1. Utilización de rizobacterias promotoras de
crecimiento vegetal (PGPR) en plantas
cultivadas en Argentina
Ing. Agr. Alejandro Perticari1
INTA – IMYZA CICVyA

2. Abundancia de organismos del
suelo
Número Biomasa
Organismo por gramo suelo (kg/ha)
acre)
Lombrices >5 110 – 1,700
Artrópodos 1-10 6 – 170
Nematodes 10 – 100 11 – 170
Protozoarios >10000 22 – 220
Algas >1000 11 – 550
Hongos >200000 1,100 – 17,000
Actinomycetes > 100 millones 440 – 5,500
Bacteria 100 millones a 1 billon 440 – 5,500
Richard Stehouwer, 2010. Unv. Pensylvania. USA

3. Incremento de la intensidad de labranza
disminuye la diversidad y biomasa microbiana.

4. Efectos de las prácticas de manejo sobre la diversidad
de microorganismos
Bosque
Monocultivo
Pastizal
Rotaciones
Richard Stehouwer, 2010. Unv. Pensylvania. USA

5. Which specificity in cooperation between phytostimulating rhizobacteria
and plants? Benoıˆt Drogue et al 2012

7. Endofitos raíz, tallo y semillas

9. Veronica
chamaedrys
Achillea
millefolium
Rumex
acetosa
Poa
pratensis
Anthoxanthum
odoratum
Plant driven selection of bacterial communitiesin the rhizosphere of
different herbaceous plants. Six different herbaceous plants were cultivated in the
same soil and the rhizosphere bacterial communities were analyzed using the
SSCP-profiling technique. Hartman et al 2008
Las plantas seleccionan los microbios que la colonizan??

10. Conocer Microbioma vegetal
nos puede ayudar a comprender
Muchas relaciones positivas y
Negativas?

12. De todos esto mo son
No cultivables el 99% ???
Cultivables solo 1%
Estos se emplean para Bioinsumos

13. Según Kloepper (1978) una bacteria PGPR es aquella altamente eficiente para aumentar el
crecimiento de plantas y aumentar la tolerancia a otros m.o que causan enfermedades.
Según Bashan (2005) Plant growth-promoting bacteria (PGPB) son definidas como bacterias
de vida libre en el suelo, rizósfera, rizoplano y filósfera que bajo algunas condiciones son
benéficas para las plantas.
Según definiciones actuales PGPM para incluir a todos los MO
PGPR/PGPB/PGPM
Grupo 1: Afectan el metabolismo de las plantas por proveer sustancias que son usualmente
escasas. Fijadores de N2, solubilizadores de P y hierro, productores de fitohormonas.
SOLUBILIZACIÓN
DE FOSFATOS
PRODUCCIÓN
DE FITOHORMONAS
FBN

14. BIOCONTROLAMILASAS PRODUCCIÓN DE
SIDEROFOROS
Grupo 2: Referido como PGPB Biocontroladoras que indirectamente promueven el
crecimiento por prevenir los efectos deletéreos de fitopatógenos. Ellos producen
sustancias que matan o inhiben a otros microbios pero no a plantas.

15. 1. AISLAMIENTO DESDE PARTES DE LA PLANTA
RAICES, HOJAS, NODULOS , SEMILLA Y SUELO
Fuente Aislamiento- Colonia Pura

16. Es fundamental identificar el microorganismo a
seleccionar al nivel de género y especie previo a los
estudios de selección para su empleo como
inoculante..

17. TRAZABILIDAD
Daniel Grasso 2007

18. Las especies patógenas o cercanas no
pueden ni deben ser utilizadas para estos
fines.

19. Se ha demostrado que determinados
microorganismos utilizados como insumos
microbiológicos (inoculantes de leguminosas,
promotores del crecimiento vegetal) intervienen
positivamente en procesos involucrados en
producciones agropecuarias sustentables.

20. DEFINICIONES
INOCULANTE BACTERIANO: Formulación conteniendo una o más bacterias béneficas
(cepas o especies) de uso sencillo y con soporte económico.
El inoculante es el medio de transporte de la bacteria desde la fábrica a la planta.
Los efectos esperados sobre el crecimiento de las plantas incluyen FBN en
leguminosas, mejor absorción de nutrientes,, efectos hormonales, etc..
BIOFERTILIZANTE ó FERTILIZANTE BIOLÓGICO: Erróneamente empleado para
reemplazar Inoculante Bacteriano. Se refiere a preparaciones de microorganismos que
pueden ser reemplazantes de la fertilización química como por ejemplo
los inoculantes para leguminosas. Sin embargo se desconocen otros efectos sobre el
crecimiento de las plantas. Al usar la palabra “fertilizante” se facilita el registro para uso
comercial. Este término, salvo que es apropiado debería ser abandonado.

21. Producto Formulado cuyo principio activo es una
microorganismo vivo no patógeno de humanos,
animales o plantas, ni patógenos oportunistas del
hombre, que favorecen la nutrición y/o el
crecimiento de las plantas. Identificable-Magnitud y
frecuencia
Excluye los denominados agentes de control
biológico, y productos de similar actividad que
favorecen la salud de las plantas (Red BIOFAG,
2008).
¿Qué es un
inoculante/Biofertilizante
Microbiano?

22.  ENCONTRAR LA MEJOR BACTERIA Y CEPA DISPONIBLE
 DESARROLLAR A PARTIR DE ESTA LA FORMULACIÓN ADECUADA
A LAS CONDICIONES DE USO.
 DESARROLLAR LAS CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO, TRANSPORTE, ETC
 ESTABLECER LOS PATRÓN (MÍNIMOS DE CONCENTRACIÓN,
ACTIVIDAD BIOLÓGICA, ETC.
 ESTABLECER LAS INSTRUMENTOS DE FIZCALIZACIÓN Y DE CONTROL DE
CALIDAD
DESARROLLO DE UN PROGRAMA DE
INOCULACIÓN

23. ESPECIFICOS: Azospirillum brasilense,
Pseudomonas fluorescens, Rhizobium, Bacillus,
Trichoderma, Penicillium billae etc.
MULTIESPECIES: Azospirillum con Pseudomonas.
Bradyrhizobium y Azospirillum , más complejos
Algas con PGPR, Paenobacillus con Azospirillum

24. Introducción
Agricultura extensiva en Argentina.
Generalidades
 Secano.
 Cultivos de verano (soja).
 Siembra directa.
 Alta adopción de tecnologías
(genotipos).
 Frecuentes limitaciones hídricas y
nutricionales (N, P, otros).
 Moderadas (localizadas)
reducciones por enfermedades y
plagas

25. Microorganismos PGPR presentes en los
inoculantes en el mercado nacional de uso para
trigo, maíz y otros.
1. Azospirillum (20 productos)
2. Pseudomonas 5-7 productos
3. Coinoculantes de 1+2 (3 productos)
4. Coinoculantes hongos, levaduras y bacteria (1)
5. Penicillium (1)
6. Trichoderma (3)
7. Bacillus (3)

26. Almacenamiento
y transporte
Dosis y
Método de uso
Formulación:
Cantidad y
calidad
metabólica
Proceso
de envasado
Vida
del
inoculante

27. Desafío obtener inoculante de Azospirillum
con sobrevida mínima de 6 meses para transformarlo
en insumo real de empleo.
Se evaluaron más de 10 tipos diferentes de formulados
Inoculantes en base a formulados pulverulentos vida útil media
inferior a los 3 meses (turba, dolomita, etc.)
2000/1 se obtiene: Inoculante formulado líquido de alta
persistencia y de vida útil media de 6 meses.
Transferido a la industria en 2001 CVT INTA-Nitragin

28. Sobrevivencia
del
inoculante
Sobrevivencia
en el
suelo
Sobrevivencia
en la
semilla
Sobrevivencia
en la
raíz
Efecto
Del
inoculante

29. FORMULACION DE MICROORGANISMOS BENEFICIOSOS
ESTADO
METODO DE
PREPARACION
METODO DE
APLICACION
SOLIDO
Polvo
Granulado
LIQUIDO
Oleoso
Acuoso
Polímero
SECADO
- (Spray, Liofilizado,
Aire)
IMPREGNADO
- Sobre sólido seco
- Cultivo
- Cultivo mezclado con otro
soporte liquido
- Cultivo impregnado en
soporte sólido y mezclado
con otro soporte líquido
SEMILLAS
- Preinoculación
- Polvo sobre semillas
a la siembra
SUELO
- En surco
SEMILLAS
- Preinoculación
- Líquido sobre
semillas a la siembra
SUELO
- En surco
FOLIAR
JLBoiardi 2007

30. Pseudomonas EN ARGENTINA
1 No se dispone de colección referencial ( cepas de empresas o colecciones
aisladas9
2. Identificación
3. Demostración de inocuidad.
4. Selección de cepas.
5. Desarrollo de formulación
6. Normativa actualizada.
7. Contralor y actitud fiscal rigurosa hacia los productos no aptos.
Comentarios:
En el caso de Pseudomonas a mi entender no se han cumplimentado en
forma rigurosa todas las etapas y estas se han realizado en forma individual
por cada una de las empresas elaboradoras de estos formulados
microbianos. No contamos con una colección única, desconozco si en todos
los casos se ha hecho la demostración de inocuidad y no hubo procesos de
selección de cepas conjunto, existiendo hoy en el mercado distintas cepas de
Pseudomonas presentes. No hay protocolos de actividad biológica
estandarizados sobre los efectos propuestos de solubilización de P. No hay
herramientas para incorporar como normativa y esto debilita el contralor.

31. Número por g/ml de
inoculante – Recién
comienza
Actividad Biológica
Número en semilla
Control de calidad PGPM –
Protocolos validados - REDCAI
Identificación de cepas
presentes

32. 0
1
2
3
4
5
6
0 2 24
N,umeroporsemilla(log10)
Tiempo (h)
Persistencia en semilla de trigo según BPCV considerado
Azospirillum
Azotobacter
Rhizobium
Paenobacillus
Bradyrhizobium

33. Inoculantes y mejoramiento del crecimiento de plantas:
mitigación de estrés abiótico

34. Inoculantes y mejoramiento del crecimiento de plantas:
mitigación de estrés abiótico
Modos de acción directos
o Aumentan la disponibilidad de nutrientes
por mineralización de formas orgánicas
o solubilización de elementos poco
disponibles.
Mejoras indirectas
o Incrementan el crecimiento de raíces
por liberación de hormonas - o
precursores de estas -, de moléculas
señal u otros desencadenantes de
cadenas de actividad de genes.
o Inducción a efectos sistémicos en las
plantas mejorando su respuesta al
ambiente bajo condiciones de estrés.
(Harman, 2011)
Desafíos:
 Evaluación extensiva local (Argentina)
 Integración en sistemas de producción (valor de la
práctica)
• Azospirillum – Pseudomonas – Penicillum
• Cereales - Leguminosas

35. Inoculantes y mejoramiento del crecimiento de plantas:
mitigación de estrés abiótico
Respuestas a la inoculación con Azospirillum
brasilense
Argentina (2002/3 a 2011/12)
Trigo (550) Maíz (n=279)
 Aumentos de rendimientos en más del 72 % de los
casos y en promedio 6 % superiores a los controles sin
su aplicación.
Díaz-Zorita et al. (2013)

36. Inoculantes y mejoramiento del crecimiento de plantas:
mitigación de estrés abiótico
Trigo Respuestas a la inoculación con Azospirillum
brasilense
(Argentina, n=297 - 2011 a 2013)
Díaz-Zorita y Fernandez Canigia (2009)
 Mayores aportes en crecimiento inicial
(producción de raíces y de biomasa aérea).
 Respuestas significativas al aumentar la
productividad de los cultivos.

37. Que tener en cuenta cuando se va a
utilizar un inoculante
Inscripción en la SAGPyA (SENASA)
Fecha de vencimiento
Número de lote
Condiciones de almacenamiento
Especie
Concentración bacteriana
Dosis
Condiciones para la inoculación

38. Tomate Eucalyptus grandis
Girasol
Lechuga criolla
Arándano

39. Arándano

40. 8691
9518
8200
8400
8600
8800
9000
9200
9400
9600
SI INOCULADOS
Promedio de ensayos Inoculación en
Campo Experimental IMYZA INTA
Castelar 2007-2010
SI = 1,0331x - 674,34
R² = 0,745
IN = 0,9669x + 674,34
R² = 0,7191
4500
5500
6500
7500
8500
9500
10500
11500
12500
4500 6500 8500 10500 12500
Rinde(kg.ha)
Ambiente (kg.ha)
Maíz con inoculantes. Castelar
Tres campañas
Ejemplo respuesta a la inoculación con PGPR
en maíz – Proyecto Inocular
Respuesta positiva promedio de la inoculación de 816 kg/ha,
equivalentes al 9%
del rendimiento de los cultivos.
El porcentaje de casos positivos 75% .

41. 3784
3950
4107
3891
4310
4577
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
3500
4000
4500
5000
Sin inocular Azospirillum Azosp + A 25 Z1 + Azosp Azotobacter +
Azosp
Paenibacillus +
Azosp
Coinoculantes Castelar 2008-9

42. En trigo se calcula 200000-300000 dosis (inoculante para 100 kg de
semilla de trigo) representando un 4-5% del área de siembra. Azospirillum
Presiembra y siembra los más empleados. Luego Pseudomonas.
En el resto de los cultivos como maíz con impulso creciente.
En el caso de arroz, Algodón, especies hortícolas, etc. los inoculantes se
utilizan en forma muy puntual. Si bien se observaron muy interesantes
Respuestas.
En hortícolas se usan EM y Trichoderma
Se promueven nuevos productos Rizoderma a base Trichoderma Limite y
Guardian a base Bacillus subtilis

43. ¿En el suelo los microbios promotores del
inoculante persisten?
¿Hay estandares de calidad de los inoculantes
espécificos ?
¿La coinoculación es un tecnología completa?
¿Los microbios promotores en formulados
inoculantes toleran condiciones ambientales
adversas?
¿La semilla de mala calidad, los fungicidas u otros
curasemillas afectan?
¿El maíz y el trigo hace por la promoción o la FBN,
las híbridos o variedades son iguales en estos
aspectos?

44. COMPONENTES DEL SISTEMA DE PROMOCION DE CRECIMIENTO
IDEAL
GENOTIPO
INOCULANTE
ESPECÍFICO
DE ALTA
VALOR
AGREGADO
APORTE A LA
PRODUCCION
PARA
CONDICIONES
NORMALES Y
MARGINALES

45. GÉNERO ESPECIES RECONOCIDAS HABITAT MECANISMOS INDIRECTOS
Gluconacetobacter diazotrophicus endófito FBN, PCP
Azoarcus endófito FBN
Azorhizobium caulinodans endófito FBN, PCP, solubilizador de P
Azospirillum amazonense, brasilense,
irakense,lipoferum,
Rizósfera,
endófito
FBN, PCP
Azotobacter armeniacus,chroococcum,
vinelandii
Rizósfera, FBN, fitohormonas, solubilizador
de P
Bacillus amyliloliquefaciens;subtilis Rizósfera, PCP
Bradyrhizobium japonicum Rizósfera
endófito
FBN
Herbaspirillum seropedicae Rizósfera,
endófito
FBN, PCP
Paenobacillus polymixa Rizosfera,
endófito
Solubilizador de P, PCP
Pseudomonas fluorescens; aurantiaca;
putida
Rizósfera Solubilizador de P
Rhizobium leguminosarum biovar
trifolii,
endófito FBN, PCP, solubilizador

46. Avances 2014
- Gramíneas fijadoras de N2?????
- MGM Microorganismos genéticamente
modificados. Ejemplos
Pseudomans transformadas en Argentina
1. Máxima FBN
2. Multifunción Producción de fitohormonas y
solubilización de fosfatos.
3. Cauba MINAGRI Dirección de Biotecnología
4. Congreso PGPR Cordoba 2014 Septiembre

47. Prospectivas:
- En un contexto de necesidad de aumentar la
productividad con altos costos de fertilización
química el empleo de microorganismos promotores
del crecimiento vegetal adquiere relevancia y tiene
amplias posibilidades de insertarse en el sistema de
producción actual y futuro.
Para que su empleo tenga credibilidad en el sector
productivo no deberían acelerarse los tiempos de
desarrollo y de evaluación de los inoculantes
elaborados con bacterias solas o combinadas.

48. Muchas gracias!!!!!!!