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UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS
FACULTAD DE QUÍMICA E INGENIERÍA QUÍMICA
TEMA DE EXPOSICIÓN:
“OBTENCIÓN DE ÁCIDO LÁCTICO POR
FERMENTACIÓN DE ALMIDÓN DE ÑAME”
Integrantes: E.A.P.:
Elvis Ticllacuri De la Cruz Ing. Química
Darío Quintanilla Bazalar Ing. Química
Tyron Zelada Segales Ing. Agroindustrial
Wilmer Alvites Obregón Ing. Química
GRUPO N° 1
INTRODUCCIÓN
Los alimentos lácteos además de ser una
fuente diaria de proteínas, grasas y
carbohidratos constituyen también una
fuente importante de microorganismos
capaces de producir, bajo ciertas
condiciones, productos de interés industrial.
En esta presentación se abordará el estudio
de una mezcla de 2 bacterias ácido lácticas
pertenecientes cada una a géneros
diferentes: Lactobacillus y Streptococcus.
AISLAMIENTO de Lactobacillius delbrueckii ssp bulgaricus
Fuente de
obtención:
Leche de
cabra (LC)
Muestreo en frascos
de vidrio porta
muestras
(esterilizadas a 121
°C)
Inoculación: Dilución
1:10 esto es 5 ml (LC)
en 45 ml (Caldo MRS)
Incubación:
Temperatura: 37±1 °C
Tiempo: 24-48 h
Condiciones: Anaeróbicas
Campana de desecación
Atmósfera enriquecida con
𝐶𝑂2: 5-10 %
Se considera tubos de
crecimiento positivo
aquellos que presentaron
turbidez del medio.
Se evaluó la densidad
poblacional (CFU/ml) de
cada muestra por
escala McFarland.
De los tubos positivos se
toma una muestra de 1
ml y se dispersa sobre
una placa Pertri con Agar
nutritivo. Para recuento
en UFC/ml
Se incubó de 24-48 h a
37 ± 1 °C, las muestras
podrían ser preservadas
de 4 a 8 °C durante 7
días y luego activadas
con caldo MRS e
incubación.
CARACTERIZACIÓN del Lactobacillius delbrueckii ssp bulgaricus
MORFOLÓGICA
Característica
Colonia del Lactobacillius
delbrueckii ssp bulgaricus
Color Gris cremoso
Tamaño 1 a 5 mm
Forma Circular
Crecimiento en
Agar
Irregular
Elevación Elevado en el centro
Contorno Completo
CARACTERIZACIÓN de Lactobacillius delbrueckii ssp bulgaricus
Prueba Resultados Prueba Resultados
Forma (microscópica)
Bacilo (bastón
alargado)
Trehalosa Positivo
Tipo de metabolismo Quimiorganotrófica Lactosa Positivo
Tipo de fermentación Homofermentativa GlcNac Positivo
Tipo de respiración Anaeróbica Manitol Positivo
Formación de ácido a partir de
azúcares fermentados
Positivo Movilidad Negativo
Fermentación de azúcares: Patogénica Negativo
Sacarosa Negativo Oxidasa Negativo
Glucosa Positivo Gram Positivo
Maltosa Positivo Esporas Negativo
FISIOLÓGICA
CARACTERIZACIÓN de Streptococcus thermophilus
MORFOLÓGICA
Característica
Colonia Streptococcus
thermophilus
Color Blanco-crema
Tamaño 0.5 a 3.0 mm
Forma Circular
Crecimiento en Agar Irregular
Elevación Convexo
Contorno Completo
Prueba Resultados Prueba Resultados
Forma
Cadenas de esferas
torcidas
Trehalosa Negativo
Tipo de metabolismo Quimiorganotrófica Lactosa Positivo
Tipo de fermentación Homofermentativa Manitol Negativo
Tipo de respiración Anaeróbica facultativa Movilidad Negativo
Formación de ácido a partir de
azúcares fermentados
Positivo Patogénica Negativo
Fermentación de azúcares: Oxidasa Negativo
Sacarosa Positivo Gram Negativo
Glucosa Positivo Esporas Negativo
Maltosa Negativo
CARACTERIZACIÓN…..(CONTINUACIÓN)
FISIOLÓGICA
Caracterización del M.O.
El ñame
Almidón
El caso de la amilosa unidas entre ellas por enlaces a 1-4
lo que da lugar a una cadena lineal. En el caso de la
amilopectina, aparecen ramificaciones debidas a enlaces a
1-6.
Caracterización del almidón
Identificación
cualitativa
Caracterización
Química
Caracterización Funcional
Gelatinización Absorción de
agua
Solubilidad y poder de
hinchamiento
Propiedades de
pastificación
Fermentación
láctica
Microorganismos utilizados para
fermentación láctica
Clasificación científica del Lactobacillus
Delbrueckii ssp. Bulgaricus.
El microorganismo Streptococcus thermophilius.
Interacción de los microorganismos Lactobacillus
delbrueckii ssp. bulgaricus y el Streptococcus
thermophilus.
Sembrado y caracterización de los
cultivos bacterianos
ÁCIDO
LÁCTICO
Estructura química del ácido
láctico D (-) y ácido Láctico L (+)
Estructura del APL basado en su quiralidad
ÁCIDO POLILÁCTICO
(APL)
Propiedades físicas y
mecánicas del APL
Caracterización y análisis del APL
Espectroscopia
infrarroja
Termogravimetría
Calorimetría
diferencial de
barrido
Biodegradabilidad
del APL
Producción de APL
Policondensación
Fermentación del almidón,
como para la posterior
obtención de ácido láctico a
partir de D. rotundata
Primera etapa: Obtención del
almidón a partir de D.
rotundata.
Segunda etapa: Obtención de
ácido láctico.
Tercera etapa: Obtención
del APL
CONCLUSIONES
El rendimiento del 15.48%
obtenido en el proceso de
extracción del almidón, se
considera adecuado,
comparado con otros métodos
reportados por diferentes
autores, así como 16.6%
reportado por Corpoica (2003),
igualmente Meaño, Ciarfella y
Dorto, (2014), obtuvieron un
7.44% de rendimiento; lo que
permite considerar como una
buena eficiencia en el proceso
de obtención de almidón
realizado en el presente estudio.
El valor encontrado en el
almidón de ñame analizado en
la presente investigación
correspondiente a 26,78%,
considerándo un almidón con
características similares a
almidones de otras variedades
de ñame;. Por lo anterior se
puede considerar que el ñame
espino es una buena fuente de
almidón para utilizarlo en
muchos procesos industriales.
El ácido láctico
producido en la etapa de
fermentación, se obtuvo
con una concentración
del 16,26%, Comparando
este resultado con los
obtenidos por Medina et
al, (2014) y Quintero et al,
(2012) quienes
obtuvieron un 13.90% y
17.6% respectivamente,
se considera este
resultado aceptable.
RECOMENDACIONES
Realizar un estudio de
evaluación de la
incidencia de variables
en el proceso de
obtención de ácido
láctico y la
optimización del
mismo
Realizar la cinética de
producción de
biomasa, en la etapa
de siembra del
microorganismo, la
cinética de
producción de ácido
láctico y la de
consumo de sustrato
probando variedad de
ecuaciones
propuestas en la
literatura para tal fin.
Realizar un estudio que
permita optimizar la
etapa de
oligomerización, para
mejorar el porcentaje de
conversión de ácido
láctico y por
consiguiente poder
obtener el APL. Así
mismo probar otros
métodos de seguimiento
a la conversión del
oligomero, diferentes al
del valor ácido

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  • 1. UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS FACULTAD DE QUÍMICA E INGENIERÍA QUÍMICA TEMA DE EXPOSICIÓN: “OBTENCIÓN DE ÁCIDO LÁCTICO POR FERMENTACIÓN DE ALMIDÓN DE ÑAME” Integrantes: E.A.P.: Elvis Ticllacuri De la Cruz Ing. Química Darío Quintanilla Bazalar Ing. Química Tyron Zelada Segales Ing. Agroindustrial Wilmer Alvites Obregón Ing. Química GRUPO N° 1
  • 2. INTRODUCCIÓN Los alimentos lácteos además de ser una fuente diaria de proteínas, grasas y carbohidratos constituyen también una fuente importante de microorganismos capaces de producir, bajo ciertas condiciones, productos de interés industrial. En esta presentación se abordará el estudio de una mezcla de 2 bacterias ácido lácticas pertenecientes cada una a géneros diferentes: Lactobacillus y Streptococcus.
  • 3. AISLAMIENTO de Lactobacillius delbrueckii ssp bulgaricus Fuente de obtención: Leche de cabra (LC) Muestreo en frascos de vidrio porta muestras (esterilizadas a 121 °C) Inoculación: Dilución 1:10 esto es 5 ml (LC) en 45 ml (Caldo MRS) Incubación: Temperatura: 37±1 °C Tiempo: 24-48 h Condiciones: Anaeróbicas Campana de desecación Atmósfera enriquecida con 𝐶𝑂2: 5-10 % Se considera tubos de crecimiento positivo aquellos que presentaron turbidez del medio. Se evaluó la densidad poblacional (CFU/ml) de cada muestra por escala McFarland. De los tubos positivos se toma una muestra de 1 ml y se dispersa sobre una placa Pertri con Agar nutritivo. Para recuento en UFC/ml Se incubó de 24-48 h a 37 ± 1 °C, las muestras podrían ser preservadas de 4 a 8 °C durante 7 días y luego activadas con caldo MRS e incubación.
  • 4. CARACTERIZACIÓN del Lactobacillius delbrueckii ssp bulgaricus MORFOLÓGICA Característica Colonia del Lactobacillius delbrueckii ssp bulgaricus Color Gris cremoso Tamaño 1 a 5 mm Forma Circular Crecimiento en Agar Irregular Elevación Elevado en el centro Contorno Completo
  • 5. CARACTERIZACIÓN de Lactobacillius delbrueckii ssp bulgaricus Prueba Resultados Prueba Resultados Forma (microscópica) Bacilo (bastón alargado) Trehalosa Positivo Tipo de metabolismo Quimiorganotrófica Lactosa Positivo Tipo de fermentación Homofermentativa GlcNac Positivo Tipo de respiración Anaeróbica Manitol Positivo Formación de ácido a partir de azúcares fermentados Positivo Movilidad Negativo Fermentación de azúcares: Patogénica Negativo Sacarosa Negativo Oxidasa Negativo Glucosa Positivo Gram Positivo Maltosa Positivo Esporas Negativo FISIOLÓGICA
  • 6. CARACTERIZACIÓN de Streptococcus thermophilus MORFOLÓGICA Característica Colonia Streptococcus thermophilus Color Blanco-crema Tamaño 0.5 a 3.0 mm Forma Circular Crecimiento en Agar Irregular Elevación Convexo Contorno Completo
  • 7. Prueba Resultados Prueba Resultados Forma Cadenas de esferas torcidas Trehalosa Negativo Tipo de metabolismo Quimiorganotrófica Lactosa Positivo Tipo de fermentación Homofermentativa Manitol Negativo Tipo de respiración Anaeróbica facultativa Movilidad Negativo Formación de ácido a partir de azúcares fermentados Positivo Patogénica Negativo Fermentación de azúcares: Oxidasa Negativo Sacarosa Positivo Gram Negativo Glucosa Positivo Esporas Negativo Maltosa Negativo CARACTERIZACIÓN…..(CONTINUACIÓN) FISIOLÓGICA
  • 8. Caracterización del M.O. El ñame Almidón El caso de la amilosa unidas entre ellas por enlaces a 1-4 lo que da lugar a una cadena lineal. En el caso de la amilopectina, aparecen ramificaciones debidas a enlaces a 1-6.
  • 9. Caracterización del almidón Identificación cualitativa Caracterización Química Caracterización Funcional Gelatinización Absorción de agua Solubilidad y poder de hinchamiento Propiedades de pastificación
  • 10. Fermentación láctica Microorganismos utilizados para fermentación láctica Clasificación científica del Lactobacillus Delbrueckii ssp. Bulgaricus. El microorganismo Streptococcus thermophilius. Interacción de los microorganismos Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus y el Streptococcus thermophilus.
  • 11. Sembrado y caracterización de los cultivos bacterianos ÁCIDO LÁCTICO Estructura química del ácido láctico D (-) y ácido Láctico L (+) Estructura del APL basado en su quiralidad
  • 12. ÁCIDO POLILÁCTICO (APL) Propiedades físicas y mecánicas del APL Caracterización y análisis del APL Espectroscopia infrarroja Termogravimetría Calorimetría diferencial de barrido Biodegradabilidad del APL Producción de APL Policondensación
  • 13. Fermentación del almidón, como para la posterior obtención de ácido láctico a partir de D. rotundata Primera etapa: Obtención del almidón a partir de D. rotundata. Segunda etapa: Obtención de ácido láctico. Tercera etapa: Obtención del APL
  • 14. CONCLUSIONES El rendimiento del 15.48% obtenido en el proceso de extracción del almidón, se considera adecuado, comparado con otros métodos reportados por diferentes autores, así como 16.6% reportado por Corpoica (2003), igualmente Meaño, Ciarfella y Dorto, (2014), obtuvieron un 7.44% de rendimiento; lo que permite considerar como una buena eficiencia en el proceso de obtención de almidón realizado en el presente estudio. El valor encontrado en el almidón de ñame analizado en la presente investigación correspondiente a 26,78%, considerándo un almidón con características similares a almidones de otras variedades de ñame;. Por lo anterior se puede considerar que el ñame espino es una buena fuente de almidón para utilizarlo en muchos procesos industriales. El ácido láctico producido en la etapa de fermentación, se obtuvo con una concentración del 16,26%, Comparando este resultado con los obtenidos por Medina et al, (2014) y Quintero et al, (2012) quienes obtuvieron un 13.90% y 17.6% respectivamente, se considera este resultado aceptable.
  • 15. RECOMENDACIONES Realizar un estudio de evaluación de la incidencia de variables en el proceso de obtención de ácido láctico y la optimización del mismo Realizar la cinética de producción de biomasa, en la etapa de siembra del microorganismo, la cinética de producción de ácido láctico y la de consumo de sustrato probando variedad de ecuaciones propuestas en la literatura para tal fin. Realizar un estudio que permita optimizar la etapa de oligomerización, para mejorar el porcentaje de conversión de ácido láctico y por consiguiente poder obtener el APL. Así mismo probar otros métodos de seguimiento a la conversión del oligomero, diferentes al del valor ácido