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INFORME:
RECONOCIMIENTO
DE EQUIPOS DE
LABORATORIO
CURSO: Biotecnología
DOCENTE: Dr. Hebert Soto Gonzales
ESTUDIANTES:
-Quispe Salas Alejandra
-Florian Ope Alanna Sasha
2023
2
"Año de la unidad, la paz, y el desarrollo"
UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIAAMBIENTAL
INFORME DE LABORATORIO:
RECONOCIMIENTO DE EQUIPOS
CURSO:
BIOTECNOLOGÍA
DOCENTE:
DR. HEBERT HERNAN SOTO GONZALES
ESTUDIANTES:
- QUISPE SALAS ALEJANDRA
- FLORIAN OPE ALANNA SASHA
ILO, MOQUEGUA2023
pág. 1
3
INDICE
1. INTRODUCCIÓN................................................................................................................. 4
2. OBJETIVOS......................................................................................................................... 5
2.1. Objetivo General ............................................................................................................... 5
2.2. Objetivos Específicos......................................................................................................... 5
3. DESARROLLO ..................................................................................................................... 5
3.1. Agitador térmico con Incubación...................................................................................... 5
3.2. Minicentrifuga – Mini Spin................................................................................................ 7
3.3. Thermo Scientific Nano Drop One..................................................................................... 9
3.4. Centrifuga Eppendorf...................................................................................................... 11
3.5. Termocicladores .............................................................................................................. 13
3.6. Fluorómetro Qubit 4........................................................................................................ 18
3.7. Centrifugador de muestras.............................................................................................. 21
3.8. Centrifuga refrigerada ..................................................................................................... 24
3.9. Electroforesis en gel de Agarosa ..................................................................................... 26
4. CONCLUSIONES ............................................................................................................... 30
5. BIBLIOGRAFIA.................................................................................................................. 31
4
1. INTRODUCCIÓN
La biología molecular ha revolucionado el campo de la investigación científica y
ha permitido avances significativos en el conocimiento de los procesos biológicos
a nivel molecular. En las instalaciones de la Universidad Nacional de Moquegua,
se llevan a cabo investigaciones de vanguardia en este campo, utilizando una
amplia gama de equipos especializados.
El objetivo general de este estudio es describir los equipos utilizados en biología
molecular en las instalaciones de la Universidad Nacional de Moquegua, así como
explorar sus aplicaciones en investigaciones. Para lograr esto, se buscará conocer
los distintos equipos de biología molecular disponibles en el laboratorio de
Biotecnología de la universidad, así como comprender sus características y
funcionamiento. Además, se indagará en el uso que se les da a estos equipos en
las investigaciones que se realizan en la institución.
El conocimiento detallado de los equipos de biología molecular y su aplicabilidad
en las investigaciones resulta fundamental para el desarrollo de nuevos enfoques
y descubrimientos en este campo. Esto permitirá a los investigadores de la
Universidad Nacional de Moquegua aprovechar al máximo las herramientas y
técnicas disponibles, optimizando sus esfuerzos y obteniendo resultados
científicos de alta calidad.
A través de este estudio, se espera contribuir al avance del conocimiento en
biología molecular y promover la investigación de frontera en la Universidad
Nacional de Moquegua. Además, se busca fomentar la formación académica y el
aprendizaje continuo, proporcionando a los estudiantes y profesionales de la
biología las bases necesarias para utilizar y comprender los equipos de biología
molecular de manera efectiva.
En resumen, este estudio tiene como objetivo describir los equipos utilizados en
biología molecular en las instalaciones de la Universidad Nacional de Moquegua,
explorando sus características, funcionamiento y aplicaciones en investigaciones.
Mediante el logro de los objetivos específicos planteados, se espera fortalecer el
5
conocimiento científico y contribuir al progreso de la investigación en biología
molecular en la institución.
2. OBJETIVOS
2.1.Objetivo General
Describir los equipos utilizados en biología Molecular en las Instalaciones de la
Universidad Nacional de Moquegua, así como sus aplicaciones en
investigaciones.
Describir los equipos utilizados en Biología Molecular en el laboratorio de
Biotecnología de la Universidad Nacional de Moquegua.
2.2.Objetivos Específicos
• Conocer los equipos de biología molecular con los que cuenta la
Universidad Nacional de Moquegua.
• Conocer las características y funcionamiento de cada equipo.
• Aprender el uso que se les da en las investigaciones.
3. DESARROLLO
A continuación, se describirá los equipos que contiene el laboratorio de
Biotecnología de la Universidad Nacional de Moquegua:
3.1.Agitador térmico con Incubación
Fig. 1 –Incubadora Portátil
Fuente: Laboratorio de Biotecnología.
Los agitadores térmicos con incubación y refrigeración de OHAUS son equipos
multifuncionales que pueden combinar la agitación, calefacción y enfriamiento
para un mayor control de la temperatura y la velocidad de agitación. Estos equipos
suelen tener graduaciones para microtubos y placas PCR, permitiendo trabajar con
6
microtubos y otros materiales similares. Los agitadores térmicos de OHAUS
cuentan con gradillas de montaje para tubos y placas, permitiendo el uso de
diferentes tipos de muestras en el equipo. En general, estos equipos son precisos,
multifuncionales y están disponibles en una variedad de modelos para satisfacer
distintas necesidades y aplicaciones en laboratorios de investigación, clínicos y de
diagnóstico, así como en la industria alimentaria y farmacéutica.
Aplicación:
Los agitadores térmicos con incubación y refrigeración de OHAUS son utilizados
en aplicaciones que requieren agitación de alta velocidad constante y calefacción
y refrigeración precisas. Estos agitadores pueden ser personalizados con bloques
intercambiables para acomodar tubos y son ideales para aplicaciones de ADN,
ARN, cultivos celulares e hibridaciones. Además, son utilizados en laboratorios,
sectores industriales y en la educación.
Incubadora Portátil
Función Características Especificaciones
Los Agitadores Térmicos con
Incubación y Refrigeración de
OHAUS tienen la función de agitar,
calentar y enfriar muestras en el
laboratorio.
Función de calefacción y enfriamiento con un
rango de temperatura de 4°C a 100°C para los
agitadores con incubación y de -20°C a 100°C
para los agitadores con refrigeración.
Control digital de velocidad de agitación y
temperatura.
Superficie de agitación magnética.
Capacidad de carga de hasta 10 kg.
Dimensiones de la plataforma de agitación de
29 x 29 cm.
Diseño resistente con tapa de acero inoxidable.
Rango de temperatura de 4°C a
100°C para los agitadores con
incubación y de -20°C a 100°C
para los agitadores con
refrigeración.
Control digital de velocidad de
agitación y temperatura.
Superficie de agitación
magnética.
Capacidad de carga de hasta 10
kg.
Dimensiones de la plataforma de
agitación de 29 x 29 cm.
Diseño resistente con tapa de
acero inoxidable.
7
3.2.Minicentrifuga – Mini Spin
Fig. 2 –Minicentrifuga
Fuente: Laboratorio de Biotecnología.
La MiniSpin es una minicentrífuga de nivel básico. Esta minicentrífuga es
compacta y es capaz de rotar hasta 12 tubos de 1,5 ml de capacidad. La
MiniSpin® tiene una velocidad máxima de 13.400 rpm y una fuerza máxima
de centrífuga relativa (RCF) de 12.100xg.
La vista general de la MiniSpin incluye una mirilla, un eje de motor y un
desbloqueo de emergencia en la parte inferior del equipo.
Partes del Equipo
Fig. 3 – Partes de la Minicentrifuga
Fuente: Eppendorf
1. Mirilla
2. Eje del Motor
8
3. Desbloqueo de Emergencia
4. Panel de Control
5. Pie con ventosa
6. Placa de especificaciones
7. Interruptor de la alimentación eléctrica
8. Hembrilla de conexión a la red
Aplicación:
La aplicación principal de la MiniSpin® - minicentrífuga es la separación de
componentes de líquidos mediante la centrifugación de pequeñas muestras.
Es ideal para la preparación de muestras de ADN, ARN y proteínas,
centrifugación de sobrenadantes claros y todo tipo de aplicaciones en las que
se requiere centrifugar pequeñas cantidades de líquidos. También es útil para
Minicentrifuga
Función Características Especificaciones
La función principal de la MiniSpin
es la de centrifugar pequeñas
muestras de líquidos. Es útil para la
separación de componentes de
líquidos, como en la preparación de
muestras de ADN, ARN y
proteínas, y para obtener
sobrenadantes claros. Es un equipo
de nivel básico con capacidad para
12 tubos de 1,5 ml que permite una
centrifugación rápida y eficiente.
Además, cuenta con funciones
como temporizador y posibilidad
de marcha continua en algunos
modelos, lo que permite adecuarse
a diferentes procesos.
Extremadamente compacta, ocupando un
espacio excepcionalmente pequeño.
El temporizador puede ser configurado hasta 30
minutos.
Capacidad del rotor: 12 tubos de 1,5/2,0mL, 2
tiras PCR.
Máxima velocidad: 14,500 rpm.
Fuerza máxima de centrifugado: 12,100xg.
Funciones multifuncionales.
Configuración de mesa y compacta.
Material adaptado para microtubos.
Está disponible en modelos MiniSpin y
MiniSpin Plus.
Velocidad mínima de 800 rpm.
Permite adecuarse a diferentes procesos.
Permite seleccionar la velocidad y el tiempo de
centrifugado.
Velocidad máxima: 14,500 rpm.
Fuerza máxima de centrifugado
(RCF): 12,100 xg.
Máxima capacidad del rotor: 12
tubos de 1,5/2,0 ml ó 2 tiras PCR.
Dimensiones (An x P x Al): 22,6
x 23,9 x 13,0 cm.
Altura de apertura de la tapa: 15,5
cm.
Nivel de ruido: 51-53 dB(A).
Intervalo de temperatura
operativa: de 4°C a 40°C.
Volumen mínimo de muestra: 0,2
ml.
Fuente de alimentación: 100-240
V, 50-60 Hz.
Peso: 2,5 kg.
Certificaciones: CE, CCSAus,
FCC, ICES, etc.
Está disponible en modelos
MiniSpin y MiniSpin Plus.
9
procesar muestras en laboratorios de biología molecular en general. La
MiniSpin® - minicentrífuga es una herramienta útil en investigaciones
biomédicas, diagnósticos de enfermedades, análisis en laboratorios clínicos y
en la industria alimentaria.
3.3.Thermo Scientific Nano Drop One
Fig. 4 –Thermo Scientific Nano Drop One
Fuente: Laboratorio de Biotecnología.
El NanoDrop One de Thermo Scientific es un espectrofotómetro de micro
volumen utilizado para cuantificar ácidos nucleicos y proteínas. Consta de un
pedestal ajustable para sostener la muestra, una cámara de medición en la que
se coloca la muestra, una fuente de luz UV-Vis y un detector. El equipo
también cuenta con software de análisis y permite la conexión a una
computadora. En general, es un instrumento compacto y de alta precisión
utilizado en diversas aplicaciones de biología molecular.
10
Aplicación:
La aplicación principal del Nanodrop One de Thermo Scientific es cuantificar
ácidos nucleicos como el ADN y ARN y proteínas. Para esto mide la
absorbancia de las muestras en las longitudes de onda específicas de 260 nm
y 280 nm, y con eso calcula la concentración y pureza de las muestras. Con
el software del equipo se puede realizar análisis estadísticos y almacenar
información sobre las muestras. También se puede usar para medir la
absorbancia en un rango espectral más amplio para otras aplicaciones
moleculares y bioquímicas.
Thermo Scientific Nano Drop One
Función Características Especificaciones
El NanoDrop One de Thermo
Scientific es un espectrofotómetro
de micro volumen utilizado para
cuantificar ácidos nucleicos y
proteínas. Entre las funciones que
ofrece se encuentran la medición
de la absorbancia a 260 nm y 280
nm para cuantificar la cantidad de
ADN y proteína respectivamente, la
medición de la absorbancia a otras
longitudes de onda, la corrección
automática de la línea base, la
posibilidad de medir muestras con
diferentes diluciones y la función
de grabación de datos en el
software del equipo. También es
posible realizar mediciones de
hasta 8 muestras en una sola
sesión mediante el accesorio de
carga automática.
Medición de absorbancia de ácidos nucleicos y
proteínas en muestras de hasta 1 μl.
Resolución espectral de 1 nm en todo el rango
UV-Visible.
Rango dinámico de concentración de 5 órdenes
de magnitud.
Alta reproducibilidad y precisión con
desviaciones típicas menores a 3%.
Interfaz de uso sencillo a través de software
intuitivo.
Accesorios para incluir muestras en cubetas o
en pedestal.
Conectividad a través de Bluetooth y WiFi para
transferencia de datos.
En resumen, el Nanodrop One ofrece alta
sensibilidad, reproducibilidad y versatilidad
para la cuantificación y calidad de ácidos
nucleicos y proteínas.
Rango espectral de 190-850 nm.
Resolución espectral de 1 nm.
Rango dinámico de
concentración de 5 órdenes de
magnitud.
Precisión típica menor a 3%.
Interfaz de software intuitiva.
Conectividad vía Bluetooth y
WiFi.
11
3.4.Centrifuga Eppendorf
Fig. 6 –Centrifuga
Fuente: Eppendorf
La centrífuga Eppendorf modelo 5425 R consta de los siguientes
componentes:
Base: Soporta toda la centrífuga y aloja el motor y controles electrónicos.
Tapas: Cubren los tubos y frascos para mantenerlos en posición durante la
centrifugación. Existen tapas de distintos tamaños y formas para diferentes
aplicaciones.
Rotor: Pieza giratoria que lleva montados los lugares de sujeción de tubos o
frascos. Existen muchos rotores compatibles para diferentes usos.
Tubos de muestra y frascos: Colocados dentro de las ranuras del rotor y
sujetos por las abrazaderas del mismo.
Panel de control: Contiene los botones de encendido y parada, selector de
velocidad y tiempo y pantalla LCD para programar la centrifugación.
Cinturón de seguridad: Sujetador para fijar la centrífuga a la mesa de
trabajo durante su funcionamiento para evitar movimientos no deseados.
Cable de alimentación: Conecta la centrífuga a la corriente eléctrica para
poder funcionar.
12
Aplicación:
La aplicación principal de la centrífuga Eppendorf modelo 5425 R es la
separación y precipitación de muestras líquidas mediante la fuerza centrífuga.
Se puede usar para:
• Separar células de sus respectivos sobrenadantes después de la lisis
celular.
• Precipitar proteínas de extractos celulares o soluciones de enzimas.
• Concentrar y purgar muestras de ácidos nucleicos como DNA y RNA.
• Eliminar bacterias de caldos de cultivo mediante centrifugación.
Centrifuga Eppendorf
Función Características Especificaciones
- La Eppendorf centrífuga modelo
5425 R tiene la función de
refrigeración mediante un sistema
de enfriamiento integrado, lo que
permite regular y mantener la
temperatura durante la
centrifugación. Esto es útil para
aplicaciones que requieren una
temperatura controlada, como
centrifugación de enzimas y
extractos celulares.
- También tiene la función Fast
Temp que permite alcanzar
rápidamente la temperatura
programada gracias a una curva de
enfriamiento optimizada.
- Posee un tablero de control
preciso con pantalla LCD que
permite programar la velocidad,
tiempo y temperatura de operación.
- Está disponible con una variedad
de rotores y accesorios para
diferentes formatos y volúmenes de
muestras.
Las principales características de la Centrífuga
eppendorf modelo 5425 R son:
- Posibilidad de refrigeración desde -10°C hasta
+40°C, lo que permite trabajar a temperaturas
controladas.
- Rango de velocidad de 300 a 4500 rpm, con
aceleración y desaceleración controlables.
- Pantalla LCD y controles intuitivos para
programar la velocidad, tiempo y temperatura.
- Soporta hasta 24 tubos de 1.5ml ó 2 ml, ó 10
tubos de 5ml gracias a los diferentes rotores
disponibles.
- Capacidad para centrifugado de muestras de
enzimas, extractos celulares, ácidos nucleicos y
proteínas.
Velocidad máxima: 13000 rpm
Aceleración/desaceleración:
entre 8 a 11 s.
Temperatura de operación: -10°C
a +40°C
Velocidad/temperatura
programable
Pantalla LCD digital
Control de desbloqueo de la tapa
en marcha
Adaptador para rotor FA-6-24-
11-7S-Angle
Alimentación eléctrica: 100-240
V, 50-60 Hz
Dimensiones (L x A x P): 34,5 x
35 x 43 cm
Peso: 17,5 kg
13
3.5.Termocicladores
También conocido como máquina de PCR es un instrumento usado en biología
molecular que permite realizar de forma automatizada y secuencial los ciclos de
temperaturas necesarios para llevar a cabo la reacción en cadena polimerasa
(PCR) de amplificación de ADN.
Un termociclador es un equipo de laboratorio de biología molecular, utilizado en
la amplificación de las moléculas de ADN mediante la técnica de PCR (Reacción
en cadena de la Polimerasa), debido que este, es capaz de realizar ciclos de
temperaturas necesarios para que amplifiquen las hebras de ADN.
El proceso de la PCR es automático y puede finalizarse en tan solo unas pocas
horas. Este proceso es dirigido por completo por el termociclador, quien esta
programado para cambiar la temperatura de reacción cada poco minuto posible la
desnaturalización y síntesis de ADN.
El modelo de termociclador más común consiste en un bloque de resistencia
eléctrica que distribuye a través de una placa una temperatura homogénea (entre
4ªC y 96ªC) durante un tiempo programable. En algunos equipos la resistencia
eléctrica se ha sustituido por la tecnología Peltier (semiconductores), que permite
mayor homogeneidad en la temperatura.
Dentro de un laboratorio encontramos dos tipos de termocicladores:
✓ Las máquinas de PCR estándar o convencional: utilizan bloques
intercambiables para acomodar placas de pocillos múltiples o tiras de
tubos, con una variedad de opciones de programas para diversas
necesidades de amplificación de genes.
✓ Los termocicladores en tiempo real: Se utilizan en aplicaciones como el
análisis cuantitativo de la expresión génica, el análisis de SNP, la
validación de objetivos farmacológicos, cortar bandas de secuenciación y
la genotipificación.
14
3.5.1. CFX96 Touch Real – Time PCR Detection System
Fig. 7 –CFX96 Real Time System
Fuente: Laboratorio de Biotecnología.
Especificaciones
Capacidad: 96 tubos de 0.2 ml.
Pantalla táctil de 26 cm a color VGA que le permite al investigador usar el equipo
sin necesidad de conectarlo a una computadora: edición, almacenaje y visualización
de los datos en tiempo real.
Volumen de reacción: 1- 50 μl (recomendado 10 -25 μl).
Método de calentamiento y enfriamiento: Peltier con 6 zonas independientes de
control de temperatura (thermal electric units).
Sello hermético “O-Ring” garantiza el buen funcionamiento del sistema.
Control de temperatura: Algoritmo que calcula la temperatura dentro de la
muestra en lugar de la temperatura dentro del bloque.
Incluye
• Un chasis de termociclador C1000.
• Un módulo de reacción óptico CFX96 de 96 pozos con gradiente.
• Un cable de alimentación eléctrica.
• Software CFX Manager™.
• Licencia para software qBase plus
• Un manual del usuario.
• Un demo kit 5-target (1725997).
15
Fig. 8 – Parametros de Ejecución
Fuente: BioRad
Funcionamiento
Se abre la tapa para colocar la muestra
Fig. 9 – Manejo de Equipo CFX96
Fuente: Laboratorio de Biotecnología.
Fig. 10 – Manejo de Equipo CFX96 Touch Real
Fuente: Laboratorio de Biotecnología.
Luego con el panel de Control se configura y se procede a realizar el análisis.
16
Fig. 11 – Panel de Control de Equipo CFX96 Touch Real
Fuente: Laboratorio de Biotecnología.
3.5.2. Termociclador C1000 Touch - PCR
Utilice el termociclador táctil C1000 con módulo de reacción dual 48/48 para
ejecutar protocolos de PCR independientes, utilizando placas de 48 pocillos o
tubos individuales. El módulo de reacción dual 48/48 se puede cambiar en
segundos sin herramientas, lo que permite el uso de módulos de 96 o 384
pozos en el mismo chasis del termociclador C1000.
CFX96 Touch Real – Time PCR Detection System
Función Características Especificaciones
Le permitirá discriminar
simultáneamente 5 genes diferentes
en una sola reacción de PCR a
través de una tecnología óptica
avanzada diseñada para maximizar
a detección de fluorescencia de
fluoróforos específicos.
Rápido: es capaz de reducir el tiempo de un
protocolo estándar de 2 horas a 25 minutos. –
Sencillo: el mantenimiento del equipo es
mínimo. Su pantalla táctil facilita la
programación, y la obtención y análisis de
resultados. No necesita estar conectado a un
ordenador para poder trabajar.
Flexible: sistema completamente abierto que
ofrece la máxima flexibilidad al usuario, tanto
en la selección de la química de detección como
en el fungible a utilizar. Además, puede ser
actualizado a un módulo óptico de Real Time
PCR de 384 pocillos fácilmente por el usuario,
sin necesidad de instalación ni calibración.
Capacidad: 96 tubos de 0.2 ml.
Pantalla táctil de 26 cm a color
VGA que le permite al
investigador usar el equipo sin
necesidad de conectarlo a una
computadora: edición,
almacenaje y visualización de los
datos en tiempo real.
Volumen de reacción: 1- 50 μl
(recomendado 10 -25 μl).
Método de calentamiento y
enfriamiento: Peltier con 6
zonas independientes de control
de temperatura
Sello hermético “O-Ring”
garantiza el buen funcionamiento
del sistema.
Control de temperatura:
Algoritmo que calcula la
temperatura dentro de la muestra
en lugar de la temperatura dentro
del bloque.
17
Fig. 12 – Termociclador C1000 Touch - PCR
Fuente: Laboratorio de Biotecnología.
Partes del equipo
• Bahía del Módulo de Reacción
• Barra de Bloqueo del Módulo de Recuperación
• Pantalla Táctil
• Puerto USB A
• Rejilla de entrada de Aire
Aplicaciones y Uso
• Amplificación/PCR
• Clonación
• Secuencia de ciclo
• Estudios de expresión génica
• Mutagénesis
18
3.6.Fluorómetro Qubit 4
El Fluorómetro Qubit 4 es la última versión del conocido fluorómetro Qubit
diseñado para medir con precisión la cantidad de ADN, ARN y proteínas, y ahora
también la integridad y calidad del ARN, utilizando los ensayos Qubit altamente
sensibles. El Fluorómetro Qubit 4 fue rediseñado para ejecutar el ensayo Qubit
RNA IQ (integridad y calidad).
El Fluorómetro Qubit 4 y el Kit de Ensayo IQ de ARN trabajan en conjunto para
distinguir con precisión el ARN intacto del degradado en solo dos sencillos pasos.
Termociclador C1000 Touch - PCR
Función Características Especificaciones
Le permitirá discriminar
simultáneamente 5 genes diferentes
en una sola reacción de PCR a
través de una tecnología óptica
avanzada diseñada para maximizar
a detección de fluorescencia de
fluoróforos específicos.
Rápido: es capaz de reducir el tiempo de un
protocolo estándar de 2 horas a 25 minutos. –
Sencillo: el mantenimiento del equipo es
mínimo. Su pantalla táctil facilita la
programación, y la obtención y análisis de
resultados. No necesita estar conectado a un
ordenador para poder trabajar.
Flexible: sistema completamente abierto que
ofrece la máxima flexibilidad al usuario, tanto
en la selección de la química de detección como
en el fungible a utilizar. Además, puede ser
actualizado a un módulo óptico de Real Time
PCR de 384 pocillos fácilmente por el usuario,
sin necesidad de instalación ni calibración.
Capacidad: 96 tubos de 0.2 ml.
Pantalla táctil de 26 cm a color
VGA que le permite al
investigador usar el equipo sin
necesidad de conectarlo a una
computadora: edición,
almacenaje y visualización de los
datos en tiempo real.
Volumen de reacción: 1- 50 μl
(recomendado 10 -25 μl).
Método de calentamiento y
enfriamiento: Peltier con 6
zonas independientes de control
de temperatura
Sello hermético “O-Ring”
garantiza el buen funcionamiento
del sistema.
Control de temperatura:
Algoritmo que calcula la
temperatura dentro de la muestra
en lugar de la temperatura dentro
del bloque.
19
Fig. 13 – Fluorómetro Qubit 4
Fuente: Laboratorio de Biotecnología
Flujo de Trabajo sencillo
El fluorómetro Qubit 4, fácil de usar, ofrece resultados mediante procedimientos
de ensayo rápidos y sencillos. La gran pantalla táctil a color le permite navegar
fácilmente a través de las diversas opciones. Los cálculos y ajustes son realizados
automáticamente por el instrumento.
Fig. 14 – Flujo de Trabajo Sencillo
Fuente: BioRad
20
Fluorómetro Qubit 4
Función Características Especificaciones
Diseñado para medir con precisión
la cantidad de ADN, ARN y
proteínas, y ahora también la
integridad y calidad del ARN,
utilizando los ensayos Qubit
altamente sensibles.
• Cuantificación rápida y altamente
precisa de ADN, ARN y proteína en
menos de tres segundos por muestra.
• Mide el ARN intacto en menos de 5
segundos por muestra.
• Elevados niveles de precisión usando
solo 1-20. μL de muestra, incluso con
muestras muy diluidas
• Calculadora de reactivos integrada que
genera rápidamente instrucciones de
preparación de soluciones de trabajo
Qubit
• Almacena resultados de hasta 1000
muestras
• Gran pantalla táctil en color de 5,7
pulgadas para una navegación de flujo
de trabajo sencilla
• La pantalla gráfica indica cuando las
muestras están en el rango extendido o
fuera de rango
• El espacio pequeño ahorra espacio en su
banco
• Exporta datos a una unidad USB o
directamente a su computadora a través
de un cable USB
• Posibilidad de personalizar su
fluorómetro Qubit con los ensayos que
ejecuta más, agregar nuevos ensayos o
incluso crear sus propios ensayos con el
software MyQubit y la herramienta web
• Dimensiones del
instrumento: 5.4 "(w) x
10" (l) x 2.2 "(h) (13.6 cm x
25 cm x 5.5 cm)
• Peso: 743 g
• Rango dinámico: 5
órdenes de magnitud
• Tiempo de procesamiento:
≤ segundos / muestra
• Fuentes de luz: LED azul
(máx ~ 470 nm), LED rojo
(máx ~ 635 nm)
• Filtros de excitación: azul
(430-495 nm), rojo (600-
645 nm)
• Filtros de emisión: verde
(510-580 nm), rojo (665-
720 nm)
• Detectores: fotodiodos,
capacidad de medición de
300-1,000 nm
• Tiempo de calentamiento:
<35 segundos
• Unidad de
almacenamiento USB: 4
GB
21
3.7.Centrifugador de muestras
Gracias a su avanzada tecnología de calentamiento, el Eppendorf Concentrator plus
facilita una rápida y eficaz concentración al vacío de ADN, ARN, nucleótidos, proteínas
y otras muestras líquidas o húmedas. Su nueva tapa recubierta proporciona una resistencia
química superior contra muchos ácidos y disolventes orgánicos.
Partes del equipo
Fig. 16 – Sistema Completo del Equipo
Fuente: Eppendorf
1. Salida de bomba de vacío de membrana integrada
2. Tapa de PMMA
3. Junta anular
4. Asidero hundido
5. Desbloqueo de emergencia
6. Carcasa de bomba
7. Placa de características
8. Conexión de red
9. Portafusiles
10. Interruptor principal
11. Elementos de manejo y display del dispositivo
12. Separador de condensado
22
13. Conexión de la manguera de la bomba en el dispositivo individual para una
bomba de vacío externa
Fig. 17– Centrifugador de muestras
Fuente: Elaboración propia
Viene en 3 configuraciones de sistema. Funcionamiento extremadamente
silencioso <50 dB (A). La bomba de membrana de PTFE, libre de mantenimiento
y resistente a los productos químicos, elimina la necesidad de realizar cambios de
aceite. El diseño compacto ahorra espacio valioso en la mesa. Gran variedad de
rotores con 15 opciones diferentes para el alojamiento de tubos de 0,2 mL a 50
mL microplacas y placas de PCRU accionamiento por inducción sin motor y una
cámara de acero inoxidable resistente a las sustancias químicas para un
funcionamiento sin problemas. Se puede conectar a la mayoría de trampas de
enfriamiento disponibles en el mercado para el uso con vapores. Tapa revestida
con resistencia química superior.
23
Centrifugador de muestras
Función Características Especificaciones
• Se pueden ajustar 3
diferentes temperaturas
(30,45, 60 ºC.
• La evaporación de los
líquidos puede realizar de
forma óptima en 3
funciones. Además de la
evacuación pura, puede
concentrar soluciones
acuosas y/o alcohólicas de
forma particularmente
rápida con 2 funciones
especiales.
• También puede utilizar el
dispositivo como un
desecador puro.
• Puede conectar una
trampa de disolventes
detrás de la bomba al
dispositivo.
• Viene en 3 configuraciones de
sistema
• Funcionamiento extremadamente
silencioso <50 dB (A)
• La bomba de membrana de PTFE,
libre de mantenimiento y resistente
a los productos químicos, elimina la
necesidad de realizar cambios de
aceite
• El diseño compacto ahorra espacio
valioso en la mesa
• Gran variedad de rotores con 15
opciones diferentes para el
alojamiento de tubos de 0,2 mL a
50 mL, microplacas y placas PCR
• Un accionamiento por inducción
sin motor y una cámara de acero
inoxidable resistente a las
sustancias químicas para un
funcionamiento sin problemas
• Se puede conectar a la mayoría de
trampas de enfriamiento
disponibles en el mercado para el
uso con vapores
• Tapa revestida con resistencia
química superior
• Alimentación
eléctrica: 120V, 50–
60 Hz.
• Capacidad de
muestras: máx. 144
recipientes/2
microplacas.
• Velocidad fija: 1400
rpm.
• Volumen de tubo:
0,2 – 50 mL.
• Rango volumétrico:
72 mL
• Vacío máximo: 20
Mbar
• Tensión: 230 V
• Altura: 230 mm
Vataje: 350 w
• Dimensiones: 58 x 33
x 29 cm
• Tipo de bomba:
Integrated diaphragm
vacuum pump
• Tipo: Concentrators
• Frecuencia: 50/60 Hz
• Velocidad: 1400 rpm
• Requisitos eléctricos:
230 V, 50/60 Hz
• Para utilizar con
(equipo): Rotor F-45-
48-1
24
3.8.Centrifuga refrigerada
La nueva Centrifuge 5910 Ri refrigerada de sobremesa destaca por su facilidad de
uso y versatilidad: La gran pantalla táctil VisioNize®
de 7 pulgadas,
extraordinariamente intuitiva, proporciona un funcionamiento rápido y sin
errores, garantizando ciclos de centrifugación eficientes y reproducibles. Además,
la función de documentación y la gestión de usuarios única apoyan su control de
calidad con múltiples niveles de autorización, protección por contraseña y
documentación de todos los ciclos de centrifugación y actividades de los usuarios.
Junto con una amplia gama de rotores basculantes y de ángulo fijo, esta centrífuga
se adapta a un espectro de aplicaciones especialmente amplio, lo que la convierte
en la opción perfecta para los laboratorios multiusuario con requisitos muy
diversos.
Partes del equipo
Fig. 18 – Partes de la centrifuga refrigerada
Fuente: Eppendorf
1. Tapa de la centrifuga
2. Tubito de control
3. Pantalla táctil
4. Desbloqueo de emergencia
5. Conexión de Ethernet
6. Placa de características
7. Interfaz USB (Tipo B)
25
8. Conexión de la red de distribución
9. Interruptor de la red de distribución
10. Interfaz USB (tipo A)
El uso de la centrifuga se ve facilitado por:
• Detección automática del rotor con limitación de velocidad
• Detección automática de desequilibrios del rotor
• Pantalla táctil para el manejo del software de la centrifuga
La centrifuga dispone de una función de favoritos y la posibilidad de crear y
gestionar programas individuales.
Fig. 19 – Partes de la centrifuga refrigerada
Fuente: Eppendorf
26
3.9.Electroforesis en gel de Agarosa
La electroforesis en gel de agarosa es de las más utilizadas para analizar y
caracterizar ácidos nucleicos de distintas procedencias. Los geles se comportan
como un tamiz molecular y permiten separar moléculas cargadas en función de su
tamaño y forma. Así, moléculas de DNA de diferente tamaño van a emigrar de
forma distinta en una electroforesis en gel de agarosa. Además, si en dicha
Centrifuga Refrigerada
Función Características Especificaciones
• La nueva centrífuga 5910 Ri
destaca por su facilidad de uso y
versatilidad: la gran interfaz
táctil VisioNize® de 7 pulgadas
con una experiencia de usuario
intuitiva proporciona un
funcionamiento rápido y sin
errores, lo que garantiza
ejecuciones eficientes y
reproducibles.
• Gran pantalla táctil
VisioNize&trade; de 7 pulgadas para
un ajuste de parámetros súper rápido
mediante la exclusiva función de
favoritos
• Gestión de usuarios con múltiples
niveles de autorización y funciones de
documentación que cumplen los
requisitos de las normas GLP/GxP
• Rotores basculantes y adaptadores
para tubos y botellas de 0,2 mL a
1.000 mL, así como todos los tipos de
placas MTP, PCR o Deepwell
• Rotores de ángulo fijo para
aplicaciones de biología molecular de
alta velocidad en tubos de 0,2 mL a
250 mL
• Alta velocidad de centrifugación de
hasta 22.132 × g (14,000 rpm)
• Tapones y tapas Eppendorf
QuickLock&trade; herméticos a los
aerosoles para un bloqueo rápido y
ergonómico de la tapa
• Tapa de centrífuga con cierre de
tapa suave
• RCF máximo: 22,132 x g
• Pantalla: VisioNize touch
interface
• Perfil::10/10
• Rotor: S-4 xUniversal
• Intervalo de temperatura: -
11ºC to +40 ºC
• Anchura exterior: 28.3 in.
• Altura exterior: 14.4 in.
• Frecuencia: 50/60 Hz
Refrigerado: si
• Nivel de ruido: < 53 dB (A)
• Memoria para programas: 99
• Rotor incluido: si
• Altura exterior: 37 cm
• Fondo: 68 cm
• Tensión: 230 V
27
electroforesis se aplican marcadores de peso molecular (fragmentos de DNA de
tamaño conocido) se puede calcular el tamaño aproximado del DNA en estudio.
Para la electroforesis de ADN generalmente se emplea gel de agarosa como
material de soporte. La agarosa es un polímero natural, polisacárido formado por
galactosas alfa y beta que se extrae de las algas de los géneros Gellidium y
Gracillaria.
Fig. 20 – Electroforesis en gel de Agarosa
Fuente: Elaboración Propia
Aplicaciones y Uso
La electroforesis, es una práctica aplicable para separar fragmentos de ADN (u
otras macromoléculas, como ARN y proteínas) por su tamaño y carga. Consiste
en aplicar una corriente a través de un gel que contiene las moléculas de interés.
Con base en su tamaño y carga, las moléculas se desplazan por el gel en diferentes
direcciones o a distintas velocidades, con lo que se separan unas de
otras. Se utiliza, generalmente con propósitos analíticos, pero puede ser una
técnica preparativa para refinar moléculas en parte, antes de
aplicar espectrometría de masas, PCR, clonación o secuenciación de ADN.
28
Con el equipo de celdas de electroforesis, se usa una corriente eléctrica para mover
las moléculas a través de un gel, o de otra matriz. Los poros del gel o la matriz,
actúan como un tamiz y permite que las moléculas más pequeñas se muevan más
rápido, que las moléculas más grandes, usando estándares de tamaños conocidos,
que se separan en el mismo gel y luego se comparan con la muestra.
Cabe destacar que, la electroforesis también se usa con mayor frecuencia, cuando
un médico sospecha una enfermedad o condición que causa la producción de una
proteína monoclonal. Una vez que se ha diagnosticado una enfermedad o
condición, la electroforesis se puede usar a intervalos regulares, para monitorear
el curso de la enfermedad y la efectividad del tratamiento.
Tipos de Electroforesis
Básicamente, la electroforesis, es una técnica capaz de medir las proteínas
específicas en la sangre y separar los elementos, según su carga eléctrica. Son
usadas a menudo, para encontrar sustancias anormales llamadas proteínas M.
De acuerdo a ello, hay diferentes tipos, los cuales son:
• Electroforesis de proteínas en gel de poliacrilamida o Electroforesis vertical:
es uno de los procesos más usados para la desinfección, análisis y
caracterización de proteínas, ésta permite separar moléculas cargadas, y
descarga diferencias en movilidad, cuando son sometidas a la acción de un
campo eléctrico.
• Electroforesis de proteínas en gel de agarosa o Electroforesis
horizontal: aplica métodos para separar ácidos nucleicos en fragmentos de
ADN. Se basa en el hecho de que los ácidos nucleicos se encuentran cargados
negativamente debido a los grupos fosfato, permitiendo que el campo
eléctrico de desplace desde el polo negativo hacia el polo positivo. Esta
separación, se llevará a cabo en una matriz sólida, el gel de agarosa e influye
su desarrollo en la velocidad con que el ácido nucleico migra en el gel,
tomando en cuenta el tamaño de la molécula, la concentración de agarosa y
la conformación del ADN.
29
Funcionamiento
Fig. 21 – Procedimiento de la electroforesis en gel de agarosa.
Fuente: EDVOTOKET (2016)
1. DILUIR el tampón concentrado (50x) en agua destilada para obtener tampón
1x (ver Tabla A).
2. MEZCLAR el polvo de agarosa con el tampón 1x en un matraz de 250 ml (ver
Tabla A).
3. DISOLVER el polvo de agarosa, poniendo la solución a hervir. CALENTAR
la solución en el microondas durante 1 minuto a alta temperatura. RETIRAR
con cuidado el matraz del microondas y MEZCLAR la solución agitando con
cuidado el matraz. Continuar CALENTANDO la solución por periodos de 15
minutos hasta que la agarosa esté completamente disuelta (la solución debe
tener un color claro como el agua).
4. Dejar ENFRIAR la agarosa hasta 60°C agitando con cuidado el matraz para
permitir una disipación homogénea del calor.
5. Mientras la agarosa se enfría, CERRAR el soporte por medio de los tornillos
de caucho de los sujetadores. SITUAR el molde (peine) en la ranura central.
6. VERTIR la solución de agarosa enfriada en el soporte. El gel debería
solidificarse al cabo de veinte minutos máximo. El gel se reafirma y se vuelve
menos transparente al solidificarse.
30
7. RETIRAR los tornillos de los sujetadores y el peine. Al quitar el peine, tenga
cuidado de no estropear los pocillos.
Fig. 22 – Funcionamiento de la electroforesis en gel de agarosa
Fuente: Laboratorio de Biotecnología de la UNAM
4. CONCLUSIONES
• Luego de realizar la siguiente practica de laboratorio se llega a la
conclusión que se logró reconocer, analizar y manejar los equipos de
laboratorio
• Todos los materiales presentes en los laboratorios de biotecnología se
deben manipular según normas y precauciones, para evitar accidentes en
las practicas.
• Además de acuerdo a los equipos observados en el laboratorio de
Biotecnología se concluye que cuenta con buenos equipos para realizar
diversas investigaciones.
• Mediante la siguiente practica de reconocimiento de equipos que se llevó
a cabo se amplió y genero conocimientos importantes para futuras
aplicación.
• Mediante la siguiente practica que se llevó a cabo se amplió y genero
conocimientos importantes para futura aplicación.
31
5. BIBLIOGRAFIA
BioRad. (2016). Manual de Instrucciones para CFX96. Recuperado de:
https://www.altona-diagnostics.com/files/public/Content%20Homepage/-
%2003%20Biorad%20CFX96/Biorad%20CFX96%20Manuals%20und%
20Co/CFX96_IM_Spanish_ES_RevA.pdf
Eppendorf. (2023, junio 16). Centrifuge 5910Ri. Centrifuga 5910Ri. Recuperado
de: https://www.eppendorf.com/es-es/Tienda-virtual-y-
Productos/Centrifugaci%C3%B3n/Centr%C3%ADfugas-
multiuso/Centrifuge-5910Ri-p-PF-963296
Labomersa. (2023, junio 16). Concentrador Plus. Labomersa. Recuperado de:
https://labomersa.com/producto/concentrador-plus/
Fisher Scientific. (2023, junio 16). Qubit 4 Fluorometer. Fisher Scientific
Retrieved, recuperado de: https://www.fishersci.es/shop/products/qubit-
4-fluorometer/15723679
Eppendorf. (s.f). Eppendorf Centrigutaion Operating – Manual MiniSpin.
Recuperado de: https://www.eppendorf.com/product-
media/doc/es/174231/Eppendorf_Centrifugation_Operating-
manual_MiniSpin-plus.pdf
Thermofisher. (s.f.). NanoDrop One User Guide. Recuperado de:
https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/CAD/manuals/3091-
NanoDrop-One-User-Guide-v1.3-sw-SPANISH.pdf
Ohaus Corporation (2019). Agitadores térmicos con incubación y refrigeración.
Recuperado el 18 de junio de 2023, de https://es.ohaus.com/es-
ES/Products/Laboratory-Equipment/Shakers/Multi-Purpose-Shakers-
With-Temperature-Control
Thermo Fisher Scientific Inc. (2023). Mini Centrifuga - Mini Spin®. Recuperado
el 18 de junio de 2023, de
https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/75002400#/
Eppendorf AG (2023). Centrífuga Eppendorf modelo 5425 R. Recuperado el 18
de junio de 2023, de https://www.eppendorf.com/LA-
es/products/centrifugation/centrifuges/microcentrifuges/model-5425-r/

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ReconEquipBioMol

  • 1. INFORME: RECONOCIMIENTO DE EQUIPOS DE LABORATORIO CURSO: Biotecnología DOCENTE: Dr. Hebert Soto Gonzales ESTUDIANTES: -Quispe Salas Alejandra -Florian Ope Alanna Sasha 2023
  • 2. 2 "Año de la unidad, la paz, y el desarrollo" UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIAAMBIENTAL INFORME DE LABORATORIO: RECONOCIMIENTO DE EQUIPOS CURSO: BIOTECNOLOGÍA DOCENTE: DR. HEBERT HERNAN SOTO GONZALES ESTUDIANTES: - QUISPE SALAS ALEJANDRA - FLORIAN OPE ALANNA SASHA ILO, MOQUEGUA2023 pág. 1
  • 3. 3 INDICE 1. INTRODUCCIÓN................................................................................................................. 4 2. OBJETIVOS......................................................................................................................... 5 2.1. Objetivo General ............................................................................................................... 5 2.2. Objetivos Específicos......................................................................................................... 5 3. DESARROLLO ..................................................................................................................... 5 3.1. Agitador térmico con Incubación...................................................................................... 5 3.2. Minicentrifuga – Mini Spin................................................................................................ 7 3.3. Thermo Scientific Nano Drop One..................................................................................... 9 3.4. Centrifuga Eppendorf...................................................................................................... 11 3.5. Termocicladores .............................................................................................................. 13 3.6. Fluorómetro Qubit 4........................................................................................................ 18 3.7. Centrifugador de muestras.............................................................................................. 21 3.8. Centrifuga refrigerada ..................................................................................................... 24 3.9. Electroforesis en gel de Agarosa ..................................................................................... 26 4. CONCLUSIONES ............................................................................................................... 30 5. BIBLIOGRAFIA.................................................................................................................. 31
  • 4. 4 1. INTRODUCCIÓN La biología molecular ha revolucionado el campo de la investigación científica y ha permitido avances significativos en el conocimiento de los procesos biológicos a nivel molecular. En las instalaciones de la Universidad Nacional de Moquegua, se llevan a cabo investigaciones de vanguardia en este campo, utilizando una amplia gama de equipos especializados. El objetivo general de este estudio es describir los equipos utilizados en biología molecular en las instalaciones de la Universidad Nacional de Moquegua, así como explorar sus aplicaciones en investigaciones. Para lograr esto, se buscará conocer los distintos equipos de biología molecular disponibles en el laboratorio de Biotecnología de la universidad, así como comprender sus características y funcionamiento. Además, se indagará en el uso que se les da a estos equipos en las investigaciones que se realizan en la institución. El conocimiento detallado de los equipos de biología molecular y su aplicabilidad en las investigaciones resulta fundamental para el desarrollo de nuevos enfoques y descubrimientos en este campo. Esto permitirá a los investigadores de la Universidad Nacional de Moquegua aprovechar al máximo las herramientas y técnicas disponibles, optimizando sus esfuerzos y obteniendo resultados científicos de alta calidad. A través de este estudio, se espera contribuir al avance del conocimiento en biología molecular y promover la investigación de frontera en la Universidad Nacional de Moquegua. Además, se busca fomentar la formación académica y el aprendizaje continuo, proporcionando a los estudiantes y profesionales de la biología las bases necesarias para utilizar y comprender los equipos de biología molecular de manera efectiva. En resumen, este estudio tiene como objetivo describir los equipos utilizados en biología molecular en las instalaciones de la Universidad Nacional de Moquegua, explorando sus características, funcionamiento y aplicaciones en investigaciones. Mediante el logro de los objetivos específicos planteados, se espera fortalecer el
  • 5. 5 conocimiento científico y contribuir al progreso de la investigación en biología molecular en la institución. 2. OBJETIVOS 2.1.Objetivo General Describir los equipos utilizados en biología Molecular en las Instalaciones de la Universidad Nacional de Moquegua, así como sus aplicaciones en investigaciones. Describir los equipos utilizados en Biología Molecular en el laboratorio de Biotecnología de la Universidad Nacional de Moquegua. 2.2.Objetivos Específicos • Conocer los equipos de biología molecular con los que cuenta la Universidad Nacional de Moquegua. • Conocer las características y funcionamiento de cada equipo. • Aprender el uso que se les da en las investigaciones. 3. DESARROLLO A continuación, se describirá los equipos que contiene el laboratorio de Biotecnología de la Universidad Nacional de Moquegua: 3.1.Agitador térmico con Incubación Fig. 1 –Incubadora Portátil Fuente: Laboratorio de Biotecnología. Los agitadores térmicos con incubación y refrigeración de OHAUS son equipos multifuncionales que pueden combinar la agitación, calefacción y enfriamiento para un mayor control de la temperatura y la velocidad de agitación. Estos equipos suelen tener graduaciones para microtubos y placas PCR, permitiendo trabajar con
  • 6. 6 microtubos y otros materiales similares. Los agitadores térmicos de OHAUS cuentan con gradillas de montaje para tubos y placas, permitiendo el uso de diferentes tipos de muestras en el equipo. En general, estos equipos son precisos, multifuncionales y están disponibles en una variedad de modelos para satisfacer distintas necesidades y aplicaciones en laboratorios de investigación, clínicos y de diagnóstico, así como en la industria alimentaria y farmacéutica. Aplicación: Los agitadores térmicos con incubación y refrigeración de OHAUS son utilizados en aplicaciones que requieren agitación de alta velocidad constante y calefacción y refrigeración precisas. Estos agitadores pueden ser personalizados con bloques intercambiables para acomodar tubos y son ideales para aplicaciones de ADN, ARN, cultivos celulares e hibridaciones. Además, son utilizados en laboratorios, sectores industriales y en la educación. Incubadora Portátil Función Características Especificaciones Los Agitadores Térmicos con Incubación y Refrigeración de OHAUS tienen la función de agitar, calentar y enfriar muestras en el laboratorio. Función de calefacción y enfriamiento con un rango de temperatura de 4°C a 100°C para los agitadores con incubación y de -20°C a 100°C para los agitadores con refrigeración. Control digital de velocidad de agitación y temperatura. Superficie de agitación magnética. Capacidad de carga de hasta 10 kg. Dimensiones de la plataforma de agitación de 29 x 29 cm. Diseño resistente con tapa de acero inoxidable. Rango de temperatura de 4°C a 100°C para los agitadores con incubación y de -20°C a 100°C para los agitadores con refrigeración. Control digital de velocidad de agitación y temperatura. Superficie de agitación magnética. Capacidad de carga de hasta 10 kg. Dimensiones de la plataforma de agitación de 29 x 29 cm. Diseño resistente con tapa de acero inoxidable.
  • 7. 7 3.2.Minicentrifuga – Mini Spin Fig. 2 –Minicentrifuga Fuente: Laboratorio de Biotecnología. La MiniSpin es una minicentrífuga de nivel básico. Esta minicentrífuga es compacta y es capaz de rotar hasta 12 tubos de 1,5 ml de capacidad. La MiniSpin® tiene una velocidad máxima de 13.400 rpm y una fuerza máxima de centrífuga relativa (RCF) de 12.100xg. La vista general de la MiniSpin incluye una mirilla, un eje de motor y un desbloqueo de emergencia en la parte inferior del equipo. Partes del Equipo Fig. 3 – Partes de la Minicentrifuga Fuente: Eppendorf 1. Mirilla 2. Eje del Motor
  • 8. 8 3. Desbloqueo de Emergencia 4. Panel de Control 5. Pie con ventosa 6. Placa de especificaciones 7. Interruptor de la alimentación eléctrica 8. Hembrilla de conexión a la red Aplicación: La aplicación principal de la MiniSpin® - minicentrífuga es la separación de componentes de líquidos mediante la centrifugación de pequeñas muestras. Es ideal para la preparación de muestras de ADN, ARN y proteínas, centrifugación de sobrenadantes claros y todo tipo de aplicaciones en las que se requiere centrifugar pequeñas cantidades de líquidos. También es útil para Minicentrifuga Función Características Especificaciones La función principal de la MiniSpin es la de centrifugar pequeñas muestras de líquidos. Es útil para la separación de componentes de líquidos, como en la preparación de muestras de ADN, ARN y proteínas, y para obtener sobrenadantes claros. Es un equipo de nivel básico con capacidad para 12 tubos de 1,5 ml que permite una centrifugación rápida y eficiente. Además, cuenta con funciones como temporizador y posibilidad de marcha continua en algunos modelos, lo que permite adecuarse a diferentes procesos. Extremadamente compacta, ocupando un espacio excepcionalmente pequeño. El temporizador puede ser configurado hasta 30 minutos. Capacidad del rotor: 12 tubos de 1,5/2,0mL, 2 tiras PCR. Máxima velocidad: 14,500 rpm. Fuerza máxima de centrifugado: 12,100xg. Funciones multifuncionales. Configuración de mesa y compacta. Material adaptado para microtubos. Está disponible en modelos MiniSpin y MiniSpin Plus. Velocidad mínima de 800 rpm. Permite adecuarse a diferentes procesos. Permite seleccionar la velocidad y el tiempo de centrifugado. Velocidad máxima: 14,500 rpm. Fuerza máxima de centrifugado (RCF): 12,100 xg. Máxima capacidad del rotor: 12 tubos de 1,5/2,0 ml ó 2 tiras PCR. Dimensiones (An x P x Al): 22,6 x 23,9 x 13,0 cm. Altura de apertura de la tapa: 15,5 cm. Nivel de ruido: 51-53 dB(A). Intervalo de temperatura operativa: de 4°C a 40°C. Volumen mínimo de muestra: 0,2 ml. Fuente de alimentación: 100-240 V, 50-60 Hz. Peso: 2,5 kg. Certificaciones: CE, CCSAus, FCC, ICES, etc. Está disponible en modelos MiniSpin y MiniSpin Plus.
  • 9. 9 procesar muestras en laboratorios de biología molecular en general. La MiniSpin® - minicentrífuga es una herramienta útil en investigaciones biomédicas, diagnósticos de enfermedades, análisis en laboratorios clínicos y en la industria alimentaria. 3.3.Thermo Scientific Nano Drop One Fig. 4 –Thermo Scientific Nano Drop One Fuente: Laboratorio de Biotecnología. El NanoDrop One de Thermo Scientific es un espectrofotómetro de micro volumen utilizado para cuantificar ácidos nucleicos y proteínas. Consta de un pedestal ajustable para sostener la muestra, una cámara de medición en la que se coloca la muestra, una fuente de luz UV-Vis y un detector. El equipo también cuenta con software de análisis y permite la conexión a una computadora. En general, es un instrumento compacto y de alta precisión utilizado en diversas aplicaciones de biología molecular.
  • 10. 10 Aplicación: La aplicación principal del Nanodrop One de Thermo Scientific es cuantificar ácidos nucleicos como el ADN y ARN y proteínas. Para esto mide la absorbancia de las muestras en las longitudes de onda específicas de 260 nm y 280 nm, y con eso calcula la concentración y pureza de las muestras. Con el software del equipo se puede realizar análisis estadísticos y almacenar información sobre las muestras. También se puede usar para medir la absorbancia en un rango espectral más amplio para otras aplicaciones moleculares y bioquímicas. Thermo Scientific Nano Drop One Función Características Especificaciones El NanoDrop One de Thermo Scientific es un espectrofotómetro de micro volumen utilizado para cuantificar ácidos nucleicos y proteínas. Entre las funciones que ofrece se encuentran la medición de la absorbancia a 260 nm y 280 nm para cuantificar la cantidad de ADN y proteína respectivamente, la medición de la absorbancia a otras longitudes de onda, la corrección automática de la línea base, la posibilidad de medir muestras con diferentes diluciones y la función de grabación de datos en el software del equipo. También es posible realizar mediciones de hasta 8 muestras en una sola sesión mediante el accesorio de carga automática. Medición de absorbancia de ácidos nucleicos y proteínas en muestras de hasta 1 μl. Resolución espectral de 1 nm en todo el rango UV-Visible. Rango dinámico de concentración de 5 órdenes de magnitud. Alta reproducibilidad y precisión con desviaciones típicas menores a 3%. Interfaz de uso sencillo a través de software intuitivo. Accesorios para incluir muestras en cubetas o en pedestal. Conectividad a través de Bluetooth y WiFi para transferencia de datos. En resumen, el Nanodrop One ofrece alta sensibilidad, reproducibilidad y versatilidad para la cuantificación y calidad de ácidos nucleicos y proteínas. Rango espectral de 190-850 nm. Resolución espectral de 1 nm. Rango dinámico de concentración de 5 órdenes de magnitud. Precisión típica menor a 3%. Interfaz de software intuitiva. Conectividad vía Bluetooth y WiFi.
  • 11. 11 3.4.Centrifuga Eppendorf Fig. 6 –Centrifuga Fuente: Eppendorf La centrífuga Eppendorf modelo 5425 R consta de los siguientes componentes: Base: Soporta toda la centrífuga y aloja el motor y controles electrónicos. Tapas: Cubren los tubos y frascos para mantenerlos en posición durante la centrifugación. Existen tapas de distintos tamaños y formas para diferentes aplicaciones. Rotor: Pieza giratoria que lleva montados los lugares de sujeción de tubos o frascos. Existen muchos rotores compatibles para diferentes usos. Tubos de muestra y frascos: Colocados dentro de las ranuras del rotor y sujetos por las abrazaderas del mismo. Panel de control: Contiene los botones de encendido y parada, selector de velocidad y tiempo y pantalla LCD para programar la centrifugación. Cinturón de seguridad: Sujetador para fijar la centrífuga a la mesa de trabajo durante su funcionamiento para evitar movimientos no deseados. Cable de alimentación: Conecta la centrífuga a la corriente eléctrica para poder funcionar.
  • 12. 12 Aplicación: La aplicación principal de la centrífuga Eppendorf modelo 5425 R es la separación y precipitación de muestras líquidas mediante la fuerza centrífuga. Se puede usar para: • Separar células de sus respectivos sobrenadantes después de la lisis celular. • Precipitar proteínas de extractos celulares o soluciones de enzimas. • Concentrar y purgar muestras de ácidos nucleicos como DNA y RNA. • Eliminar bacterias de caldos de cultivo mediante centrifugación. Centrifuga Eppendorf Función Características Especificaciones - La Eppendorf centrífuga modelo 5425 R tiene la función de refrigeración mediante un sistema de enfriamiento integrado, lo que permite regular y mantener la temperatura durante la centrifugación. Esto es útil para aplicaciones que requieren una temperatura controlada, como centrifugación de enzimas y extractos celulares. - También tiene la función Fast Temp que permite alcanzar rápidamente la temperatura programada gracias a una curva de enfriamiento optimizada. - Posee un tablero de control preciso con pantalla LCD que permite programar la velocidad, tiempo y temperatura de operación. - Está disponible con una variedad de rotores y accesorios para diferentes formatos y volúmenes de muestras. Las principales características de la Centrífuga eppendorf modelo 5425 R son: - Posibilidad de refrigeración desde -10°C hasta +40°C, lo que permite trabajar a temperaturas controladas. - Rango de velocidad de 300 a 4500 rpm, con aceleración y desaceleración controlables. - Pantalla LCD y controles intuitivos para programar la velocidad, tiempo y temperatura. - Soporta hasta 24 tubos de 1.5ml ó 2 ml, ó 10 tubos de 5ml gracias a los diferentes rotores disponibles. - Capacidad para centrifugado de muestras de enzimas, extractos celulares, ácidos nucleicos y proteínas. Velocidad máxima: 13000 rpm Aceleración/desaceleración: entre 8 a 11 s. Temperatura de operación: -10°C a +40°C Velocidad/temperatura programable Pantalla LCD digital Control de desbloqueo de la tapa en marcha Adaptador para rotor FA-6-24- 11-7S-Angle Alimentación eléctrica: 100-240 V, 50-60 Hz Dimensiones (L x A x P): 34,5 x 35 x 43 cm Peso: 17,5 kg
  • 13. 13 3.5.Termocicladores También conocido como máquina de PCR es un instrumento usado en biología molecular que permite realizar de forma automatizada y secuencial los ciclos de temperaturas necesarios para llevar a cabo la reacción en cadena polimerasa (PCR) de amplificación de ADN. Un termociclador es un equipo de laboratorio de biología molecular, utilizado en la amplificación de las moléculas de ADN mediante la técnica de PCR (Reacción en cadena de la Polimerasa), debido que este, es capaz de realizar ciclos de temperaturas necesarios para que amplifiquen las hebras de ADN. El proceso de la PCR es automático y puede finalizarse en tan solo unas pocas horas. Este proceso es dirigido por completo por el termociclador, quien esta programado para cambiar la temperatura de reacción cada poco minuto posible la desnaturalización y síntesis de ADN. El modelo de termociclador más común consiste en un bloque de resistencia eléctrica que distribuye a través de una placa una temperatura homogénea (entre 4ªC y 96ªC) durante un tiempo programable. En algunos equipos la resistencia eléctrica se ha sustituido por la tecnología Peltier (semiconductores), que permite mayor homogeneidad en la temperatura. Dentro de un laboratorio encontramos dos tipos de termocicladores: ✓ Las máquinas de PCR estándar o convencional: utilizan bloques intercambiables para acomodar placas de pocillos múltiples o tiras de tubos, con una variedad de opciones de programas para diversas necesidades de amplificación de genes. ✓ Los termocicladores en tiempo real: Se utilizan en aplicaciones como el análisis cuantitativo de la expresión génica, el análisis de SNP, la validación de objetivos farmacológicos, cortar bandas de secuenciación y la genotipificación.
  • 14. 14 3.5.1. CFX96 Touch Real – Time PCR Detection System Fig. 7 –CFX96 Real Time System Fuente: Laboratorio de Biotecnología. Especificaciones Capacidad: 96 tubos de 0.2 ml. Pantalla táctil de 26 cm a color VGA que le permite al investigador usar el equipo sin necesidad de conectarlo a una computadora: edición, almacenaje y visualización de los datos en tiempo real. Volumen de reacción: 1- 50 μl (recomendado 10 -25 μl). Método de calentamiento y enfriamiento: Peltier con 6 zonas independientes de control de temperatura (thermal electric units). Sello hermético “O-Ring” garantiza el buen funcionamiento del sistema. Control de temperatura: Algoritmo que calcula la temperatura dentro de la muestra en lugar de la temperatura dentro del bloque. Incluye • Un chasis de termociclador C1000. • Un módulo de reacción óptico CFX96 de 96 pozos con gradiente. • Un cable de alimentación eléctrica. • Software CFX Manager™. • Licencia para software qBase plus • Un manual del usuario. • Un demo kit 5-target (1725997).
  • 15. 15 Fig. 8 – Parametros de Ejecución Fuente: BioRad Funcionamiento Se abre la tapa para colocar la muestra Fig. 9 – Manejo de Equipo CFX96 Fuente: Laboratorio de Biotecnología. Fig. 10 – Manejo de Equipo CFX96 Touch Real Fuente: Laboratorio de Biotecnología. Luego con el panel de Control se configura y se procede a realizar el análisis.
  • 16. 16 Fig. 11 – Panel de Control de Equipo CFX96 Touch Real Fuente: Laboratorio de Biotecnología. 3.5.2. Termociclador C1000 Touch - PCR Utilice el termociclador táctil C1000 con módulo de reacción dual 48/48 para ejecutar protocolos de PCR independientes, utilizando placas de 48 pocillos o tubos individuales. El módulo de reacción dual 48/48 se puede cambiar en segundos sin herramientas, lo que permite el uso de módulos de 96 o 384 pozos en el mismo chasis del termociclador C1000. CFX96 Touch Real – Time PCR Detection System Función Características Especificaciones Le permitirá discriminar simultáneamente 5 genes diferentes en una sola reacción de PCR a través de una tecnología óptica avanzada diseñada para maximizar a detección de fluorescencia de fluoróforos específicos. Rápido: es capaz de reducir el tiempo de un protocolo estándar de 2 horas a 25 minutos. – Sencillo: el mantenimiento del equipo es mínimo. Su pantalla táctil facilita la programación, y la obtención y análisis de resultados. No necesita estar conectado a un ordenador para poder trabajar. Flexible: sistema completamente abierto que ofrece la máxima flexibilidad al usuario, tanto en la selección de la química de detección como en el fungible a utilizar. Además, puede ser actualizado a un módulo óptico de Real Time PCR de 384 pocillos fácilmente por el usuario, sin necesidad de instalación ni calibración. Capacidad: 96 tubos de 0.2 ml. Pantalla táctil de 26 cm a color VGA que le permite al investigador usar el equipo sin necesidad de conectarlo a una computadora: edición, almacenaje y visualización de los datos en tiempo real. Volumen de reacción: 1- 50 μl (recomendado 10 -25 μl). Método de calentamiento y enfriamiento: Peltier con 6 zonas independientes de control de temperatura Sello hermético “O-Ring” garantiza el buen funcionamiento del sistema. Control de temperatura: Algoritmo que calcula la temperatura dentro de la muestra en lugar de la temperatura dentro del bloque.
  • 17. 17 Fig. 12 – Termociclador C1000 Touch - PCR Fuente: Laboratorio de Biotecnología. Partes del equipo • Bahía del Módulo de Reacción • Barra de Bloqueo del Módulo de Recuperación • Pantalla Táctil • Puerto USB A • Rejilla de entrada de Aire Aplicaciones y Uso • Amplificación/PCR • Clonación • Secuencia de ciclo • Estudios de expresión génica • Mutagénesis
  • 18. 18 3.6.Fluorómetro Qubit 4 El Fluorómetro Qubit 4 es la última versión del conocido fluorómetro Qubit diseñado para medir con precisión la cantidad de ADN, ARN y proteínas, y ahora también la integridad y calidad del ARN, utilizando los ensayos Qubit altamente sensibles. El Fluorómetro Qubit 4 fue rediseñado para ejecutar el ensayo Qubit RNA IQ (integridad y calidad). El Fluorómetro Qubit 4 y el Kit de Ensayo IQ de ARN trabajan en conjunto para distinguir con precisión el ARN intacto del degradado en solo dos sencillos pasos. Termociclador C1000 Touch - PCR Función Características Especificaciones Le permitirá discriminar simultáneamente 5 genes diferentes en una sola reacción de PCR a través de una tecnología óptica avanzada diseñada para maximizar a detección de fluorescencia de fluoróforos específicos. Rápido: es capaz de reducir el tiempo de un protocolo estándar de 2 horas a 25 minutos. – Sencillo: el mantenimiento del equipo es mínimo. Su pantalla táctil facilita la programación, y la obtención y análisis de resultados. No necesita estar conectado a un ordenador para poder trabajar. Flexible: sistema completamente abierto que ofrece la máxima flexibilidad al usuario, tanto en la selección de la química de detección como en el fungible a utilizar. Además, puede ser actualizado a un módulo óptico de Real Time PCR de 384 pocillos fácilmente por el usuario, sin necesidad de instalación ni calibración. Capacidad: 96 tubos de 0.2 ml. Pantalla táctil de 26 cm a color VGA que le permite al investigador usar el equipo sin necesidad de conectarlo a una computadora: edición, almacenaje y visualización de los datos en tiempo real. Volumen de reacción: 1- 50 μl (recomendado 10 -25 μl). Método de calentamiento y enfriamiento: Peltier con 6 zonas independientes de control de temperatura Sello hermético “O-Ring” garantiza el buen funcionamiento del sistema. Control de temperatura: Algoritmo que calcula la temperatura dentro de la muestra en lugar de la temperatura dentro del bloque.
  • 19. 19 Fig. 13 – Fluorómetro Qubit 4 Fuente: Laboratorio de Biotecnología Flujo de Trabajo sencillo El fluorómetro Qubit 4, fácil de usar, ofrece resultados mediante procedimientos de ensayo rápidos y sencillos. La gran pantalla táctil a color le permite navegar fácilmente a través de las diversas opciones. Los cálculos y ajustes son realizados automáticamente por el instrumento. Fig. 14 – Flujo de Trabajo Sencillo Fuente: BioRad
  • 20. 20 Fluorómetro Qubit 4 Función Características Especificaciones Diseñado para medir con precisión la cantidad de ADN, ARN y proteínas, y ahora también la integridad y calidad del ARN, utilizando los ensayos Qubit altamente sensibles. • Cuantificación rápida y altamente precisa de ADN, ARN y proteína en menos de tres segundos por muestra. • Mide el ARN intacto en menos de 5 segundos por muestra. • Elevados niveles de precisión usando solo 1-20. μL de muestra, incluso con muestras muy diluidas • Calculadora de reactivos integrada que genera rápidamente instrucciones de preparación de soluciones de trabajo Qubit • Almacena resultados de hasta 1000 muestras • Gran pantalla táctil en color de 5,7 pulgadas para una navegación de flujo de trabajo sencilla • La pantalla gráfica indica cuando las muestras están en el rango extendido o fuera de rango • El espacio pequeño ahorra espacio en su banco • Exporta datos a una unidad USB o directamente a su computadora a través de un cable USB • Posibilidad de personalizar su fluorómetro Qubit con los ensayos que ejecuta más, agregar nuevos ensayos o incluso crear sus propios ensayos con el software MyQubit y la herramienta web • Dimensiones del instrumento: 5.4 "(w) x 10" (l) x 2.2 "(h) (13.6 cm x 25 cm x 5.5 cm) • Peso: 743 g • Rango dinámico: 5 órdenes de magnitud • Tiempo de procesamiento: ≤ segundos / muestra • Fuentes de luz: LED azul (máx ~ 470 nm), LED rojo (máx ~ 635 nm) • Filtros de excitación: azul (430-495 nm), rojo (600- 645 nm) • Filtros de emisión: verde (510-580 nm), rojo (665- 720 nm) • Detectores: fotodiodos, capacidad de medición de 300-1,000 nm • Tiempo de calentamiento: <35 segundos • Unidad de almacenamiento USB: 4 GB
  • 21. 21 3.7.Centrifugador de muestras Gracias a su avanzada tecnología de calentamiento, el Eppendorf Concentrator plus facilita una rápida y eficaz concentración al vacío de ADN, ARN, nucleótidos, proteínas y otras muestras líquidas o húmedas. Su nueva tapa recubierta proporciona una resistencia química superior contra muchos ácidos y disolventes orgánicos. Partes del equipo Fig. 16 – Sistema Completo del Equipo Fuente: Eppendorf 1. Salida de bomba de vacío de membrana integrada 2. Tapa de PMMA 3. Junta anular 4. Asidero hundido 5. Desbloqueo de emergencia 6. Carcasa de bomba 7. Placa de características 8. Conexión de red 9. Portafusiles 10. Interruptor principal 11. Elementos de manejo y display del dispositivo 12. Separador de condensado
  • 22. 22 13. Conexión de la manguera de la bomba en el dispositivo individual para una bomba de vacío externa Fig. 17– Centrifugador de muestras Fuente: Elaboración propia Viene en 3 configuraciones de sistema. Funcionamiento extremadamente silencioso <50 dB (A). La bomba de membrana de PTFE, libre de mantenimiento y resistente a los productos químicos, elimina la necesidad de realizar cambios de aceite. El diseño compacto ahorra espacio valioso en la mesa. Gran variedad de rotores con 15 opciones diferentes para el alojamiento de tubos de 0,2 mL a 50 mL microplacas y placas de PCRU accionamiento por inducción sin motor y una cámara de acero inoxidable resistente a las sustancias químicas para un funcionamiento sin problemas. Se puede conectar a la mayoría de trampas de enfriamiento disponibles en el mercado para el uso con vapores. Tapa revestida con resistencia química superior.
  • 23. 23 Centrifugador de muestras Función Características Especificaciones • Se pueden ajustar 3 diferentes temperaturas (30,45, 60 ºC. • La evaporación de los líquidos puede realizar de forma óptima en 3 funciones. Además de la evacuación pura, puede concentrar soluciones acuosas y/o alcohólicas de forma particularmente rápida con 2 funciones especiales. • También puede utilizar el dispositivo como un desecador puro. • Puede conectar una trampa de disolventes detrás de la bomba al dispositivo. • Viene en 3 configuraciones de sistema • Funcionamiento extremadamente silencioso <50 dB (A) • La bomba de membrana de PTFE, libre de mantenimiento y resistente a los productos químicos, elimina la necesidad de realizar cambios de aceite • El diseño compacto ahorra espacio valioso en la mesa • Gran variedad de rotores con 15 opciones diferentes para el alojamiento de tubos de 0,2 mL a 50 mL, microplacas y placas PCR • Un accionamiento por inducción sin motor y una cámara de acero inoxidable resistente a las sustancias químicas para un funcionamiento sin problemas • Se puede conectar a la mayoría de trampas de enfriamiento disponibles en el mercado para el uso con vapores • Tapa revestida con resistencia química superior • Alimentación eléctrica: 120V, 50– 60 Hz. • Capacidad de muestras: máx. 144 recipientes/2 microplacas. • Velocidad fija: 1400 rpm. • Volumen de tubo: 0,2 – 50 mL. • Rango volumétrico: 72 mL • Vacío máximo: 20 Mbar • Tensión: 230 V • Altura: 230 mm Vataje: 350 w • Dimensiones: 58 x 33 x 29 cm • Tipo de bomba: Integrated diaphragm vacuum pump • Tipo: Concentrators • Frecuencia: 50/60 Hz • Velocidad: 1400 rpm • Requisitos eléctricos: 230 V, 50/60 Hz • Para utilizar con (equipo): Rotor F-45- 48-1
  • 24. 24 3.8.Centrifuga refrigerada La nueva Centrifuge 5910 Ri refrigerada de sobremesa destaca por su facilidad de uso y versatilidad: La gran pantalla táctil VisioNize® de 7 pulgadas, extraordinariamente intuitiva, proporciona un funcionamiento rápido y sin errores, garantizando ciclos de centrifugación eficientes y reproducibles. Además, la función de documentación y la gestión de usuarios única apoyan su control de calidad con múltiples niveles de autorización, protección por contraseña y documentación de todos los ciclos de centrifugación y actividades de los usuarios. Junto con una amplia gama de rotores basculantes y de ángulo fijo, esta centrífuga se adapta a un espectro de aplicaciones especialmente amplio, lo que la convierte en la opción perfecta para los laboratorios multiusuario con requisitos muy diversos. Partes del equipo Fig. 18 – Partes de la centrifuga refrigerada Fuente: Eppendorf 1. Tapa de la centrifuga 2. Tubito de control 3. Pantalla táctil 4. Desbloqueo de emergencia 5. Conexión de Ethernet 6. Placa de características 7. Interfaz USB (Tipo B)
  • 25. 25 8. Conexión de la red de distribución 9. Interruptor de la red de distribución 10. Interfaz USB (tipo A) El uso de la centrifuga se ve facilitado por: • Detección automática del rotor con limitación de velocidad • Detección automática de desequilibrios del rotor • Pantalla táctil para el manejo del software de la centrifuga La centrifuga dispone de una función de favoritos y la posibilidad de crear y gestionar programas individuales. Fig. 19 – Partes de la centrifuga refrigerada Fuente: Eppendorf
  • 26. 26 3.9.Electroforesis en gel de Agarosa La electroforesis en gel de agarosa es de las más utilizadas para analizar y caracterizar ácidos nucleicos de distintas procedencias. Los geles se comportan como un tamiz molecular y permiten separar moléculas cargadas en función de su tamaño y forma. Así, moléculas de DNA de diferente tamaño van a emigrar de forma distinta en una electroforesis en gel de agarosa. Además, si en dicha Centrifuga Refrigerada Función Características Especificaciones • La nueva centrífuga 5910 Ri destaca por su facilidad de uso y versatilidad: la gran interfaz táctil VisioNize® de 7 pulgadas con una experiencia de usuario intuitiva proporciona un funcionamiento rápido y sin errores, lo que garantiza ejecuciones eficientes y reproducibles. • Gran pantalla táctil VisioNize&trade; de 7 pulgadas para un ajuste de parámetros súper rápido mediante la exclusiva función de favoritos • Gestión de usuarios con múltiples niveles de autorización y funciones de documentación que cumplen los requisitos de las normas GLP/GxP • Rotores basculantes y adaptadores para tubos y botellas de 0,2 mL a 1.000 mL, así como todos los tipos de placas MTP, PCR o Deepwell • Rotores de ángulo fijo para aplicaciones de biología molecular de alta velocidad en tubos de 0,2 mL a 250 mL • Alta velocidad de centrifugación de hasta 22.132 × g (14,000 rpm) • Tapones y tapas Eppendorf QuickLock&trade; herméticos a los aerosoles para un bloqueo rápido y ergonómico de la tapa • Tapa de centrífuga con cierre de tapa suave • RCF máximo: 22,132 x g • Pantalla: VisioNize touch interface • Perfil::10/10 • Rotor: S-4 xUniversal • Intervalo de temperatura: - 11ºC to +40 ºC • Anchura exterior: 28.3 in. • Altura exterior: 14.4 in. • Frecuencia: 50/60 Hz Refrigerado: si • Nivel de ruido: < 53 dB (A) • Memoria para programas: 99 • Rotor incluido: si • Altura exterior: 37 cm • Fondo: 68 cm • Tensión: 230 V
  • 27. 27 electroforesis se aplican marcadores de peso molecular (fragmentos de DNA de tamaño conocido) se puede calcular el tamaño aproximado del DNA en estudio. Para la electroforesis de ADN generalmente se emplea gel de agarosa como material de soporte. La agarosa es un polímero natural, polisacárido formado por galactosas alfa y beta que se extrae de las algas de los géneros Gellidium y Gracillaria. Fig. 20 – Electroforesis en gel de Agarosa Fuente: Elaboración Propia Aplicaciones y Uso La electroforesis, es una práctica aplicable para separar fragmentos de ADN (u otras macromoléculas, como ARN y proteínas) por su tamaño y carga. Consiste en aplicar una corriente a través de un gel que contiene las moléculas de interés. Con base en su tamaño y carga, las moléculas se desplazan por el gel en diferentes direcciones o a distintas velocidades, con lo que se separan unas de otras. Se utiliza, generalmente con propósitos analíticos, pero puede ser una técnica preparativa para refinar moléculas en parte, antes de aplicar espectrometría de masas, PCR, clonación o secuenciación de ADN.
  • 28. 28 Con el equipo de celdas de electroforesis, se usa una corriente eléctrica para mover las moléculas a través de un gel, o de otra matriz. Los poros del gel o la matriz, actúan como un tamiz y permite que las moléculas más pequeñas se muevan más rápido, que las moléculas más grandes, usando estándares de tamaños conocidos, que se separan en el mismo gel y luego se comparan con la muestra. Cabe destacar que, la electroforesis también se usa con mayor frecuencia, cuando un médico sospecha una enfermedad o condición que causa la producción de una proteína monoclonal. Una vez que se ha diagnosticado una enfermedad o condición, la electroforesis se puede usar a intervalos regulares, para monitorear el curso de la enfermedad y la efectividad del tratamiento. Tipos de Electroforesis Básicamente, la electroforesis, es una técnica capaz de medir las proteínas específicas en la sangre y separar los elementos, según su carga eléctrica. Son usadas a menudo, para encontrar sustancias anormales llamadas proteínas M. De acuerdo a ello, hay diferentes tipos, los cuales son: • Electroforesis de proteínas en gel de poliacrilamida o Electroforesis vertical: es uno de los procesos más usados para la desinfección, análisis y caracterización de proteínas, ésta permite separar moléculas cargadas, y descarga diferencias en movilidad, cuando son sometidas a la acción de un campo eléctrico. • Electroforesis de proteínas en gel de agarosa o Electroforesis horizontal: aplica métodos para separar ácidos nucleicos en fragmentos de ADN. Se basa en el hecho de que los ácidos nucleicos se encuentran cargados negativamente debido a los grupos fosfato, permitiendo que el campo eléctrico de desplace desde el polo negativo hacia el polo positivo. Esta separación, se llevará a cabo en una matriz sólida, el gel de agarosa e influye su desarrollo en la velocidad con que el ácido nucleico migra en el gel, tomando en cuenta el tamaño de la molécula, la concentración de agarosa y la conformación del ADN.
  • 29. 29 Funcionamiento Fig. 21 – Procedimiento de la electroforesis en gel de agarosa. Fuente: EDVOTOKET (2016) 1. DILUIR el tampón concentrado (50x) en agua destilada para obtener tampón 1x (ver Tabla A). 2. MEZCLAR el polvo de agarosa con el tampón 1x en un matraz de 250 ml (ver Tabla A). 3. DISOLVER el polvo de agarosa, poniendo la solución a hervir. CALENTAR la solución en el microondas durante 1 minuto a alta temperatura. RETIRAR con cuidado el matraz del microondas y MEZCLAR la solución agitando con cuidado el matraz. Continuar CALENTANDO la solución por periodos de 15 minutos hasta que la agarosa esté completamente disuelta (la solución debe tener un color claro como el agua). 4. Dejar ENFRIAR la agarosa hasta 60°C agitando con cuidado el matraz para permitir una disipación homogénea del calor. 5. Mientras la agarosa se enfría, CERRAR el soporte por medio de los tornillos de caucho de los sujetadores. SITUAR el molde (peine) en la ranura central. 6. VERTIR la solución de agarosa enfriada en el soporte. El gel debería solidificarse al cabo de veinte minutos máximo. El gel se reafirma y se vuelve menos transparente al solidificarse.
  • 30. 30 7. RETIRAR los tornillos de los sujetadores y el peine. Al quitar el peine, tenga cuidado de no estropear los pocillos. Fig. 22 – Funcionamiento de la electroforesis en gel de agarosa Fuente: Laboratorio de Biotecnología de la UNAM 4. CONCLUSIONES • Luego de realizar la siguiente practica de laboratorio se llega a la conclusión que se logró reconocer, analizar y manejar los equipos de laboratorio • Todos los materiales presentes en los laboratorios de biotecnología se deben manipular según normas y precauciones, para evitar accidentes en las practicas. • Además de acuerdo a los equipos observados en el laboratorio de Biotecnología se concluye que cuenta con buenos equipos para realizar diversas investigaciones. • Mediante la siguiente practica de reconocimiento de equipos que se llevó a cabo se amplió y genero conocimientos importantes para futuras aplicación. • Mediante la siguiente practica que se llevó a cabo se amplió y genero conocimientos importantes para futura aplicación.
  • 31. 31 5. BIBLIOGRAFIA BioRad. (2016). Manual de Instrucciones para CFX96. Recuperado de: https://www.altona-diagnostics.com/files/public/Content%20Homepage/- %2003%20Biorad%20CFX96/Biorad%20CFX96%20Manuals%20und% 20Co/CFX96_IM_Spanish_ES_RevA.pdf Eppendorf. (2023, junio 16). Centrifuge 5910Ri. Centrifuga 5910Ri. Recuperado de: https://www.eppendorf.com/es-es/Tienda-virtual-y- Productos/Centrifugaci%C3%B3n/Centr%C3%ADfugas- multiuso/Centrifuge-5910Ri-p-PF-963296 Labomersa. (2023, junio 16). Concentrador Plus. Labomersa. Recuperado de: https://labomersa.com/producto/concentrador-plus/ Fisher Scientific. (2023, junio 16). Qubit 4 Fluorometer. Fisher Scientific Retrieved, recuperado de: https://www.fishersci.es/shop/products/qubit- 4-fluorometer/15723679 Eppendorf. (s.f). Eppendorf Centrigutaion Operating – Manual MiniSpin. Recuperado de: https://www.eppendorf.com/product- media/doc/es/174231/Eppendorf_Centrifugation_Operating- manual_MiniSpin-plus.pdf Thermofisher. (s.f.). NanoDrop One User Guide. Recuperado de: https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/CAD/manuals/3091- NanoDrop-One-User-Guide-v1.3-sw-SPANISH.pdf Ohaus Corporation (2019). Agitadores térmicos con incubación y refrigeración. Recuperado el 18 de junio de 2023, de https://es.ohaus.com/es- ES/Products/Laboratory-Equipment/Shakers/Multi-Purpose-Shakers- With-Temperature-Control Thermo Fisher Scientific Inc. (2023). Mini Centrifuga - Mini Spin®. Recuperado el 18 de junio de 2023, de https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/75002400#/ Eppendorf AG (2023). Centrífuga Eppendorf modelo 5425 R. Recuperado el 18 de junio de 2023, de https://www.eppendorf.com/LA- es/products/centrifugation/centrifuges/microcentrifuges/model-5425-r/