2. Universidad
científica del sUr
DIRECTORIO Ing. Juan Guerrero Barrantes
Decano de la Facultad de Ingeniería y Gestión Ambiental
Ing. José Dextre Chacón
Presidente del Directorio Dra. Josefina Takahashi Sato
Decana de la Facultad de Negocios Agroforestales
RECTOR
Dra. Laurietz Seda Ramírez
Dr. Agustín Iza Stoll
Decana de la Facultad de Artes Escénicas y Literatura
AUTORIDADES Ing. Zandra Rivera Chávez
Mg. Roland Leidinger Ayllón Directora de la Facultad de Ingeniería
de Sistemas Empresariales
Vicerrector Académico y Gerente General
Mg. Larissa Bálsamo Fasce
Dr. José Amiel Pérez Directora de la Carrera de Psicología
Vicerrector de Investigación
Mg. Humberto Espinosa Ariza
Dr. Pedro Mendoza Arana Director de la Carrera de Administración
de Negocios Internacionales
Decano de la Facultad de Medicina Humana
Mg. Nilda Escobedo Rojas
Ing. Jorge Ponce Urquiza Directora de la Carrera de Marketing y Administración
Decano de la Facultad de Ingeniería
Económica y de Negocios Mg. Jenny Canales Peña
Directora de la Carrera de Comunicación y Publicidad
Dr. Rodolfo Valdivia Maibach
Decano de la Facultad de Estomatología Abg. Mariano Castro Sánchez-Moreno
Director de la Carrera de Derecho
Dra. Luzmila Troncoso Corso
Arq. Ignacio Pacheco Díaz
Decana de la Facultad de Nutrición y Dietética Director de la Carrera de Arquitectura
y Urbanismo Ambiental
Dr. Manuel Rosemberg Barrón
Decano de la Facultad de Medicina Sra. Mariza Ríos Olivera
Veterinaria y Zootecnia Directora de Servicios Académicos
Ing. José Carlos Dextre Chacón Lic. Gustavo Luján Zumaeta
Director de Propuesta Educativa
Decano de la Facultad de Ingeniería
de Sistemas Empresariales
Mg. Fernando Paredes Delgado
Director Comercial
Dra. Sonia Valle Rubio
Decana de la Facultad de Biología Marina y Econegocios Dr. Emilio Guija Poma
Director del Instituto de Investigación
Ing. Jorge Chávez Salas
Decano de la Facultad de Administración Percy Encinas Carranza
de Turismo Sostenible y Hotelería Director del Centro Cultural y del Fondo Editorial

4. cOntenidO
Revista Científica Vol 7 Nº1, enero-abril 2010.
editOrial 7
artícUlOs OriGinales
POBlaciÓn Y distriBUciÓn tisUlar de cÉlUlas
Oct-4+ en teJidOs fetales Y adUltOs de ratÓn
tissUe distriBUtiOn Of POPUlatiOn and Oct-4+ cells
in fetal and adUlt tissUes Of MOUse
Nathaly Enciso, José Amiel Pérez y Javier Enciso Gutiérrez 8
cinÉtica de deGradaciÓn tÉrMica de vitaMina c
Y caPacidad antiOXidante de caMU caMU
(Myrciaria dubia) Y Mandarina (Citrus reticulata)
tHerMal deGradatiOn Kinetics Of vitaMin c antiOXidant caPacitY
Of caMU caMU (Myrciaria dubia) and tanGerine (Citrus reticulata)
Emilio Guija Poma, Oscar Reátegui Arévalo y Luzmila Troncoso Corzo 16
GlUtatiÓn PerOXidasa, GlUtatiÓn redUctasa Y
GlUtatiÓn redUcidO en sUJetOs eXPUestOs a la altUra
GlUtatHiOne PerOXidase, GlUtatHiOne redUctase and
GlUtatHiOne redUced in eXPOsed sUBJects tO tHe HeiGHt
Luz Oyola H., Haydée Zúñiga C., Elizabeth Carranza A., Edgar Florentini R., Delia Whu W.y Gloria Gordillo R. 24
relaciÓn entre índices ZOOMÉtricOs, carGa
Y entrenaMientO cOn las variaciOnes de
cOrtisOl en caBallOs PerUanOs de PasO
dUrante Una caBalGata de resistencia
relatiOnsHiP BetWeen ZOOMetrics rates, freiGHt
and traininG WitH cOrtisOl variatiOns in PerUvian
PasO HOrses dUrinG a ride Of resistance
Paola Quintana Dolores, Veronica Orozco, Katherine Tejada, María Luz de la Barra 30
elaBOraciÓn de Una Base nOrMativa Para Medir la
calidad de vida relaciOnada cOn la salUd en UsUariOs
de essalUd Mediante el sf 36 - v1 HUacHO 2009
develOPMent Of a nOrMative Basis tO MeasUre tHe QUalitY Of life
HealtH-related in Users Of essalUd tHrOUGH tHe sf 36 - v1 HUacHO 2009
Orlando Tipismana Neyra 40

5. CIENTÍFICA ISSN 1997-700X
artícUlOs de revisiÓn
MÉtOdOs de MediciÓn del cOlOr
en PÁPriKa (Capsicum annuum L)
MetHOds Of MeasUreMent Of cOlOr in PaPriKa (Capsicum annuum l)
Juan Carlos Dávila, Marcial I. Silva Jaimes 52
PrÁctica físicO-dePOrtiva Y estilOs de vida
relaciOnadOs cOn la salUd en adOlescentes
sPOrt and PHYsical Practice-related lifestYles in adOlescent HealtH
Sara Márquez 60
cartas al editOr
relaciÓn entre increMentO del tieMPO HaBitUal
de lectUra Y eficiente cOMPrensiÓn lectOra en
estUdiantes de PriMer ciclO de diversas facUltades
acadÉMicas de la Universidad científica del sUr
Gabriela Inés Carrillo Mendoza 70
tesis
clínica Y ePideMiOlOGía de la tUBercUlOsis en
Pacientes del centrO MÉdicO naval “cirUJanO
MaYOr santiaGO tÁvara” en lOs aÑOs 2005 - 2008
Miguel Fernando Gonzales Aste 76
sala caBieses
ideas Para renOvar la enseÑanZa de la Medicina
Fernando Cabieses Molina 88
nOtas 94
instrUcciOnes Para lOs aUtOres 100

6. cOMitÉ científicO
Dr. Paul Schiller
Universidad de Miami – EE.UU.
CIENTÍFICA Dr. Emilio Guija
Universidad Científica del Sur
Revista CIENTÍFICA Vol 7 Nº1, enero-abril 2010. - Vicerrectorado de Investigación
revista CIENTÍFICA Prof. Ramsés Salas
Universidad Nacional Federico Villarreal
director - Facultad de Ciencias Naturales y Matemáticas
Dr. José Amiel Pérez
U. Científica del Sur
Vicerrector de investigación Dr. Javier Enciso
jamiel@ucsur.edu.pe Universidad Científica del Sur
comité editorial -Vicerrectorado de Investigación
Dr. Pedro Mendoza Arana
U. Científica del Sur Dr. James Graham
Decano de la Facultad de Medicina Humana Universidad de Illinois en Chicago – EE.UU.
decamed@ucsur.edu.pe
Dr. Felipe Antonio San Martín Howard Dr. Alejandro Burga
U. Nacional Mayor de San Marcos
Presidente del Consejo de Universidad Científica del Sur
Gestión de la Investigación - Facultad de Medicina Humana
fsanmartinh@unmsm.edu.pe
Dr. Óscar Valiente Castillo Dr. Pedro San Martín Howard
U. San Antonio Abad del Cuzco Hospital Nacional Dos de Mayo
Decano de la Facultad de Medicina
osvacal18@yahoo.es Jefe del Departamento de Pediatría
Asesora de diseño: Erika Kohatsu Ing. Óscar Paiba
Asistente de prensa: Rodrigo Salazar Universidad Científica del Sur
Coordinación editorial: Eliana Cumpa
- Facultad de Ingeniería de Sistemas Empresariales
Corrector de estilo: Niki Tito
Diseño y diagramación: Ojo Gráfico
Dra. Nancy Lozano
CIENTÍFICA, revista de ciencias de Universidad Nacional Mayor de San Marcos
la Universidad Científica del Sur, - Facultad de Farmacia y Bioquímica
publica tres números al año.
La revista está dirigida a
investigadores científicos, Ing. Juan Guerrero Barrantes
docentes y estudiantes universitarios. Universidad Científica del Sur
- Facultad de Ingeniería y Gestión Ambiental
La Universidad Científica del Sur no se solidariza
necesariamente con las opiniones expresadas
en los artículos publicados en esta edición Ing. José Dávila
de CIENTÍFICA. Se autoriza la reproducción
de los textos siempre que se cite la fuente. Universidad Científica del Sur
- Facultad de Ingeniería de Sistemas Empresariales.
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Tel.: +511 6106400 anexo 164
Tiraje: 600 ejemplares. Canje o donación. CIENTÍFICA se encuentra
indizada en Latindex
Hecho el depósito legal en la Biblioteca Nacional del Perú:
Nº 2008-15522 / ISSN: 1997-700X

7. editOrial
células madre pluripotentes inducidas
El proceso natural de la creación de la vida se inicia con la fertilización del óvulo que da origen
al huevo o zigote y formará después, en su multiplicación primera, las células indiferenciadas –la
mórula y el blastocisto–, para finalmente desarrollar células específicas que integrarán tejidos u
órganos determinados, células propias de cada uno de ellos. Este es el sentido normal de desarrollo
de los seres vivos: del zigote a las células diferenciadas.
Más allá de las experiencias realizadas en mamíferos que culminaron con la clonación y el nacimiento
de la oveja Dolly, con la fertilización in vitro o la implementación de diversas técnicas para superar
los problemas de esterilidad de las parejas, los científicos estudiaron minuciosamente las sucesivas
fases del proceso de fertilización y particularmente la etapa que interrumpe la multiplicación de
células indiferenciadas y concluye con la formación de las células específicas.
Aquellos investigadores lograron a partir de estas células, denominadas células madre (o troncales)
y además embrionarias, por su origen, dirigir su diferenciación y obtener las células diferenciadas
que deseaban con solo agregar un factor de transformación, específico para cada tipo de tejido.
Así, se obtuvieron neuronas, osteocitos, hepatocitos, células epiteliales, renales, cardiacas, etc.,
de significativo valor para la medicina reparativa y regenerativa. Ofrecen un futuro promisorio con
posibilidades terapéuticas extraordinarias.
Se buscaron otros tipos de células madre que, respetando los códigos de ética vigentes, en modo
alguno pudieran impedir el desarrollo del embrión, la creación de una vida. Se identificaron células
madre en los seres vivos adultos, a las que se les denominó pluripotentes. Las células madre
embrionarias son totipotentes porque son capaces de crear no solo diversos tipos de células
propias del organismo, como las pluripotentes, sino la vida toda. Son capaces de formar la placenta
y todos los elementos requeridos para el desarrollo del embrión.
Estas células pluripotentes, aunque importantes y cumplidoras de las exigencias éticas, no tuvieron
el éxito y el reconocimiento esperados. No exhibían la versatilidad y abundancia requeridas que sí
presentaban las células madre embrionarias. Entonces apareció publicado el trabajo del cirujano
japonés Yamanaka, quien con Takahashi (2006) logró algo inesperado y sorprendente: recorrer
el camino inverso, es decir, desarrollarse a partir de células diferenciadas y retroceder hasta las
células madre, las indiferenciadas, aquellas que con la adición de factores de transformación
pueden convertirse en las células específicas de cada tejido u organismo, las que se elija, y ello se
logró con la utilización de 4 factores de transcripción: Oct-3/4, Sox2, c-Myc, y Klf4. A estas células
se las denominó células madre pluripotentes inducidas (iPS). Estudios posteriores añadieron
ventajas, suprimieron efectos indeseados y redujeron los factores de transcripción a uno solo, el
más importante: Oct-3/4.
En la Universidad Científica del Sur se han iniciado tareas en el área de las células madre pluripotentes
con el trabajo de Nathaly Enciso, que precisamente trata del mencionado factor de transcripción
Oct-3/4, titulado “Población y distribución tisular de células Oct-4+ en tejidos fetales y adultos de
ratón” y que publicamos en esta edición. Se trata de un trabajo experimental que, estamos seguros,
significa un temprano, augural y positivo esfuerzo que se suma a muchos otros dirigidos a revelar
algo de los insondables misterios de la creación de la vida, así como a ofrecernos tecnologías
regenerativas que han de aplicarse en favor de la salud y el bienestar de las futuras generaciones.
Con este trabajo cuantitativo se ha verificado el orden y la proporción del factor de transcripción
Oct-3/4 en los diversos tejidos experimentalmente estudiados: en primer lugar, placenta con
13,75%, y luego el hígado de fetos del último tercio de gestación con 12,75%. El tejido adiposo
muestra la mayor población en ratones adultos: 1% de células positivas al marcador Oct-3/4, en
cultivos celulares del feto es de 19,75% y en las células embrionarias es de 3,75%; resultados
obtenidos mediante la técnica de inmunocitoquímica utilizando el anticuerpo monoclonal Oct-3/4.
Estas actividades constituyen líneas de investigación destacadas de la Universidad Científica
del Sur y de otras universidades, tareas que habrán de prestigiar a las instituciones dedicadas
al esclarecimiento del tema y su mejor aplicación. Su destino exitoso estará reservado para
investigadores dotados de habilidades singulares y mentes comprometidas en la búsqueda de una
mejor calidad de vida para el hombre del mañana.
dr. José amiel Pérez
Director de la Revista Científica

8. artícUlOs
OriGinales
POBlaciÓn Y distriBUciÓn tisUlar
de cÉlUlas Oct-4+ en teJidOs
fetales Y adUltOs de ratÓn
TISSUE DISTRIBUTION OF POPULATION AND Oct-4+
CELLS IN FETAL AND ADULT TISSUES OF MOUSE
Nathaly Enciso Benavides1, José Amiel Pérez1, Javier Enciso Gutiérrez1
resUMen direccionar el estudio de fuentes de células
madre para aislamiento y expansión a órganos
Las células madre se definen por su capacidad de fácil y legal obtención como es la placenta
de autorenovación y por su diferenciación y el tejido adiposo de adultos.
hacia múltiples linajes celulares y tipos de
tejido cuando se encuentran bajo condiciones Palabras clave: células madre, Oct-4,
microambientales adecuadas. Oct-4 es tal placenta, hígado fetal.
vez el factor de transcripción más importante
en definir el destino de las células durante el aBstract
desarrollo embrionario para activar o reprimir
la expresión de genes específicos. El objetivo Stem cells are defined by their capacity for self-
de este trabajo fue determinar las poblaciones renewal and differentiation into multiple cell
de células inmunoreactivas al marcador Oct-4 lineages and tissue types under appropriate
(Oct-4+) en tejido cutáneo de ratones adultos microenvironmental conditions. Oct-4 is
y fetos, hígado fetal y placenta de ratón. Se maybe the most important transcription factor
usó un anticuerpo monoclonal anti Oct-4 y for defining the cells fate during embryonic
se evidenció la inmunoreactividad mediante development to activate or repress the
inmunohistoquímica indirecta en cortes expression of specific genes. The aim of this
histológicos incluidos en parafina de 5μ de study was to determine the immunoreactive
grosor. Los resultados demuestran que en cell populations to marker Oct-4 in adult and
todos los tejidos estudiados hay poblaciones fetuses skin, fetal liver and placenta of mice.
diferenciales de células inmunoreactivas a Monoclonal antibody to Oct-4 was used in
Oct-4, siendo la placenta la que tiene mayor order to demonstrate immunoreactivity by
población con 13,75%, seguida del hígado indirect immunohistochemistry in 5μ thick
fetal con 12,75%, tejido adiposo fetal 9,00 paraffin-embedded histological sections.
%, epidermis de feto 1,50%, en adulto el Results show that in all tissues studied have
tejido adiposo con 1,00%, dermis 0,50% y differential cell populations immunoreactive to
epidermis 0,25%. Estos resultados permitirán Oct-4 by immunohistochemistry, the placenta
1
Universidad CientífiCa del sUr. laboratorio de investigaCión en biología CelUlar.

9. Población y distribución tisular de células Oct-4+ en tejidos fetales y adultos de ratón
still has the largest population with 13.75% diferentes programas de desarrollo (Niwa et
followed by 12.75% in fetal liver, fetal adipose al., 2000), cuando está sobreexpresado las
tissue with 9%, 1.50% in fetal epidermis, células madre embrionarias se diferencian
1.00% in adult fat tissue, 0.50% in dermis, and principalmente en células parecidas a las
0.25% in epidermis. These results will lead the primitivas del endodermo (Niwa et al., 2007).
study of stem cells sources to get tissues in
a easy and legal way such as placenta and Junto a STAT3, Oct-4 estimula la expresión
adult fat tissue. del gen eed para silenciar la expresión de
genes asociados a la diferenciación en
Key words: stem cells, Oct-4, placenta, fetal liver. células madre embrionarias autorenovables
(Ura et al., 2008), y con Sox2 está involucrado
en la activación y represión de varios de estos
intrOdUcciÓn
genes in vivo (Yuan et al., 1995; Nishimoto et
Las células madre se definen por su capacidad al., 1999). Mientras que necesita del Factor
de autorenovación y por su diferenciación Inhibidor de Leucemia (LIF) para ser expresado
hacia múltiples linajes celulares y tipos de (Wumser & Gage, 2002; Aghajanova, 2006).
tejido cuando se encuentran bajo condiciones
Por otro lado, el uso terapéutico de células
microambientales adecuadas (Bonde et.
madre depende de la disponibilidad de células
al., 2004; Yu et al., 2008). Dichas células
pluripotentes que no tengan limitaciones
tienen una jerarquía de potencia establecida:
técnicas, éticas u otras consideraciones
totipotente → pluripotente → multipotente
inmunitarias (Lowry et al., 2008). La
→ unipotente, pero también muestran una
obtención de células madre pluripotentes
jerarquía de desarrollo, clasificándose en base
embriónicas (ES) mediante fusión celular y
a la etapa específica de la ontogénesis en la
transferencia nuclear de células somáticas
que aparecen: embrionaria, fetal y adulta
ha permitido plantear nuevos protocolos
(Ploemarcher, R., 1997; Pappa & Anagnou,
(Byrne et al., 2007), puesto que estas no
2009).
poseen el alto reconocimiento antigénico
El destino de las células durante el desarrollo que tienen las células adultas, permitiendo
es definido por factores de transcripción que trasplantes heterólogos (Pappa & Anagnoy,
actúan como interruptores moleculares para 2009).Recientemente, se ha logrado
activar o reprimir la expresión de genes (Niwa et obtener células ES a partir de fibroblastos
al., 2000). Los factores de transcripción Oct-4, reprogramados de ratón por la transducción
Sox2, Klf4 y Nanog son reguladores esenciales del set de factores Oct-4, Sox2, C-Myc y
para la formación y/o mantenimiento de las Klf4 cambiando el estado transcripcional
células de la masa interna (ICM) durante la y epigenético, y convirtiéndolas en células
preimplantación del ratón y para renovar madre pluripotentes inducidas (iPS),
sus células pluripotentes (Loh et al., 2006), indistinguibles de las células ES (Takahashi
así como en la reprogramación epigenética y Yamanaka, 2006; Okita et al., 2007; Wernig
de fibroblastos en células humanas (Yu et et al., 2007). Igualmente, se ha conseguido
al., 2007). Más aún, se ha demostrado que generar células madre pluripotentes a partir de
solo Oct-4 es suficiente para generar células fibroblastos de piel humana introduciendo en
madre pluripotentes a partir de células madre ellos, mediante retrovirus, los cuatro factores
neurales de ratón adulto (Kim et al., 2009). utilizados en ratones (Takahashi et al., 2007)
Debiendo resaltarse que estos mismos y, recientemente, a partir de células hepáticas
factores se encuentran sobreexpresados en y gástricas de ratones (Aoi et al., 2008).
tumores de diferente origen histogénico en
Obtener células madre a partir de cordón
humanos (Schoenhals et al., 2009).
umbilical, placenta, gelatina de Wharton y de
El factor Oct-4 pertenece a la familia de las tejido adulto es la mejor opción científica y ética
proteínas POU y está codificado por el gen para el tratamiento de algunas enfermedades
Pou5fl, es un regulador de pluripotencia degenerativas y neoplásicas (Wang et al.,
esencial para la formación inicial de las 2004; Parolini et al., 2008; Pappa & Anagnou,
células pluripotentes en estadios tempranos 2009); sin embargo, se necesita conocer la
del desarrollo de mamíferos (Rosner et al., biología y cuantificación de sus poblaciones
1990; Scholer et al.,1990; Nichols et al., para el aislamiento, expansión y diferenciación
1998; Donovan & Gearhart, 2001), además, en diversos linajes de células adultas. El
de manera dosis-dependiente determina el objetivo de este trabajo fue determinar la
destino final de dichas células (Gidekel et población de células inmunoreactivas al factor
al., 2003) requiriéndose una cantidad crítica de transcripción de células madre Oct-4, a
para mantener la autorenovación celular y nivel de tejido cutáneo adulto y fetal, hígado
aumentar o disminuir la regulación, induciendo fetal y placenta a término.
científica 7 (1), 2010 9

10. Nathaly Enciso Benavides, José Amiel Pérez, Javier Enciso Gutiérrez
ARTÍCULOS ORIGINALES
Materiales Y MÉtOdOs pH 7.4. Luego fueron incluidas en parafina y
posteriormente se realizaron cortes de 5μ de
grosor en micrótomo rotatorio. Posteriormente
Materiales
las muestras fueron desparafinadas según
animales. Se trabajó con 20 ratones Balb/c técnica convencional, y, por último las láminas
obtenidos del bioterio del Instituto Nacional sialinizadas adheridas con los cortes fueron
de Salud de Lima, de los cuales 10 fueron sumergidas en agua destilada hasta el inicio
fetos de 16 días de edad y 10 adultos. de la inmunohistoquímica.
reactivos y equipos. Anticuerpos técnicas experimentales
monoclonales anti-Oct-4 (Zymed, Inc,
EE.UU.), un Kit para inmunohistoquímica inmunohistoquímica
(Zymed, Inc, EE.UU.), polylisina; buffer fosfato Se realizó basado en protocolos y técnicas
A PH 7.4. Microscopio digital con software estándares ya descritas (Ramos-Vara,
Scophe Photo Version 2, Cámara de flujo 2005), las láminas sialinizadas con los
laminar. cortes adheridos a ellas y mantenidas en
buffer citrato a pH 6.8, fueron sometidas a
Métodos
ultrasonido en un horno microondas, por 3
Para efectos de este estudio, y existiendo ciclos con una potencia de 6 por 5 minutos. El
diferencias entre el desarrollo del embrión de anticuerpo primario fue incubado a 4º C por
ratón y el del humano, se consideró que el toda la noche.
período embrionario se extiende hasta el día 15
interpretación de resultados
y a partir del 16 se considera feto (Theiler, 1989).
Para cuantificar la inmunoreactividad celular
diseño experimental en tejidos, se contaron 400 células a 40X. La
Los animales fueron distribuidos en dos inmunoreactividad positiva (+) se consideró
grupos de estudio como se describe a cuando las células evidenciaban un color
continuación: G-I feto y placenta; G-II adulto. marrón a nivel nuclear y citoplasmático en
comparación a una muestra similar de tejido
toma de muestra sometida a inmunohistoquímica sin usar el
anticuerpo primario Oct-4.
En adultos y fetos la muestra de piel se tomó
de la región dorsal mientras que la placenta resultados y discusión
fue completa. Las muestras fueron fragmentos
de tejido de 1 x 0,5 cm de cada grupo etario. En este trabajo se encontró que algunos tejidos
Los fetos fueron obtenidos mediante cesárea fetales estudiados tenían notablemente un
realizada en una cabina de flujo laminar. mayor número de células Oct-4+. Resaltando
una alta diferencia entre ambas fuentes; y
Procesamiento histológico dentro de los tejidos adultos destaca el tejido
adiposo subcutáneo con 1,0% de células
Las muestras para inmunohistoquímica positivas para Oct-4+ superior a la dermis que
fueron fijadas en formol al 10 % en buffer tuvo 0,5% y epidermis 0,25% (tabla 1).
tabLa 1. Porcentaje de céLuLas oct-4+ en tejidos fetaL y aduLto mediante inmunohistoquímica.
10 científica 7 (1), 2010

11. Población y distribución tisular de células Oct-4+ en tejidos fetales y adultos de ratón
En tanto que si observamos solamente tejidos seguido del hígado fetal con 12,75% y el tejido
fetales, la placenta es el tejido que tiene mayor adiposo con 9,00%, la dermis 0,78% y la
población de células Oct-4+ con el 13,75%, epidermis 1,50% (tabla 2).
tabLa 2. cantidad de céLuLas oct-4+ según tiPos de tejido en fetos de ratón, mediante inmunohistoquímica.
Por otro lado, en cuanto a la distribución conformando las glándulas sebáceas (B) y
de las células Oct-4+ en la piel de ratón mayoritariamente en el tejido adiposo de la
adulto, estas células se ubican regularmente hipodermis (C) (figura 1).
figura 1. PieL de ratón aduLto. (a) controL negativo de
ePidermis, dermis, foLícuLo y gLánduLa sebácea. ihq.40x.
(b) céLuLas oct-4+ en Las gLánduLas sebáceas. ihq.40x.
(c) hiPodermis con céLuLas Positivas a
inmunomarcación Para oct-4. ihq.20x.
científica 7 (1), 2010 11

12. Nathaly Enciso Benavides, José Amiel Pérez, Javier Enciso Gutiérrez
ARTÍCULOS ORIGINALES
En tejido fetal, la distribución de tejido adiposo de la hipodermis es el que
Oct-4+ evidencia pocas células con presentó la mayor población de células
inmunoreacción positiva en la epidermis con inmunoreactividad positiva (figura 3)
y ligeramente mayor población en la siendo similar esta diferecia poblacional
dermis (figura 2 B). Mientras que el con lo observado en piel de adulto.
figura 2. PieL de feto de ratón de 16 días de edad. (a) área con inmunoreacción a marcador
oct-4 en céLuLas de La ePidermis y dermis. ihq. 10x. (b) vista anterior a mayor amPLitud. ihq. 40x.
figura 3. tejido adiPoso de La hiPodermis de La PieL de feto de ratón de 16 días. aPreciar un nido de céLuLas
con inmunotinción Positiva (coLor marrón intenso) Para marcador oct-4. ihq. (a)10x; (b)40x.
Mientras que la placenta fetal de 16 días de y tamaño heterogéneo, con marcación nuclear
edad fue el tejido con mayor población de y recubriendo tejido epitelial, endotelial y en
células Oct-4+, las cuales fueron de morfología células sanguíneas intravasculares (figura 4).
12 científica 7 (1), 2010

13. Población y distribución tisular de células Oct-4+ en tejidos fetales y adultos de ratón
figura 4. PLacenta fetaL de 16 días de desarroLLo. notabLe PobLación de céLuLas con
inmunoreacción Positiva (coLor marrón) Para marcador oct-4. ihq. 40x.
Finalmente, el hígado de feto del tercer heterogénea, y de distribución que privilegia
trimestre de desarrollo tiene una notable el espacio intravascular y el endotelio,
población de células Oct-4+; sin embargo, es mientras que a nivel celular la marcación es
ligeramente menor que la placenta, siendo más intensa y amplia a nivel nuclear como se
esta población de morfología y tamaño muestra en la figura 5.
figura 5. hígado de feto de 16 días de edad. (a) numerosas céLuLas evidenciando inmunotinción
Positiva Para marcador oct-4. (b) controL sin anticuerPo oct-4. ihq. 40x.
El porcentaje de la población de células Una nueva opción para obtener células
inmunoreactivas a Oct-4 en tejido adiposo madre para medicina regenerativa sin tener
de ratón adulto equivalente al 1,00% es restricciones bioéticas es la placenta fetal,
similar al descrito por trabajos previos de que tiene alta población de células madre
otros investigadores en humanos (Tabarab multipotenciales (13,75%) inmunoreactivas
& Studera, 2002). Queda así establecido al marcador Oct-4. Trabajos recientes de
que cuando trabajemos con fuentes de otros investigadores han propuesto también
células madre en adultos, el tejido adiposo nuevas fuentes (Wang et al., 2004), pero
será la fuente de elección. falta aún caracterizar el genotipo y fenotipo
científica 7 (1), 2010 13

14. Nathaly Enciso Benavides, José Amiel Pérez, Javier Enciso Gutiérrez
ARTÍCULOS ORIGINALES
de esta población de células madres y su respectivamente; mientras que el tejido
capacidad de diferenciación, según las adiposo del ratón adulto tiene la mayor
necesidades de aplicaciones médicas, en población de células positivas para el
humanos y animales (Parolini et al. 2008). marcador Oct-4 con 1,0%.
Se concluye que la placenta y el hígado financiamiento
de fetos del último tercio de gestación son
los tejidos que tienen mayor población Este trabajo fue financiado parcialmente
de células con inmunomarcación positiva por el CONCYTEC mediante contrato de
para Oct-4 con 13,75 % y 12,75 % subvención No. 016-2007-CONCYTEC-OAJ.
referencias BiBliOGrÁficas
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Annals of the New York Academy of Sciences Volume 1034 Issue The Uterus and Human
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Generation of pluripotent stem cells from adult mouse liver and stomach cells. Science
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3. Bonde J, Hess D & Nolta J. (2004). Recent advances in hematopoietic stem cell biology.
Curr Opin Hematol; 11:392-398.
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450:497–502.
5. Donovan P & Gearhart J. (2001). The end of the beginning for pluripotent stem cells. Nature 414:92-97.
6. Gidekel S, Pizov G, Bergman Y & Pikarsky E. (2003). Oct-3/4 is a dose-dependent oncogenic
fate determinant. Cancer Cell. 4(5):361-70.
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nathaLy enciso benavides
corresPondencia: nathyenciso@yahoo.com
recePción:
29 de enero de 2010
acePtación:
19 de abriL de 2010
científica 7 (1), 2010 15

16. cinÉtica de deGradaciÓn tÉrMica de vitaMina c
Y caPacidad antiOXidante de caMU caMU
(Myrciaria dubia) Y Mandarina (Citrus reticulata)
THERMAL DEGRADATION KINETICS OF VITAMIN C ANTIOXIDANT CAPACITY
OF CAMU CAMU (Myrciaria dubia) AND TANGERINE (Citrus reticulata)
Emilio Guija Poma1, Oscar Reátegui Arévalo1 y Luzmila Troncoso Corzo1
resUMen binodal, con dos diferentes energías de
activación: 6,24 kJ/mol y 97,69 kJ/mol.
Se ha determinado la degradación térmica de
la vitamina C en mandarina y camu camu, así Palabras clave: ácido ascórbico, Myrciaria
como la capacidad antioxidante de ambas dubia, Citrus reticulata, cinética de
frutas. El rango de la temperatura utilizada degradación térmica, actividad antioxidante.
estuvo comprendido entre 60 y 100º C. La
vitamina C se degradó acorde con una cinética aBstract
de primer orden, tanto en la mandarina como It has determined the thermal degradation
en el camu camu. La energía de activación of vitamin C in tangerine and camu camu,
de la vitamina C se determinó utilizando la and the antioxidant capacity of both
ecuación de Arrhenius, en la mandarina fue de fruits. The temperature range used was
21,2 kJ/mol, mientras que en el camu camu fue between 60 and 100º C. Vitamin C was
de 10,18 kJ/mol. La capacidad antioxidante de degraded according to first-order kinetic
la mandarina también fue afectada por acción model in both tangerine and camu camu.
de la temperatura, el valor de la energía de The activation energy of vitamin C was
activación fue de 8,11 kJ/mol, mientras que determined using the Arrhenius equation,
el camu camu mostró un comportamiento tangerine was 21,2 kJ/mol, while camu
1
universidad científica deL sur. facuLtad de medicina humana. Laboratorio de investigación en bioLogía ceLuLar.

17. Cinética de degradación térmica de vitamina C y capacidad antioxidante de
camu camu (Myrciaria dubia) y mandarina (Citrus reticulata)
camu was 10,18 kJ/mol. The antioxidant La capacidad antioxidante de un alimento
capacity of tangerine was also affected de origen vegetal reside en su amplia
by temperature, the value of the activation variedad de constituyentes, entre los que se
energy was 8,11 kJ/mol, while camu encuentra la vitamina C, cuya degradación
camu showed a binodal behavior with two propiciada por diversos factores podría
different activation energy: 6,24 kJ/mol and comprometer las propiedades antioxidantes
97,69 kJ/mol. de esta vitamina. En el presente trabajo se
describe el efecto de la temperatura sobre
Key words: ascorbic acid, Myrciaria dubia, el contenido de vitamina C y la capacidad
Citrus reticulata, thermal degradation antioxidante de camu camu y mandarina.
kinetics, antioxidant activity.
Materiales Y MÉtOdOs
intrOdUcciÓn
Materiales
La vitamina C es una de las vitaminas
El ácido tricloroacético, reactivo de
hidrosolubles que el ser humano debe
Folin-Ciocalteu, cloruro ferroso, cloruro
ingerir con la dieta, debido a que no
férrico, 2,4,6-Tris(2-pyridyl)-s-triazine,
dispone de las enzimas necesarias para
2,6-diclorofenolindofenol.
sintetizarla. Esta vitamina cumple diferentes
funciones en el organismo ya que participa Métodos
en la síntesis de colágeno, absorción
de hierro a nivel intestinal, síntesis de Preparación de la muestra.-
neurotransmisores, liberación de hierro Se separó la parte comestible del camu camu
de la transferrina, antioxidante, etc. (1). (Myrciaria dubia) y de la mandarina (Citrus
Diversos alimentos de origen vegetal como reticulata), las que se homogenizaron con una
la naranja, coliflor, limón, brócoli, camu solución al 10% de ácido tricloroacético en
camu, papa, kiwi, melón, papaya, etc., una proporción de 1:4, luego se centrifugaron
nos proporcionan cantidades apropiadas a 3000 rpm en una centrífuga clínica durante
de esta vitamina, cuya estabilidad es 10 minutos, a cuyo término se obtuvo un
dependiente de diversos factores: pH, sobrenadante que fue diluido con agua
temperatura, metales de transición, etc. bidestilada en una proporción 1:1.
(2,3,4).
Determinación de vitamina C.-
En el organismo humano se generan
radicales libres a través de diferentes La vitamina C se determinó por duplicado
procesos entre los que se incluyen la utilizando el reactivo 2,6-diclorofenolindofenol
reducción del oxígeno por electrones de (8). Para realizar los cálculos se prepararon
la cadena respiratoria mitocondrial, la concentraciones diferentes de vitamina C que
acción de la NADPH oxidasa, los metales fueron tituladas utilizando el reactivo anterior.
de transición como el fierro y cobre en Determinación de la capacidad antioxidante.-
presencia de peróxido de hidrógeno, etc.
(5,6) Los radicales libres ejercen efecto La capacidad antioxidante se determinó
nocivo sobre las proteínas, lípidos y ADN, utilizando el método de Benzie adaptado por
ocasionando daño a las células y pueden Szöllösi (9), para cuya finalidad se adicionó
conducir al estrés oxidativo, lo que se evita una alícuota de la muestra y se colocó en
parcialmente por la defensa antioxidante baño maría a 37º C durante 15 minutos, a
que dispone el organismo, defensa que no cuyo término se leyó en el espectrofotómetro
es lo suficientemente eficiente para evitar a 593 nm. Para realizar los cálculos se
el continuo efecto dañino de los radicales preparó una curva de calibración utilizando
libres, razón que obliga a ingerir frutas concentraciones crecientes de cloruro férrico.
y verduras por ser excelentes fuentes
de compuestos antioxidantes: vitamina Efecto de la temperatura.-
C, β-caroteno, licopeno, vitamina E, Con el propósito de observar el efecto de la
polifenoles, flavonoides, etc. (7). temperatura sobre el contenido de vitamina C
científica 7 (1), 2010 17

18. Emilio Guija Poma, Oscar Reátegui Arévalo y Luzmila Troncoso Corzo
ARTÍCULOS ORIGINALES
y la capacidad antioxidante de ambas frutas residual de vitamina C en función del tiempo
se utilizó un baño maría a las temperaturas: a las temperaturas antes indicadas permitió
60, 80 y 100º C; para el camu camu, calcular la constante de velocidad para
por la naturaleza de su comportamiento cada una de ellas, valores que se utilizaron
antioxidante, se le sometió adicionalmente para elaborar el gráfico de Arrehnius, en el
a las temperaturas de 37 y 50 ºC. En que se graficó logaritmo de las constantes
diversos intervalos se tomaron alícuotas para de velocidad en función de la inversa de la
determinar la concentración de vitamina C temperatura absoluta, conforme se observa
remanente y la capacidad antioxidante. en la figura 2. La energía de activación de
la degradación de vitamina C por efecto de
la temperatura se calculó de acuerdo a la
resUltadOs
ecuación de Arrehnius:
La concentración de vitamina C de la
mandarina estuvo comprendido entre 35
y 50 mg/dL de jugo, mientras que el camu lnk = ln Ae-Ea/RT
camu mostró valores entre 1,95 y 2,3 g/
dL. La degradación térmica de vitamina C El valor de la energía de activación de la
del jugo de mandarina siguió una cinética degradación de vitamina C de la mandarina
de primer orden, en la figura 1 se observa fue de 21,2 kJ/mol. Los valores de t1/2 (min)
el comportamiento de esta vitamina a tres para 60º C fue de 94,0, para 80º C tuvo un
temperaturas diferentes 60, 80 y 100º C; valor de 57,8 y para los 100º C fue de 35,0;
graficar el logaritmo de la concentración valores que se calcularon utilizando la figura 1.
figura 1. efecto de La temPeratura sobre La degradación de vitamina c de La mandarina.
figura 2. gráfico de arrehnius. vitamina c de La mandarina.
18 científica 7 (1), 2010

19. Cinética de degradación térmica de vitamina C y capacidad antioxidante de
camu camu (Myrciaria dubia) y mandarina (Citrus reticulata)
Un resultado cuantitativamente distinto se en función del tiempo. En la figura 5 se
obtuvo para la degradación térmica de la muestra el efecto de la temperatura sobre
vitamina C del camu camu, utilizando las la capacidad antioxidante de la mandarina,
mismas temperaturas, en la figura 3 se observa como en los experimentos anteriores la
que la descomposición de la vitamina C siguió disminución de la capacidad antioxidante
una cinética de primer orden, habiéndose tuvo un comportamiento compatible con una
calculado la constante de velocidad para cinética de primer orden; el cálculo de las
cada una de las temperaturas utilizadas. Los constantes de velocidad correspondiente a
logaritmos de las constantes de velocidad cada una de las temperaturas utilizadas hizo
se graficaron en función de la inversa de la posible la graficación de Arrehnius, conforme
temperatura absoluta, conforme se observa se muestra en la figura 6, la energía de
en la figura 4. El valor de la pendiente se utilizó activación calculada fue de 8,11 kJ/mol. En
para calcular la energía de activación, cuyo cambio, la temperatura afectó de una manera
valor fue de 10,18 kJ/mol. La vida media de completamente diferente la capacidad
las reacciones a las temperaturas utilizadas antioxidante del camu camu conforme puede
fueron 73,4 minutos para 60º C, 60,2 minutos observarse en la figura 7; cuando se grafica el
para la temperatura de 80º C y 51,0 minutos logaritmo de k en función de 1/T se obtiene
para la temperatura de 100º C. una recta binodal, lo que permite calcular dos
energías de activación diferentes: la primera
La determinación simultánea de la capacidad corresponde a temperaturas comprendidas
antioxidante en cada una de las muestras entre 37 y 60 ºC cuyo valor es de 97,69 kJ/
permitió establecer la probable existencia mol, y el valor de la energía de activación para
de una relación entre contenido de vitamina temperaturas en el rango de 60 a 100 ºC es
C remanente y la capacidad antioxidante, de 6,24 kJ/mol.
figura 3. efecto de La temPeratura sobre La degradación de vitamina c de camu camu.
figura 4. gráfico de arrehnius. vitamina c deL camu camu.
científica 7 (1), 2010 19

20. Emilio Guija Poma, Oscar Reátegui Arévalo y Luzmila Troncoso Corzo
ARTÍCULOS ORIGINALES
figura 5. efecto de La temPeratura sobre La caPacidad antioxidante de La mandarina.
figura 6. gráfico de arrehnius.- caPacidad antioxidante de La mandarina.
figura 7. gráfico de arrehnius. caPacidad antioxidante deL camu camu.
20 científica 7 (1), 2010

21. Cinética de degradación térmica de vitamina C y capacidad antioxidante de
camu camu (Myrciaria dubia) y mandarina (Citrus reticulata)
discUsiÓn Un análisis cinético de la degradación de
vitamina C en jugos de Citrus sinensis y
La vitamina C es un compuesto termolábil Citrus clementina sugiere que el proceso
cuya estabilidad es afectada por diversos ocurre a través de una reacción de primer
factores como: pH, metales de transición, orden, correspondiéndole una energía de
temperatura, etc. (10,11). En la industria activación de 35,9 kJ/mol (15), así mismo, se
alimentaria las frutas son sometidas ha descrito que la cinética de degradación
a varios tratamientos entre los que se térmica de vitamina C en néctar de copoazú
incluye a la temperatura, factor que acelera tiene una energía de activación de 74,5 kJ/
considerablemente la degradación de mol (16); de manera análoga se ha observado
esta vitamina. Se ha observado que las que el procesamiento térmico de la pulpa
reacciones de degradación térmica de de Rosa canina L produce descomposición
la vitamina C en presencia de oxígeno de la vitamina C, proceso que también
molecular son importantes en sistemas obedece a una reacción de primer orden y
aerobios y que en forma natural ocurren en se ajusta a la ecuación de Arrhenius, cuya
los alimentos (12). energía de activación calculada fue de 47,5
Se ha descrito que la vitamina C es inestable kJ/mol (17).
en soluciones acuosas, en experimentos La naturaleza de la manipulación a que son
realizados con este solvente se ha mostrado sometidos los alimentos altera de manera
que esta vitamina se descompone mediante diferente el contenido de polifenoles
un proceso que es dependiente de la de la fresa, se ha observado que la
concentración de la vitamina C y del tiempo pasteurización del jugo de fresa produjo
(13). Así mismo, se ha observado que la una disminución de 27%, mientras que la
vitamina C en el jugo de naranja sufre del néctar disminuyó 14%; una significativa
reacciones de oxidación a través de una pérdida se produjo durante el amasado
cinética de primer orden, resultado que es (18). Los α y β-carotenos de la zanahoria
similar al que hemos obtenido y que reviste son relativamente termoestables, aunque
particular importancia cuando las frutas pueden isomerizarse durante la cocción
han de someterse a tratamiento térmico (19), en cambio los polifenoles durante
o debe almacenarse durante un tiempo la cocción se perdieron completamente,
prolongado, especialmente en regiones debido a la liberación de sus moléculas al
donde la temperatura está por encima de agua en que se sometieron a la cocción,
los 30º C. como consecuencia de la ruptura de
El contenido de vitamina C de la mandarina, los componentes celulares (19). Los
35-50 mg/dL, es similar al publicado por carotenoides se incrementaron en un 14%
otros autores (14), quienes manifiestan que durante el proceso de ebullición, en cambio,
las concentraciones que ellos encuentran cuando la zanahoria se trató con vapor de
difieren en razón a la localidad en que agua ocasionó solo una ligera disminución.
se cultiva esta fruta, habiendo mostrado La manipulación casera de las frutas,
que aquellas que se cultivan en las zonas así como las etapas que comprende
altas tienen una mayor concentración de el procesamiento industrial, afectan el
vitamina C que las cultivadas en zonas contenido de compuestos fenólicos totales,
bajas tropicales. No solamente se observa antocianinas totales y en consecuencia
una diferencia en la concentración de la capacidad antioxidante. Se ha descrito
vitamina C, sino en la energía de activación que la capacidad antioxidante de las
de las mandarinas procedentes de la costa fresas, evaluadas utilizando la técnica
y sierra, cuyos valores de 44,56 y 53,56 FRAP, disminuyó 34% durante la
kJ/mol son más elevados que el valor preparación del puré, de manera análoga
que hemos encontrado en el presente el pasaje a través de una criba también
trabajo. La temperatura también afectó la afectó considerablemente la capacidad
estabilidad de la vitamina C del camu camu, antioxidante, estos efectos fueron evaluados
pero el valor de la energía de activación de utilizando el método TEAC, resultados que
esta vitamina fue mucho menor al publicado fueron muy similares a los observados
para otras fuentes de vitamina C. con la técnica FRAP (18). La capacidad
científica 7 (1), 2010 21

22. Emilio Guija Poma, Oscar Reátegui Arévalo y Luzmila Troncoso Corzo
ARTÍCULOS ORIGINALES
antioxidante de la mandarina es afectada La temperatura afectó de una manera
por tratamiento térmico, probablemente poco usual la capacidad antioxidante del
como consecuencia de los efectos que camu camu, esta propiedad es afectada
ejerce la temperatura sobre los contenidos considerablemente a temperaturas
de vitamina C y polifenoles, compuestos comprendidas entre 37 y 50 ºC, rango en
que son los mayores responsables de la que se produce una ostensible pérdida de la
capacidad antioxidante de las frutas; los capacidad antioxidante, es decir, la capacidad
valores de las energías de activación de la antioxidante es muy sensible a temperaturas
vitamina C y de la capacidad antioxidante inferiores a los 60 ºC, información que
difieren considerablemente, lo cual sugiere reviste particular importancia durante la
que la capacidad antioxidante no podría manipulación doméstica e industrial de
adscribirse exclusivamente a la vitamina C. esta fruta; en cambio, a temperaturas
comprendidas entre 60 y 100 ºC no se
El tratamiento térmico de los alimentos afecta en forma perceptible la capacidad
modifica el contenido de carotenoides y antioxidante del camu camu, lo que sugiere
compuestos fenólicos y, en consecuencia, la que probablemente los compuestos fenólicos
capacidad antioxidante de la Opuntia ficus- influirían sobre el efecto que la temperatura
indica; se ha mostrado que la contribución de ejerce sobre la degradación de la vitamina
los compuestos fenólicos libres a la actividad C y ambos sobre la capacidad antioxidante.
antioxidante fue considerablemente mayor: Es necesario realizar experimentos que
45/23, 42/9,5, 46/3,5, 46/3 y 47/1,3, efecto permitan establecer probables correlaciones
que aumenta a medida que se incrementa entre la degradación térmica de vitamina C y
la temperatura: 25, 63, 68, 73 y 78º C, el efecto que ejercerían diversos polifenoles
habiéndose identificado que los carotenoides sobre la estabilidad de esta vitamina, así
influyen considerablemente en la actividad como sobre la capacidad antioxidante de las
antioxidante de la Opuntia ficus-indica (20). frutas.
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emiLio guija Poma
corresPondencia: eguijaP@hotmaiL.com
oscar reátegui arévaLo
corresPondencia: oreategui@ucsur.edu.Pe
LuzmiLa troncoso corzo
corresPondencia: Ltroncoso@terra.com.Pe
recePción:
31 de marzo de 2010
acePtación:
21 de abriL de 2010
científica 7 (1), 2010 23

24. GlUtatiÓn PerOXidasa, GlUtatiÓn
redUctasa Y GlUtatiÓn redUcidO en
sUJetOs eXPUestOs a la altUra
GLUTATHIONE PEROXIDASE, GLUTATHIONE REDUCTASE AND
GLUTATHIONE REDUCED IN EXPOSED SUBJECTS TO THE HEIGHT
Luz Oyola H.1, Haydée Zúñiga C.1, Elizabeth Carranza A.1, EdgarFlorentini R.2,
Delia Whu W.3 y Gloria Gordillo R.3
resUMen analizada por el método de Paglia y Valentin
(1), la de GRd por el método de Goldberg
Objetivos: Estimar las variaciones de la y Spooner (2) usando Kits de Randox, y el
actividad de las enzimas antioxidantes contenido de GSH por el método de Beutler,
Glutatión peroxidasa (GPX, EC 1.11.1.9), Duran y Kelly (3). resultados: Nosotros
y Glutatión reductasa (GRd, EC.1.6.4.2), encontramos que las actividades de la GPx y
así como en la concentración de Glutatión GRd y la concentración de GSH aumentaron
reducido (GSH) en varones sometidos a en la hipoxia aguda; mientras que en los
hipoxia aguda y crónica, comparando los residentes de la altura la actividad de GPx y
resultados con los de sujetos de nivel del la concentración de GSH fueron mayores y
mar. Materiales y métodos: El estudio se la GRd fue menor que a nivel del mar. Todas
realizó siguiendo las normas de Helsinki, en las diferencias fueron estadísticamente
120 sujetos aparentemente sanos, cuyas significativas (p<,000), excepto entre los
edades oscilaban entre 20 a 40 años: 30 de residentes de las ciudades de similar altura,
nivel del mar (Lima, 150 m), 30 de nivel del mar donde: GPx, p<,022; GRd, p:NS y GSH,
sometidos a hipoxia aguda al trasladarlos a la p<,009.
altura (Morococha, 4.540 m), y para analizar
el efecto de la hipoxia crónica: 30 nativos Palabras clave: Glutatión peroxidasa,
de Morococha, 4.540 m y 30 de Cerro de Glutatión reductasa, hipoxia aguda, Cerro
Pasco, 4.340 m. La actividad de GPx fue de Pasco, antioxidantes, energía.
1
universidad nacionaL mayor de san marcos. instituto nacionaL de bioLogía andina
2
universidad nacionaL mayor de san marcos. facuLtad de ciencias matemáticas
3
universidad nacionaL mayor de san marcos. facuLtad de farmacia y bioquímica

25. Glutatión peroxidasa, Glutatión reductasa y Glutatión reducido en sujetos expuestos a la altura
aBstract su concentración en cada punto sea lo
suficientemente alta para permitir una buena
Objectives: To estimate changes in the difusión.
activity of antioxidant enzymes glutathione
peroxidase (GPx, EC 1.11.1.9) and El metabolismo celular mismo modifica la
glutathione reductase (GRd EC.1.6.4.2) PO2 tisular; así, a mayor actividad metabólica
and reduced glutathione concentration in es mayor la PCO2 local y la temperatura,
men subjected to acute hypoxia chronic, y la menor PaO2 hace que disminuya la
comparing the results with those of subjects afinidad de la hemoglobina por el oxígeno
at sea level. Materials and Methods: The facilitándose su entrega a los tejidos.
study was conducted following the rules
Cuando los tejidos no reciben la cantidad
of Helsinki, in 120 apparently healthy adecuada de oxígeno se crea una situación
subjects whose ages were between 20 to fisiológica conocida como hipoxia, condición
40 years: 30 sea level (Lima, 150 m), 30 metabólica en la que el suministro de oxígeno
sea level under acute hypoxia they moved a las células limita la producción de energía
to the height (Morococha, 4540 m) and to a niveles por debajo de los requerimientos
analyze the effect of chronic hypoxia: 30 celulares y lo limita severamente como
Native Morococha, 4540 m, 30 Cerro de sucede en la altura.
Pasco, 4340 m. GPx activity was analyzed
by the method of Paglia and Valentine, the La hipoxia puede ser producida por
RBC by the method of Goldberg et al. using condiciones de la atmósfera, así como por
Randox kits, and content of glutathione by trastornos de difusión entre capilar y célula
the method of Beutler et al. results: We por aumento del líquido intersticial, por
found that the activities of the GPx and GRd intoxicación de los sistemas enzimáticos
and GSH concentrations increased in acute celulares de óxido-reducción y por consumo
hypoxia, while residents of the high altitude: excesivo de oxígeno en los tejidos. Uno de
GPx activity and GSH concentrations were estos sistemas antioxidantes es el sistema
higher, and the GRd was lower than at the Glutatión peroxidasa/Glutatión reductasa.
sea level. All differences were statistically El Glutatión es sintetizado dentro de las
significant (p<0.000), except among células del organismo viviente, es un
residents of cities of similar height, where: tripéptido, pequeña molécula de proteína
GPx, p <.022; GRd, p: NS and GSH, p <.009. compuesta por los aminoácidos: ácido
Key words: Glutathione peroxidase, glutámico, glicina y cisteína. Se conoce
Glutathione reductase, Glutathione, acute también como tiol porque su capacidad
hypoxia, Cerro de Pasco, antioxidants, energy. de donación de electrones está ligada al
sulfhidrilo o grupo de azufre.
intrOdUcciÓn En nuestro organismo funciona en dos
formas: la activa o reducida (GSH) y la forma
La oxidación es un mecanismo químico oxidada inactiva (GSSG). El poder reductor
utilizado por nuestro organismo para del GSH es una medida de su capacidad
producir y degradar sustancias y está ligado de eliminar radicales libres. Cuando los
a la producción de energía. El oxígeno está niveles de GSH/GSSG cambian la célula es
íntimamente ligado a estos mecanismos de vulnerable a los ataques internos o externos
oxidación, los cuales son controlados por el de las células.
sistema antioxidante, por lo que debe existir
un balance entre oxidación y antioxidación El Glutatión reducido (GSH) constituye un
que puede ser útil en la cuantificación del importantísimo antioxidante producido por
daño tisular. las células del organismo, especialmente
por los glóbulos rojos, y mantiene a la
Para una adecuada provisión de oxígeno hemoglobina en estado reducido (Fe2+).
a las células es indispensable que los Contribuyen a mantenerlo en su estado
sistemas encargados de su adquisición y reducido enzimas como:
transporte funcionen normalmente y que
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26. Luz Oyola H., Haydée Zúñiga C., Elizabeth Carranza A., Edgar Florentini R., Delia Whu W. y Gloria Gordillo R.
ARTÍCULOS ORIGINALES
Glutatión peroxidasa (GPx), presente en las Materiales Y MÉtOdOs
mitocondrias, citosol y peroxisomas. Con
el GSH cataliza la reducción de elementos Material humano
tóxicos como el peróxido de H (H2O2) y los El presente estudio se realizó en 120 varones
lipoperóxidos (L-OOH) transformándolos en aparentemente sanos de 18 a 30 años de
agua y los correspon-dientes alcoholes. En edad, y contando con el consentimiento
esta reacción se forma un puente disulfuro informado voluntario y por escrito de
entre dos moléculas de GSH dando lugar a acuerdo a las normas de Helsinki, para lo
Glutatión oxidado (GSSG). cual se les ilustró acerca de los exámenes
Glutatión reductasa (GRd, CE 1.6.4.2.) que se les iba a realizar, sus beneficios y
es una flavoenzima dependiente del riesgos.
nicotinamida adenina dinucleótido fosfato Los sujetos se agruparon de la siguiente
reducido (NADPH), que cataliza la reducción manera:
del Glutatión oxidado (GSSG) a Glutatión
reducido (GSH) con la oxidación simultánea a. 30 sujetos de nivel del mar, Lima, 150 m.
de β-fosfato nicotinamida adenina
b. 30 sujetos sometidos a hipoxia aguda
dinucleótido (β-NADPH2).
(HA), Morococha, 4.540 m.
El NADPH se ha propuesto como
antioxidante capaz de neutralizar radicales c. 30 sujetos residentes de la altura,
libres tóxicos y reparar biomoléculas Morococha, 4.540 m.
derivadas de los radicales. Kirsch y de d. 30 sujetos residentes de Cerro de Pasco,
Groot (4). 4.340 m.
El GSH a través de diversos mecanismos y A cada uno de los sujetos, en estado de
enzimas puede actuar como antioxidante ayuno, se les tomó una muestra de 10 ml
frente a la metahemoglobina (Fe3+), la de sangre, que se recibió una parte en
cual se puede acumular frente al estrés tubos heparinizados y otra en tubos limpios
oxidativo modificando la estructura de la y secos, que se centrifugó para separar
célula sanguínea, debilitando la membrana suero, que se congeló hasta realizar las
del eritrocito haciéndola más vulnerable a la pruebas experimentales. Parte de la sangre
ruptura. entera se centrifugó a 2.000 rpm por 10
Asumiendo que el eritrocito en la altura sea minutos, separándose los glóbulos rojos,
más susceptible al estrés oxidativo, se ha que luego fueron lavados por tres veces con
diseñado el presente estudio con la finalidad solución salina fisiológica hasta obtener un
de evaluar si existe alguna modificación en las sobrenadante limpio.
actividades del sistema Glutatión, para lo cual Métodos
se determinó: las actividades de las enzimas
Glutatión peroxidasa y Glutatión reductasa, Glutatión peroxidasa (U/g. Hb). Se
así como la concentración de GSH en sujetos determinó en sangre entera por el método
expuestos a hipoxia aguda y en nativos de de Paglia y Valentin (1). La GPx cataliza la
altura, comparando los resultados con los de oxidación del GSH por el hidroperóxido de
sujetos de nivel del mar. cumeno. El GSSG en presencia de GRd
26 científica 7 (1), 2010

27. Glutatión peroxidasa, Glutatión reductasa y Glutatión reducido en sujetos expuestos a la altura
y NADPH es inmediatamente convertido resUltadOs
en su forma reducida con una oxidación
concomitante de NADPH en NADP+. Se En la tabla 1 se puede apreciar las
mide la disminución de la absorbencia a actividades de Glutatión peroxidasa,
340 ηm. Glutatión reductasa y la concentración de
Glutatión reducido obtenidos en los cuatro
Glutatión reductasa (U/g. Hb). Se grupos de estudio: sujetos de nivel del mar
determinó en eritrocitos lavados por el (Lima, 150 m), sujetos expuestos a hipoxia
método de Goldberg y Spooner (2). Se aguda (Morococha, 4.540 m) y sujetos
basa en que la GRd cataliza la reducción de residentes en la altura (Morococha, 4.540 m
GSSG en presencia de NADPH, el cual es y Cerro de Pasco, 4.340 m). Como se puede
oxidado a NADP+. Se mide la disminución observar en la tabla 1, ambas actividades
en la absorbancia a 340 ηm. enzimáticas y la concentración de GSH
aumentan en la exposición a la hipoxia aguda;
Glutatión reducido (μmol/g Hb). Se mientras que en la exposición crónica en los
determinó en sangre entera por el método dos lugares de altura: la Glutatión peroxidasa
de Beutler, Duran y Kelly (3), basado en y GSH fueron mayores que a nivel del mar, y
el desarrollo de un color amarillo cuando la Glutatión reductasa fue menor. Todas las
5,5´-ditiobis(2-ácido nitrobenzoico) (DTNB) diferencias tienen significación estadística,
es agregado a compuestos sulfhidrilo. p<,000; excepto al comparar los valores
El color que desarrolla es estable por de los residentes de Morococha y Cerro
aproximadamente 10 minutos y la reacción de Pasco, dos ciudades que se encuentran
es poco afectada por variación en la a altitudes similares, donde: GPx, p<,022;
temperatura. La reacción es leída a 412 ηm. GRd, p:NS y GSH, p<,009.
tabLa 1. actividad de gLutatión Peroxidasa, gLutatión reductasa
y vaLores de gLutatión reducido a diferentes aLtitudes (n = 30).
Por comParaciones múLtiPLes a diferentes niveLes de aLtitud, se encontró que: gPx, grd y gsh
aumentaron en hiPoxia aguda(b); gPx y gsh fueron mayores y grd menor en hiPoxia crónica(c,d).
Las diferencias fueron estadísticamente significativas, P<,000; excePto entre Los residentes
de ciudades de simiLar aLtura(c,d), donde: gPx, P<,022; grd, P:ns y gsh, <,009.
científica 7 (1), 2010 27

28. Luz Oyola H., Haydée Zúñiga C., Elizabeth Carranza A., Edgar Florentini R., Delia Whu W. y Gloria Gordillo R.
ARTÍCULOS ORIGINALES
discUsiÓn La disminuida actividad de GRd
observada en los residentes de la altura
Los resultados del presente estudio ponen se debería a la excesiva producción
en evidencia que los sujetos sometidos a de especies reactivas de oxígeno o a
hipoxia aguda presentan mayor actividad factores ambientales, como lo sostienen
de las enzimas GPx y GRd y mayor Frei, Forte, Ames y Cross (12), Fridovich
concentración de GSH; y que en hipoxia y Handler (13) y Araya, Miyamoto, Kondo,
crónica se aprecia un aumento de la Isobe, Shimizu, Ishiguro et al. (14).
actividad de la GPx y de la concentración
de GSH y disminución de la actividad de la
GRd. En la exposición a la hipoxia aguda, el cOnclUsiOnes
eritrocito sería inducido a estrés oxidativo, 1. La exposición a la hipoxia aguda
posiblemente a ello se deba el aumento de produce modificaciones en el sistema
los niveles de GSH y de las actividades de Glutatión, tales como: aumento de
las enzimas involucradas en su generación, las actividades de la GPx y GRd y de
para así realizar su defensa antioxidante la concentración de GSH como una
y controlar la cantidad y el efecto de los protección para la eliminación de
radicales libres, como lo sugieren Prior especies reactivas de oxígeno que
(5), Romay, Pascual y Lissi (6), Hallrwell y surgen en la altura.
Gutteridge (7), y Oyola y col. (8).
2. En los residentes de altura: la actividad
La mayor actividad de GPx y los mayores de GPx y las concentraciones de GSH
valores de GSH en los residentes de altura fueron mayores que en los de nivel del
responderían a un sistema de defensa del mar.
organismo para proteger a la célula contra
la acción de los radicales libres en la altura, 3. La actividad de GRd en los residentes de
por la presencia de más sustancias óxido- la altura (Morococha y Cerro de Pasco)
reductoras, tal como lo sostienen Cisneros, fueron menores que en los residentes
Prego, Pupo Balboa y Céspedes (9), Pascual, de nivel del mar, posiblemente por su
Martínez, Barcena, López Barea y Toribio (10) mayor demanda para reducir el peróxido
y Mahadik, Makar, Murthy, Ortiz, Wakade y de hidrógeno y otros lipoperóxidos que
Karpiak (11). son elementos tóxicos.
referencias BiBliOGrÁficas
1. Paglia DE, Valentin WN. Studies on the quantitative characterization of erythrocite Glutatión
peroxidase. J. Lab. Clin Med. 1967;70:158-159.
2. Golberg DM, Spooner RJ. In: Methods of Enzymatic Analysis (Bergmeyer HV. Ed) 3rd Ed.
1987;3:258-265.
3. Beutler E, Duran O and Kelly B. Improved method for the determination of blood glutathione.
Journal of Laboratory and Clinical Medicine 1963;61:882.
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