La técnica de patch-clamp permite medir las corrientes que fluyen a través de los canales iónicos de la membrana celular y conocer la actividad de un solo canal, desarrollada en 1976 por Neher y Sakmann y premiada con el Nobel en 1991. Esta técnica utiliza un micropipeta de vidrio para aislar una porción de membrana y medir las corrientes iónicas, lo que permitió por primera vez grabar las corrientes de un solo canal y demostrar su papel en el potencial de acción.

1. TÉCNICAS ELECTROFISIOLÓGICAS:
PATCH-CLAMP
Por Paola Micaela Ozzano

2. INTRODUCCIÓN
 Definición:
 Técnica electrofisiológica para medir
corriente eléctrica que pasa a través de la
membrana en un canal sencillo en células.

3. INTRODUCCIÓN

4. INTRODUCCIÓN
 Propiedades de membrana a tener en
cuenta:
 Difusión
 Corriente eléctrica:
 Potencial eléctrico ( voltaje, V)
 Conductancia eléctrica (G)
 Voltaje membrana (Vm)
 Potencial de equilibrio €

5. POTENCIAL DE ACCIÓN

6. ESTADOS FUNCIONALES DE LOS CANALES DE NA+ Y K+ OPERADOS POR VOLTAJE

7. CAMBIOS EN LA PERMEABILIDAD IÓNICA RELATIVA DURANTE EL POTENCIAL DE ACCIÓN

8. MÉTODO DE CONTROL DE VOLTAJE: VOLTAJE CLAMP
 Método de la pinza de voltaje

9. MÉTODO DE FIJACIÓN (PINZAMIENTO) DE VOLTAJE
 Esta técnica es empleada para el registro de
las corrientes de los canales iónicos
dependientes de voltaje capaces de generar
un potencial de acción.

10. MÉTODO DE FIJACIÓN (PINZAMIENTO) DE VOLTAJE
Alan Hodgkin Andrew Huxley
 Utilizaron la técnica de control de voltaje para investigar los
cambios de permeabilidad subyacentes al potencial de acción.

11. TÉCNICA DE PATCH-CLAMP
(FIJACIÓN DE MEMBRANA, MÉTODO DE CONTROL EN PARCHE)
 Técnica diseñada en 1976 que permite medir
las corrientes que fluyen a través de canales
iónicos de la membrana celular, conocer el
registro de la actividad de un solo canal iónico y
la medida directa de sus propiedades
(conductancia y cinética)
 Este descubrimiento hizo posible la grabación
de las corrientes de un solo canal iónico por
primera vez, demostrando la participación de la
célula en los procesos de potencial de acción.

12. TÉCNICA DE PATCH-CLAMP
(FIJACIÓN DE MEMBRANA, MÉTODO DE CONTROL EN PARCHE)
 Descubrimiento de las técnicas electrofisiológicas
de patch-clamp
Erwin Neher Bert Sakmann
 Premio Nobel de Medicina y Fisiología(7 de octubre
1991)

13. TÉCNICA DE PATCH-CLAMP
(FIJACIÓN DE MEMBRANA, MÉTODO DE CONTROL EN PARCHE)

14. TÉCNICA DE PATCH-CLAMP
(FIJACIÓN DE MEMBRANA, MÉTODO DE CONTROL EN PARCHE)

15. TÉCNICA DE PATCH-CLAMP
(FIJACIÓN DE MEMBRANA, MÉTODO DE CONTROL EN PARCHE)

16. VARIACIONES

17. BIBLIOGRAFÍA
 Principios de Neurociencia, Kandel, Eric R.,
McGraw-Hill / Interamericana
 Aidley D. The physiology of excitable cells.
3rd.ed. NewYork; 1971
 Purves D, et. al. Invitación a la neurociencia.
Argentina: editorial medica panamericana;
2003