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INTRO D UCC IÓ N A LA
MICROBIOLOGÍA
CLINICA
MSc. LUIS LLOJA LOZANO
DEFINICIÓN DE
MICROBIOLOGÍA
• Ciencia que estudia los seres vivos que no se pueden ver a
simple vista (organismos microscópicos)
• Definición implica que su objeto de estudio está
determinado por la metodología:
• Microscopio
• Técnicas de cultivo puro en laboratorio
FASES EN LA HISTORIA DE LA
MICROBIOLOGÍA
1. Periodo especulativo (desde la antigüedad
hasta primeros microscopios)
2. Primeros microscopistas (1675 -mediados del
s.XIX)
3. Cultivo de microorganismos (hasta finales del
siglo XIX)
4. Hasta nuestros días:multitud de enfoques en
el estudio microbiano.Ciencias“emancipadas”
(Virología,Inmunología)
FASES DE LA HISTORIA DE LA
MICROBIOLOGIA
PERIODO ESPECULATIVO
• La humanidad conoce las actividades microbianas sin saber
nada de los microorganismos:
• Enfermedades infecciosas
• “miasmas”
• Lucrecio (s.I a.C.):“semillas de enfermedad”
• Frascatorius (1546):gérmenes vivos
• Alimentos y bebidas fermentados (queso,leches fermentadas,vino,
cerveza,etc)
PRIMEROS MICROSCOPISTAS
• Antonij van Leeuwenhoek:
• Microscopio simple
• Descubrimiento de los
microorganismos (“animálculos”
en gota de estanque,1675)
• Describe bacterias (1683)
• Describe protozoos
Microscopio simple
de Leeuwenhoek
Primeros
dibujos de
bacterias
(Leeuwenhoek,
1683)
Microscopio
compuesto de
Robert Hooke
LAS GRANDES
CONTROVERSIAS DEL
SIGLO X I X Y SU
RESOLUCIÓN
EL DEBATE SOBRE LA GENERACIÓN
ESPONTÁNEA
• Ideas asumidas desdeAristóteles
• Redi (1668):experimentos que descartan la
generación espontánea de animales
• “Omne vivo ex ovo”
• Pero aún no se acepta“Omne vivo ex vivo”
• La disputa entre Spallanzani y Needham
• Los experimentos se interpretan erróneamente
(Needham) como que al calentar los frascos el aire pierde
su“fuerzavital”(vitalismo)
PASTEUR ZANJA LA POLÉMICA SOBRE LA
GENERACIÓN ESPONTÁNEA
• Experimentos con frascos abiertos al aire dotados de largos
cuellos curvados (“cuellos de cisne”).
• Una vez llevados aebullición,no aparecen microorganismos si el
frasco no se mueve
• Aparecen microorganismos si el líquido alcanza el cuello curvo
• “Trampas” para capturar microorganismos
TERCER PERIODO DE LA
MICROBIOLOGIA MEDICA
• Dos teorías sobre el origen de las fermentaciones:química y
biológica
• Pasteur (1857) es llamado a resolver un problema de las
destilerías de Lille
• 1857:bacterias que producen fermentación láctica
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• Descubre la fermentación butírica y la vida en ausencia
de aire (anaerobiosis)
• Reconciliación de las dos teorías:Buchner aísla un preparado
libre de células (zimasa) de levadura
TERCER PERIODO DE LA MICROBIOLOGIA
AVANCES TÉCNICOS:
CULTIVO PURO
• Dos teorías sobre forma de microorganismos:
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• Su resolución dependió de cultivos puros (laboratorio
de Robert Koch)
• Medios sólidos a base de rodajas de patata
• Medios sólidos a base de gelatina
• Medios sólidos a base de agar-agar
• Petri (en el laboratorio de Koch) inventa la placa que
lleva su nombre
• Medios de enriquecimiento y medios diferenciales
(Beijerink,Winogradsky)
ROBERT KOCH
AVANCES TÉCNICOS:MICROSCOPIOS Y
TÉCNICAS DE TINCIÓN
• Koch colabora con la industria alemana del vidrio
(Schott) y pide ayuda a expertos en óptica (Abbé,
Zeiss)
• Lentes acromáticas mejoradas
• Iluminación inferior con condensador
• Objetivo de inmersión (1878)
• Koch colabora con industria química BASF:
• Tinciones para observar bacterias (azul de metileno,
fuchsina,violeta de genciana,etc),1877 y siguientes
• Ziehl y Neelsen: tinción diferencialAAR (1883)
• Hans C.Gram:tinción diferencial Gram (1884)
AVANCES EN MICROSCOPIOS DEBIDOS A
KOCH Y SUS COLABORADORES
Iluminación inferior
y condensador
Sección del objetivo
de inmersión
PAPEL DE LOS MICROORGANISMOS EN LAS
ENFERMEDADES INFECCIOSAS
• Pasteur es llamado a Provenza para resolver una
enfermedad del gusano de seda (pebrina)
• En 1869 identifica al protozoo Nosema bombycis como el
responsable
• Davaine (1863-1868): la sangre de ganado afectado por
carbunco contiene grandes cantidades de microorganismos
LOS MICROORGANISMOS EN LAS
ENFERMEDADES INFECCIOSAS
• Koch (1876): con su técnica de cultivo puro aísla y
propaga experimentalmente por primera vez una bacteria
patógena (la responsable del carbunco o ántrax)
• Primeras microfotografías de Bacillus anthtracis teñido con
azul de metileno
• Confirma que esta bacteria presenta una fase resistente
(endosporas)
• La enfermedad se puede reproducir experimentalmente
al re inocular bacilos a animales de laboratorio
POSTULADOS DE KOCH (1882)
• El agente patógeno debe estar presente en
los individuos enfermos
• El microorganismo debe poder aislarse del
huésped enfermo en cultivo puro
• El microorganismo crecido en cultivo puro,
al inocularse en animales sanos, induce en
ellos la enfermedad
• De estos animales experimentales
inoculados y ya enfermos,se puede volver a
aislar el microorganismo
LA ESCUELA DE KOCH AGENTES
PATÓGENOS
• Cólera(1883)
• Difteria(1884)
• Tétanos (1885)
• Neumonía (1886)
• Meningitis (1887)
• Peste (1894)
• Sífilis (1905)
Robert Koch
ASEPSIA,QUIMIOTERAPIA
• La introducción de anestesia (mediados siglo XIX)
trae infecciones quirúrgicas
• Lister introduce el uso del fenol y de sales de
mercurio (asepsia en quirófano)
• Paul Ehrlich:idea de las “balas mágicas”
• Colabora con industria química y descubre el salvarsán,
contra la sífilis
• “Quimioterapia”
• Domagk (1935):rojo de prontosilo contra
neumococos
• Época de las sulfamidas
ANTIBIOTERAPIA
• Fleming (1929): extracto crudo de penicilina (del
hongo Penicilliumnotatum)
• Chain y Florey (1940): purificación penicilina. Uso
en 2ª Guerra Mundial
• Descubrimiento estreptomicina (Waksman, 1944)
de Streptomyces griseus
• Tras la Guerra, se descubren numerosos
antibióticos, producidos sobre todo por
Actinomicetos
ESTRUCTURA
BACTERIANA
LAS BACTERIAS
•Descubiertas por Anton Van Leeuwenhoek (1674)
•Células microscópicas que se miden en micras (u)
•Mayoría presentan pared celular compuesta de
peptidoglucano (polimero de proteínas y
carbohidratos)
•Reproducción por fisión binaria (asexual)
•Material genético encontrado en plásmidos
•Algunas poseen cápsula
•Pueden formar colonias
CÉLULA BACTERIANA
a) Pared celular
b) Membrana celular
c) Mesosomas
d) Citoplasma o citosol
e) Ribosomas
f) Genoide o nucleoide
g) Cápsula
h) Polirribosomas
i) Espora
j) Flagelo
k) Fimbria
l) Pili
m) Inclusiones
Bacterias
AGRUPACIONES BACTERIANAS
• Determina forma celular
• Protege de presión osmótica
• Permite clasificación
bacteriana
• Participa en patogenicidad
• ImportanteAntigeno de
superficie
• Es blanco de antibióticos
• Contiene peptidoglicano
COMPOSICIÓN DE LA PARED CELULAR
• Péptidoglicano (mureína)
2 azúcares:N-acetilglucosamina y ácido N-
acetilmurámico y 4 aminoácidos: L-Alanina,D-Alanina, D-
Glutámico,Lisina ( o ácido diaminopimélico)
• Estructura
Lámina fina de cadenas de azúcares conectadas por
puentes de aminoácidos.
TINCIÓN DE GRAM
PARED CELULAR:BACTERIAS GRAM (+)Y GRAM(-)
Bacteria Gram Positivo Bacteria Gram Negativo
Pared celular simple Pared celular compleja
Capa de peptidoglucano gruesa Capa de peptidoglucano fina
No presenta capa externa de
lipopolisacáridos
Presenta capa externa de
lipopolisacáridos
Retienen cristal violeta/iodo-
color azul/violeta
Retienen safranina-color
rojo/rosado
Modelo Mosaico Fluido De
Singer y Nicholson
• Bicapa Fosfolipídica
con Proteinas
incrustadas.
• No contiene Esteroles
MEMBRANA DINAMICA
FUNCIONES
• Permeabilidad selectiva y Transporte
de Solutos.
- Difusión facilitada.
- Transporte dependiente de
union a Proteinas
- Transporte quimiosmótico
- Traslocación de grupo
FLAGELO
• Apéndice locomotor de las bacterias. Son filamentos largos,
huecos y helicoidales que suelen tener longitud varias veces
mayor que la propia célula. Su diámetro es de 12-20 nm.
Longitud 1-70 µ.
• Está compuesto por flagelina,la cual se sintetiza en el
ribosoma ( flagelosoma)
• Los bacilos son los que poseen flagelos
• La movilidad bacteriana está controlada por un proceso
denominado quimiotaxis
FLAGELOS
Localización y número de flagelos
para distinguir a las bacterias.
◼ Monotrico - único flagelo polar
◼ Anfitrico – un flagelo en cada
extremo de cuerpo bacteriano
◼ Lofotrico – flagelos agrupados en un
extremo del cuerpo bacteriano
◼ Peritrico – flagelos en todo el cuerpo
bacteriano
A) Monótrico B) Anfítrico
C) Lofótrico D) Perítrico
- Localiza dentro de membrana citoplasmatica
- Carece de Plástidos Autónomos :
Mitocondrias y Cloroplastos
- Carece de retículo Endoplásmico y aparato reticular de Golgi
Presentan :
a) Gránulos de reserva
- Poli ß Hidroxibutírico (Fuente de C.)
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- Glicógeno
30s – 16s + 21 Proteina
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TEMA 1. INTRODUCCION A LA MICROBIOLOGIA (1).pdf

  • 1. INTRO D UCC IÓ N A LA MICROBIOLOGÍA CLINICA MSc. LUIS LLOJA LOZANO
  • 2. DEFINICIÓN DE MICROBIOLOGÍA • Ciencia que estudia los seres vivos que no se pueden ver a simple vista (organismos microscópicos) • Definición implica que su objeto de estudio está determinado por la metodología: • Microscopio • Técnicas de cultivo puro en laboratorio
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  • 4. FASES EN LA HISTORIA DE LA MICROBIOLOGÍA 1. Periodo especulativo (desde la antigüedad hasta primeros microscopios) 2. Primeros microscopistas (1675 -mediados del s.XIX) 3. Cultivo de microorganismos (hasta finales del siglo XIX) 4. Hasta nuestros días:multitud de enfoques en el estudio microbiano.Ciencias“emancipadas” (Virología,Inmunología)
  • 5. FASES DE LA HISTORIA DE LA MICROBIOLOGIA
  • 6. PERIODO ESPECULATIVO • La humanidad conoce las actividades microbianas sin saber nada de los microorganismos: • Enfermedades infecciosas • “miasmas” • Lucrecio (s.I a.C.):“semillas de enfermedad” • Frascatorius (1546):gérmenes vivos • Alimentos y bebidas fermentados (queso,leches fermentadas,vino, cerveza,etc)
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  • 8. PRIMEROS MICROSCOPISTAS • Antonij van Leeuwenhoek: • Microscopio simple • Descubrimiento de los microorganismos (“animálculos” en gota de estanque,1675) • Describe bacterias (1683) • Describe protozoos
  • 12. LAS GRANDES CONTROVERSIAS DEL SIGLO X I X Y SU RESOLUCIÓN
  • 13. EL DEBATE SOBRE LA GENERACIÓN ESPONTÁNEA • Ideas asumidas desdeAristóteles • Redi (1668):experimentos que descartan la generación espontánea de animales • “Omne vivo ex ovo” • Pero aún no se acepta“Omne vivo ex vivo” • La disputa entre Spallanzani y Needham • Los experimentos se interpretan erróneamente (Needham) como que al calentar los frascos el aire pierde su“fuerzavital”(vitalismo)
  • 14. PASTEUR ZANJA LA POLÉMICA SOBRE LA GENERACIÓN ESPONTÁNEA • Experimentos con frascos abiertos al aire dotados de largos cuellos curvados (“cuellos de cisne”). • Una vez llevados aebullición,no aparecen microorganismos si el frasco no se mueve • Aparecen microorganismos si el líquido alcanza el cuello curvo • “Trampas” para capturar microorganismos
  • 15. TERCER PERIODO DE LA MICROBIOLOGIA MEDICA • Dos teorías sobre el origen de las fermentaciones:química y biológica • Pasteur (1857) es llamado a resolver un problema de las destilerías de Lille • 1857:bacterias que producen fermentación láctica • 1860:levaduras producen fermentacion alcohólica • Descubre la fermentación butírica y la vida en ausencia de aire (anaerobiosis) • Reconciliación de las dos teorías:Buchner aísla un preparado libre de células (zimasa) de levadura
  • 16. TERCER PERIODO DE LA MICROBIOLOGIA
  • 17. AVANCES TÉCNICOS: CULTIVO PURO • Dos teorías sobre forma de microorganismos: pleomorfismo y monomorfismo • Su resolución dependió de cultivos puros (laboratorio de Robert Koch) • Medios sólidos a base de rodajas de patata • Medios sólidos a base de gelatina • Medios sólidos a base de agar-agar • Petri (en el laboratorio de Koch) inventa la placa que lleva su nombre • Medios de enriquecimiento y medios diferenciales (Beijerink,Winogradsky)
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  • 20. AVANCES TÉCNICOS:MICROSCOPIOS Y TÉCNICAS DE TINCIÓN • Koch colabora con la industria alemana del vidrio (Schott) y pide ayuda a expertos en óptica (Abbé, Zeiss) • Lentes acromáticas mejoradas • Iluminación inferior con condensador • Objetivo de inmersión (1878) • Koch colabora con industria química BASF: • Tinciones para observar bacterias (azul de metileno, fuchsina,violeta de genciana,etc),1877 y siguientes • Ziehl y Neelsen: tinción diferencialAAR (1883) • Hans C.Gram:tinción diferencial Gram (1884)
  • 21. AVANCES EN MICROSCOPIOS DEBIDOS A KOCH Y SUS COLABORADORES Iluminación inferior y condensador Sección del objetivo de inmersión
  • 22. PAPEL DE LOS MICROORGANISMOS EN LAS ENFERMEDADES INFECCIOSAS • Pasteur es llamado a Provenza para resolver una enfermedad del gusano de seda (pebrina) • En 1869 identifica al protozoo Nosema bombycis como el responsable • Davaine (1863-1868): la sangre de ganado afectado por carbunco contiene grandes cantidades de microorganismos
  • 23. LOS MICROORGANISMOS EN LAS ENFERMEDADES INFECCIOSAS • Koch (1876): con su técnica de cultivo puro aísla y propaga experimentalmente por primera vez una bacteria patógena (la responsable del carbunco o ántrax) • Primeras microfotografías de Bacillus anthtracis teñido con azul de metileno • Confirma que esta bacteria presenta una fase resistente (endosporas) • La enfermedad se puede reproducir experimentalmente al re inocular bacilos a animales de laboratorio
  • 24. POSTULADOS DE KOCH (1882) • El agente patógeno debe estar presente en los individuos enfermos • El microorganismo debe poder aislarse del huésped enfermo en cultivo puro • El microorganismo crecido en cultivo puro, al inocularse en animales sanos, induce en ellos la enfermedad • De estos animales experimentales inoculados y ya enfermos,se puede volver a aislar el microorganismo
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  • 26. LA ESCUELA DE KOCH AGENTES PATÓGENOS • Cólera(1883) • Difteria(1884) • Tétanos (1885) • Neumonía (1886) • Meningitis (1887) • Peste (1894) • Sífilis (1905) Robert Koch
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  • 30. ASEPSIA,QUIMIOTERAPIA • La introducción de anestesia (mediados siglo XIX) trae infecciones quirúrgicas • Lister introduce el uso del fenol y de sales de mercurio (asepsia en quirófano) • Paul Ehrlich:idea de las “balas mágicas” • Colabora con industria química y descubre el salvarsán, contra la sífilis • “Quimioterapia” • Domagk (1935):rojo de prontosilo contra neumococos • Época de las sulfamidas
  • 31. ANTIBIOTERAPIA • Fleming (1929): extracto crudo de penicilina (del hongo Penicilliumnotatum) • Chain y Florey (1940): purificación penicilina. Uso en 2ª Guerra Mundial • Descubrimiento estreptomicina (Waksman, 1944) de Streptomyces griseus • Tras la Guerra, se descubren numerosos antibióticos, producidos sobre todo por Actinomicetos
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  • 38. LAS BACTERIAS •Descubiertas por Anton Van Leeuwenhoek (1674) •Células microscópicas que se miden en micras (u) •Mayoría presentan pared celular compuesta de peptidoglucano (polimero de proteínas y carbohidratos) •Reproducción por fisión binaria (asexual) •Material genético encontrado en plásmidos •Algunas poseen cápsula •Pueden formar colonias
  • 39. CÉLULA BACTERIANA a) Pared celular b) Membrana celular c) Mesosomas d) Citoplasma o citosol e) Ribosomas f) Genoide o nucleoide g) Cápsula h) Polirribosomas i) Espora j) Flagelo k) Fimbria l) Pili m) Inclusiones
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  • 44. • Determina forma celular • Protege de presión osmótica • Permite clasificación bacteriana • Participa en patogenicidad • ImportanteAntigeno de superficie • Es blanco de antibióticos • Contiene peptidoglicano
  • 45. COMPOSICIÓN DE LA PARED CELULAR • Péptidoglicano (mureína) 2 azúcares:N-acetilglucosamina y ácido N- acetilmurámico y 4 aminoácidos: L-Alanina,D-Alanina, D- Glutámico,Lisina ( o ácido diaminopimélico) • Estructura Lámina fina de cadenas de azúcares conectadas por puentes de aminoácidos.
  • 47. PARED CELULAR:BACTERIAS GRAM (+)Y GRAM(-) Bacteria Gram Positivo Bacteria Gram Negativo Pared celular simple Pared celular compleja Capa de peptidoglucano gruesa Capa de peptidoglucano fina No presenta capa externa de lipopolisacáridos Presenta capa externa de lipopolisacáridos Retienen cristal violeta/iodo- color azul/violeta Retienen safranina-color rojo/rosado
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  • 50. Modelo Mosaico Fluido De Singer y Nicholson • Bicapa Fosfolipídica con Proteinas incrustadas. • No contiene Esteroles MEMBRANA DINAMICA
  • 51. FUNCIONES • Permeabilidad selectiva y Transporte de Solutos. - Difusión facilitada. - Transporte dependiente de union a Proteinas - Transporte quimiosmótico - Traslocación de grupo
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  • 55. FLAGELO • Apéndice locomotor de las bacterias. Son filamentos largos, huecos y helicoidales que suelen tener longitud varias veces mayor que la propia célula. Su diámetro es de 12-20 nm. Longitud 1-70 µ. • Está compuesto por flagelina,la cual se sintetiza en el ribosoma ( flagelosoma) • Los bacilos son los que poseen flagelos • La movilidad bacteriana está controlada por un proceso denominado quimiotaxis
  • 57. Localización y número de flagelos para distinguir a las bacterias. ◼ Monotrico - único flagelo polar ◼ Anfitrico – un flagelo en cada extremo de cuerpo bacteriano ◼ Lofotrico – flagelos agrupados en un extremo del cuerpo bacteriano ◼ Peritrico – flagelos en todo el cuerpo bacteriano
  • 58. A) Monótrico B) Anfítrico C) Lofótrico D) Perítrico
  • 59. - Localiza dentro de membrana citoplasmatica - Carece de Plástidos Autónomos : Mitocondrias y Cloroplastos - Carece de retículo Endoplásmico y aparato reticular de Golgi Presentan : a) Gránulos de reserva - Poli ß Hidroxibutírico (Fuente de C.) - Volutina o Metacromatico (Fuente de Fosfato) - Glicógeno 30s – 16s + 21 Proteina b) Ribosoma 70 S 26s (35%) 50s + 32 Proteinas 5s