La técnica histológica implica 8 pasos: 1) obtención de la muestra, 2) fijación, 3) deshidratación, 4) aclaramiento, 5) inclusión, 6) corte, 7) baño de flotación, y 8) tinción. Estos pasos preservan la morfología de los tejidos y permiten estudiar sus características a nivel microscópico usando colorantes y un microscopio óptico.

1. Mayela Estivalis Vega Rivera
TÉCNICAS
HISTOLÓGICAS

2. TÉCNICA HISTOLÓGICA
• Serie de métodos y técnicas utilizados para poder estudiar las
características morfológicas y moleculares de los tejidos.
1.- Obtención de muestra
2.- Fijación
3.- Deshidratación
4.- Aclaramiento
5.- Inclusión
6.- Corte
7.- Baño de flotación
8.- Tinción

3. 1.- OBTENCIÓN DE MUESTRA
• Biopsia
• Necropsia
• Frotis de células superficiales
• Frotis de células sanguíneas
• Aplastados celulares

4. 2.- FIJACIÓN
• Con un fijador simple (Formaldehido) o
mezcla de fijadores (liquido de Bouin o
Helly).
• Conservar la morfología y la composición
de los tejidos.
• Se puede clasificar en 3 métodos:
o Por inmersión
o Por perfusión
o Por vapores

5. 3.- DESHIDRATACIÓN
• Con Alcohol etílico
• Eliminar el agua de los tejidos.
• Evita la deformación de la a
morfología del tejido, debido a
la rápida salida del agua.

6. 4.- ACLARAMIENTO
• Se sumerge el tejido en un liquido que sea miscible tanto
en el medio de inclusión como en el medio de
deshidratación.
• Xilol
• Benzol
• Tolueno

7. Confección del taco:
Es la inclusión definitiva del trozo de
tejido. Se utiliza un molde metálico
especial denominado barras de
Leuckart, donde se vierte parafina
liquida (60°C).
• Los tejidos deben ser sumergidos
en una sustancia de consistencia
firme, la cual puede ser hidrófila o
hidrófoba.
• Parafina
• Paraplast
5.- INCLUSIÓN

8. 6.- CORTE
• Se debe cortar el taco obtenido
en secciones muy delgadas que
permitan el paso de luz, utilizando
el micrótomo.
• Con un grosor de 6 a 8 µm.
• Tipo Minot

9. 7.- BAÑO DE FLOTACIÓN
• Se coloca la muestra sobre
el agua tibia y se retira con
un portaobjetos.

10. 8.- TINCIÓN
• Colorantes básicos: Basófilos.
 Hematoxilina
 Azul de toluidina
 Azul de metileno
• Colorantes ácidos: Acidófilos.
 Eosina
 Naranja G
 Fucsina ácida

11. Hematoxilina – Eosina
Hematoxilina
Azul: Núcleo, regiones ácidas del citoplasma
Eosina
Rosa: Regiones básicas del citoplasma, fibras de
colágena
Tricrómetrico de Masson
Negro: Núcleos
Rojo: Músculo, queratina, citoplasma
Azul o verde: Colágena
Ácido periódico de Schiff (PAS)
Magenta: Glucógeno y moléculas ricas en
carbohidratos

12. MICROSCOPIO ÓPTICO
Pie: Sirve como base al microscopio
y en él se encuentra la fuente de
iluminación.
Platina: superficie sobre la que
se colocan las preparaciones.
Tubo: Cilindro hueco que forma el
cuerpo del microscopio.
Brazo: Une al tubo a la platina.
Lugar por el que se debe tomar el
microscopio para mover de lugar.
Macrométrico: Sirve para tener un
primer enfoque de la muestra al
utilizarse el objetivo de menor
aumento.
Micrométrico: Sirve para dar
un enfoque preciso de la
muestra.
Ocular: sistema de lentes más
cercanos al ojo observador, situados
en la parte superior (10x).
Revolver: estructura giratoria
que contiene los objetivos.
Objetivos: Sistema de lentes
convergentes que se acoplan
en la parte inferior del tubo.
Condensador: Sistema de lentes
convergentes que captan los
rayos de luz y los concentra sobre
la preparación.
Fuente de luz: Lámpara
halógena de bajo voltaje (12V).