o bolsa pequeña
- Guantes
- Marcador
5.2. EQUIPOS
- Estufa
- Autoclave
- Cámara de flujo laminar
- Sistema purificador de agua
- Contador de colonias

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6. PROCEDIMIENTO
1. Se empezó con el Agar nutriente, el cual fue llevado a la autoclave por un lapso de 20
minutos, para ello se usó el agua purificada, la cual debe llegar hasta una marca que
tiene el equipo, lo cual indica que recién se puede empezar a programar para su
funcionamiento.
Figura 08: Autoclave, Fuente: Elaboración propia
2. Mientras se espera que termine su proceso la autoclave, se programó también la cabina
de flujo laminar por 15 minutos, para que vaya desinfectando el lugar del trabajo.
Figura 09: Cabina de flujo laminar, Fuente: Elaboración propia
3. Se sacaron las placas Petri de la estufa, las cuales estaban protegidas y aisladas del
medio exterior, ello con la finalidad de que no se infecten o contaminen.

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Figura 10: Placas petri, Fuente: Elaboración propia
4. Una vez que estaba lista la cabina se llevaron los paquetes de las placas y se fue sacando
una por una con cuidado para agregar el medio de cultivo. Para ello el personal
encargado tuvo que lavarse las manos y luego desinfectarse con alcohol.
Figura 11: Proceso dentro de la cabina de flujo , Fuente: Elaboración propia
5. Una vez que terminó el tiempo programado en la autoclave se sacó los frascos de agar
nutriente y fueron llevados a la cabina para agregar cierta cantidad del mismo en las
placas para cada estudiante, lo cual servirá como medio de cultivo microbiológico.
Figura 12: Agar nutriente, Fuente: Elaboración propia

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6. Se prepararon 16 medios de cultivo, agregando una cantidad de agar nutriente,
aproximadamente hasta la mitad de las placas. Luego de finalizar este proceso, cada
placa se protegió del medio exterior con una bolsa pequeña.
Figura 13: Medio de cultivo, Fuente: Elaboración propia
7. Cada placa entregada a un estudiante en específico, se dejó destapada en un espacio
concreto por un lapso de 24 horas, terminando este tiempo cada placa se tapó y fue
sellada con papel fill.
Figura 14: Medio de cultivo / 24 horas , Fuente: Elaboración propia
8. Luego cada muestra debe ser llevada a laboratorio para ser analizada y comparada con
cada placa de los demás estudiantes del curso.
Figura 15: Comparación de cada placa, Fuente: Elaboración propia

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7. RESULTADOS
Luego de esperar el tiempo indicado (24 horas) se llevó las placas con la muestra al
laboratorio para ser analizadas y comparadas con las placas de los demás integrantes del
curso.
A continuación, se muestra el resultado obtenido por mi persona, luego de haber dejado la
placa con el medio de cultivo microbiológico en mi cuarto, ubicado en Alto Ilo.
Figura 16: Resultado de mi placa con el medio de cultivo, Fuente: Elaboración propia
Esta muestra será comparada con la de un compañero del curso, que dejó su placa en su
servicio higiénico, específicamente en la ducha, será denominada placa 2.
Figura 17: Resultado de la placa 2, Fuente: Elaboración propia

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Figura 18: Resultado de la placa 2 en el contador de colonias, Fuente: Elaboración
propia
Como segunda muestra de comparación, se eligió a la placa que contiene el medio de cultivo
de una compañera que eligió como espacio su cuarto, pero que este es accesible para sus
mascotas, será denominada placa 3.
Figura 19: Resultado de la placa 3, Fuente: Elaboración propia
8. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Tal como se pudo apreciar en la placa 1 hay poca presencia de microrganismos, como es
el caso de colonias de bacterias y hongos, posiblemente se debe a que hay poca presencia
de los mismos en el espacio en el que se dejó la placa Petri con el medio de cultivo, otra
posible respuesta podría ser el tiempo de incubación de las bacterias, ya que después de las
24 horas se procedió a observar los detalles de la placa, mientras que en la placa 2 y 3
pasadas las 24 horas se procedió a sellar la placa para que no esté en contacto con el medio
externo, y pasado un día aproximadamente se procedió a observar los cambios.

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En el caso de la placa 2, esta fue dejada en la bañera, por lo que estuvo en contacto con las
bacterias que se encuentran en el servicio higiénico, pudiendo ser posiblemente el lugar
mas cargado o concentrado con estos microorganismos, motivo por el cual se aprecian
colonias de bacterias de forma clara, con diferentes formas y tamaños, predominando la
forma irregular.
Para la placa 3, que se dejó en un dormitorio al que acceden también las mascotas, se
aprecia la presencia de microorganismos, incluyendo bacterias y hongos, se diferencia
entre ambos, ya que los hongos se expanden, como si fuera una mancha, en términos de
cantidad se podría decir que hay presencia de dos hongos y menor cantidad de colonias
bacterianas que en la placa 2.
La diferencia entre la placa 2 y 3, está en el espacio en el que se dejó el cultivo
microbiológico, antes de hacer el experimento se podría inferir que existe mayor cantidad
de bacterias en un baño que en un dormitorio, y con los resultados obtenidos se comprueba
lo pensado o planteado.
9. CONCLUSIONES
• Es importante tener cuidado al momento de hacer la experimentación, verificando que
los materiales no se contaminen, de esa manera el cultivo microbiológico podrá cumplir
su finalidad, y se podrá observar los microorganismos presentes en un determinado
espacio.
• La cantidad y tipo de microorganismos, ya sean bacterias y hongos, va a depender de la
zona elegida para dejar el cultivo, hay espacios donde hay mayor presencia de los
mismos, como es el caso de los servicios higiénicos.
• Usando los cultivos microbiológicos se puede comprobar y analizar la cantidad de
microorganismos presentes en un determinado lugar, ello va a depender de las
condiciones del mismo, y esto puede dar un indicio de los cuidados y la higiene presente.
10. RECOMENDACIONES
• Se debe usar en todo momento los implementos de seguridad, como es el caso de la bata
de laboratorio y los guantes, para evitar contaminar las muestras.
• Se deben respetar las reglas de laboratorio para evitar accidentes.
• Es importante cuidar el material encargado para cada estudiante.

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11. BIBLIGRAFÍA
Aspelab. (s.f.). Obtenido de https://slideplayer.es/slide/1111393/
Instrumentación Científico Técnica. (s.f.). Obtenido de
http://www.ictsl.net/productos/aparatos/02e34698af0a59d59.html
Sartorius. (s.f.). Obtenido de https://www.medicalexpo.es/prod/sartorius-group/product-
69922-644418.html
Sartorius. (s.f.). Obtenido de https://www.sartorius.com/shop/ww/en/usd/applications-
laboratory-lab-water-purification/arium-bagtank-50-w-o-pump/p/H2O-AOV-
50-W#
YB VALDIVIAS. (s.f.). Obtenido de http://valdivias.com.pe/productos/autoclave-de-
50l__trashed/