Este protocolo de laboratorio describe los pasos para identificar y diagnosticar la tuberculosis pulmonar a través de una muestra de esputo. Incluye tinción de Ziehl-Neelsen para visualizar bacilos ácido-alcohol resistentes bajo el microscopio, cultivo en medio Lowenstein-Jensen para verificar el crecimiento de Mycobacterium tuberculosis, y reportar los resultados de la baciloscopia para el diagnóstico.

1. PROTOCOLO DE LABORATORIO PARA LA IDENTIFICACIÓN Y
DIAGNÓSTICO DE TUBERCULOSIS PULMONAR
Tipo de Muestra: Esputo
IDENTIFICACIÓN
Solicitud médica:
BK-TINCIÓN Y CULTIVO.
Recepción de la muestra
Área de Microbiología
Procedimiento: Baciloscopia (Tinción
ziehl Neelsen)
Marcar portaobjetos con el
número correspondiente de la
muestra.
Prender el mechero, asegurando un
ambiente estéril
Esta preparación se realiza en
un portaobjetos limpio y seco.
La muestra se debe fijar aplicando
fuego al portaobjeto por debajo.
Se cubre el portaobjetos con la
solución de carbol fucsina
(colorante básico primario).
Calentar durante 5
minutos.
Lavar con Agua limpia
Cubrir el frotis con alcohol ácido al 3% Durante 5 minutos. Lavar con Agua limpia
Cubrir el frotis con azul de
metileno ( colorante de contraste)
Durante 1 - 2 minutos. Lavar con Agua limpia
Examinar el frotis en el microscopio Objetivo de 100X + el aceite de inmersión.
Interpretar los resultados
Microorganismos → ácido
alcohol resistente negativos
(AAR-).
Microorganismos → ácido
alcohol resistente positivos
(AAR+).
Color rojizo Color Azul
Realizar Cultivo
Análisis Microscópico
Descontaminación de la muestra
Hidróxido de Sodio (NaOH) al 4% 3 ml
durante 2 minutos.
Sembrar en
Incubar a 37°C
Verificar crecimiento a
los 7, 30 y 60 días.
Positivo para bacilos AAR
compatibles con M.
tuberculosis en la muestra
analizada.
DIAGNÓSTICO
Agar lowenstein-jensen
Reportar Baciloscopia
Elaborado por: Juliana Alejandra Aguirre Rodríguez – Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca – Facultad de Ciencias Básicas – Bacteriología y Laboratorio Clínico.