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Procedimiento e interpretación
de los coprocultivos.
Universidad Autónoma de Santo Domingo
Escuela de Microbiología y Parasitología
Practica de MIP-212
Principio de Coprocultivo
• Las infecciones entéricas constituyen una
de las consulta externas más frecuente de
emergencia y consultorios de médicos
generales y pediatras.
• Es por tanto importante para todo el
personal médicos y paramédicos conocer
los aspectos relacionados con esta, como
son: epidemiologia, etiología, fisiología,
prevención, diagnostico y tratamiento.
• La gastroenteritis es una enfermedad
caracterizada por nausea, vómitos, cólicos
abdominales, diarrea y ocasionalmente
fiebre.
• El síntoma más común es la diarrea, que
se manifiesta por un aumento en el
numero y cantidad de deposiciones al día.
Vía de transmisión
Transmisión directa Transmisión indirecta
• Las infecciones gastrointestinales, poseen dos mecanismos:
Etiología de las Infecciones Entéricas
Generalmente es de naturaleza infecciosa.
los principales agentes son:
• Virus
• Bacterias
• Parásitos
• Hongos
Relacionada a condiciones de vida
inadecuadas:
• Falta de agua potable
• Inadecuada manipulación del agua
• Eliminación inapropiada de excretas.
• Pobre nutrición.
• Ausencia de lactancia materna.
Principales Microorganismos
En la enfermedad diarreica aguda
son:
Virus
• Rotavirus (causa más frecuente en <2
años)
• Norwalk
• Calicivirus
• Adenovirus
• Astrovirus
Parásitos
• Geardia Lambia
• Entamoeba histolitica
• Cryptosporidium spp
Bacterias
• E. coli enteropatogena (ECEP)
• E. coli enterotoxigenica (ETEG
• E.coli productora de toxina shiga (STEC)
• E. coli enteroinvaciva (EIEC)
• E.coli enteroagregantes (EAEC)
• Salmonella spp
• Shigella spp
• Campylobacter spp
• Vibrio cholera
• Yersinia spp
Generalidades de la Shigella
• Su hábitat está limitada al tubo digestivo de
seres humanos.
• Dosis infectiva es de 103 microorganismos.
• Son anaerobio facultativos, pero se
multiplican mejor en condiciones aeróbicas.
• Presentan antígeno O, existen más de 40
serotipos.
Generalidades Salmonella
Existen más 2500 serotipos de salmonellas, de esta cabe destacar 4, la
salmonella paratyphi A, paratyphi B, choleraesuis y typhi.
Clasificación: El genero salmonella de divide en dos especies( Salmonella
entérica y Salmonella bongori
Sueles ser patógena en el ser humano o en animales cuando se adquiere
por vía oral.
Tipos de muestras
Procedimiento para Tomar de Muestra
de Heces
• Recolectar la
muestra al
inicio de la
enfermedad
infecciosa.
• Tomar
muestra antes
de iniciar
tratamiento
con
antimicrobian
os.
Obtener muestra por evacuación
espontanea:
• Tomar muestra en recipiente de boca ancha
estéril.
• Tomar con un hisopo una porción de las heces
recolectadas por evacuación espontanea.
• Seleccionar zona donde haya sangre, moco,
pus.
• Introducir el hisopo impregnado hasta la mitad
del medio de transporte Cary Blair.
• Rotular el recipiente con los datos del paciente,
fecha y hora de recolección.
Trasladar al
laboratorio
antes de las
2hs. De lo
contrario
inocular en
medio de
transporte.
Hisopado rectal
Esta muestra es colectada en pacientes: neonatos
y adultos en condiciones desmejoradas:
1. Humedecer hisopo de algodón con liquido
estéril o medio de transporte.
2. Introducir en el recto sobrepasando el
esfínter.
3. Rotar el hisopo para hacer la toma de la
muestra anal.
4. Dejar 10-30 segundos para absorber los
microorganismos y retirar.
5. Introducir el hisopo con la muestra en un
frasco estéril, con tapa de rosca o medio de
transporte con conservante.
6. Rotular el recipiente: Nombre completo
fecha y hora de recolección.
7. Trasladar al laboratorio antes de las 2hs. De
lo contrario inocular en medio de transporte.
Volumen de la muestra
Heces formadas
o pastosas
1-2grs.
Heces liquidas
5-10 ml.
Observaciones de la Muestra Importantes
• La muestra recolectada por
evacuación espontanea en frasco debe
ser llevada a temperatura ambiente
para ser procesada antes de las 2hs de
colección.
• El hisopado en Cary Blair no debe
refrigerarse.
• Las muestras para estudio virológico
deben enviarse sin medio de cultivo,
pues este diluye las partículas virales.
Medios y Reactivos
• -Agar Sangre (con 5% sangre de
carnero)
• Agar MacConkey
• -Agar Hektoen
• -Agar SS
• -Caldo selenito (sólo vigilancia
epidemiológica)
• -Agar TCBS (vibrio)
Procedimiento de Siembra e Incubación de la
Muestra
• 1. Sembrar muestra:
realizar emulsión de muestra,
luego colocar una asada en un
extremo de la placa, estriar por
agotamiento, sembrar en cada
una de los medios a investigar.
• La muestra formada o
pastosa se siembra directa.
4. Incubar placas de
• 18 a 24hs, por 36°C
AS HK SS Mk Mk +sol
¡Vamos a la práctica!
Interpretación de los Resultados
• Macroscopía:
• Microscopía: Bacilos Gram negativos
Colonias
convexas grises,
borde lisos,
brillantes.
Colonias verde
con puntos
negros,
circular.
Colonias claras,
circular, borde
lisos.
Colonias claras
con puntos
negros,
circular.
AS Mk HK SS
Interpretación de los Resultados
Urea:
negativa
S= positivo
I= negativa
M= positivo
Citrato:
negativo
Lisina:
positiva
Glucosa: Positiva
Lactosa: negativa
Sacarosa: negativa
H2+CO2= positivo
H2S=positivo
Bioquímica
Identificación de
microorganismo
Salmonella spp
3.Regla milimétrica
2. Comparar el valor
obtenido con la CLSI
1. Utilizar fondo negro o
oscuro para la lectura
de los discos.
Materiales necesarios para la lectura de
antibiograma (Método: difusión por disco)
Antibióticos
• Azitrhomycin
• Ceftriaxone
• Meropenem
• Cloranfenicol
• Ampicilina
• Ciprofloxacina
• Ceftazidima
• Cefepime
• Piperacilin -Tazobactam
• Imipenem
• Gentamicina
• Amikacina
• Cefoxitina
• Trimetoprim/
Sulfamethoxazole
• Amoxicilina Clavulanico
Antibiograma: Método Kirby-Bauer
(Difusión por disco)
Interpretación de los Resultados
• Macroscopía:
• Microscopía: Bacilos Gram negativos
Colonias
pequeñas grises,
borde lisos,
brillante.
Colonias verde
azuladas,
pequeñas,
borde lisos.
Colonias claras,
pequeñas, borde
lisos.
Colonias claras,
pequeñas, borde
lisos.
AS Mk HK SS
Interpretación de los Resultados
Urea:
negativa
S= negativa
I= negativa
M= negativa
Citrato:
negativo
Lisina:
negativa
Glucosa: Positiva
Lactosa: negativa
Sacarosa: negativa
H2+CO2= negativo
H2S=negativo
Bioquímica
Identificación de
microorganismo
Shigella spp
Antibióticos
• Azitrhomycin
• Ceftriaxone
• Meropenem
• Cloranfenicol
• Ampicilina
• Ciprofloxacina
• Ceftazidima
• Cefepime
• Piperacilin -Tazobactam
• Imipenem
• Gentamicina
• Amikacina
• Cefoxitina
• Trimetoprim/
Sulfamethoxazole
• Amoxicilina Clavulanico
Antibiograma: Método Kirby-Bauer
(Difusión por disco)
Referencia
Manual de Normas y Procedimientos de
Bacteriología Clínica, de la antigua Secretaria
de Salud Publica y Asistencia Social
(SESPAS). Ahora Ministerio de Salud
Publica
Procedimiento e interpretación
de los coprocultivos.
Universidad Autónoma de Santo Domingo
Escuela de Microbiología y Parasitología
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  • 1. Procedimiento e interpretación de los coprocultivos. Universidad Autónoma de Santo Domingo Escuela de Microbiología y Parasitología Practica de MIP-212
  • 2. Principio de Coprocultivo • Las infecciones entéricas constituyen una de las consulta externas más frecuente de emergencia y consultorios de médicos generales y pediatras. • Es por tanto importante para todo el personal médicos y paramédicos conocer los aspectos relacionados con esta, como son: epidemiologia, etiología, fisiología, prevención, diagnostico y tratamiento. • La gastroenteritis es una enfermedad caracterizada por nausea, vómitos, cólicos abdominales, diarrea y ocasionalmente fiebre. • El síntoma más común es la diarrea, que se manifiesta por un aumento en el numero y cantidad de deposiciones al día.
  • 3. Vía de transmisión Transmisión directa Transmisión indirecta • Las infecciones gastrointestinales, poseen dos mecanismos:
  • 4. Etiología de las Infecciones Entéricas Generalmente es de naturaleza infecciosa. los principales agentes son: • Virus • Bacterias • Parásitos • Hongos Relacionada a condiciones de vida inadecuadas: • Falta de agua potable • Inadecuada manipulación del agua • Eliminación inapropiada de excretas. • Pobre nutrición. • Ausencia de lactancia materna.
  • 5. Principales Microorganismos En la enfermedad diarreica aguda son: Virus • Rotavirus (causa más frecuente en <2 años) • Norwalk • Calicivirus • Adenovirus • Astrovirus Parásitos • Geardia Lambia • Entamoeba histolitica • Cryptosporidium spp Bacterias • E. coli enteropatogena (ECEP) • E. coli enterotoxigenica (ETEG • E.coli productora de toxina shiga (STEC) • E. coli enteroinvaciva (EIEC) • E.coli enteroagregantes (EAEC) • Salmonella spp • Shigella spp • Campylobacter spp • Vibrio cholera • Yersinia spp
  • 6. Generalidades de la Shigella • Su hábitat está limitada al tubo digestivo de seres humanos. • Dosis infectiva es de 103 microorganismos. • Son anaerobio facultativos, pero se multiplican mejor en condiciones aeróbicas. • Presentan antígeno O, existen más de 40 serotipos.
  • 7. Generalidades Salmonella Existen más 2500 serotipos de salmonellas, de esta cabe destacar 4, la salmonella paratyphi A, paratyphi B, choleraesuis y typhi. Clasificación: El genero salmonella de divide en dos especies( Salmonella entérica y Salmonella bongori Sueles ser patógena en el ser humano o en animales cuando se adquiere por vía oral.
  • 9. Procedimiento para Tomar de Muestra de Heces • Recolectar la muestra al inicio de la enfermedad infecciosa. • Tomar muestra antes de iniciar tratamiento con antimicrobian os. Obtener muestra por evacuación espontanea: • Tomar muestra en recipiente de boca ancha estéril. • Tomar con un hisopo una porción de las heces recolectadas por evacuación espontanea. • Seleccionar zona donde haya sangre, moco, pus. • Introducir el hisopo impregnado hasta la mitad del medio de transporte Cary Blair. • Rotular el recipiente con los datos del paciente, fecha y hora de recolección. Trasladar al laboratorio antes de las 2hs. De lo contrario inocular en medio de transporte.
  • 10. Hisopado rectal Esta muestra es colectada en pacientes: neonatos y adultos en condiciones desmejoradas: 1. Humedecer hisopo de algodón con liquido estéril o medio de transporte. 2. Introducir en el recto sobrepasando el esfínter. 3. Rotar el hisopo para hacer la toma de la muestra anal. 4. Dejar 10-30 segundos para absorber los microorganismos y retirar. 5. Introducir el hisopo con la muestra en un frasco estéril, con tapa de rosca o medio de transporte con conservante. 6. Rotular el recipiente: Nombre completo fecha y hora de recolección. 7. Trasladar al laboratorio antes de las 2hs. De lo contrario inocular en medio de transporte.
  • 11. Volumen de la muestra Heces formadas o pastosas 1-2grs. Heces liquidas 5-10 ml.
  • 12. Observaciones de la Muestra Importantes • La muestra recolectada por evacuación espontanea en frasco debe ser llevada a temperatura ambiente para ser procesada antes de las 2hs de colección. • El hisopado en Cary Blair no debe refrigerarse. • Las muestras para estudio virológico deben enviarse sin medio de cultivo, pues este diluye las partículas virales.
  • 13. Medios y Reactivos • -Agar Sangre (con 5% sangre de carnero) • Agar MacConkey • -Agar Hektoen • -Agar SS • -Caldo selenito (sólo vigilancia epidemiológica) • -Agar TCBS (vibrio)
  • 14. Procedimiento de Siembra e Incubación de la Muestra • 1. Sembrar muestra: realizar emulsión de muestra, luego colocar una asada en un extremo de la placa, estriar por agotamiento, sembrar en cada una de los medios a investigar. • La muestra formada o pastosa se siembra directa. 4. Incubar placas de • 18 a 24hs, por 36°C AS HK SS Mk Mk +sol
  • 15. ¡Vamos a la práctica!
  • 16. Interpretación de los Resultados • Macroscopía: • Microscopía: Bacilos Gram negativos Colonias convexas grises, borde lisos, brillantes. Colonias verde con puntos negros, circular. Colonias claras, circular, borde lisos. Colonias claras con puntos negros, circular. AS Mk HK SS
  • 17. Interpretación de los Resultados Urea: negativa S= positivo I= negativa M= positivo Citrato: negativo Lisina: positiva Glucosa: Positiva Lactosa: negativa Sacarosa: negativa H2+CO2= positivo H2S=positivo Bioquímica Identificación de microorganismo Salmonella spp
  • 18. 3.Regla milimétrica 2. Comparar el valor obtenido con la CLSI 1. Utilizar fondo negro o oscuro para la lectura de los discos. Materiales necesarios para la lectura de antibiograma (Método: difusión por disco)
  • 19. Antibióticos • Azitrhomycin • Ceftriaxone • Meropenem • Cloranfenicol • Ampicilina • Ciprofloxacina • Ceftazidima • Cefepime • Piperacilin -Tazobactam • Imipenem • Gentamicina • Amikacina • Cefoxitina • Trimetoprim/ Sulfamethoxazole • Amoxicilina Clavulanico Antibiograma: Método Kirby-Bauer (Difusión por disco)
  • 20. Interpretación de los Resultados • Macroscopía: • Microscopía: Bacilos Gram negativos Colonias pequeñas grises, borde lisos, brillante. Colonias verde azuladas, pequeñas, borde lisos. Colonias claras, pequeñas, borde lisos. Colonias claras, pequeñas, borde lisos. AS Mk HK SS
  • 21. Interpretación de los Resultados Urea: negativa S= negativa I= negativa M= negativa Citrato: negativo Lisina: negativa Glucosa: Positiva Lactosa: negativa Sacarosa: negativa H2+CO2= negativo H2S=negativo Bioquímica Identificación de microorganismo Shigella spp
  • 22. Antibióticos • Azitrhomycin • Ceftriaxone • Meropenem • Cloranfenicol • Ampicilina • Ciprofloxacina • Ceftazidima • Cefepime • Piperacilin -Tazobactam • Imipenem • Gentamicina • Amikacina • Cefoxitina • Trimetoprim/ Sulfamethoxazole • Amoxicilina Clavulanico Antibiograma: Método Kirby-Bauer (Difusión por disco)
  • 23. Referencia Manual de Normas y Procedimientos de Bacteriología Clínica, de la antigua Secretaria de Salud Publica y Asistencia Social (SESPAS). Ahora Ministerio de Salud Publica
  • 24. Procedimiento e interpretación de los coprocultivos. Universidad Autónoma de Santo Domingo Escuela de Microbiología y Parasitología Practica de MIP-212