1) El documento describe diferentes métodos de esterilización y desinfección, incluyendo calor seco, calor húmedo, autoclave, filtración, radiaciones y ultrasonidos. 2) El método más efectivo es el calor húmedo usando autoclave a 121°C durante 15 minutos, mientras que los métodos de radiación son peligrosos pero altamente efectivos al ionizar átomos. 3) Los ultrasonidos utilizan vibraciones para romper la pared celular bacteriana.

1. ENFERMERÍA
MICROBIOLOGÍA
PROF. PATRICIA NARBÓN

2.  Penetra en los materiales porosos peor que el
calor húmedo
 Sólo se puede usar para objetos que no se
deterioren con la temperatura: objetos
metálicos, material de vidrio…
 Ventajas frente al calor húmedo:
 No corroe las superficies metálicas
 Puede utilizarse para esterilizar medios
deshidratados, y aceites

3.  Procedimientos esterilización calor seco:
1. Horno Pasteur: 150-180°C durante 2h.
Utilizado para material de vidrio.
2. Flameado: asa de siembra
3. Incineración: animales muertos de
laboratorio, material infectado…

5.  Más efectivo que el calor seco. Penetra mejor
en los materiales porosos y desnaturaliza
mayormente las proteínas, ya que éstas son
más estables en estado de desecación.
 Métodos:
1. Hervido o ebullición: ropa,
jeringas…Normalmente dura 20 minutos. En
muchas ocasiones no produce esterilización
completa, pero sí desinfección, ya que
mueren la mayor parte de bacterias y virus.

6. 2. Autoclave: emplea vapor de agua calentado
y alta presión. Es el método más usado para
esterilizar por su rapidez, eficacia y
versatilidad para una amplia gama de
productos.
 Medios de cultivo
 Vidrio
 Ropa
 Utensilios de inoxidable
Esterilización completa a 121°C durante 15
minutos. (a veces 20 minutos)

7. Temperatura
ºC
100
110
120
15
Tiempo (min.)
Etapa de calentamiento Etapa de
mantenimiento
Etapa de enfriamiento
1 2 3

8. 3. Pasteurización: es una desinfección, no una
esterilización, ya que no mueren todos los
microoganismos, solamente las formas
vegetativas. Se usa para:
 Materiales termolábiles
 Materiales que se alteren a altas
temperaturas (leche)
Se calienta a 60-75°C durante más de media
hora.
4. Pasteurización rápida (HTST): 72°C durante
15 segundos.
5. Temperatura ultraelevada (UHT):
esterilización a 140-150°C durante 1-3
segundos.

9. 6. Tindalización o esterilización fraccionada
por vapor: se usa para materiales que no
pueden soportar altas temperaturas. Se
puede hacer en autoclave a 80-100°C, de
forma que mueren la mayoría de las células
vegetativas. Posteriormente se incuba
material a 37°C 24h, para que germinen las
esporas y sean susceptibles al nuevo
calentamiento.
Se hace 3 veces durante 3 días consecutivos
(calentar e incubar).

10.  Punto térmico letal (o de esterilización): es
la temperatura más baja a la que se
esteriliza un cultivo por 10 minutos.
 Tiempo de muerte térmica: tiempo más
corto necesario para destruir todos los
microorganismos de una suspensión, a una
temperatura específica y en condiciones
definidas.
 Tiempo de reducción decimal (valor D):
tiempo necesario para eliminar el 90% de la
población microbiana a una temperatura
dada.

11.  Valor Z: aumento de temperatura necesario
para reducir el valor D a la décima parte de
su valor.
 Valor F: tiempo en minutos y a una
temperatura dada necesario para destruir
una población de células o esporas.

12. VALOR D

13. log
nº
m.o.
viables
tiempo
60 ºC
100
10
1
70 ºC
50 ºC
¿ A que temperatura es menor el
valor de D?

15.  La esterilización por filtración se logra por el
paso de un líquido o un gas a través de un
material capaz de retener los
microorganismos presentes.
 La esterilización por filtración se emplea
para materiales sensibles al calor, tales
como ciertos medios de cultivo, azúcares,
soluciones de antibióticos y otros
medicamentos, etc.

17. Actividad
antimicrobiana
Alta energía
Baja energía
Dos tipos: Radiaciones ionizantes
Radiaciones no ionizantes

18. Características:
 Alta energía, baja longitud de onda
 Gran poder de penetración
 Ionizan átomos y moléculas
 No requieren altas temperaturas
Tipos:
 Rayos gamma (60Co o 137Cs)
 Rayos catódicos (electrones acelerados)
 Partículas beta
 Rayos X

19. Mecanismos de acción:
Formación de radicales libres
Daño al ADN, ARN
Resistencia:
Priones
Deinococcus radiodurans
Enterococcus faecium
Esporas bacterianas
Virus
Hongos
Bacterias (en gral)
 Peligrosas para el personal que las maneja.
Alto grado de entrenamiento.
 Generan radicales libres y producen
mutaciones del ADN
 Alto coste

20. Características:
 Baja energía, sin poder ionizante
 Sin poder penetrante
 Máxima eficiencia biocida a 260nm
Mecanismos de acción:
 Sitio blanco ADN
 Formación de dímeros de timina
Inconveniente
 No atraviesa eficazmente el cristal
películas de suciedad, agua…

21. USOS COMUNES
 Desinfección de superfices, agua, aire
 Esterilización de ambientes y en ocasiones
superficie, sólo a 260nm, y durante cierto
tiempo.

22.  Vibraciones mecánicas no audibles que
rompen la pared celular y provocan la lisis de
la bacteria.