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• Instituto Tecnológico de Ciudad Altamirano

• Alumno: Christian Emmanuel León Salgado

    • 3er. Semestre de Lic. En Biología

       • Asignatura: Biología celular

      • Asesor: Erika Oropeza Bruno
En 1937 el bioquímico sueco Arne Tiselius dio a conocer un nuevo método
  para separar las proteínas de una mezcla.



• La electroforesis es una técnica para la separación de moléculas según la
  movilidad de estas en un campo eléctrico. la electroforesis se usa en una
  gran mayoría en la materia del ADN recombinan-te ya que nos permite
  saber la carga que poseen los polipéptidos, y separar los diferentes
  polipéptidos resultantes de las variaciones del experimento del ADN
  recombinante.
• Éste consistía en colocar un cierto volumen de una solución de dos o más
  proteínas en un tubo de vidrio en forma de “U”, sin llenarlo completamente.
  Después el espacio restante en cada extremo se ocupaba con el volumen
  necesario de una solución de electrolitos libre de proteína, que actuaba
  como amortiguador. Luego se sumergía un electrodo en la solución
  amortiguadora libre de proteína de cada extremo, se conectaban los
  electrodos a una fuente de electricidad y se sometía todo el sistema a un
  campo eléctrico..
• Alta sensibilidad, resolución y versatilidad.
• Método de separación de
– Ácidos nucleicos
– Proteínas
– Otras biomoléculas
• Entrega criterio de pureza.
• Separa mezclas complejas
• Permite determinar
– El peso molecular de una proteína
– Punto isoeléctrico.
– Número de cadenas polipeptídicas de una proteína
• La variante de uso más común para el análisis de mezclas de
  proteínas o de ácidos nucleicos utiliza como soporte un gel,
  habitualmente de agarosa o de poliacrilamida. Los ácidos nucleicos
  ya disponen de una carga eléctrica negativa, que los dirigirá al polo
  positivo, mientras que las proteínas se cargan al unirse con
  sustancias como el SDS (dodecilsulfato sódico) (C12H25NaO4S)
  que incorpora cargas negativas de una manera dependiente de la
  masa molecular de la proteína.
• En acetato de celulosa
• En gel
• Libre
• En esta, el campo eléctrico se aplica a disoluciones o
  suspensiones. Históricamente, es el origen de la
  electroforesis tal y como hoy se conoce y fue
  desarrollada por Arne Tiselius en 1937. Actualmente está
  en desuso, ya que al ser un fluido el medio en el que se
  desarrolla, tiene poco poder de resolución.
• Es un método para fraccionar mezclas proteicas, tal como lo es el suero
  sanguíneo, como las moléculas tienen distinta movilidad cuando son
  sometidas a la acción de un campo eléctrico, separándose en fracciones. El
  buffer o tampón que se use para la corrida es fundamental, porque de él va
  a depender la carga neta de las moléculas, de su pH. Otros factores
  importantes son el tamaño de la molécula, la intensidad de corriente
  utilizada y la temperatura.
• La electroforesis en gel es un grupo de técnicas empleadas por los
  científicos para separar moléculas basándose en propiedades como el
  tamaño, la forma o el punto isoeléctrico. La electroforesis en gel se utiliza
  generalmente con propósitos analíticos, pero puede ser una técnica
  preparativa para purificar moléculas parcialmente antes de aplicar
  espectrometría de masas, PCR ( Reacción en cadena de la Polimerasa),
  clonación o secuenciación de ADN.
• Para separar distintas especies moleculares, se crea un campo eléctrico
  para la molécula colocada en un líquido portador. Al generar este campo
  existirá una intensidad pasando constantemente del polo positivo al polo
  negativo, por lo tanto, actuará una fuerza sobre la molécula y esta
  experimentará una aceleración hasta obtener una velocidad en la que la
  resistencia, por viscosidad del medio, neutraliza la fuerza impulsora, es
  decir, la molécula se desplaza con una velocidad constante.
• http://es.wikipedia.org/wiki/Electroforesis
• http://depa.fquim.unam.mx/proteinas/estructura/EPpage.
  html
• http://www.oncoinmun.cl/pdf/mcn/2004/electroforesis.pdf
• http://anajesusa.wordpress.com/2007/12/08/electroforesi
  s-en-acetato-de-celulosa/
• http://www.labnano.org.mx/esp%20electroforesis.htm

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Electroforesis

  • 1. • Instituto Tecnológico de Ciudad Altamirano • Alumno: Christian Emmanuel León Salgado • 3er. Semestre de Lic. En Biología • Asignatura: Biología celular • Asesor: Erika Oropeza Bruno
  • 2. En 1937 el bioquímico sueco Arne Tiselius dio a conocer un nuevo método para separar las proteínas de una mezcla. • La electroforesis es una técnica para la separación de moléculas según la movilidad de estas en un campo eléctrico. la electroforesis se usa en una gran mayoría en la materia del ADN recombinan-te ya que nos permite saber la carga que poseen los polipéptidos, y separar los diferentes polipéptidos resultantes de las variaciones del experimento del ADN recombinante.
  • 3. • Éste consistía en colocar un cierto volumen de una solución de dos o más proteínas en un tubo de vidrio en forma de “U”, sin llenarlo completamente. Después el espacio restante en cada extremo se ocupaba con el volumen necesario de una solución de electrolitos libre de proteína, que actuaba como amortiguador. Luego se sumergía un electrodo en la solución amortiguadora libre de proteína de cada extremo, se conectaban los electrodos a una fuente de electricidad y se sometía todo el sistema a un campo eléctrico..
  • 4. • Alta sensibilidad, resolución y versatilidad. • Método de separación de – Ácidos nucleicos – Proteínas – Otras biomoléculas • Entrega criterio de pureza. • Separa mezclas complejas • Permite determinar – El peso molecular de una proteína – Punto isoeléctrico. – Número de cadenas polipeptídicas de una proteína
  • 5. • La variante de uso más común para el análisis de mezclas de proteínas o de ácidos nucleicos utiliza como soporte un gel, habitualmente de agarosa o de poliacrilamida. Los ácidos nucleicos ya disponen de una carga eléctrica negativa, que los dirigirá al polo positivo, mientras que las proteínas se cargan al unirse con sustancias como el SDS (dodecilsulfato sódico) (C12H25NaO4S) que incorpora cargas negativas de una manera dependiente de la masa molecular de la proteína.
  • 6. • En acetato de celulosa • En gel • Libre
  • 7. • En esta, el campo eléctrico se aplica a disoluciones o suspensiones. Históricamente, es el origen de la electroforesis tal y como hoy se conoce y fue desarrollada por Arne Tiselius en 1937. Actualmente está en desuso, ya que al ser un fluido el medio en el que se desarrolla, tiene poco poder de resolución.
  • 8. • Es un método para fraccionar mezclas proteicas, tal como lo es el suero sanguíneo, como las moléculas tienen distinta movilidad cuando son sometidas a la acción de un campo eléctrico, separándose en fracciones. El buffer o tampón que se use para la corrida es fundamental, porque de él va a depender la carga neta de las moléculas, de su pH. Otros factores importantes son el tamaño de la molécula, la intensidad de corriente utilizada y la temperatura.
  • 9. • La electroforesis en gel es un grupo de técnicas empleadas por los científicos para separar moléculas basándose en propiedades como el tamaño, la forma o el punto isoeléctrico. La electroforesis en gel se utiliza generalmente con propósitos analíticos, pero puede ser una técnica preparativa para purificar moléculas parcialmente antes de aplicar espectrometría de masas, PCR ( Reacción en cadena de la Polimerasa), clonación o secuenciación de ADN.
  • 10. • Para separar distintas especies moleculares, se crea un campo eléctrico para la molécula colocada en un líquido portador. Al generar este campo existirá una intensidad pasando constantemente del polo positivo al polo negativo, por lo tanto, actuará una fuerza sobre la molécula y esta experimentará una aceleración hasta obtener una velocidad en la que la resistencia, por viscosidad del medio, neutraliza la fuerza impulsora, es decir, la molécula se desplaza con una velocidad constante.
  • 11. • http://es.wikipedia.org/wiki/Electroforesis • http://depa.fquim.unam.mx/proteinas/estructura/EPpage. html • http://www.oncoinmun.cl/pdf/mcn/2004/electroforesis.pdf • http://anajesusa.wordpress.com/2007/12/08/electroforesi s-en-acetato-de-celulosa/ • http://www.labnano.org.mx/esp%20electroforesis.htm