MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA CLINICA UNIVERSIDAD

1. LICENCIATURA EN ENFERMERIA
L.Q.C.
Lic.
Mtro.
T.S.E.
MICROBIOLOGIA Y
PARASITOLOGIA
SAMUEL OLIVER
ALVAREZ ORTIZ

2. ENCUADRE
EXAMEN
30%
TAREAS , ACTIVIDADES
30%
EXPOSICIONES INDIVIDUAL Y
EQUIPO
20%
TRABAJO FINAL
20%

3. HOJA DE PRESENTACION
UNIVERSIDAD POPULAR
AUTONOMA DE VERACRUZ
SEDE CATEMACO, VERACRUZ
LICENCIATURA EN ENFERMERIA
3ER SEMESTRE
MATERIA:
DOCENTE:
ALUMNO:
SEMESTRE
SECCION
NO. PRACTICA
NOMBRE DE LA PRACTICA
FECHA DE ENTREGA
VO.BO
CATEMACO,VER 8 DE SEP 2023.

4. REPORTES PARA PRACTICA
• ORDEN PARA ENTREGA DE PRACTICA
INTRODUCCION
OBJETIVOS
DIAGRAMA DEL
PROCEDIMIENTO,
METODOLOGIA
RESULTADOS
CONCLUSIONES
IMAGENES DE LA
PRACTICA

5. MICROBIOLOGIA

6. ¿Qué es la microbiología?
• Estudio de los organismos microscópicos
• 3 palabras griegas: mikros (pequeño), bios (vida) y logos (ciencia)
estudio de la vida microscópica
• Surgió como ciencia tras el descubrimiento y perfeccionamiento del
microscopio.

7. ¿Qué son los microorganismos?
• Organismos que no pueden ser observados a simple vista, al menos
en parte de su ciclo.
• Organismos que viven como células aisladas o entidades que
contienen ácidos nucleicos capaces de replicarse, por lo menos en
parte de su ciclo.
• Incluidos: algas, hongos, protozoarios, bacterias y virus.

8. ¿Cómo afectan nuestra vida?
• Diversos tipos de microorganismos son causantes de enfermedades y
abundan casi en cualquier lugar por lo que permanentemente
estamos expuestos a un contagio.
• Pueden afectarnos en el aspecto económico ya que le producen
enfermedades a los animales y a las plantas dañando las cosechas y
las clases de ganados y otros animales domésticos que sirven como
fuente de alimento.

9. Ramas de la Microbiología

10. Epidemias
• Descritas a lo largo de toda la historia de la humanidad.
• Atribuidas en la antigüedad a hechizos o magia.
• SIN EXPLICACIÓN HASTA EL SIGLO XVII.

11. Anton van Leeuwenhoek
(1632-1723)
• Pionero en descubrimientos sobre los protozoos, los glóbulos rojos de la
sangre, el sistema de capilares y los ciclos vitales de los insectos.
• Construyó como entretenimiento diminutas lentes biconvexas montadas
sobre platinas de latón, que se sostenían muy cerca del ojo. A través de
ellos podía observar objetos, que montaba sobre la cabeza de un alfiler,
ampliándolos hasta trescientas veces.
• Otros: red de capilares (de Malpighi), glóbulos rojos, protozoos y
bacterias en agua “animáculos” y espermatozoides de insectos y
humanos.
• Demostró los huevos de gorgojos, pulgas y mejillones y que estos no
surgían espontáneamente a partir de granos de trigo y arena.
• Describió el ciclo vital de las hormigas mostrando que las larvas y pupas
proceden de huevos, examinó plantas y tejidos musculares, y describió tres
tipos de bacterias: bacilos, cocos y espirilos.
• Mantuvo en secreto el arte de construir sus lentes, por lo que no se
realizaron nuevas observaciones de bacterias hasta que se desarrolló el
microscopio compuesto en el siglo XIX.

12. Anton van Leeuwenhoek
(1632-1723)
Sus primeros dibujos fueron publicados en 1684

13. Robert Hooke (1635-1702)

15. Lazzaro Spallanzani (1729-1799)

16. Robert Koch (1843-1910)
• Iniciador de la bacteriología médica moderna. Estudió
botánica, física y matemáticas y MEDICINA.
• Otros intereses: arqueología, antropología, las enfermedades
ocupacionales, como el envenenamiento por plomo, y la
bacteriología.

17. Robert Koch (1843-1910)
• En 1870 demostró que el carbunco infeccioso o ántrax sólo se desarrollaba
en los ratones cuando el material inyectado en su torrente sanguíneo
contenía bastones o esporas viables del Bacillus anthracis.
• Mostró cómo trabajar con dichos microorganismos, cómo obtenerlos a
partir de animales infectados, cómo cultivarlos artificialmente y cómo
destruirlos.
• En 1881 dio a conocer sus estudios sobre la tuberculosis y al año siguiente
anunció que había aislado el bacilo responsable de la enfermedad.
• Después se dedicó al estudio del cólera, que en 1883 había alcanzado
niveles de epidemia en la India. Identificó al bacilo causante y descubrió que
era transmitido a los seres humanos sobre todo a través del agua.
• Más tarde viajó a África, donde estudió las causas de las enfermedades
transmitidas por insectos.
• Desde 1891 fue director del Instituto de Enfermedades Infecciosas de Berlín
creado para la investigación médica hasta su jubilación en 1904.
• En 1905 obtuvo el Premio Nobel de Fisiología y Medicina. Murió el 27 de
mayo de 1910 en el balneario alemán de Baden-Baden.

18. Postulados de Koch

19. Postulados moleculares de Koch: 1980

20. Louis Pasteur (1822-1895)
• Químico y biólogo francés que fundó la ciencia
de la microbiología.
• Comenzó investigando los procesos de
fermentación del vino y la cerveza y descubrió la
existencia de las bacterias que interferían en
este proceso.
• En 1861 introdujo los términos de aeróbico y
anaeróbico, según las características de
crecimiento de las levaduras.
• Aplicó sus conclusiones al estudio de la causa y
el desarrollo de las enfermedades y demostró la
teoría de los gérmenes como causantes de las
mismas.
• Introdujo el término “virus” sin hacer distinción y
“vacuna” en honor a Jenner
• Desarrolló vacunas que consiguieron salvar miles
de vidas: cólera aviar, antrax y rabia

21. Ferdinand Julius Cohn (1828-1898)
• Considerado fundador de la microbiología moderna y padre de la
bacteriología.
• En 1872 propuso la clasificación de las bacterias: género, especie y
variedades.
• Describió otros microorganismos patógenos transmitidos por agua
contaminada, distintos al V. cholerae

22. Otros eventos importantes del siglo XIX
• 1878: Joseph Lister publica sus estudios sobre la fermentación de la
leche Bacterium lactis
• 1879: Albert Neisser identifica al agente causal de la gonorrea
• 1880: Alphonse Laverin encuentra al parásito de la malaria en
glóbulos rojos.
• 1881: Paul Erlich utiliza el azul de metileno

23. Siglo XX
• Aerobiosis y anaerobiosis
• En 1938 se observaron por primera vez los virus gracias a la
invención del microscopio electrónico.
• En las décadas de 1960 y 1970 se descubrieron numerosos
virus y se determinaron sus características físicas y químicas.
• Diversas técnicas innovadoras: microscopio electrónico de
barrido o las técnicas de secuenciación del ácido
desoxirribonucleico (ADN).
• Descubrimiento de los priones por Stanley Prusiner y su
equipo en 1982 ha abierto una vía de estudio dentro de la
microbiología (simples proteínas desprovistas de material
genético)
• En 1988 Kary Mullis utiliza la enzima de Thermus aquaticus
para estabilizar la PCR (premio Nobel en 1993)

24. Alexander Fleming (1881-1955)
• Descubrió que algunas
colonias crecidas de S.
aureus eran destruidas por
el crecimiento del hongo
Penicillium
• Realizó la extracción del
compuesto activo:
penicilina

25. Karl Woese (1928-

26. Por análisis de rARN 16S

27. Microscopios
• Ojo humano 0.2 mm.
• Microscopio óptico, resolución
máxima 0.2 micras (1 micra).
• Microscopio electrónico,
resolución máxima 0.5nm

28. Microscopios

29. Microscopios

30. Ejemplo: Staphylococcus aureus

31. HISTORIA DE LA
MICROBIOLOGIA

32. QUE ES LO QUE ESTUDIA LA
MICROBIOLOGIA
• La microbiología es una rama de las ciencias que se encarga de
estudiar los diferentes tipos de microorganismos ya sean procariotas
o eucariotas. Estudia, analiza y realiza una descripción de los
diferentes tipos de microorganismos que existen en el planeta, la
forma en la que éstos funcionan y la forma en la que viven y se
desarrollan.

33. QUE ES LA MICROBIOLOGIA Y SU
IMPORTANCIA
Es una rama de la biología que se enfoca en el estudio de los microorganismos,
incluyendo bacterias, virus, hongos y protozoos. Esta disciplina se dedica a la
clasificación, descripción, distribución y análisis de las formas de vida y
funcionamiento de estos organismos. La microbiología también estudia la forma en
que los microorganismos interactúan con su entorno y con otros organismos.
• Esta disciplina es importante porque nos ayuda a comprender cómo estos
organismos interactúan con su entorno y con otros seres vivos. Además, la
microbiología tiene aplicaciones en una amplia variedad de campos, como la
medicina, la agricultura, la industria alimentaria y la biotecnología.
• En el ámbito de la salud, la microbiología es fundamental para el diagnóstico y
tratamiento de enfermedades infecciosas causadas por microorganismos patógenos.
Los microbiólogos también estudian cómo los microorganismos pueden ser
utilizados para producir medicamentos y vacunas.

40. Clasificacion de los
Microorganismos
«Patógenos»
CAPITULO 2
MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA CLINICA
11 – 22 A RODRIGUEZ TORRES.

41. ¿Cuáles son los principales microorganismos?
Categorías de microorganismos
ü De acuerdo al tipo de células que los conforma, los microorganis
mos pueden ser procariontes o eucariontes.
ü Las bacterias son procariontes, y los hongos y protozoos son euca
riontes.
ü Los virus son considerados como “organismos al límite de la vida
” ya que no poseen estructura celular, sino que son parásitos intra
celulares obligados.

43. ü Categorías de microorganismos
Sin embargo, la mayoría de los microorganismos
son benéficos. Por ejemplo, lo son los microorganismos saprófito
s de la flora intestinal o los descomponedores de un ecosistema
Llamaremos microorganismo patógeno todo aquel que se
a capaz de provocar enfermedades infecciosas en el hosp
edero.
Los microorganismos nosocomiales son una categoría de patógenos
responsables de las
infecciones intrahospitalarias.

44. ü Las bacterias son procariontes unicelul
ares con un tamaño que fluctúa entre 0
,3 y 5 μm.
BACTERIAS
ü Algunas utilizan flagelos para moverse, y en un ambiente favorable se re
producen muy rápidamente por un mecanismo asexual denominado fisi
ón binaria.
ü Su capacidad de adaptación y patogenicidad está ligada a procesos que a
umentan su variabilidad genética, como las mutaciones y recombinacion
es genéticas.
ü La mayoría presenta una pared celular compuesta de Peptidoglicanos
.

45. BACTERIAS

46. Criterios de clasificación
Las bacterias se clasifican según distintos criterios; algunos de los
cuales son:
a. Según su forma. Se reconocen tres tipos fundamentales:
Cocos: esferas que son más
resistentes a la desecación. En
la foto, Staphylococcus aureus, un
peligroso patógeno nosocomial.

47. Criterios de clasificación
Las bacterias se clasifican según distintos criterios; algunos de los
cuales son:
a. Según su forma. Se reconocen tres tipos fundamentales:
Bacilos: formas alargadas
que tienen una mayor área
de superficie para absorber
nutrientes, EJ: Legionella
Pneumophila.

48. Criterios de clasificación
Las bacterias se clasifican según distintos criterios; algunos de los
cuales son:
a. Según su forma. Se reconocen tres tipos fundamentales:
Espirilos: hélices que pueden
moverse con mayor facilidad en
los fluidos. Ej: Spirillum
minor, transmitido por la
mordedura de ratas

49. b. Según el lugar de residencia de las bacterias en el hospedero.
ü Bacterias intracelulares facultativas: se multiplican en el medio extra
celular y escapan a los mecanismos de defensa escondiéndose dentro de las
células.
ü Bacterias intracelulares obligadas: solo pueden vivir y multiplicarse de
ntro de las células del hospedero.
ü Bacterias extracelulares: solo viven y se multiplican en el espacio interc
elular del tejido conjuntivo, vías respiratorias, intestinal y sangre.
El tipo de respuesta inmunitaria empleada para eliminar a las bacteria
s dependerá de dónde estas se alojen.

50. ü Las diferencias en la organización de la pared celular de distintos tipos bact
erianos queda en evidencia al emplear la tinción de Gram.
ü La pared celular de las bacterias Gram positivas se tiñe de violeta con la tin
ción,
ü bacterias Gram negativas no se tiñen y se ven rosadas.
c. Según la reacción de su pared celular con la tinción de Gram

51. Bacterias Gram positivas:
tienen sobre su membrana
plasmática una gruesa capa de
Peptidoglicano
Bacterias Gram negativas:
presentan sobre su membrana
plasmática una delgada pared
celular de peptidoglicano y sobre
ella una membrana plasmática
externa.

54. Protozoos
Son unicelulares eucariontes que se mo
vilizan con seudópodos,
flagelos o cilios.
Algunas de las múltiples especies que ex
isten infectan al ser humano en calidad
de comensales (+,0), o bien, como parás
itos (+,-)
Estos últimos pueden provocar enferme
dad, entre ellos están ciertas amebas qu
e invaden el intestino, causando amebia
sis; flagelados, como el Trypanosoma cr
uzi, causante de la enfermedad de Chaga
s.y

55. ü Hongos
• Son organismos eucariontes que se reproducen de forma sexual
y asexual mediante esporas.
• Existen cerca de 70.000 mil especies , de las cuales cerca de 300
están relacionadas con infecciones en el ser humano.
• Las enfermedades por hongos en individuos sanos no son peligr
osas; un ejemplo de ello es el llamado pie de atleta, que afecta
a muchos jóvenes que usan zapatillas y mantienen los pies en es
e ambiente húmedo.

57. Algunos hongos pueden poner
en peligro la vida, si el sistema i
nmune del hospedero se encue
ntra deprimido, si presenta una
flora bacteriana alterada, si est
á sometido a quimioterapia o p
adece inmunodeficiencias cong
énitas o adquiridas (SIDA), se d
enominan patógenos oportuni
stas.
ü Hongos

58. VIRUS
ü Son parásitos obligados, pues necesitan usar la m
aquinaria celular para sintetizar los ácidos nucleic
os y las proteínas que los conforman y para lograr
reproducirse.
ü Pueden afectar a bacterias, plantas y animales pa
ra lograr su objetivo y por esto son responsables
de una gran cantidad de enfermedades.

59. ü Los virus están formados por una o dos hebra
s de ADN o de ARN, rodeados por una cápsid
e y por un manto.
ü Contienen las enzimas necesarias para copiar
su material genético y para ensamblar las nue
vas partículas virales.

61. Estructura general de un virus.
ü El ciclo replicativo de los virus comprende el ingreso de su material
genético y enzimas a la célula, a través de su unión a receptores cel
ulares.
ü Si es un virus ADN, el ácido nucleico ingresa directamente al núcleo
.
ü Si es un virus ARN, se puede copiar en una hebra de ADN mediant
e su enzima, la transcriptasa reversa, proteasa e integrasa.
ü Ya instalado en el núcleo, el ácido nucleico es transcrito por enzima
s del hospedero, traducido en los ribosomas y ensamblado en el cit
oplasma de la célula que lo alberga.

62. Estructura general de un virus.
ü De esta manera se obtienen millones de copias del virus que pueden lisar l
a célula para salir a infectar otras células cercanas.
ü Este mecanismo corresponde al ciclo lítico.
Otros virus con material genético de ARN se replican en el citoplasma sin ingr
esar su genoma al ADN.
ü En otras ocasiones, los virus pueden permanecer latentes en ella por largos
períodos de tiempo.
ü En animales, y tal vez en plantas, esta situación puede conducir a la transfor
mación maligna celular originando un cáncer.

65. ü Priones
Los priones son proteínas que normalmente están en algunos teji
dos, pero cuya estructura está alterada y se han vuelto infecciosas.
ü Resistentes a la esterilización y a las proteasas.
ü Inducen la formación de más moléculas similares, a expensas d
e proteínas ya existentes.
ü Se acumulan en las células, especialmente en las neuronas, dest
ruyéndolas.
.

66. Tinción de Gram

67. ¿Qué es la
tinción de Gram?
La tinción de Gram es una prueba que busca
bacterias en una parte del cuerpo donde se s
ospecha una infección o en ciertos fluidos cor
porales, como la sangre o la orina. Esto incluy
e la garganta, los pulmones, los genitales y les
iones en la piel

68. ¿Para qué se usa la tinción de Gram?
• Se usa para buscar la presencia de
bacterias en muestras de tejido
caracterizado como Gram positivas
o Gram Negativas en base a la
propiedades químicas y físicas de
sus de sus paredes celulares
¿EN QUÉ MICROORGANISMOS
PODEMOS UTILIZAR LA TÉCNICA DE
GRAM?
La tinción de Gram es un tipo de tinción que se realiz
a sobre las bacterias para observarlas mejor bajo el
microscopio. Según la distribución del peptidoglicano
de la pared celular que las envuelve, se tiñen de una
forma u otra. Así, las bacterias que no se tiñen media
nte esta técnica se denominan Gram negativas.

69. La tinción de Gram es una
técnica muy sencilla que se
basa en el uso de un
colorante que permite
observar las bacterias mejor
que bajo el microscopio.

70. ¿Quién Fue el
creador de la tinción
de Gram?
La tinción de Gram se llama así por el científico
Danés Hans Christian Gram quien desarrollo la
técnica en 1884 como una técnica para disting
uir entre dos tipos de bacterias con síntomas cl
ínicos similares: las bacterias Streptococcus
pneumoniae (neumococo) y la klebsiella
pneumoniae
Su Fundamento Se basa en las caract
erísticas de la pared celular presente
en las bacterias la cual posee propied
ades diferentes.

71. Bacterias gran positivas:
ü Las bacterias Gram positivas se clasifican por el color que a
dquieren después de aplicarles un proceso químico deno
minado tinción de Gram.
ü Las bacterias Gram positivas se tiñen de azul cuando se les
aplica dicha tinción.
Todas las bacterias se pueden clasificar en una de las tres form
as básicas:
Ø Esferas (cocos),
Ø Bastones (bacilos)
Ø Espirales o hélices (espiroquetas).
Los bacilos Gram positivos causan ciertas infeccione
s, incluidas las siguientes:
• Carbunco
• Difteria
• Infecciones por enterococos
• Erisipelotricosis
• Listeriosis
Los cocos Gram positivos causan ciertas infecciones, incluidas l
as siguientes:
• Infecciones neumocócicas
• Infecciones por Staphylococcus aureus
• Infecciones por estreptococo
• Síndrome de choque (shock) tóxico
Las bacterias Gram positivas son cada vez más resistentes a los
antibióticos.

72. Bacterias Gram negativas:
Ø Las bacterias Gram negativas se clasifican por el color que a
dquieren después de aplicarles un proceso químico denomi
nado tinción de Gram.
Ø Las bacterias Gram negativas se tiñen de rojo cuando se util
iza este proceso.
Ø Las bacterias Gram negativas están encerradas en una cáps
ula protectora.
Esta cápsula ayuda a evitar que los glóbulos blancos (que comb
aten las infecciones) ingieran las bacterias. Bajo la cápsula, las
bacterias Gram negativas tienen una membrana externa que la
s protege contra ciertos antibióticos, como la penicilina.
Las infecciones por bacterias Gram negativas comprenden las s
iguientes:
• Brucelosis
• Infecciones por Campylobacter
• Enfermedad por arañazo de gato
• Cólera
• entre otras
Las bacterias Gram negativas pueden causar muchas infeccion
es graves, como
Ø Neumonía
Ø Peritonitis
Ø Infecciones de las vías urinarias,
Ø Infecciones del torrente sanguíneo
Las bacterias Gram negativas son cada vez más resistentes a los antibi
óticos.

73. Proceso de tinción
de Gram

74. 1. Coloca la muestra en el
portaobjetos.
2. FIJA LA MUESTRA POR
CALOR.
Para que la tinción de Gram sea útil, coloca una cap
a delgada de la muestra sobre el portaobjetos. Es
recomendable una muestra que tenga menos de 24
horas, ya que las bacterias más antiguas pueden te
ner paredes celulares dañadas que responderán de
forma menos predecible a la tinción de Gram.
Ø El calor fijará las bacterias al portaobjetos de forma que no
se enjuaguen tan fácilmente durante la tinción.
Ø Pasa rápidamente el portaobjetos dos o tres veces por la lla
ma de un mechero Bunsen o caliéntalo sobre un calentador
de portaobjetos eléctrico.
Ø No lo sobrecalientes o las muestras podrían distorsionarse.
Ø Si vas a usar un mechero Bunsen, la llama debe ser un tono
pequeño y azul, no uno alto y anaranjado.

75. 3. Empapa la muestra con
cristal violeta.
Ø Usa una pipeta para empapar la muestra de la bacteria con
varias gotas de tinte cristal violeta,
Ø Espera de 30 a 60 segundos. En una solución acuosa,
el cristal violeta (CV) se disocia en CV+ e iones de.
cloruro (Cl-).
Ø Estos iones penetran a través de la pared celular y la me
mbrana celular de células tanto Gram positivas como Gra
m negativas.
Ø El ion CV+ interactúa con los componentes con carga negativa
de las células bacterianas para mancharlas de violeta. Por un
minuto.
4. ENJUAGA SUAVEMENTE EL
CRISTAL VIOLETA.
Ø Inclina el portaobjetos y usa un matraz de lavado para
rociar un pequeño chorro de agua destilada o de grifo
sobre la parte superior del portaobjetos

76. 5. Cubrir la lamina con lugol
por 1 minuto.
6. LAVAR DE NUEVO EL
PORTAOBJETOS EN EL CHORRO
DE AGUA.

77. 7. Se añade alcohol-
acetona.
8. SE AÑADE PUEDE AÑADIR
UNA TINCIÓN DE SAFRANINA O
FUCSINA.
Para desteñir las bacterias que se deben teñir con el violeta de
genciana. Es la parte más importante de la prueba, ya que si se
deja demasiado tiempo se desteñirían todas las bacterias. Des
pués se lava de nuevo con agua para eliminar el alcohol.
Para distinguir las gram negativas que aparecerán bajo el micr
oscopio (en lugar de incoloras) con un tono rosado o rojo. Lava
r con agua.

78. 9. Seca el portaobjetos.
Puedes dejar que el portaobjetos se seque con el aire o secarlo
usando papel absorbente que se venda para este propósito. La
tinción de Gram está terminada.
10. PREPARA EL
MICROSCOPIO ÓPTICO.
Coloca el portaobjetos bajo el microscopio óptico. Las bacteria
s varían en gran medida en tamaño, así que la magnificación to
tal requerida es 100x

79. Tinción de flagelos de
Leifson
Los flagelos, largos y finos apéndices de las células
bacterianas que les permiten moverse, son tan del
gados que resultan invisibles al microscopio óptico,
si no se realiza una técnica especial para su tinción.
Los distintos métodos de tinción utilizan combinaci
ones de mordientes y metales para engrosar. los fl
agelos, así como colorantes para teñirlos.

80. La tinción de flagelos de Leifson se realiza
según la siguiente técnica:
- Se fija químicamente la suspensión ba
cteriana, mediante formol, y se hace la
extensión en un portaobjetos.
- Se deja secar al aire, sin calen
tamiento alguno.
-Se cubre la preparación con u
na mezcla de ácido tánico y el
colorante rosanilina, de prepa
ración extemporánea. El ácido
tánico engruesa los flagelos
y la rosanilina los tiñe.
- Se retira el exceso de colorante con
agua.
- Se deja secar al aire, antes de su observación
al microscopio.

81. Coloración de capsula:
La tinción de cápsula es una técnica de coloración difere
ncial que tiene la propiedad de resaltar la estructura
polisacárido que rodea a ciertas bacterias y levaduras de
nominada cápsula. Se utiliza en los laboratorios clínicos
para ayudar al diagnóstico de ciertas patologías
originadas por microorganismos capsulados.
Materiales:
- Mechero o quemador de bunsen.
- Colorante tinta china.
- Asa bacteriológica.
- Alcohol etílico.
- Portaobjetos.
- Cepa klebsiella pneumoniae.

82. Procedimiento de la tinción de tinta china:
1. Limpiar el portaobjetos con una torunda humedecida
en alcohol etílico.
2. Colocar una gota pequeña de tinta china cerca del cultivo
cerca de un extremo, de un Portaobjetos limpio.
3. Hacer una suspensión de K. pneumoniae sobre la gota
de colorante.
4. Extender la suspensión sobre todo en el porta objetos.

83. 5. Dejar secar y etiquetar la preparación.
6. Observar directamente al microscopio la muestra de tinción tinta china ya una vez realizado todos los pasos.

84. Tinción de esporas
¿Qué es la tinción de esporas?
La tinción de esporas es la metodología usada para co
lorear las estructuras de resistencia que forman algun
os géneros bacterianos cuando se encuentran en con
diciones desfavorables; estas estructuras
corresponden a una forma de supervivencia.
Existen muchos géneros que forman esporas; sin embargo, los
principales son
Bacillus
es un género de bacterias en
forma de bastón y Gram
positiva.
Clostridium.
Se trata de bacilos grampositivos
, parásitas y saprofitas, algunas.
de ellas, que esporulan y son mó
viles, en general por intermedio
de flagelos peritricos

85. ¿Por qué es importante esta técnica?
Cada bacilo puede dar origen a una espora. Al momento de teñir la preparación
, la espora se puede encontrar dentro del bacilo (endospora) o fuera de este
(exospora). Con las técnicas de coloración convencionales para bacterias —
(NEGATIVAS) como la tinción de Gram— las esporas quedan incoloras.
Estas metodologías son muy varia
das; entre estas se pueden mencio
nar la técnica de:
Dorner
La tinción de Möeller
La metodología de Shaeffer–Fulton
De todas las técnicas mencionadas, la metodología de Shaeffer-Fulton es la más utilizada en lo
s laboratorios de rutina. Debe su nombre a dos microbiólogos que crearon la coloración en 19
30: Alicia Shaeffer y McDonald Fulton. Sin embargo, en ocasiones la técnica es denominada Wi
rtz-Conklin en honor a dos bacteriólogos de los años 1900.

86. Fundamento de esta coloración
Las esporas no se tiñen con las coloraciones convencionales debido
a que poseen una pared muy gruesa. La compleja composición de.
las esporas impide la entrada de la mayoría de los colorantes.
La espora es una estructura deshidratada que contiene un 15 % de
calcio y ácido dipicolínico. Por ello, la mayoría de las técnicas de col
oración de esporas se basan en la aplicación de calor para que el co
lorante pueda penetrar la gruesa estructura

87. Procedimiento para la preparación de esporas con
Verde Malaquita.
El verde de malaquita es un colorante verde q
ue permite detectar la presencia de
microorganismos con esporas. Como colorant
e de contraste, para la tinción de las células ve
getativas se utiliza la safranina.
Materiales.
Ø Portaobjeto con muestra Fijada al calor
Ø Batería de colorante. Verde de malaquita y
safra.
Ø Hisopo para flamear
Ø Pinzas Metálicas
Ø Cronómetro

88. procedimiento
1. Prepara para el trabajo de laboratorio.
2. Teñir con verde de malaquita
3.Lavar con agua para quitar el exceso de verde
de malaquita.
4.Teñir con safranina durante 1 minuto.
5. Lavar Nuevamente con agua. Siempre
hacerlo con suavidad y en posición vertical

89. 6. Secar la muestra con papel filtro.
7.Añadir una gota de aceite de inmersión para ver la muestra
en el microscopio.
8. Observar la muestra en el microscopio.

90. PARED SELULAR
MORFOLOGIA BACTERIANA
La forma de las bacterias es muy variada y, a menudo, una
misma especie adopta distintos tipos morfológicos, lo que
se conoce como pleomorfismo. De todas formas, podemos
distinguir tres tipos fundamentales de bacterias:
• Coco: de forma esférica.
• Diplococo: cocos en grupos de dos.
• Tetracoco: cocos en grupos de cuatro
• Estreptococo: cocos en cadenas.
• Estafilococo: cocos en agrupaciones irregulares o en ra
cimo.
Bacilo Los bacilos son bacterias que tienen forma de bas
tón cuando se observan al microscopio. Los bacilos se
suelen dividir en:
➢ Bacilos Gram positivos: fijan el violeta de genciana (ti
nción de Gram) en la pared celular porque carecen de ca
pa de lipopolisacárido

91. Formas helicoidales:
Vibrio: ligeramente curvados y en forma de coma, judía,
cacahuete o arriñonado
Espirilo: en forma helicoidal rígida o en forma de
tirabuzón.
Espiroqueta: en forma de tirabuzón (helicoidal flexible).
ESTRUCTURA DE LAS BACTERIAS
La estructura unicelular bacteriana suele ser bastante si
mple. Las bacterias están formadas por una única célula
sin núcleo celular y casi sin orgánulos definidos, pero
con un nucleoide (región irregular donde se halla el ADN
circular de los procariotas) y una pared celular de
peptidoglicano que recubre la célula por fuera de la me
mbrana plasmática.

92. Nucleoide:
Región nuclear o cuerpo nuclear es la región q
ue en los procariotas contiene el ADN. Esta regi
ón es de forma irregular
CITOPLASMA BACTERIANO
El citoplasma bacteriano es la masa de materia
viva delimitada por la membrana citoplásmica.
En su interior se albergan:
Cuerpos nucleares

93. EMBOLTURA BACTERIANA
La envoltura celular bacteriana comprende la
membrana citoplasmática y la pared celular m
ás una membrana externa, en el caso que esta
exista. La
mayoría de las envolturas celulares bacterianas
caen en dos categorías importantes: Gram-posi
tiva y Gram-negativa.
Comprende:
1. membrana citoplasmática
2. Pared celular
3. Capsula
Membrana citoplasmática
La membrana plasmática, membrana celular, membrana cit
oplasmática o plasmalema , es una capa o bicapa lipídica d
e fosfolípidos y otras sustancias que delimita toda la célula,
dividiendo el medio extracelular del intracelular (citoplasm
a).
1. Membrana de permeabilidad selectiva
2. Punto de síntesis de ADN, polímeros de pared y lípidos
3. Asume función de mitocondrias de la célula eucariota

94. Pared celular bacteriana
La pared celular bacteriana (PCB) es una estructura diná
mica que recubre la membrana celular y mantiene la int
egridad de la célula. Además, desempeña un importante
papel en la resistencia a los antibióticos.
PEPTIDOGLUCANO O MIREINA
El peptidoglicano o mureína constituye la estructura bási
ca de la pared celular de las bacterias y es ligeramente di
ferente en bacterias Gram-Positivas y Gram-Negativas, a
unque en ambas está formado por los mismos compone
ntes, una secuencia alternante de N-acetil-glucosamina (
NAG) y acido acetil-murámico.

95. ENBUELTA DE GRAMPOSITIVA
La pared celular Gram-positiva se caracteriza.
Por la presencia de una capa de peptidoglicano
muy gruesa, que es responsable de la
retención de los tintes violetas durante la tinci
ón de Gram. Las paredes celulares
Gram-positivas contienen unos polialcoholes d
enominados ácidos teicoicos, algunos de los
cuales se enlazan con lípidos para formar
ácidos lipoteicoicos.
APENNDICES
Flagelos: Un flagelo es un apéndice móvil con
forma de látigo presente en muchos organis
mos unicelulares y en algunas células de orga
nismos pluricelulares. Normalmente los flagel
os son usados para el movimiento, aunque al
gunos organismos pueden utilizarlos para otr
as funciones.

96. Fibrilla o pilis:
los pelos cortos que utilizan las bacterias para
adherirse a las superficies.
Pilis extracelular: Intercambio material
genético

97. • CONCLUSION
• ✓ Aprendimos como identificar y diferenciar los tipos de
tinciones que se nos presentes.
• ✓ Ahora sabemos que tipo de tinción se utiliza para cada tipo
de bacteria.
• ✓ Podremos identificar cual de los colorantes se utilizan para
cada muestra.