3. VIDA
El proceso dinámico por el que los organismos completan su ciclo biológico
MUERTE
Nivel metabólico a partir del cual las células que componen esos
organismos no son capaces de recuperar las funciones vitales que le
son propias
AUTOLISIS PUTREFACCION
• De la localización y la naturaleza del tejido considerado
• De la temperatura existente en el medio donde se encuentra el tejido.
4. ¿QUE ES
FIJACION
TISULAR?
Es interrumpir los
procesos de degradación
que aparecen tras la
muerte celular, tratando de
conservar la arquitectura y
composición tisular lo mas
próxima posible a como se
encontraba en el
organismo vivo
6. …Es la imagen
obtenida después
de la
manipulación, y
que comprende
fijación, inclusión,
corte y coloración
¿Y, LA IMAGEN
EQUIVALENTE?
7. 1. La propiedad denominada constancia: la imagen
equivalente ha de observarse en todo los tejidos
idénticos obtenidos de distintos individuos de su misma
especie animal.
2. Su reproductividad en todas las preparaciones
histológicas obtenidas a partir de dichos tejidos
independientes del proceso de fijación empleado.
8. 1. No existe un método universal de fijación.
2. No todos los fijadores conservan indefinidamente el
tejido.
3. Un defecto de fijación jamás puede ser corregido.
4. Es inútil realizar un estudio histológico sobre un
material con graves defectos de fijación.
9. • Fijación Histológica o Citológica: esta pretende
principalmente la conservación de la arquitectura y
estructura de los tejidos y cedulas, sin considerar los
cambios moleculares inducidos sobres sus componentes
bioquímicos
• Fijación histoquímica: para esta es mas trascendental
preservar la composición molecular y bioquímica de los
tejidos que conservar los propios detalles morfológicos
celulares.
10. • La fijación inicial o primaria, que es la realizada sobre el
tejido fresco.
• La fijación secundaria o refijacion, que consiste en
colocar un tejido ya fijado en un segundo fijador para
demostrar algún componente tisular específico o
simplemente para intensificar la fijación inicial.
11. Fijadores por métodos físicos
Es el método de elección para realizar
estudios morfológicos o funcionales en
los que se requiera conservar intacta la
estructura antigua del tejido o se
contenido enzimático, en este se emplea
el enfriamiento por congelación del tejido
como método para detener la autolisis y
putrefacción tisular.
Fijadores por métodos
químicos
En este los agentes fijadores,
generalmente en forma liquida,
actúan desnaturalizando e
insolubilizando las proteínas
tisulares lo cual bloquea la
autolisis por inactivación
enzimática. Además algunos de
estos líquidos fijadores impiden
el crecimiento bacteriano.
12. CRIODESECACION (liofilización)
Fijación
instantánea por
congelación en
nitrógeno liquido
Desecación por
sublimación
directa de agua
congelada a
vapor en una
bomba al vacío.
CRIOSUSTITUCIO
N
Congelación lenta y progresiva
del agua congelada de un tejido
por un liquido fijador, en
ocasiones puede actuar
simultáneamente como medio
de inclusión.
13. 1. Capacidad para bloquear de inmediato la autolisis
2. Efecto microbicida
3. No provocar reacciones o distorsiones
4. Inducción de cambios en la textura y composición
tisular
14. 1. Para evitar la autolisis, el tejido debe ser colocando lo
mas rápidamente posible en el liquido fijador.
2. El tejido debe estar seleccionado
3. El volumen necesario de fijador esta determinado por el
del tejido que se va a fijar.
4. La presión osmótica del líquido fijador y la del tejido
serán equivalente.
5. El pH del líquido fijado debe aproximarse al pH
fisiológico, salvo que su composición deba contener
ácidos.
6. El tiempo de fijación es especifico para cada fijador.
15. Se realiza con los siguientes objetivos:
1. Limitar el tiempo de contacto entre el fijador y
el tejido.
2. Impedir el contacto del fijador con los medios
de inclusión utilizados para proseguir el
tratamiento de la muestra.(porque existe
incompatibilidad química entre ambos)
16. 1. FIJADORES POR DESHIDRATACIÓN TISULAR
Los principales agentes fijadores por deshidratación son los
alcoholes esencialmente el metílico, y el etílico, la acetona, y el
cloroformo. Los únicos que se utilizan como fijadores simples
son: el alcohol etílico y la acetona.
2. FIJADORES POR CAMBIO EN EL ESTADO COLOHIDAL DE
LAS PROTEINAS.
Todos los fijadores contemplados en este grupo son de carácter
acido, se emplean formando parte de mezclas fijadoras y
poseen una gran velocidad de penetración en los tejidos y algún
poder de decalcificación.
17. 3. FIJADORES QUE ACTUAN POR FORMACION DE SALES
CON LOS TEJIDOS
Por lo general todos los agentes de este grupo poseen una gran
velocidad de fijación ya que la formulación de las sales se
produce instantáneamente. La precipitación metálicas por el
tejido provoca un notable endurecimiento, lo que obliga a
emplearlo en mezclas fijadoras que amortigüen este efecto.
4. FIJADORES QUE ACTUAN POR RETICULARIZACION DE
LAS PROTEINAS.
Los principales agentes fijadores que actúan por este
mecanismo son los aldehídos o potentes oxidantes como el
tetróxido de osmio.
18. A. Formolsalino
B. Formalina neutra
C. Formol tamponado
D. Formalina acida
E. Formol calciso, solución de beaker
20. Instrumento mecánico con
el cual se realizan
secciones tisulares para
la observación en el
microscopio.
http://www.youtube.com/wat
ch?v=twPmE-
4py2c&feature=player_em
bedded
21. El micrótomo se encuentra conformado
por:
Porta bloques
• Porta cuchillas clásico
Mecanismo de avance del portabloques
sobre la cuchilla
• Rueda micrométrica
22.
23. 1. Micrótomo de oscilación o balanceo:
2. Micrótomo de rotación o tipo Minot
http://www.youtube.com/watch?v=GIlF3AW3uh
U
3. Micrótomo de desplazamiento
3.1De portabloques deslizante o tipo leitz
3.2 De cuchilla móvil o tipo reichert-jung
3.3 Tipo tetrander
24.
25.
26.
27.
28.
29. Es un micrótomo básicamente derivado del Minot pero con
mejoras:
• Sistema de iluminación.
• Platina portacuchillas
• Sistema óptico con microscopio.
30.
31. • La selección y cuidado del las cuchillas era para
confeccionar buenas preparaciones histológicas.
• Actualmente se usan dispositivos de cuchillas
desechables , desplazando las cuchillas permanentes.
• Cuchilla planocóncavas : Tipo A y B
• Biplana, en cuña o de tipo c
• Biplana con faceta o tipo D
32.
33. La confección de cortes en parafina consta de seis pasos:
1. Talladado y enfriamiento del bloque.
2. Fijación al portabloques.
3. Orientación del bloque.
4. Orientación de la cuchilla del micrótomo y devastado
del bloque.
5. Selección del espesor del bloque
6. Realización de las secciones.
7. Estirado de los cortes y confesión de las preparaciones
8. Secado de las preparaciones histológicas
34. Comprende varias operaciones sucesivas:
1. Conservación ,tallado y fijación de bloques al
micrótomo.
2. Orientación de la cuchilla
3. Obtención y manipulación de cortes
35. Corte en el micrótomo de congelación.
1. Congelación del bloque
2. Obtención de secciones
3. Confección de preparaciones
Técnica de corte en el criostato
1. Congelación del material
2. Realización de las secciones
3. Soluciones adherentes para portaobjetos
36. Corte en el micrótomo de congelación
1. Congelación del bloque
2. Obtención de secciones
3. Confección de preparaciones
Técnica de corte en el criostato
1. Congelación del material
2. Realización de las secciones
3. Soluciones adherentes para portaobjetos
37. Técnica de corte y manejo de la secciones en microscopia
eléctrica.
1. Espesor de los cortes ultra finos
2. Cuchillas de ultramicrotomo
3. Técnica de corte ultramicrotomia
39. • Sustancia que puesta en contacto con un soporte
adecuado, se une a el de forma perdurable
transmitiéndole su color
• Pueden emplearse para distinguir entre diferentes
tipos de células o para revelar la presencia de
determinados constituyentes de la célula
40. NATURALES ARTIFICIALES
Se obtienen a partir del
extracto de plantas e
insectos
•Colorantes nucleares:
Hematoxilina
Carmín
•Colorantes
citoplasmáticos:
Safranina
Orceina
Obtienen a partir del
carbón y en la actualidad
se sintetizan en el
laboratorio
Su gama aumenta
continuamente
41. Los colorantes naturales y artificiales presentan un
soporte químico que son :
LOS ANILLOS AROMATICOS
Derivados del
benceno
Gran diversidad de
derivados del benceno
y por ende de
colorantes de anilina
42. GRUPOS
CROMOFOROS
Radicales químicos responsables de
la modificación molecular a la que se
debe la aparición del color
CROMÓGENO: Conjunto formado por el grupo cromoforo mas anillo
aromático
No es un colorante No se liga con los tejidos
43. COLORANTES SEGÚN SUS
GRUPOS CROMOFOROS
FUNCIO
N
GRUPO CROMOGENO
•Colorantes nitrados y nitrosados
•Colorantes azoicos
•Colorantes derivados de la
antraquinona
•Colorantes derivados de la acridina
•Colorantes derivados de iminas
quinonicas
•Colorantes derivados del
difenilmetano
•Colorantes derivados del xanteo
•Colorantes derivados de la
ftalocianinas
44. GRUPOS AUXOCROMOS Dotados de
carga
eléctrica,
es
decir, poseen
carácter ácido o
básico
Son responsables de que el colorante tenga mayor o menor
afinidad por la estructura que se va a teñir, es decir que fija
eficazmente el colorante
45. CLASIFICACION DE LOS COLORANTES
SEGÚN SUS GRUPOS AUXOCROMOS Y
APETENCIA TISULAR
•COLORANTES BASICOS
•COLORANTES ACIDOS
•COLORANTES NEUTROS
•COLORANTES INDIFERENTES
•COLORANTES METACROMATICOS
46. MECANISMOS
GENERALES DE
COLORACION
•Mecanismos de carácter
físico
•Mecanismos de carácter
fisicoquímico o histoquímico
Combinados
explican las
particularidades de
las principales
técnicas de tinción
e n anatomía
patológica
47. COLORACIONES
NUCLEARES
Entre ellos están colorantes básicos como:
•Galocianina
•El verde de metilo
•El azul de azilarina S
•La fucsina básica
•El violeta de cresilo o rojo nuclear extra
Entre los de mayor importancia que son de origen natural
están:
•El carmín
•La safranina
•La hematoxilina
Que es el colorante nuclear por excelencia
48. COLORANTES
CITOPLASMATICOS
En general son menos específicos que los
nucleares, pues se fijan a los
componentes extracelulares de los tejidos
provocando su tinción simultanea
•COLORANTES XANTENICOS:
Eosina
Floxina
•CROMOTROPO 2R