1. INTRO D UCC IÓ N A LA
MICROBIOLOGÍA
CLINICA
MSc. LUIS LLOJA LOZANO
2. DEFINICIÓN DE
MICROBIOLOGÍA
• Ciencia que estudia los seres vivos que no se pueden ver a
simple vista (organismos microscópicos)
• Definición implica que su objeto de estudio está
determinado por la metodología:
• Microscopio
• Técnicas de cultivo puro en laboratorio
3.
4. FASES EN LA HISTORIA DE LA
MICROBIOLOGÍA
1. Periodo especulativo (desde la antigüedad
hasta primeros microscopios)
2. Primeros microscopistas (1675 -mediados del
s.XIX)
3. Cultivo de microorganismos (hasta finales del
siglo XIX)
4. Hasta nuestros días:multitud de enfoques en
el estudio microbiano.Ciencias“emancipadas”
(Virología,Inmunología)
6. PERIODO ESPECULATIVO
• La humanidad conoce las actividades microbianas sin saber
nada de los microorganismos:
• Enfermedades infecciosas
• “miasmas”
• Lucrecio (s.I a.C.):“semillas de enfermedad”
• Frascatorius (1546):gérmenes vivos
• Alimentos y bebidas fermentados (queso,leches fermentadas,vino,
cerveza,etc)
7.
8. PRIMEROS MICROSCOPISTAS
• Antonij van Leeuwenhoek:
• Microscopio simple
• Descubrimiento de los
microorganismos (“animálculos”
en gota de estanque,1675)
• Describe bacterias (1683)
• Describe protozoos
13. EL DEBATE SOBRE LA GENERACIÓN
ESPONTÁNEA
• Ideas asumidas desdeAristóteles
• Redi (1668):experimentos que descartan la
generación espontánea de animales
• “Omne vivo ex ovo”
• Pero aún no se acepta“Omne vivo ex vivo”
• La disputa entre Spallanzani y Needham
• Los experimentos se interpretan erróneamente
(Needham) como que al calentar los frascos el aire pierde
su“fuerzavital”(vitalismo)
14. PASTEUR ZANJA LA POLÉMICA SOBRE LA
GENERACIÓN ESPONTÁNEA
• Experimentos con frascos abiertos al aire dotados de largos
cuellos curvados (“cuellos de cisne”).
• Una vez llevados aebullición,no aparecen microorganismos si el
frasco no se mueve
• Aparecen microorganismos si el líquido alcanza el cuello curvo
• “Trampas” para capturar microorganismos
15. TERCER PERIODO DE LA
MICROBIOLOGIA MEDICA
• Dos teorías sobre el origen de las fermentaciones:química y
biológica
• Pasteur (1857) es llamado a resolver un problema de las
destilerías de Lille
• 1857:bacterias que producen fermentación láctica
• 1860:levaduras producen fermentacion alcohólica
• Descubre la fermentación butírica y la vida en ausencia
de aire (anaerobiosis)
• Reconciliación de las dos teorías:Buchner aísla un preparado
libre de células (zimasa) de levadura
17. AVANCES TÉCNICOS:
CULTIVO PURO
• Dos teorías sobre forma de microorganismos:
pleomorfismo y monomorfismo
• Su resolución dependió de cultivos puros (laboratorio
de Robert Koch)
• Medios sólidos a base de rodajas de patata
• Medios sólidos a base de gelatina
• Medios sólidos a base de agar-agar
• Petri (en el laboratorio de Koch) inventa la placa que
lleva su nombre
• Medios de enriquecimiento y medios diferenciales
(Beijerink,Winogradsky)
20. AVANCES TÉCNICOS:MICROSCOPIOS Y
TÉCNICAS DE TINCIÓN
• Koch colabora con la industria alemana del vidrio
(Schott) y pide ayuda a expertos en óptica (Abbé,
Zeiss)
• Lentes acromáticas mejoradas
• Iluminación inferior con condensador
• Objetivo de inmersión (1878)
• Koch colabora con industria química BASF:
• Tinciones para observar bacterias (azul de metileno,
fuchsina,violeta de genciana,etc),1877 y siguientes
• Ziehl y Neelsen: tinción diferencialAAR (1883)
• Hans C.Gram:tinción diferencial Gram (1884)
21. AVANCES EN MICROSCOPIOS DEBIDOS A
KOCH Y SUS COLABORADORES
Iluminación inferior
y condensador
Sección del objetivo
de inmersión
22. PAPEL DE LOS MICROORGANISMOS EN LAS
ENFERMEDADES INFECCIOSAS
• Pasteur es llamado a Provenza para resolver una
enfermedad del gusano de seda (pebrina)
• En 1869 identifica al protozoo Nosema bombycis como el
responsable
• Davaine (1863-1868): la sangre de ganado afectado por
carbunco contiene grandes cantidades de microorganismos
23. LOS MICROORGANISMOS EN LAS
ENFERMEDADES INFECCIOSAS
• Koch (1876): con su técnica de cultivo puro aísla y
propaga experimentalmente por primera vez una bacteria
patógena (la responsable del carbunco o ántrax)
• Primeras microfotografías de Bacillus anthtracis teñido con
azul de metileno
• Confirma que esta bacteria presenta una fase resistente
(endosporas)
• La enfermedad se puede reproducir experimentalmente
al re inocular bacilos a animales de laboratorio
24. POSTULADOS DE KOCH (1882)
• El agente patógeno debe estar presente en
los individuos enfermos
• El microorganismo debe poder aislarse del
huésped enfermo en cultivo puro
• El microorganismo crecido en cultivo puro,
al inocularse en animales sanos, induce en
ellos la enfermedad
• De estos animales experimentales
inoculados y ya enfermos,se puede volver a
aislar el microorganismo
25.
26. LA ESCUELA DE KOCH AGENTES
PATÓGENOS
• Cólera(1883)
• Difteria(1884)
• Tétanos (1885)
• Neumonía (1886)
• Meningitis (1887)
• Peste (1894)
• Sífilis (1905)
Robert Koch
27.
28.
29.
30. ASEPSIA,QUIMIOTERAPIA
• La introducción de anestesia (mediados siglo XIX)
trae infecciones quirúrgicas
• Lister introduce el uso del fenol y de sales de
mercurio (asepsia en quirófano)
• Paul Ehrlich:idea de las “balas mágicas”
• Colabora con industria química y descubre el salvarsán,
contra la sífilis
• “Quimioterapia”
• Domagk (1935):rojo de prontosilo contra
neumococos
• Época de las sulfamidas
31. ANTIBIOTERAPIA
• Fleming (1929): extracto crudo de penicilina (del
hongo Penicilliumnotatum)
• Chain y Florey (1940): purificación penicilina. Uso
en 2ª Guerra Mundial
• Descubrimiento estreptomicina (Waksman, 1944)
de Streptomyces griseus
• Tras la Guerra, se descubren numerosos
antibióticos, producidos sobre todo por
Actinomicetos
38. LAS BACTERIAS
•Descubiertas por Anton Van Leeuwenhoek (1674)
•Células microscópicas que se miden en micras (u)
•Mayoría presentan pared celular compuesta de
peptidoglucano (polimero de proteínas y
carbohidratos)
•Reproducción por fisión binaria (asexual)
•Material genético encontrado en plásmidos
•Algunas poseen cápsula
•Pueden formar colonias
39. CÉLULA BACTERIANA
a) Pared celular
b) Membrana celular
c) Mesosomas
d) Citoplasma o citosol
e) Ribosomas
f) Genoide o nucleoide
g) Cápsula
h) Polirribosomas
i) Espora
j) Flagelo
k) Fimbria
l) Pili
m) Inclusiones
44. • Determina forma celular
• Protege de presión osmótica
• Permite clasificación
bacteriana
• Participa en patogenicidad
• ImportanteAntigeno de
superficie
• Es blanco de antibióticos
• Contiene peptidoglicano
45. COMPOSICIÓN DE LA PARED CELULAR
• Péptidoglicano (mureína)
2 azúcares:N-acetilglucosamina y ácido N-
acetilmurámico y 4 aminoácidos: L-Alanina,D-Alanina, D-
Glutámico,Lisina ( o ácido diaminopimélico)
• Estructura
Lámina fina de cadenas de azúcares conectadas por
puentes de aminoácidos.
47. PARED CELULAR:BACTERIAS GRAM (+)Y GRAM(-)
Bacteria Gram Positivo Bacteria Gram Negativo
Pared celular simple Pared celular compleja
Capa de peptidoglucano gruesa Capa de peptidoglucano fina
No presenta capa externa de
lipopolisacáridos
Presenta capa externa de
lipopolisacáridos
Retienen cristal violeta/iodo-
color azul/violeta
Retienen safranina-color
rojo/rosado
48.
49.
50. Modelo Mosaico Fluido De
Singer y Nicholson
• Bicapa Fosfolipídica
con Proteinas
incrustadas.
• No contiene Esteroles
MEMBRANA DINAMICA
51. FUNCIONES
• Permeabilidad selectiva y Transporte
de Solutos.
- Difusión facilitada.
- Transporte dependiente de
union a Proteinas
- Transporte quimiosmótico
- Traslocación de grupo
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54.
55. FLAGELO
• Apéndice locomotor de las bacterias. Son filamentos largos,
huecos y helicoidales que suelen tener longitud varias veces
mayor que la propia célula. Su diámetro es de 12-20 nm.
Longitud 1-70 µ.
• Está compuesto por flagelina,la cual se sintetiza en el
ribosoma ( flagelosoma)
• Los bacilos son los que poseen flagelos
• La movilidad bacteriana está controlada por un proceso
denominado quimiotaxis
57. Localización y número de flagelos
para distinguir a las bacterias.
◼ Monotrico - único flagelo polar
◼ Anfitrico – un flagelo en cada
extremo de cuerpo bacteriano
◼ Lofotrico – flagelos agrupados en un
extremo del cuerpo bacteriano
◼ Peritrico – flagelos en todo el cuerpo
bacteriano
59. - Localiza dentro de membrana citoplasmatica
- Carece de Plástidos Autónomos :
Mitocondrias y Cloroplastos
- Carece de retículo Endoplásmico y aparato reticular de Golgi
Presentan :
a) Gránulos de reserva
- Poli ß Hidroxibutírico (Fuente de C.)
- Volutina o Metacromatico (Fuente de Fosfato)
- Glicógeno
30s – 16s + 21 Proteina
b) Ribosoma 70 S 26s
(35%) 50s + 32 Proteinas
5s