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LABORATORIO No. 7
                                 PROTOZOOARIOS

GENERALIDADES:
Son organismos unicelulares de forma y tamaño variable.           Poseen   diferentes
organelos de locomoción; flagelos, cilios y seudópodos.
Los protozoos existen en dos formas: la vegetativa o trofozoito que es la forma
patógena, y la quística o quiste que es la forma infectante.       Los quistes son
formas de resistencia. Los protozoos que se transmiten por vía fecal-oral (amebas,
giardias y balantidium) poseen fase quística mientras que los que se transmiten por
vectores (tripanosomas, leishmania, malaria) o por contacto íntimo (trichomonas) no
adoptan esta forma de resistencia.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
1. Establecer diferencias morfológicas para la identificación entre todos los
   géneros y especies de amebas.
2. Identificar los diversos estadíos parasitarios de la amebas (Trofozoitos y
   quistes)

PARTE I: PROTOZOOS INTESTINALES/CLASE RHIZOPODEA (AMEBAS)
De todas las amebas la única especie patógena para el hombre es la Entamoeba
histolytica.   Las amebas se presentan en tres estadíos diferentes: trofozoito,
prequiste y quiste. La Entamoeba gingivalis y la Dientamoeba fragilis no presenta
la forma quística.    Las amebas parásitas del hombre habitan todas en el tubo
digestivo (intestino grueso) excepto la Entamoeba gingivalis que vive en la boca.
Para reconocer las diferentes especies de amebas es importante tener en cuenta las
siguientes características diagnósticas:
  Tamaño
  Movilidad
  Diferencia entre endo y ectoplasma
  La morfología del núcleo hace diagnóstico de especies.

Entamoeba histolyitica:
Es la más importante de todas las amebas se presenta en forma de trofozoito,
prequiste y quiste.
Trofozoito: 20-30 micras, muy móvil, endoplasma granuloso y ectoplasma transparente,
hialino.     Para su reconocimiento hay que observar las características del núcleo
que tiene cariosoma central, pequeño y la cromatina uniformemente distribuida. Se
encuentran en las heces diarreicas y es el único estadío que se encuentra en el
absceso hepático amibiano.
Prequiste: Es el estadío intermedio entre el trofozoito y el quiste, inmóvil y con un
solo núcleo.
Quiste: 10-18 micras. Es la forma más frecuente. En el interior se encuentran los
núcleos hasta cuatro o también los cuerpos cromatoidales en forma de grano de arroz
con bordes redondeados y estas estructuras también son suficientes para hacer el
diagnóstico.

Todas las infecciones por E. histolytica deben tratarse.


Entamoeba coli:
No es patógena. También se presenta en tres estadíos:
Trofozoito: 30-40 micras, poco móvil, el ectoplasma es granuloso, su núcleo es
fácilmente visible, presentando una cariosoma excéntrico y la cromatina irregular.
Prequiste: 15-30 micras, apariencia incolora.   El núcleo presenta igual morfología
que en el trofozoito.
Quiste: 12-20 micras, presenta más de 4 núcleos, presenta cuerpos cromatoidales
delgados y de extremos astillados.
Endolimax nana:
Como la Entamoeba coli es un comensal.
Trofozoito: 6-15 micras, son muy pequeños, con múltiples seudópodos, de movimientos
rápidos en materias fecales recién emitidas.     El núcleo se observa poco pero es
refringente.
Quiste: Son muy pequeños generalmente con cuatro núcleos refringentes.
Iodamoeba butschilii:
Trofozoito: 8-20 micras, movimiento lento, citoplasma vacuolizado.
Quiste: son muy numerosos en las heces 8-15 micras y un solo núcleo, es fácil
reconocerlo por la vacuola de glucógeno.

DIAGNOSTICO DE AMIBIASIS:
1. Examen coprológico tomando de la región que contiene moco
2. Rectosigmoidoscopia
3. Cultivos

                                                                            Entamoeba coli




          Entamoeba histolytica


                                         Iodamoeba bustchlii   Endolimax nana




         Entamoeba hartmani




                                  Entamoeba
                                  gingivalis



PARTE II: PROTOZOOS INTESTINALES/CLASE ZOOMASTIGOPHOREA (FLAGELADOS)
Son protozoarios que se mueven por medio de flagelos, los cuales pueden ser únicos
o múltiples; también pueden utilizar para su locomoción la membrana ondulante. Los
siguientes son flagelados, que habitan en el tubo digestivo y cavidades orgánicas.
Los flagelados hemáticos y tisulares se estudiarán más adelante. La Giardiasis y la
Balantidiasis reciben tratamiento.
Giardia lamblia: Es el único flagelado que habita en el intestino delgado (duodeno-
yeyuno). Adopta una forma vegetativa o trofozoito que es la patógena, y una forma
quística que es la resistente e infectante.
Trofozoito: Tiene forma piriforme. Es el único protozoo intestinal que tiene
simetría bilateral completa.   En el extremo anterior presenta dos núcleos con un
cariosoma central grande, posee ocho flagelos de los cuales dos son anteriores, dos
son posteriores y cuatro restantes laterales.
Su extremidad anterior es redondeada y la posterior puntiaguda.       En su porción
ventral esta provisto de una concavidad superficial (disco suctorio) con la que se
fija a las células intestinales.     Posee además de una parte media, dos barras
gruesas llamadas axonemas y además un par de condensaciones que son cuerpos
parabasales. Tienen movimiento unidireccional y en forma de balanceo.
Quiste: Ovalados miden de 8 a 12 micras con un polo más redondeado que el otro.
Cuando están inmaduros tienen dos núcleos y los maduros cuatro.      Con frecuencia
presentan una envoltura con doble pared. En el interior se observan una fibrillas
curvas en forma de “S” que corresponden a los futuros flagelos del trofozoito.
La enfermedad que produce se denomina giardiasis y el diagnóstico se realiza por la
observación de los parásitos en materia fecal.

Chilomastix mesnilli: Junto con la Giardia lamblia son los flagelados más frecuentes
del intestino del hombre.   Su hábitat más común es el colon. No es patógeno. Su
presencia en el coprológico es indicativa de contaminación oro-fecal.
Trofozoito: Presenta un cuerpo alargado piriforme. Mide de 6 a 20 miras. Tiene un
núcleo esférico con cariosoma central situado hacia la parte media del polo
anterior, también presenta un citostoma. Posee tres flagelos libres (dos cortos y
uno largo) y otro que se encuentra en el interior del citostoma.
Quiste: Son incoloros en forma de pera o limón. Miden de 7 a 10 micras. Es un
    comensal inocuo y no da sintomatología

    Trichomona hominis: Solo se le conoce el estado de trofozoito.
    Trofozoito: Es móvil, piriforme y mide de 7 a 15 micras, tiene de 3 a 5 flagelos
    libres y uno más bordeando los márgenes de la membrana ondulante, con el extremo
    posterior libre. Presenta un axostilo visible que sobresale por el extremo
    posterior del citoplasma. Su hábitat común es el área cecal del intestino grueso.
    El diagnóstico se realiza observando los trofozoitos en las heces y se diferencia
    de Giardia lamblia por el movimiento que presenta ya que es errático y muchas veces
    de rotación.
                                                                       Giardia lamblia
                          Chilomastix mesnilii




N: Núcleo
CAR: Cariosoma
C: Citostoma
FL: Flagelo



                                                       Trichomonas hominis




    PARTE III: PROTOZOOS INTESTINALES/CLASE CILIATA (CILIADOS)
    A esta clase pertenecen los protozoarios que se mueven por medio de cilias, las
    cuales son pequeñas prolongaciones citoplasmáticas que recubren todo el cuerpo del
    parásito.   En la mayoría de ellos existe una boca llamada citostoma, por donde
    penetran los alimentos. Durante su ciclo vital presentan dos estadíos: la forma de
    trofozoito y la forma quística, por medio del cual se hace la transmisión de un
    individuo a otro.

    Balantidium coli: Es el mayor protozoario intestinal y el único ciliado patógeno
    para el hombre. La enfermedad se denomina Balantidiasis.
    Trofozoito: Su cuerpo esta cubierto de cilias, filamentos delgados, cortos, móviles,
    que por medio de sus movimientos realiza el desplazamiento del parásito. Dentro del
    citoplasma se aprecian vacuolas alimenticias. Posee dos núcleos el macronúcleo en
    forma de riñón y en su concavidad el micronúcleo de forma esférica. Presenta en su
    extremo anterior una boca y en el extremo posterior un pequeño poro, el citopigio
    para la expulsión de los alimentos. Mide de 50 a 200 micras. Vive en el intestino
    grueso donde produce ulceraciones semejantes a las de E. Histolyitica.
    Quiste: Miden de 40 a 70 micras, de forma esférica u oval.               Se caracterizan por
    tener macronúcleo y una pared quística muy gruesa.




           Balantidium coli
PRACTICA # 7: PROTOZOARIOS


1. EJERCICIO:
De acuerdo a lo observado en el laboratorio dibuje los siguientes        esquemas
manteniendo la proporción de los tamaños de los trofozoitos y quistes.

                             Entamoeba histolyitica
              Trofozoito                                Quiste




                                Entamoeba coli
              Trofozoito                                Quiste




                                Endolimax nana
              Trofozoito                                Quiste




                              Iodamoeba butschilii
              Trofozoito                                Quiste




                                Giardia lamblia
              Trofozoito                                Quiste




                              Chilomastix mesnilli:
              Trofozoito                                Quiste
PRACTICA # 7: PROTOZOARIOS

NOMBRE______________________________________FECHA________________GRUPO_____


2. RESPONDA:
Los dos parásitos más comunes que ocasionan prolapso rectal en los pacientes
desnutridos son: Entamoeba histolytica y Trichuris trichuiura. Observando usted la
mucosa rectal prolapsada ¿Cómo haría el diagnóstico diferencial para saber cuál de
los dos parásitos esta produciendo esta complicación? ____________________________

___________________________________________________________________________________

3. COMPLETE LOS CICLOS DE VIDA:


                       CICLO DE VIDA DE Entamoeba histolytica




Describa los pasos por los cuales se inicia el recorrido del parásito desde su
entrada hasta la salida nuevamente del hospedero, además diga el estadío
diagnóstico e infectivo.
1.   __________________________________________________________________________
2.   __________________________________________________________________________
3.   __________________________________________________________________________
4.   __________________________________________________________________________

A. Colonización: _____________________________________________________________
B. Enfermedad: ______________________________________________________________
C. Enfermedad: ______________________________________________________________
CICLO DE VIDA Giardia lamblia




Describa los pasos por los cuales se inicia el recorrido del parásito desde su entrada hasta
la salida nuevamente del hospedero, además diga el estadío diagnóstico e infectivo.
1.   __________________________________________________________________________
2.   __________________________________________________________________________
3.   __________________________________________________________________________
4.   __________________________________________________________________________
5.   __________________________________________________________________________

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Laboratorio No. 7: Protozoarios intestinales

  • 1. LABORATORIO No. 7 PROTOZOOARIOS GENERALIDADES: Son organismos unicelulares de forma y tamaño variable. Poseen diferentes organelos de locomoción; flagelos, cilios y seudópodos. Los protozoos existen en dos formas: la vegetativa o trofozoito que es la forma patógena, y la quística o quiste que es la forma infectante. Los quistes son formas de resistencia. Los protozoos que se transmiten por vía fecal-oral (amebas, giardias y balantidium) poseen fase quística mientras que los que se transmiten por vectores (tripanosomas, leishmania, malaria) o por contacto íntimo (trichomonas) no adoptan esta forma de resistencia. OBJETIVOS ESPECÍFICOS: 1. Establecer diferencias morfológicas para la identificación entre todos los géneros y especies de amebas. 2. Identificar los diversos estadíos parasitarios de la amebas (Trofozoitos y quistes) PARTE I: PROTOZOOS INTESTINALES/CLASE RHIZOPODEA (AMEBAS) De todas las amebas la única especie patógena para el hombre es la Entamoeba histolytica. Las amebas se presentan en tres estadíos diferentes: trofozoito, prequiste y quiste. La Entamoeba gingivalis y la Dientamoeba fragilis no presenta la forma quística. Las amebas parásitas del hombre habitan todas en el tubo digestivo (intestino grueso) excepto la Entamoeba gingivalis que vive en la boca. Para reconocer las diferentes especies de amebas es importante tener en cuenta las siguientes características diagnósticas: Tamaño Movilidad Diferencia entre endo y ectoplasma La morfología del núcleo hace diagnóstico de especies. Entamoeba histolyitica: Es la más importante de todas las amebas se presenta en forma de trofozoito, prequiste y quiste. Trofozoito: 20-30 micras, muy móvil, endoplasma granuloso y ectoplasma transparente, hialino. Para su reconocimiento hay que observar las características del núcleo que tiene cariosoma central, pequeño y la cromatina uniformemente distribuida. Se encuentran en las heces diarreicas y es el único estadío que se encuentra en el absceso hepático amibiano. Prequiste: Es el estadío intermedio entre el trofozoito y el quiste, inmóvil y con un solo núcleo. Quiste: 10-18 micras. Es la forma más frecuente. En el interior se encuentran los núcleos hasta cuatro o también los cuerpos cromatoidales en forma de grano de arroz con bordes redondeados y estas estructuras también son suficientes para hacer el diagnóstico. Todas las infecciones por E. histolytica deben tratarse. Entamoeba coli: No es patógena. También se presenta en tres estadíos: Trofozoito: 30-40 micras, poco móvil, el ectoplasma es granuloso, su núcleo es fácilmente visible, presentando una cariosoma excéntrico y la cromatina irregular. Prequiste: 15-30 micras, apariencia incolora. El núcleo presenta igual morfología que en el trofozoito. Quiste: 12-20 micras, presenta más de 4 núcleos, presenta cuerpos cromatoidales delgados y de extremos astillados. Endolimax nana: Como la Entamoeba coli es un comensal. Trofozoito: 6-15 micras, son muy pequeños, con múltiples seudópodos, de movimientos rápidos en materias fecales recién emitidas. El núcleo se observa poco pero es refringente. Quiste: Son muy pequeños generalmente con cuatro núcleos refringentes.
  • 2. Iodamoeba butschilii: Trofozoito: 8-20 micras, movimiento lento, citoplasma vacuolizado. Quiste: son muy numerosos en las heces 8-15 micras y un solo núcleo, es fácil reconocerlo por la vacuola de glucógeno. DIAGNOSTICO DE AMIBIASIS: 1. Examen coprológico tomando de la región que contiene moco 2. Rectosigmoidoscopia 3. Cultivos Entamoeba coli Entamoeba histolytica Iodamoeba bustchlii Endolimax nana Entamoeba hartmani Entamoeba gingivalis PARTE II: PROTOZOOS INTESTINALES/CLASE ZOOMASTIGOPHOREA (FLAGELADOS) Son protozoarios que se mueven por medio de flagelos, los cuales pueden ser únicos o múltiples; también pueden utilizar para su locomoción la membrana ondulante. Los siguientes son flagelados, que habitan en el tubo digestivo y cavidades orgánicas. Los flagelados hemáticos y tisulares se estudiarán más adelante. La Giardiasis y la Balantidiasis reciben tratamiento. Giardia lamblia: Es el único flagelado que habita en el intestino delgado (duodeno- yeyuno). Adopta una forma vegetativa o trofozoito que es la patógena, y una forma quística que es la resistente e infectante. Trofozoito: Tiene forma piriforme. Es el único protozoo intestinal que tiene simetría bilateral completa. En el extremo anterior presenta dos núcleos con un cariosoma central grande, posee ocho flagelos de los cuales dos son anteriores, dos son posteriores y cuatro restantes laterales. Su extremidad anterior es redondeada y la posterior puntiaguda. En su porción ventral esta provisto de una concavidad superficial (disco suctorio) con la que se fija a las células intestinales. Posee además de una parte media, dos barras gruesas llamadas axonemas y además un par de condensaciones que son cuerpos parabasales. Tienen movimiento unidireccional y en forma de balanceo. Quiste: Ovalados miden de 8 a 12 micras con un polo más redondeado que el otro. Cuando están inmaduros tienen dos núcleos y los maduros cuatro. Con frecuencia presentan una envoltura con doble pared. En el interior se observan una fibrillas curvas en forma de “S” que corresponden a los futuros flagelos del trofozoito. La enfermedad que produce se denomina giardiasis y el diagnóstico se realiza por la observación de los parásitos en materia fecal. Chilomastix mesnilli: Junto con la Giardia lamblia son los flagelados más frecuentes del intestino del hombre. Su hábitat más común es el colon. No es patógeno. Su presencia en el coprológico es indicativa de contaminación oro-fecal. Trofozoito: Presenta un cuerpo alargado piriforme. Mide de 6 a 20 miras. Tiene un núcleo esférico con cariosoma central situado hacia la parte media del polo anterior, también presenta un citostoma. Posee tres flagelos libres (dos cortos y uno largo) y otro que se encuentra en el interior del citostoma.
  • 3. Quiste: Son incoloros en forma de pera o limón. Miden de 7 a 10 micras. Es un comensal inocuo y no da sintomatología Trichomona hominis: Solo se le conoce el estado de trofozoito. Trofozoito: Es móvil, piriforme y mide de 7 a 15 micras, tiene de 3 a 5 flagelos libres y uno más bordeando los márgenes de la membrana ondulante, con el extremo posterior libre. Presenta un axostilo visible que sobresale por el extremo posterior del citoplasma. Su hábitat común es el área cecal del intestino grueso. El diagnóstico se realiza observando los trofozoitos en las heces y se diferencia de Giardia lamblia por el movimiento que presenta ya que es errático y muchas veces de rotación. Giardia lamblia Chilomastix mesnilii N: Núcleo CAR: Cariosoma C: Citostoma FL: Flagelo Trichomonas hominis PARTE III: PROTOZOOS INTESTINALES/CLASE CILIATA (CILIADOS) A esta clase pertenecen los protozoarios que se mueven por medio de cilias, las cuales son pequeñas prolongaciones citoplasmáticas que recubren todo el cuerpo del parásito. En la mayoría de ellos existe una boca llamada citostoma, por donde penetran los alimentos. Durante su ciclo vital presentan dos estadíos: la forma de trofozoito y la forma quística, por medio del cual se hace la transmisión de un individuo a otro. Balantidium coli: Es el mayor protozoario intestinal y el único ciliado patógeno para el hombre. La enfermedad se denomina Balantidiasis. Trofozoito: Su cuerpo esta cubierto de cilias, filamentos delgados, cortos, móviles, que por medio de sus movimientos realiza el desplazamiento del parásito. Dentro del citoplasma se aprecian vacuolas alimenticias. Posee dos núcleos el macronúcleo en forma de riñón y en su concavidad el micronúcleo de forma esférica. Presenta en su extremo anterior una boca y en el extremo posterior un pequeño poro, el citopigio para la expulsión de los alimentos. Mide de 50 a 200 micras. Vive en el intestino grueso donde produce ulceraciones semejantes a las de E. Histolyitica. Quiste: Miden de 40 a 70 micras, de forma esférica u oval. Se caracterizan por tener macronúcleo y una pared quística muy gruesa. Balantidium coli
  • 4. PRACTICA # 7: PROTOZOARIOS 1. EJERCICIO: De acuerdo a lo observado en el laboratorio dibuje los siguientes esquemas manteniendo la proporción de los tamaños de los trofozoitos y quistes. Entamoeba histolyitica Trofozoito Quiste Entamoeba coli Trofozoito Quiste Endolimax nana Trofozoito Quiste Iodamoeba butschilii Trofozoito Quiste Giardia lamblia Trofozoito Quiste Chilomastix mesnilli: Trofozoito Quiste
  • 5. PRACTICA # 7: PROTOZOARIOS NOMBRE______________________________________FECHA________________GRUPO_____ 2. RESPONDA: Los dos parásitos más comunes que ocasionan prolapso rectal en los pacientes desnutridos son: Entamoeba histolytica y Trichuris trichuiura. Observando usted la mucosa rectal prolapsada ¿Cómo haría el diagnóstico diferencial para saber cuál de los dos parásitos esta produciendo esta complicación? ____________________________ ___________________________________________________________________________________ 3. COMPLETE LOS CICLOS DE VIDA: CICLO DE VIDA DE Entamoeba histolytica Describa los pasos por los cuales se inicia el recorrido del parásito desde su entrada hasta la salida nuevamente del hospedero, además diga el estadío diagnóstico e infectivo. 1. __________________________________________________________________________ 2. __________________________________________________________________________ 3. __________________________________________________________________________ 4. __________________________________________________________________________ A. Colonización: _____________________________________________________________ B. Enfermedad: ______________________________________________________________ C. Enfermedad: ______________________________________________________________
  • 6. CICLO DE VIDA Giardia lamblia Describa los pasos por los cuales se inicia el recorrido del parásito desde su entrada hasta la salida nuevamente del hospedero, además diga el estadío diagnóstico e infectivo. 1. __________________________________________________________________________ 2. __________________________________________________________________________ 3. __________________________________________________________________________ 4. __________________________________________________________________________ 5. __________________________________________________________________________