DETERMINACIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS Y ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LAS HOJAS DE ALIUM CEPA VAR. CEBOLLA AMARILLA DULCE

1. 1
UNIVERSIDAD NACIONAL “SAN LUIS GONZAGA” DE ICA
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES
PROYECTO DE INVESTIGACIÓN
I. GENERALIDADES
1. TÍTULO
DETERMINACIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS Y
ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE
LAS HOJAS DE ALIUM CEPA VAR. CEBOLLA AMARILLA
DULCE
2. PERSONAL INVESTIGADOR
2.1. AUTORES
Q.F. Unfredo Pabel Apumayta Vega (Responsable)
Q.F. Gerardo Francisco Rosas Hernández (Miembro)
3. TIPO DE INVESTIGACION
Básica
4. RÉGIMEN DE INVESTIGACIÓN
Libre
5. LUGAR DONDE SE REALIZA EL ESTUDIO
Distrito de Ica.

2. 2
6. INSTITUCION DONDE SE DESARROLLA EL PROYECTO
Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional
“San Luis Gonzaga” de Ica.
7. DEPARTAMENTO ACADÉMICO Y SECCIÓN A LA QUE
PERTENECE EL PROYECTO
Departamento Académico de Ciencias Químicas de la Facultad
de Farmacia y Bioquímica.
8. DURACION DEL PROYECTO
12 Meses
Fecha de Inicio : Diciembre del 2014.
Fecha de término : Noviembre del 2015.
9. ETAPAS DEL PROYECTO
 Etapa Informativa 1 mes
 Etapa Preparativa 1 mes
 Etapa Ejecutiva 4 mes
 Etapa Evaluativa 4 meses
 Publicación y sustentación 2 mes
10. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES
ACTIVIDADES
MESES
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Revisión bibliográfica X X X X X X X X X X X X
Elaboración y trámite del
Proyecto.
X X

3. 3
coordinación con los
productores de Cebollas
Amarillas Dulces
X X X X X X
Obtención de muestras. X X X
Obtención de extracto. X X X X
Análisis fitoquímico X X X
Determinación de la actividad
antioxidante.
X X X
Tratamiento de los resultados. X X X
Redacción del informe. X X
11. RECURSOS DISPONIBLES
11.1. PERSONAL DE APOYO.
- Personal docente y no docente de la Facultad de
Farmacia y Bioquímica.
11.2. LOCALES Y SEDES EDUCATIVAS
- Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica
de la UNICA.
- Biblioteca de la Facultad de Agronomía.
- Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica
de la UNMSM Lima.

4. 4
11.3. MATERIALES Y METODOS
11.3.1. Descripción de la Muestra.
Se trabajará con hojas de cebollas blancas
que quedan después que los bulbos de las
cebollas son acopiados y colocados en
costales para su venta. Se trabajará con
cultivos de cebollas procedente de la
Pampa de Villacuri Ica.
12. PRESUPUESTO EN NUEVOS SOLES
12.1. INVERSIÓN EN BIENES
Materiales de oficina 740.00
Material de Limpieza 570.00
Muestras 120.00
Materiales y Reactivos 1,800.00
Sub Total 3,130.00
Material bibliográfico y fototécnico
Fotocopias 100.00
Consultas en Internet 120.00
Sub Total 220.00

5. 5
12.2. SERVICIOS
12.2.1. Movilidad y dietas
Movilidad Ica–Lima-Ica 150.00
Dieta y alojamiento Lima 300.00
Movilidad Local 1,200.00
Sub total 1,650.00
12.2.2. Impresiones y Procesamientos
Tipeos 140.00
Traducciones 120.00
Sub total 260.00
Total ........................................... 5,260.00
13. FINANCIACIÓN
Para el desarrollo del presente Proyecto los gastos serán asumidos por el
fondo de desarrollo universitario.
II. PLAN DE INVESTIGACION
A. PROBLEMA
a. ENUNCIADO DEL PROBLEMA
El problema queda enmarcado en la siguiente pregunta.

6. 6
¿Qué tipos de metabolitos secundarios y Cuál es la
actividad antioxidante del extracto etanólico obtenidos
de las hojas post cosecha de las Cebollas Amarillas
Dulces que crecen la Pampa Villacuri – Ica?
b. DEFINICION Y DELIMITACION DEL PROBLEMA
La cebolla es una planta bianual que necesita de dos ciclos para
producir semilla. Desarrolla un bulbo (parte comestible) en su
primera ciclo de crecimiento y los vástagos o tallos florales en la
segunda ciclo.
El tallo es muy rudimentario y pequeño, ya que alcanza solo unos
cuantos milímetros de longitud. Se le llama "falso tallo" y presenta
un conjunto de hojas que forman el punto apical. Entre los
principales activos que contiene la cebolla destaca un 0.015% de
aceite esencial incoloro, muy rico en compuestos sulfurados como
la cicloaliína y la propiláliína. El jugo fresco de cebolla contiene
ácido sulfociánico y sulfocianato e isosulfocianato de alilo. Además
tiene ácido tiosulfínico, cuya fermentación produce una sustancia
con efectos bacteriostáticos. Entre los componentes volátiles
destaca el ácido tiopropiónico y el 2-propanotial-sóxido, sustancias
responsables del lagrimeo que produce la cebolla al cortarla.
Además se han encontrado otras sustancias sulfuradas, entre las
que destacan algunos derivados polifenólicos, glucósidos,
flavónicos (sobre todo quercitina) y fitohormonas con efecto

7. 7
gonadotrópico(1,2). Con respecto al uso de sus hojas no hay
reportes. En la región Ica para el periodo de cosecha 2012 – 2013
la producción fue de 1216,084.73 TM(1).Esperándose un incremento
de la producción para el periodo de cosecha 2031-2014. Este
volumen de material cosechado genera aproximadamente el 45-55
% de su peso como material que se desperdicia. Principalmente
hojas que son dejadas al ambiente para poco a poco se sequen y
termine reciclándose en el suelo o termine siendo quemado.
Mientras esto ocurre el entorno ambiental es modificado por los
malos olores y crecimiento desmesurado de insectos que podrían
estar siendo vectores de vectores y propiciando contaminación por
hongos y o bacterias Fito patógenas y otros malestares(3,4,5).
Creemos necesario iniciar estudios de las hojas pos cosecha de las
cebollas amarillas que crecen en la Pampa Villacuri de Ica a fin de
investigar posibles propuestas para el uso de este residuo agrario;
motivo por lo cual presentamos como plan de investigación el tema
“DETERMINACIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS Y
ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DEL EXTRACTO ETANÓLICO
DE LAS HOJAS DE ALIUM CEPA VAR. CEBOLLA
AMARILLA DULCE” trabajo que se desarrollará en el
Laboratorio de Química Analítica de la Facultad de
Farmacia y Bioquímica de la UNICA.

8. 8
c. OBJETIVO DE LA INVESTIGACIÓN
i. Objetivo General
Determinar qué tipos de metabolitos secundarios y
que actividad antioxidante tiene el extracto etanólico
obtenido a partir de las hojas post cosecha de Allium
cepa Var. Cebolla Amarilla Dulce que crece en La
Pampa Villacuri de Ica.
B. HIPOTESIS Y VARIABLES.
a. HIPÓTESIS
- El extracto etanólico de las hojas post cosecha de
Allium cepa Var. Cebolla Amarilla Dulce que crecen en
La Pampa Villacuri de Ica tiene los metabolitos
secundartios siguientes; Fenoles, taninos, triterpenos
esteroidales, cumarinas, flavonides y saponinas; Con
una actividad antioxidante, expresada como CI50 frente
a una solución patrón de DPPH que oscila entre 60-80
L.
b. VARIABLES.
Variable Independiente:
- Hojas post cosecha de Cebolla Amarilla Dulce

9. 9
Variables Dependientes:
- Metabolitos secundarios
- Actividad antioxidante
c. OPERACIONALIZACION DE LA VARIABLE.
Posición de la
Variabl e
Nominación de
la Variable
Indicador Índice
Variable
Indepe ndi ente
Hojas post
cosecha de
Cebollas
Amarilla
Dulce
Características
morfol ógi cas
Taxonomía
g
Clasificación
botáni ca
Variable
Dependi ente
Estudio
fitoquímico
Actividad
Antioxidante
Reaciones de
coloración y/o
precipitación de
metabolitos
secundari os
Cuantificaci ón
espectrofotom étri ca
Positivo
negati vo
Absorbanci a
C. MATERIAL, METODO Y TECNICAS.
3. NATURALEZA DEL ESTUDIO(6,7,8,9,10)
Tipo de estudio: transversal exploratorio y Explicativo
Nivel de Investigación. Será una investigación básica.

10. 10
Diseño de Investigación: Experimental
4. MUESTRA A ENSAYAR
Las muestras a ensayar serán hojas pos cosecha de la
Cebollas Amarilla Dulce que crecen en la Pampa Villacuri
de Ica
5. OBTENCIÓN DE MUESTRA A ESTUDIAR
El proceso para obtener la muestra a estudiar. Se
presentan en el flujograma siguiente:
FLUXOGRAMA N° 1
OBTENCIÓN DE MUESTRA A ESTUDIAR
CULTIVO DE
CEBOLLAS
COSECHA DE
CEBOLLAS BLANCAS
BULBOS DE
CEBOLLAS
HOJAS DE CEBOLLAS

11. 11
FLUXOGRAMA N° 2
OBTENCIÓN DE EXTRACTO ETAN0LICO
HOJAS DE CEBOLLAS
SECADO
MOLIDO
MACERACIÓN
FILTRACIÓN
MARCO 1er L. FILTRADO
SEGUNDA
MACERACIÓN
FILTRACIÓN
DESECHAR
2do
L. FILTRADO
MARCO
M1
MS1
Det. de la Act.
Antioxidante y
estudio fitoquim.

12. 12
6. ANÁLISIS DEL EXTRACTO ETANÓLICO
- Análisis Organoléptico: Utilizando los órganos de los sentidos
se determinará: color, olor, sabor y aspecto.
- Análisis Físico-Químicos: Se determinará:
* Sólidos solubles totales
* Cenizas
7. ESTUDIO FITOQUÍMICO
Se ejecutarán las reacciones siguientes:
Tricloruro férrico.- para determinar la presencia de compuestos
de naturaleza fenólica.
Gelatina-Sal.- Para determinar la presencia de taninos.
Shinoda.- Para determinar la presencia de flavonoides.
Lierberman-Burchard.- Para determinar la presencia de
triterpenos esteroidales.
Dragendorff, Mayer, Wagner y ácido pícrico.- Para determinar la
presencia de alcaloides.
Prueba de la espuma.- Para determinar la presencia de
saponinas.
Ensayo de Rosemhein.- Para determinar la presencia de
catequinas y/o leucoantocianidinas

13. 13
8. DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE
MÉTODO DPPH
La actividad antioxidante se determinará por el método de análisis
químico cuantitativo espectrofotométrico visible en el que se mide
la disminución de la concentración (absorbancia) que tiene una
solución patrón del reactivo (radical libre) 2,2 difenil-1-picrilhidrazil
(DPPH) cuando es consumido por antioxidantes.
FUNDAMENTO
El radical libre DPPH (solución color violeta) reacciona con
compuestos secuestradores de electrones desapareados,
disminuyendo su concentración (pérdida de la intensidad de color)
que es monitoreada a una longitud de onda de 517 nanómetros.
La reacción química que representa la reacción es la siguiente:
PREPARACIÓN DE REACTIVOS
Solución de DPPH
- 22 mg del reactivo se disuelven en 100 mL de metanol.

14. 14
Solución Amortiguadora de Acetato pH 6
Para preparar esta solución se utilizó el ácido acético 0.1 M 500
mL y su sal acetato sódico tri hidrato 136.08 g
DETERMINACION DE LA CI50
La CI50 es la concentración del extracto expresada en micro litros
que es capaz de hacer disminuir en 50 % la concentración de una
solución patrón del radical libre 1,1, difenil-2-picrilhidrazil (DPPH)

15. 15
BIBLIOGRAFIA
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Agraria. Se puede conseguir en:
WWW.agroica.gob.pe/?q=node/246. Visitado 20-11-14
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Visitado 12-11-14.
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mundo.WWW.agrolibertad.gob.pe/…/inteligencia_dee_mercado_de-
la_cebolla.Visitado 14-1q1-14.
4. Principales Aspectos Agroeconómicos de la Cadena Productiva
de Cebolla. Dirección Regional de Competitividad Agraria.
WWW.minag.gob.pe
5. Martí-Boscà J.V. El medio ambiente y su impacto en la salud.
Gac. Sanit, 2004, 18 (Supl 1) 221. (EEMS), Maastricht, Holanda,
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6. Brand-Williams, W., Cuvelier, M. E., & Berset, C. (1995). Use of a
free radical method to evaluate antioxidant activity. LWT – Food
Science & Technology, 28, 25–30.
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Flavonoids in onion cultivars (Allium cepa L.). Journal of Food
Science, 73, C599–C605.
8. Gorinstein, S., Leontowicz, H., Leontowicz, M. (2008).
Comparison of the main bioactive compounds and antioxidant
activities in garlic and white and red onions after treatment

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4426.
9. Kaur, C., Joshi, S., & Kapoor, H. C. (2009). Antioxidants in onion
(Allium cepa L.) cultivars grown in India. Journal of Food
Biochemistry, 33, 184–200.
10 Prakash, D., Singh, B. N., & Upadhyay, G. (2007). Antioxidant and
free radicalscavenging activities of phenols from onion (Allium cepa).
Food Chemistry, 102,1389–1393
Ica, Diciembre del 2014
_______________________ _________________________
Q.F. UNFRED O PABE L APUMA Y T A VEGA Q.F. GERAR D O F. ROSA S HERNÁN D E Z
INVESTIGADOR RESPONSABLE COLABORADOR

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ANEXO 1
CEBOLLA AMARILLA DULCE