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“AÑO DE LA UNIDAD, LA PAZ Y EL DESARROLLO.”
UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL
BIOTECNOLOGÍA
TEMA:
RECONOCIMIENTO DE EQUIPOS DE LABORATORIO PRESENTADOS
DOCENTE:
BLGO. SOTO GONZALES, HEBERT HERNAN
ALUMNA:
HUIZA LORENZO, PAOLA ARACELLI
MOQUEGUA, 23 DE JUNIO DEL 2023
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ÍNDICE
1. INTRODUCCIÓN..............................................................................................................2
2. OBJETIVOS.......................................................................................................................4
2.1. Objetivo General .........................................................................................................4
2.2. Objetivo Específicos ...................................................................................................4
3. MARCO TEORICO ...........................................................................................................4
3.1. Agitadores Térmicos Con Incubación Y Refrigeración ..............................................4
3.2. MiniSpin - Mini centrífuga .........................................................................................6
3.3. Nanodrop One C..........................................................................................................8
3.4. Centrifuga 5425R......................................................................................................10
3.5. Termociclador............................................................................................................12
3.6. Qubit 4 - Fluorometer................................................................................................14
3.7. Concentrador de ADN...............................................................................................16
3.8. Centrifuga 5910 Ri....................................................................................................18
3.9. SISTEMA DE ELECTROFORESIS BIO-RAD.......................................................20
4. CONCLUSIONES............................................................................................................22
5. BIBLIOGRAFÍA..............................................................................................................22
1. INTRODUCCIÓN
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Al encontramos en un laboratorio podemos observar que en este ambiente se encuentran
diversos equipos. Estos equipos están orientados a la investigación y a la realización de
experimentos, muchos de estos pueden resultar complicados de manejar debido a las
grandes dimensiones que tienen estos, además de las diversas funciones que cada uno
tiene. Es por ello que tener un conocimiento claro acerca de como funciona equipo
resulta necesario sobre todo porque de manejarlo de manera inadecuada puede hacer
que el equipo no nos de los resultados correctos o que incluso se llegue a malograr.
En este informe se pretende describir acerca de algunos de los equipos que fueron
mostrados en nuestra visita al laboratorio, además de ciertas características y
aplicaciones que tiene cada uno de ellos, de esta manera podemos diferenciarlos,
además de tener un conocimiento acerca de su funcionamiento para así poder facilitar
su manejo, cuando lo llevemos a cabo.
Las investigaciones realizadas en un laboratorio de biotecnología se dan con el objetivo
de obtener producto o desarrollar procesos que tengan que ver con la biología y la
genética. Para llevar a cabo estas investigaciones se emplean estos equipos los cuales
facilitan el trabajo del investigador y ayudan a proporcionar resultados, los cuales serán
precisos de acuerdo al modelo de equipo empleado ya que se apreciaron varios equipos
con la misma funcionalidad, pero con la diferencia de que son de capacidades
diferentes, además de emplear a una temperatura diferente, como también el tiempo, el
cual puede verse influenciado por la necesidad que tenga el investigador.
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2. OBJETIVOS
2.1. Objetivo General
Describir los equipos que se nos fueron mostrados en la visita al laboratorio de
biotecnología.
2.2. Objetivo Específicos
• Comprender las características que poseen cada equipo que se encuentra en el
laboratorio de biotecnología
• Conocer las aplicaciones en las que se usan estos equipos y como ayudan a
facilitar el análisis en ciertos casos en donde se requiera su aplicación.
3. MARCO TEORICO
3.1. Agitadores Térmicos Con Incubación Y Refrigeración
La incubadora portátil o también conocido agitador térmico, está diseñados para
aplicaciones de calefacción y refrigeración que requieren agitación de alta
velocidad constante y precisa con un control de temperatura confiable desde 17
°C por debajo de la temperatura ambiente hasta 100 °C. Estos dispositivos son
especialmente útiles en aplicaciones que requieren la incubación de muestras a
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una temperatura específica, junto con la agitación constante para promover la
mezcla y la reacción.
Características
Algunas características y beneficios de los Agitadores Térmicos con Incubación
y Refrigeración son:
• Cuenta con un software mejorado que permite un control rápido y
preciso. Los modelos de enfriamiento alcanzan hasta 17 °C por debajo
de la temperatura ambiente.
• La pantalla táctil intuitiva facilita un funcionamiento y programación
sencillos. Además, se permite configurar a seis idiomas distintos guían
al usuario a través del funcionamiento de la unidad.
• Cree programas fácilmente para aplicaciones repetidas.
Almacenamiento para cinco programas separados de 5 pasos. El puerto
USB le permite transferir los datos de la prueba a una unidad flash para
el registro de los análisis realizados.
• Este equipo puede llegar a una velocidad de 3000 rpm, el cual se deberá
subir gradualmente y se dará de acuerdo al análisis que se requiera llevar
a cabo.
Aplicaciones
Esta incubadora permite ser usada para realizar cultivos, estudios de proteínas,
así como también las hibridaciones.
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3.2. MiniSpin - Mini centrífuga
La mini centrífuga MiniSpin es un equipo de laboratorio utilizado para realizar
centrifugación de pequeñas muestras. Son versiones compactas y de tamaño
reducido de las centrifugadoras convencionales, diseñadas específicamente para
el procesamiento de volúmenes de muestra más pequeños, generalmente en el
rango de microlitros.
Características
Algunas características y beneficios del MiniSpin - Mini centrífuga son:
• Tamaño compacto: La MiniSpin es una centrífuga pequeña y portátil,
ideal para laboratorios con espacio limitado o para su uso en el campo.
Su diseño compacto la hace fácil de transportar y colocar en cualquier
superficie de trabajo.
• Velocidad ajustable: Esta centrífuga ofrece una velocidad máxima de
hasta 14,500 rpm (13,400 x g), lo que permite una rápida separación de
las muestras en un corto período de tiempo. Además, la velocidad se
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puede ajustar en incrementos de 100 rpm para adaptarse a diferentes
protocolos y requisitos de centrifugación.
• Capacidad de muestras: La MiniSpin puede acomodar hasta 12 tubos de
PCR de 1.5 ml o 2.0 ml, lo que la hace adecuada para la centrifugación
de pequeñas cantidades de muestras, como reacciones de PCR,
preparación de muestras o precipitación de precipitados.
• Funcionamiento silencioso: Esta centrífuga funciona de manera
silenciosa, lo que minimiza las distracciones y los ruidos en el entorno
de trabajo.
• Seguridad: La MiniSpin está equipada con funciones de seguridad para
proteger al usuario y las muestras. Incluye un sistema de bloqueo de tapa,
que evita que la centrífuga se abra durante el funcionamiento.
Aplicaciones
Las mini centrífuga MiniSpin son ampliamente utilizadas en laboratorios de
investigación, clínicas y otros entornos de laboratorio donde se trabaja con
muestras biológicas, químicas o biomédicas. Pueden emplearse para separar
componentes de una muestra mediante fuerza centrífuga, como separar células
de sangre, precipitar partículas o realizar la separación de fases.
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3.3. Nanodrop One C
El NanoDrop One es un espectrofotómetro UV-VIS de barrido espectral que
mida la variación de la absorbancia con la longitud de onda empleando solo una
micro-gota y opcionalmente en cubeta. El sistema de retención de muestras
patentado permite la medición de muestras de alta concentración sin necesidad
de dilución, por lo que la medición es rápida, fiable y reproducible de pureza de
DNA, RNA y proteínas en volúmenes de microlitro.
Características
Algunas características y beneficios del Nanodrop One C son:
• Medición rápida y sin dilución: Permite la medición directa de la
muestra sin requerir diluciones adicionales, lo que ahorra tiempo y
minimiza la cantidad de muestra requerida.
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• Amplio rango de longitud de onda: Puede medir la absorbancia en un
amplio rango de longitud de onda, desde el ultravioleta (190 nm) hasta
el visible (840 nm), lo que permite el análisis de una variedad de
compuestos biomoleculares.
• Software intuitivo: Viene con un software fácil de usar que proporciona
herramientas de análisis y permite la personalización de los parámetros
de medición. También ofrece funciones de análisis de muestras en serie
y generación de informes.
• Verificación de calidad de la muestra: Proporciona indicadores de
calidad de la muestra, como la relación A260/A280 y A260/A230, que
ayudan a evaluar la pureza de los ácidos nucleicos y detectar
contaminantes.
• Compatibilidad con diversos tipos de muestras: Puede medir ácidos
nucleicos (ADN, ARN) y proteínas, así como otros compuestos
biomoleculares y químicos.
• Cabe mencionar que los microtubos utilizados son de dos diferentes
materiales, de plástico y de cuarzo las cuales tienen una capacidad
máxima de 2 microlitros.
Aplicaciones
Los espectrofotómetros NanoDrop One C es un equipo el cual es utilizado
para cuantificar y calificar muestras de ácido nucleico como un paso de
control de calidad para ensayos posteriores de RT-qPCR. Estos instrumentos
pueden ayudar a prevenir experimentos fallidos o no publicables
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proporcionando concentraciones precisas de ácido nucleico e identificando
contaminantes que pueden alterar los resultados experimentales.
3.4. Centrifuga 5425R
La centrífuga 5425 R es un modelo de centrífuga fabricada por Eppendorf,
una reconocida empresa de equipos de laboratorio. Esta centrífuga es
ampliamente utilizada en laboratorios de investigación, académicos, clínicos
y farmacéuticos para una variedad de aplicaciones de centrifugación.
Características
Algunas características y beneficios de la Centrifuga 5425R son:
• Rotor de capacidad variable: La centrífuga 5425 R puede acomodar
diferentes tipos de rotores dependiendo de las necesidades del
usuario. Puede utilizar rotores de ángulo fijo para tubos de centrífuga
estándar de 1,5 ml o 2,0 ml.
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• Control de temperatura: Cuenta con un sistema de control de
temperatura integrado, el cual varía desde -10ºC a 40ºC lo que
permite la refrigeración de las muestras durante la centrifugación.
• Velocidad ajustable: La velocidad de la centrífuga es ajustable en
incrementos de 100 rpm, lo que permite adaptarla a diferentes
protocolos y aplicaciones específicas. La velocidad máxima de
centrifugación varía según el rotor utilizado, pero generalmente
alcanza hasta 21,130 x g.
• Pantalla intuitiva y programable: Muestra información relevante,
como velocidad, tiempo restante y temperatura. Además, tiene la
capacidad de almacenar y programar diferentes protocolos de
centrifugación, lo que facilita la repetición de experimentos y
asegura una configuración precisa.
• Funciones de seguridad: Las funciones incluyen sistemas de frenado
para detener la centrifugación de manera segura, detección de
desequilibrio para evitar vibraciones excesivas y protección de sobre
temperatura para evitar daños en las muestras en caso de falla en la
refrigeración.
Aplicaciones
Entre sus aplicaciones, generalmente las podemos encontrar en laboratorios
clínicos, que la usan para el estudio de la sangre, la separación de plasma,
sedimentación a partir de un líquido o sólidos.
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También es empleado en la industria agrícola, donde se emplean para separar
el contenido graso del fruto. En general existen tipos de centrifugadoras para
satisfacer las necesidades según la rama de la ciencia en la que esté o para
el objetivo que se necesite.
3.5. Termociclador
El termociclador es un equipo esencial en la PCR, ya que proporciona las
condiciones controladas de temperatura necesarias para llevar a cabo la
amplificación de ácidos nucleicos. Su diseño y funcionalidades permiten
realizar la PCR de manera eficiente, precisa y reproducible.
Características
Algunas características y beneficios del Termociclador son:
• Bloque de muestras: El termociclador tiene un bloque de muestras
donde se colocan los tubos o placas de reacción que contienen la
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mezcla de reacción para la PCR. Este bloque se calienta y enfría de
acuerdo con el programa de ciclos de temperatura.
• Control preciso de la temperatura: El termociclador permite
controlar de forma precisa y estable la temperatura en cada etapa del
ciclo de la PCR. Esto asegura que las reacciones ocurran en las
condiciones óptimas para la amplificación del ADN.
• Programación flexible: Los termocicladores tienen una interfaz que
permite programar los ciclos de temperatura según los
requerimientos de la PCR específica. Se pueden definir diferentes
etapas de temperatura, tiempos y ciclos para adaptarse a diferentes
protocolos experimentales.
• Gradiente de temperatura: Algunos termocicladores ofrecen la
función de gradiente de temperatura, lo que significa que se puede
establecer una temperatura diferente en distintas partes del bloque de
muestras. Esto permite realizar optimizaciones de temperatura para
encontrar las condiciones de amplificación óptimas.
• Sistema de detección: Permite monitorear en tiempo real la cantidad
de ADN amplificado durante la PCR. Esto se puede lograr mediante
fluoróforos o sondas específicas.
Aplicaciones
Un termociclador es un equipo utilizado en biología molecular para llevar a
cabo la amplificación de ácidos nucleicos mediante la reacción en cadena de
la polimerasa. La PCR es una técnica fundamental en la investigación
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genética y en el diagnóstico molecular, y el termociclador es el instrumento
clave para realizar este proceso. Cabe mencionar que en la pandemia del
Covid-19, este equipo fue utilizado para determinar el virus del COVID.
3.6. Qubit 4 - Fluorometer
El Qubit 4 se basa en una tecnología de ensayo por fluorescencia que utiliza
sondas específicas de unión al ADN o ARN. A diferencia de los métodos
tradicionales de cuantificación de ácidos nucleicos, como la
espectrofotometría UV-Vis, el Qubit 4 proporciona una medición directa y
precisa de la concentración de ácidos nucleicos sin verse afectado por la
presencia de contaminantes o impurezas.
Características
Algunas características y beneficios del Qubit 4 – Fluorometer son:
• Sensibilidad y rango dinámico: Detecta y cuantifica cantidades muy
pequeñas de ácidos nucleicos, en el rango de picogramos a
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microgramos. Esto permite trabajar con muestras de baja
concentración y conservar las muestras valiosas.
• Flexibilidad en los ensayos: El sistema Qubit 4 ofrece diferentes
ensayos de cuantificación para adaptarse a diferentes tipos de ácidos
nucleicos y aplicaciones.
• Resultados rápidos y sencillos: Ofrece resultados en tiempo real y de
manera rápida, sin requerir diluciones ni calibraciones complicadas.
• Software intuitivo: El sistema Qubit 4 cuenta con un software fácil
de usar que guía al usuario a través del proceso de cuantificación y
muestra los resultados de manera clara. También permite el registro
y almacenamiento de datos para un seguimiento y análisis posterior.
• Compatibilidad con muestras variadas: El Qubit 4 es compatible con
una amplia gama de muestras, incluyendo ADN genómico,
plásmidos, ARN total, ARNm y muestras de PCR.
Aplicaciones
El Qubit 4 es un sistema de cuantificación de ácidos nucleicos confiable y
preciso que permite una medición directa y sensible de la concentración de
ADN, ARN y otras muestras de ácidos nucleicos. Su fácil uso y rapidez en
la obtención de resultados lo convierten en una herramienta valiosa en
laboratorios de biología molecular y genética.
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3.7. Concentrador de ADN
Un concentrador de ADN es un equipo utilizado para concentrar y purificar
muestras de ADN. La concentración de ADN es un paso importante en
muchas aplicaciones de laboratorio, como secuenciación, clonación, PCR y
análisis genético.
Características
Algunas características y beneficios de los concentradores de ADN son:
• Concentración selectiva: Los concentradores de ADN permiten
concentrar selectivamente el ADN mientras se eliminan otras
impurezas. Esto es especialmente útil cuando se trabaja con muestras
de baja concentración o cuando se requiere eliminar contaminantes.
• Rapidez: Los concentradores de ADN pueden procesar muestras en
un tiempo relativamente corto, lo que permite una mayor eficiencia
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en el laboratorio. Dependiendo del equipo utilizado, el proceso
puede llevar desde unos minutos hasta varias horas.
• Volumen de muestra: Los concentradores de ADN están disponibles
en diferentes tamaños y capacidades, lo que permite trabajar con
volúmenes variables de muestra. Algunos concentradores pueden
procesar muestras desde micro volúmenes hasta grandes volúmenes,
según las necesidades del usuario.
• Facilidad de uso: La mayoría de los concentradores de ADN son
fáciles de usar y no requieren habilidades técnicas avanzadas. Por lo
general, implican pasos simples, como cargar la muestra, aplicar la
fuerza centrífuga y recolectar el ADN concentrado.
• Recuperación eficiente: Los concentradores deADN están diseñados
para lograr una alta eficiencia de recuperación del ADN concentrado.
Esto asegura que se obtenga una cantidad adecuada de ADN
concentrado para las aplicaciones posteriores.
Aplicaciones
Es importante tener en cuenta que los concentradores de ADN son
herramientas complementarias utilizadas en conjunto con otros métodos de
purificación y extracción de ADN. La elección del concentrador de ADN
adecuado dependerá del volumen de muestra, la concentración inicial del
ADN y las especificaciones requeridas para la aplicación particular.
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3.8. Centrifuga 5910 Ri
La centrífuga 5910 Ri de Eppendorf es una centrífuga refrigerada de alto
rendimiento y versatilidad que proporciona un control preciso de la
temperatura y velocidades de centrifugación ajustables.
Características
A continuación, se destacan algunas características y funciones clave de la
centrífuga 5910 Ri:
• Refrigeración de alta eficiencia: La centrífuga 5910 Ri está equipada
con un sistema de refrigeración eficiente que permite mantener las
muestras a temperaturas bajas durante la centrifugación. Esto es
particularmente útil para aplicaciones sensibles al calor o que
requieren mantener la integridad de las muestras, como la
centrifugación de células, cultivos celulares, proteínas y ácidos
nucleicos.
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• Amplia capacidad y compatibilidad de rotores: La centrífuga 5910
Ri puede acomodar una variedad de rotores y adaptadores para
adaptarse a diferentes tamaños y tipos de tubos de centrífuga. Esto
brinda flexibilidad para procesar muestras en tubos de 1,5 ml, 2 ml,
15 ml y 50 ml, así como en placas de microtitulación.
• Control de temperatura preciso: La 5910 Ri permite un control
preciso de la temperatura, con un rango que va desde -10°C hasta
40°C. Esto garantiza que las muestras se mantengan a la temperatura
deseada durante la centrifugación.
• Velocidad ajustable y alta capacidad de centrifugación: La centrífuga
5910 Ri ofrece una amplia gama de velocidades de centrifugación,
con una velocidad máxima de hasta 22,000 rpm. Además, tiene una
alta capacidad de centrifugación, con la capacidad de procesar hasta
4 litros de muestra en una sola corrida.
• Control y programación intuitiva: Tiene una pantalla táctil a color y
un sistema de control digital que permite una programación y
configuración sencilla de los parámetros de centrifugación. También
ofrece la posibilidad de almacenar y recuperar protocolos
personalizados.
Aplicaciones
La centrifuga 5410 Ri, es adecuada para una amplia gama de aplicaciones y
es especialmente útil cuando se requiere centrifugar muestras sensibles al
calor.
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3.9. SISTEMA DE ELECTROFORESIS BIO-RAD
Los sistemas de electroforesis de Bio-Rad, permiten la personalización
según las necesidades específicas de cada laboratorio. Estos sistemas suelen
incluir los componentes esenciales para la electroforesis, como las cámaras
de electroforesis, los geles de agarosa o poliacrilamida, los tampones de
electroforesis, los marcadores de peso molecular y los electrodos.
Características
Algunos de los sistemas de electroforesis más populares y conocidos de Bio-
Rad son:
• Sistema de electroforesis en gel de agarosa: Bio-Rad ofrece sistemas
de electroforesis en gel de agarosa como el modelo Sub-Cell GT.
Estos sistemas son utilizados para la separación de ácidos nucleicos,
como ADN y ARN, en muestras de investigación y aplicaciones
clínicas.
• Sistema de electroforesis en gel de poliacrilamida: Bio-Rad también
proporciona sistemas de electroforesis en gel de poliacrilamida,
como el modelo Mini-PROTEAN. Estos sistemas son utilizados para
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la separación y análisis de proteínas en estudios de expresión
proteica, caracterización de proteínas y análisis de muestras
biológicas.
• Sistema de electroforesis y transferencia Western: Bio-Rad ofrece
sistemas de electroforesis integrados con transferencia Western,
como el sistema Mini-PROTEAN Tetra. Estos sistemas permiten la
separación de proteínas por electroforesis y su posterior
transferencia a una membrana para su detección mediante inmuno
transferencia.
Aplicaciones
Los sistemas de electroforesis de Bio-Rad son utilizados en laboratorios de
investigación, académicos y clínicos para separar y analizar moléculas como
ácidos nucleicos y proteínas.
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4. CONCLUSIONES
En conclusión se pudo describir cada uno de los equipos que se observo en la visita al
laboratorio de biotecnología, se realizo una descripción que incluía sus características
y aplicaciones en las que son empleadas cada uno de los equipos ya que de esta
manera en una futura visita podremos entender mejor como es que funciona cada
equipo, como podemos utilizarlo sin llegar a malograrlo, además de facilitar nuestro
trabajo al realizar nuestras investigaciones y experimentos que requieran el uso de
alguno de los equipos mostrados.
5. BIBLIOGRAFÍA
• Artedinamico. (2022). Espectrofotómetro NanoDrop One C. Equipos Y
Laboratorio de Colombia. https://www.equiposylaboratorio.com/portal/inicio
• Centrífuga MiniSpin – Tubos de 1.5 Y 2ML – Labomersa. (2022).
Labomersa.com. https://labomersa.com/producto/centrifuga-mini-espintubos-de-
1-5-y-2ml/
• NanoDrop One C - Controltecnica Instrumentación Científica... (2021, December
10). Controltecnica Instrumentación Científica. División BIO.
https://www.controltecnica.com/bio/producto/nanodrop-one-c/
• Centrifuge 5425 R MManual de instrucciones original. (n.d.). Retrieved June 18,
2023, from https://www.eppendorf.com/product-
media/doc/es/924635/Centrifugation_Operating-manual_Centrifuge-5425-R.pdf
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• Bio-Rad CFX384 Real-Time 384-well PCR qPCR Detection System Made in 2020
Unit2 Pred CFX Opus. (2020). Bostonind.com. https://www.bostonind.com/bio-
rad-cfx384-real-time-384-well-pcr-qpcr-detection-system-made-in-2020-unit2-
pred-cfx-
opus?language=en&currency=USD?utm_source=merchant_shopping&utm_medi
um=asia_shopping_ads&keyword=&gclid=CjwKCAjws7WkBhBFEiwAIi16814
_hOYZa9_EL3VzuaPN1UAKDyDdJxSsBX2LbUmtPs4gBbOI6q_KERoCYYE
QAvD_BwE
• Qubit 4 Fluorometer | Thermo Fisher Scientific - PE. (2018). Thermofisher.com.
https://www.thermofisher.com/pe/en/home/industrial/spectroscopy-elemental-
isotope-analysis/molecular-spectroscopy/fluorometers/qubit/models/qubit-4.html
• concentrador para ADN Eppendorf SE. (2015).
Http://Twitter.com/MedicalExpoNews.
https://www.medicalexpo.es/prod/eppendorf-se/product-68382-962683.html
• Centrifuge 5910 Ri - centrífuga refrigerada - Eppendorf España. (2023).
Eppendorf.com. https://www.eppendorf.com/es-es/Tienda-virtual-y-
Productos/Centrifugaci%C3%B3n/Centr%C3%ADfugas-multiuso/Centrifuge-
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  • 1. “AÑO DE LA UNIDAD, LA PAZ Y EL DESARROLLO.” UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL BIOTECNOLOGÍA TEMA: RECONOCIMIENTO DE EQUIPOS DE LABORATORIO PRESENTADOS DOCENTE: BLGO. SOTO GONZALES, HEBERT HERNAN ALUMNA: HUIZA LORENZO, PAOLA ARACELLI MOQUEGUA, 23 DE JUNIO DEL 2023
  • 2. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 2 ÍNDICE 1. INTRODUCCIÓN..............................................................................................................2 2. OBJETIVOS.......................................................................................................................4 2.1. Objetivo General .........................................................................................................4 2.2. Objetivo Específicos ...................................................................................................4 3. MARCO TEORICO ...........................................................................................................4 3.1. Agitadores Térmicos Con Incubación Y Refrigeración ..............................................4 3.2. MiniSpin - Mini centrífuga .........................................................................................6 3.3. Nanodrop One C..........................................................................................................8 3.4. Centrifuga 5425R......................................................................................................10 3.5. Termociclador............................................................................................................12 3.6. Qubit 4 - Fluorometer................................................................................................14 3.7. Concentrador de ADN...............................................................................................16 3.8. Centrifuga 5910 Ri....................................................................................................18 3.9. SISTEMA DE ELECTROFORESIS BIO-RAD.......................................................20 4. CONCLUSIONES............................................................................................................22 5. BIBLIOGRAFÍA..............................................................................................................22 1. INTRODUCCIÓN
  • 3. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 3 Al encontramos en un laboratorio podemos observar que en este ambiente se encuentran diversos equipos. Estos equipos están orientados a la investigación y a la realización de experimentos, muchos de estos pueden resultar complicados de manejar debido a las grandes dimensiones que tienen estos, además de las diversas funciones que cada uno tiene. Es por ello que tener un conocimiento claro acerca de como funciona equipo resulta necesario sobre todo porque de manejarlo de manera inadecuada puede hacer que el equipo no nos de los resultados correctos o que incluso se llegue a malograr. En este informe se pretende describir acerca de algunos de los equipos que fueron mostrados en nuestra visita al laboratorio, además de ciertas características y aplicaciones que tiene cada uno de ellos, de esta manera podemos diferenciarlos, además de tener un conocimiento acerca de su funcionamiento para así poder facilitar su manejo, cuando lo llevemos a cabo. Las investigaciones realizadas en un laboratorio de biotecnología se dan con el objetivo de obtener producto o desarrollar procesos que tengan que ver con la biología y la genética. Para llevar a cabo estas investigaciones se emplean estos equipos los cuales facilitan el trabajo del investigador y ayudan a proporcionar resultados, los cuales serán precisos de acuerdo al modelo de equipo empleado ya que se apreciaron varios equipos con la misma funcionalidad, pero con la diferencia de que son de capacidades diferentes, además de emplear a una temperatura diferente, como también el tiempo, el cual puede verse influenciado por la necesidad que tenga el investigador.
  • 4. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 4 2. OBJETIVOS 2.1. Objetivo General Describir los equipos que se nos fueron mostrados en la visita al laboratorio de biotecnología. 2.2. Objetivo Específicos • Comprender las características que poseen cada equipo que se encuentra en el laboratorio de biotecnología • Conocer las aplicaciones en las que se usan estos equipos y como ayudan a facilitar el análisis en ciertos casos en donde se requiera su aplicación. 3. MARCO TEORICO 3.1. Agitadores Térmicos Con Incubación Y Refrigeración La incubadora portátil o también conocido agitador térmico, está diseñados para aplicaciones de calefacción y refrigeración que requieren agitación de alta velocidad constante y precisa con un control de temperatura confiable desde 17 °C por debajo de la temperatura ambiente hasta 100 °C. Estos dispositivos son especialmente útiles en aplicaciones que requieren la incubación de muestras a
  • 5. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 5 una temperatura específica, junto con la agitación constante para promover la mezcla y la reacción. Características Algunas características y beneficios de los Agitadores Térmicos con Incubación y Refrigeración son: • Cuenta con un software mejorado que permite un control rápido y preciso. Los modelos de enfriamiento alcanzan hasta 17 °C por debajo de la temperatura ambiente. • La pantalla táctil intuitiva facilita un funcionamiento y programación sencillos. Además, se permite configurar a seis idiomas distintos guían al usuario a través del funcionamiento de la unidad. • Cree programas fácilmente para aplicaciones repetidas. Almacenamiento para cinco programas separados de 5 pasos. El puerto USB le permite transferir los datos de la prueba a una unidad flash para el registro de los análisis realizados. • Este equipo puede llegar a una velocidad de 3000 rpm, el cual se deberá subir gradualmente y se dará de acuerdo al análisis que se requiera llevar a cabo. Aplicaciones Esta incubadora permite ser usada para realizar cultivos, estudios de proteínas, así como también las hibridaciones.
  • 6. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 6 3.2. MiniSpin - Mini centrífuga La mini centrífuga MiniSpin es un equipo de laboratorio utilizado para realizar centrifugación de pequeñas muestras. Son versiones compactas y de tamaño reducido de las centrifugadoras convencionales, diseñadas específicamente para el procesamiento de volúmenes de muestra más pequeños, generalmente en el rango de microlitros. Características Algunas características y beneficios del MiniSpin - Mini centrífuga son: • Tamaño compacto: La MiniSpin es una centrífuga pequeña y portátil, ideal para laboratorios con espacio limitado o para su uso en el campo. Su diseño compacto la hace fácil de transportar y colocar en cualquier superficie de trabajo. • Velocidad ajustable: Esta centrífuga ofrece una velocidad máxima de hasta 14,500 rpm (13,400 x g), lo que permite una rápida separación de las muestras en un corto período de tiempo. Además, la velocidad se
  • 7. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 7 puede ajustar en incrementos de 100 rpm para adaptarse a diferentes protocolos y requisitos de centrifugación. • Capacidad de muestras: La MiniSpin puede acomodar hasta 12 tubos de PCR de 1.5 ml o 2.0 ml, lo que la hace adecuada para la centrifugación de pequeñas cantidades de muestras, como reacciones de PCR, preparación de muestras o precipitación de precipitados. • Funcionamiento silencioso: Esta centrífuga funciona de manera silenciosa, lo que minimiza las distracciones y los ruidos en el entorno de trabajo. • Seguridad: La MiniSpin está equipada con funciones de seguridad para proteger al usuario y las muestras. Incluye un sistema de bloqueo de tapa, que evita que la centrífuga se abra durante el funcionamiento. Aplicaciones Las mini centrífuga MiniSpin son ampliamente utilizadas en laboratorios de investigación, clínicas y otros entornos de laboratorio donde se trabaja con muestras biológicas, químicas o biomédicas. Pueden emplearse para separar componentes de una muestra mediante fuerza centrífuga, como separar células de sangre, precipitar partículas o realizar la separación de fases.
  • 8. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 8 3.3. Nanodrop One C El NanoDrop One es un espectrofotómetro UV-VIS de barrido espectral que mida la variación de la absorbancia con la longitud de onda empleando solo una micro-gota y opcionalmente en cubeta. El sistema de retención de muestras patentado permite la medición de muestras de alta concentración sin necesidad de dilución, por lo que la medición es rápida, fiable y reproducible de pureza de DNA, RNA y proteínas en volúmenes de microlitro. Características Algunas características y beneficios del Nanodrop One C son: • Medición rápida y sin dilución: Permite la medición directa de la muestra sin requerir diluciones adicionales, lo que ahorra tiempo y minimiza la cantidad de muestra requerida.
  • 9. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 9 • Amplio rango de longitud de onda: Puede medir la absorbancia en un amplio rango de longitud de onda, desde el ultravioleta (190 nm) hasta el visible (840 nm), lo que permite el análisis de una variedad de compuestos biomoleculares. • Software intuitivo: Viene con un software fácil de usar que proporciona herramientas de análisis y permite la personalización de los parámetros de medición. También ofrece funciones de análisis de muestras en serie y generación de informes. • Verificación de calidad de la muestra: Proporciona indicadores de calidad de la muestra, como la relación A260/A280 y A260/A230, que ayudan a evaluar la pureza de los ácidos nucleicos y detectar contaminantes. • Compatibilidad con diversos tipos de muestras: Puede medir ácidos nucleicos (ADN, ARN) y proteínas, así como otros compuestos biomoleculares y químicos. • Cabe mencionar que los microtubos utilizados son de dos diferentes materiales, de plástico y de cuarzo las cuales tienen una capacidad máxima de 2 microlitros. Aplicaciones Los espectrofotómetros NanoDrop One C es un equipo el cual es utilizado para cuantificar y calificar muestras de ácido nucleico como un paso de control de calidad para ensayos posteriores de RT-qPCR. Estos instrumentos pueden ayudar a prevenir experimentos fallidos o no publicables
  • 10. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 10 proporcionando concentraciones precisas de ácido nucleico e identificando contaminantes que pueden alterar los resultados experimentales. 3.4. Centrifuga 5425R La centrífuga 5425 R es un modelo de centrífuga fabricada por Eppendorf, una reconocida empresa de equipos de laboratorio. Esta centrífuga es ampliamente utilizada en laboratorios de investigación, académicos, clínicos y farmacéuticos para una variedad de aplicaciones de centrifugación. Características Algunas características y beneficios de la Centrifuga 5425R son: • Rotor de capacidad variable: La centrífuga 5425 R puede acomodar diferentes tipos de rotores dependiendo de las necesidades del usuario. Puede utilizar rotores de ángulo fijo para tubos de centrífuga estándar de 1,5 ml o 2,0 ml.
  • 11. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 11 • Control de temperatura: Cuenta con un sistema de control de temperatura integrado, el cual varía desde -10ºC a 40ºC lo que permite la refrigeración de las muestras durante la centrifugación. • Velocidad ajustable: La velocidad de la centrífuga es ajustable en incrementos de 100 rpm, lo que permite adaptarla a diferentes protocolos y aplicaciones específicas. La velocidad máxima de centrifugación varía según el rotor utilizado, pero generalmente alcanza hasta 21,130 x g. • Pantalla intuitiva y programable: Muestra información relevante, como velocidad, tiempo restante y temperatura. Además, tiene la capacidad de almacenar y programar diferentes protocolos de centrifugación, lo que facilita la repetición de experimentos y asegura una configuración precisa. • Funciones de seguridad: Las funciones incluyen sistemas de frenado para detener la centrifugación de manera segura, detección de desequilibrio para evitar vibraciones excesivas y protección de sobre temperatura para evitar daños en las muestras en caso de falla en la refrigeración. Aplicaciones Entre sus aplicaciones, generalmente las podemos encontrar en laboratorios clínicos, que la usan para el estudio de la sangre, la separación de plasma, sedimentación a partir de un líquido o sólidos.
  • 12. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 12 También es empleado en la industria agrícola, donde se emplean para separar el contenido graso del fruto. En general existen tipos de centrifugadoras para satisfacer las necesidades según la rama de la ciencia en la que esté o para el objetivo que se necesite. 3.5. Termociclador El termociclador es un equipo esencial en la PCR, ya que proporciona las condiciones controladas de temperatura necesarias para llevar a cabo la amplificación de ácidos nucleicos. Su diseño y funcionalidades permiten realizar la PCR de manera eficiente, precisa y reproducible. Características Algunas características y beneficios del Termociclador son: • Bloque de muestras: El termociclador tiene un bloque de muestras donde se colocan los tubos o placas de reacción que contienen la
  • 13. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 13 mezcla de reacción para la PCR. Este bloque se calienta y enfría de acuerdo con el programa de ciclos de temperatura. • Control preciso de la temperatura: El termociclador permite controlar de forma precisa y estable la temperatura en cada etapa del ciclo de la PCR. Esto asegura que las reacciones ocurran en las condiciones óptimas para la amplificación del ADN. • Programación flexible: Los termocicladores tienen una interfaz que permite programar los ciclos de temperatura según los requerimientos de la PCR específica. Se pueden definir diferentes etapas de temperatura, tiempos y ciclos para adaptarse a diferentes protocolos experimentales. • Gradiente de temperatura: Algunos termocicladores ofrecen la función de gradiente de temperatura, lo que significa que se puede establecer una temperatura diferente en distintas partes del bloque de muestras. Esto permite realizar optimizaciones de temperatura para encontrar las condiciones de amplificación óptimas. • Sistema de detección: Permite monitorear en tiempo real la cantidad de ADN amplificado durante la PCR. Esto se puede lograr mediante fluoróforos o sondas específicas. Aplicaciones Un termociclador es un equipo utilizado en biología molecular para llevar a cabo la amplificación de ácidos nucleicos mediante la reacción en cadena de la polimerasa. La PCR es una técnica fundamental en la investigación
  • 14. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 14 genética y en el diagnóstico molecular, y el termociclador es el instrumento clave para realizar este proceso. Cabe mencionar que en la pandemia del Covid-19, este equipo fue utilizado para determinar el virus del COVID. 3.6. Qubit 4 - Fluorometer El Qubit 4 se basa en una tecnología de ensayo por fluorescencia que utiliza sondas específicas de unión al ADN o ARN. A diferencia de los métodos tradicionales de cuantificación de ácidos nucleicos, como la espectrofotometría UV-Vis, el Qubit 4 proporciona una medición directa y precisa de la concentración de ácidos nucleicos sin verse afectado por la presencia de contaminantes o impurezas. Características Algunas características y beneficios del Qubit 4 – Fluorometer son: • Sensibilidad y rango dinámico: Detecta y cuantifica cantidades muy pequeñas de ácidos nucleicos, en el rango de picogramos a
  • 15. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 15 microgramos. Esto permite trabajar con muestras de baja concentración y conservar las muestras valiosas. • Flexibilidad en los ensayos: El sistema Qubit 4 ofrece diferentes ensayos de cuantificación para adaptarse a diferentes tipos de ácidos nucleicos y aplicaciones. • Resultados rápidos y sencillos: Ofrece resultados en tiempo real y de manera rápida, sin requerir diluciones ni calibraciones complicadas. • Software intuitivo: El sistema Qubit 4 cuenta con un software fácil de usar que guía al usuario a través del proceso de cuantificación y muestra los resultados de manera clara. También permite el registro y almacenamiento de datos para un seguimiento y análisis posterior. • Compatibilidad con muestras variadas: El Qubit 4 es compatible con una amplia gama de muestras, incluyendo ADN genómico, plásmidos, ARN total, ARNm y muestras de PCR. Aplicaciones El Qubit 4 es un sistema de cuantificación de ácidos nucleicos confiable y preciso que permite una medición directa y sensible de la concentración de ADN, ARN y otras muestras de ácidos nucleicos. Su fácil uso y rapidez en la obtención de resultados lo convierten en una herramienta valiosa en laboratorios de biología molecular y genética.
  • 16. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 16 3.7. Concentrador de ADN Un concentrador de ADN es un equipo utilizado para concentrar y purificar muestras de ADN. La concentración de ADN es un paso importante en muchas aplicaciones de laboratorio, como secuenciación, clonación, PCR y análisis genético. Características Algunas características y beneficios de los concentradores de ADN son: • Concentración selectiva: Los concentradores de ADN permiten concentrar selectivamente el ADN mientras se eliminan otras impurezas. Esto es especialmente útil cuando se trabaja con muestras de baja concentración o cuando se requiere eliminar contaminantes. • Rapidez: Los concentradores de ADN pueden procesar muestras en un tiempo relativamente corto, lo que permite una mayor eficiencia
  • 17. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 17 en el laboratorio. Dependiendo del equipo utilizado, el proceso puede llevar desde unos minutos hasta varias horas. • Volumen de muestra: Los concentradores de ADN están disponibles en diferentes tamaños y capacidades, lo que permite trabajar con volúmenes variables de muestra. Algunos concentradores pueden procesar muestras desde micro volúmenes hasta grandes volúmenes, según las necesidades del usuario. • Facilidad de uso: La mayoría de los concentradores de ADN son fáciles de usar y no requieren habilidades técnicas avanzadas. Por lo general, implican pasos simples, como cargar la muestra, aplicar la fuerza centrífuga y recolectar el ADN concentrado. • Recuperación eficiente: Los concentradores deADN están diseñados para lograr una alta eficiencia de recuperación del ADN concentrado. Esto asegura que se obtenga una cantidad adecuada de ADN concentrado para las aplicaciones posteriores. Aplicaciones Es importante tener en cuenta que los concentradores de ADN son herramientas complementarias utilizadas en conjunto con otros métodos de purificación y extracción de ADN. La elección del concentrador de ADN adecuado dependerá del volumen de muestra, la concentración inicial del ADN y las especificaciones requeridas para la aplicación particular.
  • 18. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 18 3.8. Centrifuga 5910 Ri La centrífuga 5910 Ri de Eppendorf es una centrífuga refrigerada de alto rendimiento y versatilidad que proporciona un control preciso de la temperatura y velocidades de centrifugación ajustables. Características A continuación, se destacan algunas características y funciones clave de la centrífuga 5910 Ri: • Refrigeración de alta eficiencia: La centrífuga 5910 Ri está equipada con un sistema de refrigeración eficiente que permite mantener las muestras a temperaturas bajas durante la centrifugación. Esto es particularmente útil para aplicaciones sensibles al calor o que requieren mantener la integridad de las muestras, como la centrifugación de células, cultivos celulares, proteínas y ácidos nucleicos.
  • 19. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 19 • Amplia capacidad y compatibilidad de rotores: La centrífuga 5910 Ri puede acomodar una variedad de rotores y adaptadores para adaptarse a diferentes tamaños y tipos de tubos de centrífuga. Esto brinda flexibilidad para procesar muestras en tubos de 1,5 ml, 2 ml, 15 ml y 50 ml, así como en placas de microtitulación. • Control de temperatura preciso: La 5910 Ri permite un control preciso de la temperatura, con un rango que va desde -10°C hasta 40°C. Esto garantiza que las muestras se mantengan a la temperatura deseada durante la centrifugación. • Velocidad ajustable y alta capacidad de centrifugación: La centrífuga 5910 Ri ofrece una amplia gama de velocidades de centrifugación, con una velocidad máxima de hasta 22,000 rpm. Además, tiene una alta capacidad de centrifugación, con la capacidad de procesar hasta 4 litros de muestra en una sola corrida. • Control y programación intuitiva: Tiene una pantalla táctil a color y un sistema de control digital que permite una programación y configuración sencilla de los parámetros de centrifugación. También ofrece la posibilidad de almacenar y recuperar protocolos personalizados. Aplicaciones La centrifuga 5410 Ri, es adecuada para una amplia gama de aplicaciones y es especialmente útil cuando se requiere centrifugar muestras sensibles al calor.
  • 20. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 20 3.9. SISTEMA DE ELECTROFORESIS BIO-RAD Los sistemas de electroforesis de Bio-Rad, permiten la personalización según las necesidades específicas de cada laboratorio. Estos sistemas suelen incluir los componentes esenciales para la electroforesis, como las cámaras de electroforesis, los geles de agarosa o poliacrilamida, los tampones de electroforesis, los marcadores de peso molecular y los electrodos. Características Algunos de los sistemas de electroforesis más populares y conocidos de Bio- Rad son: • Sistema de electroforesis en gel de agarosa: Bio-Rad ofrece sistemas de electroforesis en gel de agarosa como el modelo Sub-Cell GT. Estos sistemas son utilizados para la separación de ácidos nucleicos, como ADN y ARN, en muestras de investigación y aplicaciones clínicas. • Sistema de electroforesis en gel de poliacrilamida: Bio-Rad también proporciona sistemas de electroforesis en gel de poliacrilamida, como el modelo Mini-PROTEAN. Estos sistemas son utilizados para
  • 21. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 21 la separación y análisis de proteínas en estudios de expresión proteica, caracterización de proteínas y análisis de muestras biológicas. • Sistema de electroforesis y transferencia Western: Bio-Rad ofrece sistemas de electroforesis integrados con transferencia Western, como el sistema Mini-PROTEAN Tetra. Estos sistemas permiten la separación de proteínas por electroforesis y su posterior transferencia a una membrana para su detección mediante inmuno transferencia. Aplicaciones Los sistemas de electroforesis de Bio-Rad son utilizados en laboratorios de investigación, académicos y clínicos para separar y analizar moléculas como ácidos nucleicos y proteínas.
  • 22. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 22 4. CONCLUSIONES En conclusión se pudo describir cada uno de los equipos que se observo en la visita al laboratorio de biotecnología, se realizo una descripción que incluía sus características y aplicaciones en las que son empleadas cada uno de los equipos ya que de esta manera en una futura visita podremos entender mejor como es que funciona cada equipo, como podemos utilizarlo sin llegar a malograrlo, además de facilitar nuestro trabajo al realizar nuestras investigaciones y experimentos que requieran el uso de alguno de los equipos mostrados. 5. BIBLIOGRAFÍA • Artedinamico. (2022). Espectrofotómetro NanoDrop One C. Equipos Y Laboratorio de Colombia. https://www.equiposylaboratorio.com/portal/inicio • Centrífuga MiniSpin – Tubos de 1.5 Y 2ML – Labomersa. (2022). Labomersa.com. https://labomersa.com/producto/centrifuga-mini-espintubos-de- 1-5-y-2ml/ • NanoDrop One C - Controltecnica Instrumentación Científica... (2021, December 10). Controltecnica Instrumentación Científica. División BIO. https://www.controltecnica.com/bio/producto/nanodrop-one-c/ • Centrifuge 5425 R MManual de instrucciones original. (n.d.). Retrieved June 18, 2023, from https://www.eppendorf.com/product- media/doc/es/924635/Centrifugation_Operating-manual_Centrifuge-5425-R.pdf
  • 23. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 23 • Bio-Rad CFX384 Real-Time 384-well PCR qPCR Detection System Made in 2020 Unit2 Pred CFX Opus. (2020). Bostonind.com. https://www.bostonind.com/bio- rad-cfx384-real-time-384-well-pcr-qpcr-detection-system-made-in-2020-unit2- pred-cfx- opus?language=en&currency=USD?utm_source=merchant_shopping&utm_medi um=asia_shopping_ads&keyword=&gclid=CjwKCAjws7WkBhBFEiwAIi16814 _hOYZa9_EL3VzuaPN1UAKDyDdJxSsBX2LbUmtPs4gBbOI6q_KERoCYYE QAvD_BwE • Qubit 4 Fluorometer | Thermo Fisher Scientific - PE. (2018). Thermofisher.com. https://www.thermofisher.com/pe/en/home/industrial/spectroscopy-elemental- isotope-analysis/molecular-spectroscopy/fluorometers/qubit/models/qubit-4.html • concentrador para ADN Eppendorf SE. (2015). Http://Twitter.com/MedicalExpoNews. https://www.medicalexpo.es/prod/eppendorf-se/product-68382-962683.html • Centrifuge 5910 Ri - centrífuga refrigerada - Eppendorf España. (2023). Eppendorf.com. https://www.eppendorf.com/es-es/Tienda-virtual-y- Productos/Centrifugaci%C3%B3n/Centr%C3%ADfugas-multiuso/Centrifuge- 5910Ri-p-PF-963296