Este documento presenta los principales métodos de diagnóstico en parasitología clínica. Describe las muestras indicadas según la localización del parásito en el huésped, como heces para parásitos intestinales y sangre para parásitos hemáticos. Se enfoca en el examen coprológico, explicando la recolección, examen macroscópico y microscópico de las muestras fecales, así como otros análisis adicionales. Finalmente, presenta brevemente el examen sanguí
1. PARASITOLOGÍA: LABORATORIO No1
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO EN PARASITOLOGÍA CLÍNICA
INTRODUCCIÓN:
Frecuentemente la mención de la parasitología médica, conjura una visión de infecciones
exóticas en áreas tropicales, aunque algunas de las infecciones están limitadas en
determinados lugares, otras ocurren con frecuencia en climas calientes y/o fríos. El examen del
laboratorio constituye una parte de los procedimientos de diagnóstico, unas veces para
confirmar el diagnóstico clínico de presunción y otras veces para el diagnóstico de nuevos e
insospechados agentes etiológicos causantes de enfermedades.
De acuerdo a la localización de los parásitos en los diferentes órganos y tejidos del huésped,
existe una muestra adecuada para el diagnóstico de cada una de las parasitosis.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
1. Identificar la muestra indicada y el método diagnóstico según la localización del parásito en el
huésped.
2. Observar e identificar los diversos estadíos morfológicos de los parásitos, además de los
elementos formes de origen vegetal y animal que se pueden encontrar en las materias fecales.
GENERALIDADES:
LOCALIZACIÓN DE LOS
MUESTRA INDICADA
PARÁSITOS
Intestinales Heces, aspirado duodenal, material de región perianal
Hemáticos Sangre
Aparato Genitourinario Flujo vaginal, secreción uretral, orina
Tisulares Biopsia y/o sangre
Pulmonares Esputo y/o biopsia
En nuestro medio las parasitosis más frecuentes están localizadas en el intestino, por lo que la
muestra es materia fecal y el método diagnóstico para el análisis de la materia fecal, se
denomina coprológico.
1. COPROLOGICO:
Es el análisis de la materia fecal con fines diagnósticos. Aunque, para el paciente como para el
personal de salud, recolectar y examinar la materia fecal suele ser algo desagradable, hay que
superar esta aversión natural y valorar la importancia que tiene este análisis en el diagnóstico
no solo de infecciones sino también de enfermedades.
Recolección de la muestra:
La obtención de la materia fecal debe hacerse en un recipiente limpio y seco que no debe estar
contaminado con orina o agua. Debe enviarse al laboratorio inmediatamente y examinarse lo
más pronto posible sobre todo en aquellos casos donde se sospecha amebiasis (los trofozoitos
mueren rápidamente y son sensibles a la refrigeración). Las muestras mantenidas por más de
24 horas a temperatura ambiente son inadecuadas.
2. El uso de laxantes solo esta indicado en casos de estreñimiento (no usar aceitosos).
El examen de materia fecal comprende examen macroscópico y examen microscópico.
A. Examen Macroscópico o Caracteres Organolépticos:
Cantidad: Diaria entre 100-200 gr/día, la séptima parte del total de alimentos ingeridos.
Color: Normalmente pardo oscuro o claro, dependiendo principalmente de la estercobilina, en
los niños amarrillo claro debido a su régimen lácteo. Entre las enfermedades que alteran el
color se encuentran las heces (acolicas) o de color arcilla en Hepatitis y TBC intestinal y las
heces hemorrágicas de un aspecto negruzco y viscosos (Melenas).
Olor: Es producido por la presencia de sustancias aromáticas (Indol, Escatol) derivadas de la
desaminación y descarboxilación del triptofano.
Consistencia: Normalmente las heces son blandas, contienen entre un 60% a un 85% de agua;
patológicamente son líquidas o duras, dependiendo de alguna enfermedad o de la dieta.
pH: Normalmente es neutro (6.9-7.2), depende del régimen alimenticio. Ácido en dieta rica en
carbohidratos, alcalino en dieta rica en proteínas.
Moco: Se encuentra generalmente en pequeñas cantidades. Por lo general indica inflamación o
irritación del intestino.
B. Examen Microscópico:
Es el denominado examen directo y consiste en observar al microscopio la materia fecal con
solución salina para observar trofozoitos (formas móviles) y con lugol para colorear estructuras
internas (núcleos).
En el examen directo se puede observar lo siguiente:
Leucocitos: Se encuentran asociados a moco en enfermedades intestinales. Cuando son más
de 20 por campo y predominan los PMNN indican diarrea invasiva. La coloración con azul de
metileno ayuda en la diferenciación de polimorfos nucleares y mononucleares.
Eritrocitos: Se observan cuando hay hemorragias del colon, hemorroides y fisuras sangrantes,
también están presentes en diarreas invasivas.
Restos alimenticios de origen vegetal: Los almidones son frecuentes, son fáciles de
identificar en las preparaciones con lugol debido a que toman un color azul cuando están sin
digerir y rojos o morados cuando están parcialmente digeridos. Las células y fibras vegetales
forman retículos en forma de panal o espirales y aunque muchas veces no tienen importancia
pueden aparecer en síndromes de malabsorción o asociarse a diarreas.
Restos alimenticios de origen animal: Son principalmente grasas y fibras musculares, las
fibras musculares son rectangulares con estrías transversales y las gotas de grasa tiene
diferente tamaño y pueden ser transparente o amarrillas.
Microbióta bacteriana: Siempre esta presente de manera normal.
3. Levaduras: Pueden observarse en condiciones normales, pero se aumentan notoriamente
cuando existe desequilibrio de la microbiota bacteriana. Solo cuando las blastoconidias están
asociadas a pseudomicelio, se deben reportar.
Cristales: Son de morfología diferente. Es muy poca su significancía clínica. Los fosfatos triples
tienen forma de ataúd, los oxalato de calcio se parecen a un sobre de carta, los de colesterina
se parecen a una escalera y los de charcot-leyden tiene forma de agujas miden de 10 a 30
micras, se originan de productos de desintegración de los eosinófilos y se asocian a procesos
alérgicos de variado origen y a parasitosis como helmintiasis e isosporosis.
Cómo se informa el examen coprológico?:
Se informa por cruces con el objetivo de 40X:
1-15 (Quistes/Trofozoitos) por campo +
16-25 (Quistes/Trofozoitos)por campo ++
26-35 (Quistes/Trofozoitos)por campo +++
más de 36 (Quistes/Trofozoitos)por campo ++++
ANÁLISIS ADICIONALES EN MUESTRAS DE MATERIA FECAL:
COPROGRAMA O COPROSCOPICO: Es un estudio más completo de la materia fecal, que
incluye, además del estudio microscópico, ya descrito, análisis bioquímicos.
MÉTODOS DE CONCENTRACIÓN: Su finalidad es aumentar la posibilidad de observación de
parásitos en una cantidad definida, mediante los procedimientos de sedimentación y flotación.
CULTIVOS: El empleo de éste método está limitado al campo de la investigación.
COLORACIONES ESPECIALES: Son tinciones permanentes, que se usan especialmente para
protozoarios, ya que en preparaciones directas a veces es difícil hacer identificación de las
especies, por lo tanto es necesario confirmar recurriendo a coloraciones. Las más usuales son
hematoxilina férrica y tricromico. Se deben hacer con materia fecal fresca y que no haya sido
preservadas en formol, este impide que la parte cromatínica retenga bien el colorante.
RECUENTO DE HUEVOS: Este método es útil para tener un dato aproximado de la intensidad
de la infección de algunos helmintos, se usan principalmente en algunas helmintiasis. Consiste
en hacer un recuento de la cantidad de huevos encontrados en toda la placa; y se reporta el
número de huevos por gramo de materias fecales (h.p.g.); este recuento también arroja
información acerca del posible número de parásitos adultos que se encuentran en el intestino.
4. 2. Averiguar
1. Obtener consistencia
muestra
Sln salina Lugol
Leve Moderado Severo
10X Examen general
Asacaris 1-40 41-200 201+
40X mayor detalle Tricocefalos 1-10 11-50 51+
Protozoarios Uncinarias 1-10 11-50 51+
Recuento de huevos
3. Criterios esenciales
* Examinar toda la preparación
* Hacer recuento de huevos
2. EXAMEN SANGUÍNEO Y DE TEJIDOS INFECTADOS: (parásitos sanguíneos y tisulares)
Luego de las heces, la sangre es la segunda muestra importante donde se recuperan parásitos
en sus diversos estadíos de desarrollo o donde se pueden detectar anticuerpos en suero o
plasma. Se usa de rutina para diagnóstico de Malaria, Leishmaniasis, Tripanosomiasis,
Filariasis, Toxoplasmosis entre otras parasitosis titulares.
Con el desarrollo científico crecen las posibilidades de diagnosticar enfermedades infecciosas y
a partir de tejidos o sangre se pueden detectar agentes infecciosos realizando extracción de su
ADN y posteriormente, por medio de la PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) amplificar
genes específicos del parasito.
Métodos diagnósticos de rutina en muestras de sangre:
Extendido: En un portaobjetos limpio, se coloca una gota de sangre y con otro
portaobjeto se extiende de modo que quede una capa delgada y pareja, se deja secar al
ambiente.
Gota gruesa: Se coloca una gota algo más grande en un portaobjeto y con la ayuda de
otro portaobjetos se extiende uniformemente en un rectángulo de 1 cm. Se deja secar al
ambiente, el objetivo en esta preparación es lisar los eritrocitos.
Los colorantes usados pueden ser: Giemsa, Wright, Hematoxilina, Leishman.
Métodos diagnósticos de rutina en tejidos infectados: Se toman biopsias que han sido
fijadas en formol y se someten a cortes para posterior tinción con hematoxilina-eosina.
3. PROCEDIMIENTO CON OTROS TIPOS DE MUESTRAS:
Frotis vaginales y secreciones uretrales: Se utiliza para buscar Trichomonas
vaginalis. En mujeres se toma la muestra usando especulo estéril. Evitar todo lavado vaginal o
5. uretral previo a la toma de muestra, se monta en un portaobjetos con solución salina para su
observación
Orina: La orina se centrifuga y se observa el sedimento. Se puede observar T. vaginalis,
huevos de Schistosoma haematobium.
Esputo: Se recoge el esputo y se observa directamente o se hacen los métodos de
concentración usados en heces.
DESARROLLO DE LA PRÁCTICA # 1
1. DEMOSTRACIÓN:
Observe el procedimiento para el montaje de un examen coprológico.
2. MATERIAS FECALES:
Observe las características organolépticas de la muestra de materia fecal que trajo al
laboratorio.
3. EJERCICIO:
De acuerdo a sus observaciones en el laboratorio, haga los dibujos correspondientes a lo que
enseguida se enumera, mantenga la proporción de tamaños entre los dibujos observados:
Fibras vegetales Fibras musculares Grasas
Cristales Almidones Levaduras
Leucocitos Eritrocitos Parásitos
6. PRACTICA # 1: MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO EN PARASITOLOGÍA CLÍNICA
4. TALLER:
a. ¿Qué es un examen coprológico seriado y porqué se ordena?
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b. ¿Describa brevemente en qué consiste un coprograma y para qué se ordena?
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c. ¿Cómo se investiga la presencia de sangre oculta en un examen de materia fecal y con
qué fin clínico se realiza el examen?
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d. ¿Cuál es el método para recuento de huevos en materia fecal recomendado por la
OMS?
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e. ¿Cuál es la mejor hora del día para la recolección de una muestra de materia fecal?
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f. ¿Diga cinco características químicas que se puedan medir en un examen coprológico?
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g. ¿Qué sustancias se utilizan para preservar las materias fecales?
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h. Llene los ítems del siguiente cuadro con los valores normales para un examen
coprológico:
Examen macroscópico Valor normal
Cantidad
Color
Olor
Consistencia
Sangre macroscópica
Moco
Pus
Parásitos
Examen microscópico Valor normal
Grasa
Almidon
Huevos y segmentos de
parásitos
Levaduras
Leucocitos
Examen químico Valor normal
pH
Sangre oculta