Analisis y Extraccion de drogas en orina y contenido gastrico

1. Universidad Nacional
“José Faustino Sánchez Carrión”
Facultad de Ingeniería Química Metalurgia.
Quím. Wilfredo Samaniego Dávila.
Colaborador Ing. Abarca Rodríguez, Joaquín José
EXTRACCION DE DROGAS ENEXTRACCION DE DROGAS EN
ORINA Y CONTENIDO GASTRICOORINA Y CONTENIDO GASTRICO

2. EXTRACCION DE DROGAS EN ORINA Y CONTENIDO GASTRICOEXTRACCION DE DROGAS EN ORINA Y CONTENIDO GASTRICO

3. ESQUIEMA ANALITICA IESQUIEMA ANALITICA I
ORINA
ACUOSO ORGANICA
(RETENER)
5 ml + CO3K2
anhridro hasta pH 8,0 - 9,0;
extraer con + 10 ml CHCl3 etanol
(8:2) + agitar 3-5 minutos.
Evaporar a pequeño volumen
en baño maría (5ml)
THL
Aplicar a las placas
cromatográficas

4. ESQUIEMA ANALITICA IIESQUIEMA ANALITICA II
ORINA
ACUOSO ORGANICA
(RETENER)
5 ml + NaOH 10N pH 8,5 - 9,0;
extraer + v buffer + bicarborato
pH 8,5 +10ml CHCl3 -
Isopropanol - 1,2 - dicloroetano
(8:1:3) + agitar.
Evaporar bajo corriente de
aire a pequeño volumen en
baño maría (5ml)
C.C.F
Aplicar a las placas
cromatográficas

5. EXTRACCION DE DROGAS EN LA SANGRE MUESTRAEXTRACCION DE DROGAS EN LA SANGRE MUESTRA
SUERO O PLASMASUERO O PLASMA

6. DROGAS NORMALMENTE ALOJADAS OVERDOSAGE EN EL QUE PUEDEDROGAS NORMALMENTE ALOJADAS OVERDOSAGE EN EL QUE PUEDE
ENCONTRARSE EL VARIOS OBTUVO EN EL PROCESO DEL EXTRACTOENCONTRARSE EL VARIOS OBTUVO EN EL PROCESO DEL EXTRACTO
FRAGMENTO A FRAGMENTO C FRAGMENTO D FRAGMENTO E
Salicylates
(Phyentoin) *
Cafeína
Carbromal
(Volúmenes del
estómago
sólo)
Chlormethiazole
Ethchlorvvnol
Flurazepam
(sangre sólo)
Glutethismide
Lorazepam
(sangre sólo)
Meprobamate
Methaquealone
(sangre sólo)
Methyprylone
Nitrazepam
(sangre sólo)
Paracetamol
Phenazone
Temazepam
(sangre sólo)
theophyline
Amitriptyline
Amphetamine +
Cafeina
Chlordiazepoxide
Chlormethiazole
Chlorpromazine +
Clomipramine
Codeína
Dosipramine
Dextropropoxyphene
Diazepam
Dihydroxodeine
Dothiepin
Doxepin
Alcaloides del
cornezuelo del
centeno
flurazepam
Imipramine
Lorazepam
Maprotiline
Methadone
Methaqualone
Mianserin
Morfina
Nitrazepam
Orphenadrine
Oxprenolol
Phenelizine +
Propranolol
Quinina
Temazepam
Theophyline
Thioridazine+
trimipramine
Benzodiazepines
(como benzo-
phenones)
FRAGMENTO B FRAGMENTO F
B…bitúricos
Chlorpropamide
Glutethimide
Paracetamol
Phenylbutazone
phenytoin
Codeína
Morfina
* Phenytoin sólo se encontrará en este fragmento después del extracto muy
vigoroso con bicarbonato de sodio.
+ Estas drogas pueden ser no detectadas debiendo a las concentraciones muy
bajas de la sangre presente, aun después de la dosis excesiva.
OVER DOSAGE ENCIMA DE LA DOSIFICACIÓN

7. MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN DE COCAINA YMÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN DE COCAINA Y
METABOLITOS POR CROMATOGRAFÍA DEMETABOLITOS POR CROMATOGRAFÍA DE
CAPA FINA (TLC)CAPA FINA (TLC)
I.I. MATERIALES.MATERIALES.
a). Placas de vidrio con sílice GEL GF254a). Placas de vidrio con sílice GEL GF254
de 10 cm de largo 250 micrones dede 10 cm de largo 250 micrones de
espesorespesor
b). Solventes de Extracción.b). Solventes de Extracción.
SolventeSolvente ProporciónProporción
E1E1 Cloroformo – EtanolCloroformo – Etanol 8:28:2
E2E2 Cloroformo Isopropanol,Cloroformo Isopropanol,
1,2 dicroroetano1,2 dicroroetano
8:1:38:1:3
E3E3 Cloroformo EtanolCloroformo Etanol 3:23:2

8. c). Sistema de Solventes.c). Sistema de Solventes.
d). Sistema de Revelado.d). Sistema de Revelado.
1.1. Revelador.Revelador.
2.2. Iodo Platinato.Iodo Platinato.
3.3. Ludy tenger: 0.5gr BiLudy tenger: 0.5gr Bi22(CO(CO33))33 en 1.1ml HClen 1.1ml HCl
Q.P más 3g de IK y llevar a 50 ml de HQ.P más 3g de IK y llevar a 50 ml de H22OO
destiloda.destiloda.
4.4. Luz ultravioleta 366 nm.Luz ultravioleta 366 nm.
SolventeSolvente ProporciónProporción
Sistema NºSistema Nº
11
Acetato de Etilo – Metanol -Acetato de Etilo – Metanol -
AmoniacoAmoniaco
17:2:117:2:1
Sistema NºSistema Nº
11
Cloroformo - Metanol – AmoniacoCloroformo - Metanol – Amoniaco 100:20:1100:20:1

9. III. DESARROLLOIII. DESARROLLO
Los extractos orgánicos se depositan enLos extractos orgánicos se depositan en
placas de sílice GEL GF254 nm con microplacas de sílice GEL GF254 nm con micro
pipetas de 1 a 2 microlitos, frente a lospipetas de 1 a 2 microlitos, frente a los
estándares respectivos las placas fueronestándares respectivos las placas fueron
desarrolladas unidimensionalmentedesarrolladas unidimensionalmente
ascendentes en los sistemas:ascendentes en los sistemas:
(Nº1): acetato de tilo – metanol – amoniaco(Nº1): acetato de tilo – metanol – amoniaco
(17:2:1).(17:2:1).
(Nº2): cloroformo – metanol – amoniaco(Nº2): cloroformo – metanol – amoniaco
(100:20:1) que saturaran las curvas(100:20:1) que saturaran las curvas
cromatográficas por un tiempo de 30cromatográficas por un tiempo de 30
minutos.minutos.

10. El tiempo de migración promedio fueEl tiempo de migración promedio fue
de 25 minutos a temperaturade 25 minutos a temperatura
ambiente y presión normal.ambiente y presión normal.
Las placas se secarán bajo corrienteLas placas se secarán bajo corriente
de aire y posteriormente se vaciaronde aire y posteriormente se vaciaron
con reactivos reveladores decon reactivos reveladores de
visualización correspondiente (reactivovisualización correspondiente (reactivo
cromógenos)cromógenos)

11. III. DETECCIÓNIII. DETECCIÓN
Las placas desarrolladas secas fueronLas placas desarrolladas secas fueron
sometidas a revelados de tipo secuencialsometidas a revelados de tipo secuencial
como sigue:como sigue:
1.1. Luz extravioleta onda larga (366nm) ondaLuz extravioleta onda larga (366nm) onda
larga observándose manchas pardas oscuraslarga observándose manchas pardas oscuras
sobre fondo violeta brillante.sobre fondo violeta brillante.
2.2.Por aspersión de Iodo platinato, enPor aspersión de Iodo platinato, en
presencia de cocaina y ecgonina metilesterpresencia de cocaina y ecgonina metilester
se observan manchas pardo violáceas dese observan manchas pardo violáceas de
tono intenso y tenue respectivamente.tono intenso y tenue respectivamente.

12. La benzoilecgonina y la ecgonina aparecenLa benzoilecgonina y la ecgonina aparecen
pocos minutos después (5 minutos) de colorpocos minutos después (5 minutos) de color
pardo violáceo.pardo violáceo.
3. Con el revelador Ludy Tenger se3. Con el revelador Ludy Tenger se
observaron manchas anaranjado amarillentoobservaron manchas anaranjado amarillento
debido a la presencia de cocaína.debido a la presencia de cocaína.
Benzoil ecgonina, ecgonina metilester yBenzoil ecgonina, ecgonina metilester y
ecgonina.ecgonina.
La mancha de ecgonina es ligeramenteLa mancha de ecgonina es ligeramente
pardusca.pardusca.

13. DETECCIÓN DE COCAINA Y SUS METABOLITOS PORDETECCIÓN DE COCAINA Y SUS METABOLITOS POR
CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA (REVELADORCROMATOGRAFIA DE CAPA FINA (REVELADOR
SECUENCIAL) - CUADRO Nº01SECUENCIAL) - CUADRO Nº01
PLACA DEPLACA DE
SILICE GELSILICE GEL
GF254GF254
SECASSECAS
COCAINACOCAINA BENZOILBENZOIL
ECGONINAECGONINA
EGONINAEGONINA
METILESTERMETILESTER
ECGONINAECGONINA
LUZLUZ
ULTRAVIOLETAULTRAVIOLETA
λλ LARGA 266NMLARGA 266NM
--------
PARDOPARDO
OSCUROOSCURO
FONDOFONDO
VIOLACEOVIOLACEO
------ --------
IODOIODO
PLATINATOPLATINATO
PARDOPARDO
VIOLÁCEOVIOLÁCEO
PARDOPARDO
VIOLACEOVIOLACEO
DESPUES DE 5DESPUES DE 5
MINUTOSMINUTOS
PARDOPARDO
VIOLÁCEOVIOLÁCEO
PARDOPARDO
VIOÁCEOVIOÁCEO
DESPUES 5DESPUES 5
MINUTOSMINUTOS
LUDY TENDERLUDY TENDER ANARANJADOANARANJADO
AMARRILLENTOAMARRILLENTO
ANARANJADOANARANJADO
AMARRILLENTOAMARRILLENTO
ANARANJADOANARANJADO
AMARRILLENTOAMARRILLENTO
PARDUSCOPARDUSCO

14. RESOLUCION DE FRENTE (RF) PARA LA COCAINA YRESOLUCION DE FRENTE (RF) PARA LA COCAINA Y
METABOLITOS EN SISTEMA DE SOLVENTESMETABOLITOS EN SISTEMA DE SOLVENTES
ELEGIDOS - CUADRO Nº 02ELEGIDOS - CUADRO Nº 02
DROGASDROGAS
RESOLUCIÓN (RF)RESOLUCIÓN (RF)
SISTEMA Nº 01SISTEMA Nº 01
ACETATO DE ETILOACETATO DE ETILO
METANOL –METANOL –
AMONIACO(17:2:1)AMONIACO(17:2:1)
SISTEMA Nº 02SISTEMA Nº 02
CLOROFORMO – METANOL –CLOROFORMO – METANOL –
AMONIACO(100.20:1)AMONIACO(100.20:1)
COCAÍNACOCAÍNA 0.980.98 0.980.98
BENZOILBENZOIL
EGONINAEGONINA
0.140.14 0.520.52
EGONINAEGONINA
METILESTERMETILESTER
0.870.87 0.930.93
ECGONINAECGONINA 0.000.00 0.260.26
EL SISTEMA Nº 02 DA MEJOR RESOLUCIÓNEL SISTEMA Nº 02 DA MEJOR RESOLUCIÓN

15. IV. RESULTADO OBTENIDOSIV. RESULTADO OBTENIDOS
MUESTRASMUESTRAS N º CASOSN º CASOS %%
POSITIVASPOSITIVAS 48.0048.00 48.0048.00
NEGATIVASNEGATIVAS 52.0052.00 52.0052.00
TOTALTOTAL 100.00100.00 100.00100.00
Los métodos cromatográfico de capa fina (TLC) dieron losLos métodos cromatográfico de capa fina (TLC) dieron los
siguientes resultadossiguientes resultados
CUADRO Nº 03CUADRO Nº 03
RESULTADOS PARA LAS MUESTRAS ANALIZADASRESULTADOS PARA LAS MUESTRAS ANALIZADAS