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REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA
MINISTERIO DEL PODER POPULAR PARA EDUCACIÓN UNIVERSITARIA
UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL “FRANCISCO DE MIRANDA”
PROGRAMAS NACIONALES DE FORMACIÓN Y MUNICIPALIZADOS
PROGRAMA CIENCIAS VETERINARIAS
PREVALENCIA DE BRUCELOSIS BOVINA EN LA FINCA
PALMASOLA, SECTOR LA PIEDRA, MUNICIPIO PÍRITU,
ESTADO FALCÓN
TUTORA:
MED. VET. DRAIDETH MIQUILENA
AUTORA:
DÍAZ Q., EURIMAR Y. (C.I. 26.598.482)
TOCÓPERO, NOVIEMBRE DE 2021
ii
AGRADECIMIENTO
Finalizando mí trabajo agradezco, a la Universidad Nacional Experimental Francisco
De Miranda por la preparación académica para poder ser una profesional y así contribuir con
el país.
A mis profesores de la universidad del programa ciencias veterinaria ya que todos
aportaron un granito de arena compartiendo sus conocimientos y enseñanzas a lo largo de mi
carrera; para llevar acabo la culminación de mis estudios
Mi agradecimiento profundo a la tutora de mi trabajo de grado, Médico
veterinario Draideth Miquilena; quien ha sido la persona que me guio desde el inicio de mi
carrera hasta el final de una manera positiva y colaboradora la cual me brindo sus aporte y
consejos profesionales que hoy en día son de gran importancia para mí.
iii
DEDICATORIA
El presente trabajo es dedicado a mi dios todopoderoso ya que todo es posible
gracias a él, a mi madre Marbelys Quero, a mi padre Heriberto Díaz, a mi hermano Elvis Díaz
y a mi novio Gustavo Maldonado que han sido mi pilar fundamental, y que de alguna manera
u otra han hecho posible que termine mis estudios en este caso mi trabajo de grado.
A mi familia también, como lo es mi abuelo Heriberto Jesús Díaz Ordoñez “tico
Díaz” que está en el cielo desde allá me cuida y me protege. Todo este esfuerzo y logro es
para él, a mi abuela Hilda mujer luchadora de 81 años que mi dios le dio la oportunidad de
verme crecer y terminar mis estudios, a mi sobrina hermosa Ivanna Díaz que con su alegría y
carisma motiva a seguir adelante, en especial primo Leonardo Jesús Córdova muy
colaborador.
Y Amigos que de alguna forma también me motivaron para que culminara mis
estudios y nunca dejara de soñar con mi profesión de Médico veterinario.
iv
REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA
MINISTERIO DEL PODER POPULAR PARA EDUCACIÓN UNIVERSITARIA
UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL “FRANCISCO DE MIRANDA”
PROGRAMAS NACIONALES DE FORMACIÓN Y MUNICIPALIZADOS
PROGRAMA CIENCIAS VETERINARIAS
PREVALENCIA DE BRUCELOSIS BOVINA EN LA FINCA PALMASOLA,
SECTOR LA PIEDRA, MUNICIPIO PÍRITU, ESTADO FALCÓN
Autora: Eurimar Y. Díaz Q.
Tutora: Med. Vet. Draideth Miquilena
Año: 2022
RESUMEN
La investigación tuvo como objetivo diagnosticar brucelosis en la población bovina de la finca
Palmasola, sector la Piedra, mediante la prueba de aglutinación con antígeno tamponado
(BPAT), se tomaron 29 muestras sanguíneas, de 27 hembras y 2 machos mayores a 1 año, dando
un total de 29 bovinos. El método de campo comprendió la extracción de sangre de la vena
coccígea, se utilizaron tubos sin anticoagulante, correctamente rotulados con la identificación de
cada animal. En el laboratorio de la Agropecuaria Mis Abuelos se centrifugó, obteniendo el
suero sanguíneo, utilizándose el antígeno bufferado para placa (BPA) como prueba tamiz. No se
presentaron casos reactores por lo tanto se obtuvo una prevalencia del 0%. Así se demostró que
la brucelosis bovina no es la enfermedad que está causando nacimiento de crías débiles,
disminución de la producción y algunos abortos en la finca objeto a estudio, por tal se
recomienda realizar diagnóstico diferencial para enfermedades como leptospirosis, rinotraqueitis
infecciosa bovina (IBR), tricomoniasis, entre otras.
Palabras claves: Brucelosis bovina, Brucella abortus, bovinos, antígeno bufferado para placa,
pruebas serológicas.
v
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MINISTERIO DEL PODER POPULAR PARA EDUCACIÓN UNIVERSITARIA
UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL “FRANCISCO DE MIRANDA”
PROGRAMAS NACIONALES DE FORMACIÓN Y MUNICIPALIZADOS
PROGRAMA CIENCIAS VETERINARIAS
PREVALENCE OF BOVINE BRUCELLOSIS AT FINCA PALMASOLA,
LA PIEDRA SECTOR, PÍRITU MUNICIPALITY, FALCÓN STATE
Author: Eurimar Y. Díaz Q.
Tutor: Med. Vet. Draideth Miquilena
Date: 2022
ABSTRACT
The objective of the research was to diagnose brucellosis in the bovine population of Palmasola
farm, la Piedra Sector, Using the buffered antigen agglutination test (BPAT), 29 blood samples
were taken from 27 females and 2 males older than 1 year, giving a total of 29 bovines. The field
method included the extraction of blood from the coccygeal vein, tubes without anticoagulant
were used, correctly labeled with the identification of each animal. In the laboratory of the
Agropecuaria Mis Abuelos it was centrifuged, obtaining the blood serum, using the buffeted
antigen for plaque (BPA) as a sieve test. There were no reactive cases, therefore a prevalence of
0% was obtained. Thus, it was demonstrated that bovine brucellosis is not the disease that is
causing the birth of weak offspring, decreased production and some abortions on the farm under
study, therefore it is recommended to perform a differential diagnosis for diseases such as
leptospirosis, rhinotracheitisbovine infectious disease (IBR), trichomoniasis, among others.
Key words: Bovine brucellosis, Brucella abortus, bovines, buffeted plaque antigen, serological
tests.
vi
ÍNDICE GENERAL
AGRADECIMIENTO ......................................................................................................ii
DEDICATORIA..............................................................................................................iii
RESUMEN ...................................................................................................................... iv
ABSTRACT .................................................................................................................... iv
INDICE GENERAL ........................................................................................................ vi
INDICE DE CUADRO.................................................................................................... ix
INDICE DE GRAFICOS.................................................................................................. x
INDICE DE TABLAS..................................................................................................... xi
INTRODUCCION............................................................................................................ 1
CAPÍTULO I: EL PROBLEMA ...................................................................................... 6
1.1. Planteamiento del Problema.............................................................................. 6
1.2. Formulación del Problema............................................................................... 11
1.3. Objetivos de la Investigación............................................................................... 11
1.3. Justificación de la Investigación...................................................................... 12
1.4. Delimitación de la Investigación ..................................................................... 14
1.5. Limitaciones de la Investigación..................................................................... 14
CAPÍTULO II: MARCO REFERENCIAL CONTEXTUAL ........................................ 15
vii
2.1. Antecedentes de la Investigación......................................................................... 15
2.2. Bases Teóricas ..................................................................................................... 19
2.2.1 Historia de la brucelosis................................................................................. 19
2.2.2. Importancia de la enfermedad ...................................................................... 20
2.2.3. Impacto economico, en la salud pública y presentacion de la enfermedad en
humanos................................................................................................................................ 20
2.2.3. Sinonimia...................................................................................................... 22
2.2.4. Generalidades de la Brucella abortus......................................................... 22
2.2.5 Distribución geográfica ................................................................................. 23
2.2.6. Taxonomía.................................................................................................... 23
2.2.7 Fuentes y vías de infección............................................................................ 24
2.2.8. Patogenia....................................................................................................... 27
2.2.9. Síntomas ...................................................................................................... 28
2.2.10. Respuesta inmune contra Brucella abortus. ............................................... 29
2.2.11. Factores de riesgo ...................................................................................... 30
2.2.12. Control....................................................................................................... 31
2.2.13. Inmunización contra Brucelosis. ............................................................... 32
2.2.14. Diagnóstico................................................................................................. 33
2.2.15. Control y erradicación. ............................................................................... 41
viii
2.3. Bases legales........................................................................................................ 45
2.4. Sistema de Hipótesis............................................................................................ 51
2.5. Operacionalización de Variables ......................................................................... 52
CAPÍTULO III: MARCO METODOLÓGICO.............................................................. 55
3.1. Nivel y Diseño de la Investigación...................................................................... 55
3.2. Población y Muestra ............................................................................................ 55
3.3. Técnicas e Instrumentos de Recolección de Datos.............................................. 58
3.4. Validez y Confiabilidad de los Instrumentos de Recolección de Datos.............. 58
3.5. Fases de la Investigación ..................................................................................... 59
3.6. Tratamiento Estadístico de los Datos .................................................................. 63
CAPÍTULO IV: ANALISIS Y DISCUSION DE LOS RESULTADOS....................... 64
CAPÍTULO V: CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ................................... 68
5.1. Conclusiones........................................................................................................ 68
5.2. Recomendaciones ................................................................................................ 68
Bibliografía..................................................................................................................... 70
Anexos ............................................................................................................................ 75
ix
ÍNDICE DE CUADROS
Cuadro 1. Operacionalización de variable para analizar las muestras serológicas
mediante la técnica BPA............................................................................................................... 53
Cuadro 2. Operacionalización para establecer la prevalencia de brucelosis en los
bovinos de la finca Palmasola....................................................................................................... 54
x
ÍNDICE DE GRÁFICOS
Gráfico 1. Resultados del análisis por sexo de Brucella abortus en la población bovina
de la finca Palmasola; casos positivos y negativos....................................................................... 64
Gráfico 2. Frecuencia de brucelosis bovina en la finca Palmasola................................. 65
Gráfico 3. Frecuencia proporcional de bovinos muestreados según la edad.................. 66
Gráfico 4. Bovinos vacunados y no vacunados contra la Brucella abortus en la finca
Palmasola...................................................................................................................................... 67
xi
ÍNDICE DE TABLAS
Tabla 1. Productores ....................................................................................................... 56
Tabla 2. Número de animales y fincas encuestadas ....................................................... 56
Tabla 3. Número de animales que conforman la población de la finca seleccionada .... 57
Tabla 4. Muestra según criterios de inclusión ................................................................ 58
Tabla 5. Resultados del análisis de Brucella abortus en la población bovina de la finca
Palmasola; casos positivos y negativos......................................................................................... 64
Tabla 6. Frecuencia de brucelosis bovina en la finca Palmasola.................................... 65
Tabla 7. Frecuencia proporcional de bovinos muestreados según la edad..................... 66
Tabla 8. Bovinos vacunados y no vacunados contra la Brucella abortus en la finca
Palmasola...................................................................................................................................... 67
1
INTRODUCCIÓN
La brucelosis bovina es una enfermedad infectocontagiosa conocida como aborto
infeccioso, afectando a bovinos de todas las edades, pero persiste con mayor frecuencia en
animales sexualmente adultos, principalmente en ganaderías de cría y leche, conjuntamente,
son susceptibles a la enfermedad otras especies como los porcinos, ovinos, caprinos, equinos
y búfalos, produciendo en éstas variados signos. Además, es una enfermedad infecciosa de
alto impacto en las ganaderías debido a las pérdidas económicas que causa por ser un
padecimiento reproductivo, altamente contagiosa. Podemos incluir, que la brucelosis bovina
es relevante desde el punto de vista sanitario no solo a nivel nacional sino internacional, pues
está clasificada entre las enfermedades zoonóticas, que, a su vez, en nuestro territorio
Nacional es considerada de declaración obligatoria ante el Instituto Nacional de Salud
Agrícola Integral (INSAI).
Por otro lado, la brucelosis es considerada una enfermedad ocupacional, representando
un riesgo ocupacional a las personas involucradas en la manipulación de los animales
contaminados ya que se pueden contagiar por contacto directo con los tejidos, sangre, orina,
fetos abortados, líquidos fetales y placenta, así como también un problema de salud pública de
gran impacto en la sociedad ya que se transmite en forma natural de los animales vertebrados
al hombre, por el consumo de sus derivados (leche, carne cruda y productos lácteos no
pasteurizados) así como de los consumidores de leche de animales enfermos.
2
Considerando que la brucelosis tiene una distribución mundial tanto para los animales
como para el humano y que en el sector la Piedra del municipio Piritu no se tiene un control
eficaz de la misma, decidimos el día 23 de septiembre del 2021 siendo las 10:00 am
dirigirnos al INSAI donde fuimos atendidas por el Jefe de salud animal Médico Veterinario
Blas Chirinos y este nos notifico que ese organismo no cuenta con la información actualizada
sobre diagnostico de brucelosis bovina en el municipio Piritu ya que desde hace
aproximadamente 10 años ningún médico veterinario de ejercicio libre, ni institucional
realiza seguimiento de la brucelosis bovina, y la información sobre movilización de bovinos
reposa en un computador que al momento de nuestra visita se encontraba dañado.
Piritu es un municipio con grandes extensiones de tierras dedicadas a la producción
ganadera, por ende, una parte significativa de la población se dedica a esta actividad, ya que
genera mano de obra a las familias piriteñas, sin embargo, estas personas se enfrentan día a
día a diferentes microorganismos y/o enfermedades provenientes de dichos animales, como lo
es el caso de la Brucelosis Bovina.
En virtud de la importancia que reviste esta enfermedad se tomó la determinación de
realizar el presente trabajo investigativo para determinar la prevalencia de la brucelosis bovina
en el sector la Piedra del municipio Piritu del estado Falcón, con la intención de beneficiar a
todos los involucrados; de esta manera los propietarios de las fincas seleccionadas quienes
obtendrán un estudio enmarcado en el método científico donde conocerán la realidad de su
hato brindándoles información pertinente sobre las causas y consecuencias que podría tener la
brucelosis.
3
De acuerdo a la metodología a seguir en el proceso investigativo el día 28 de mayo de
2021, a las 8:00 am con el fin de conocer a través de la observación directa y participativa la
realidad existente en el sector la Piedra, y diagnosticar el o los problemas existentes nos
reunimos con los señores Héctor Bracho, Ángel Bracho, Rafael Campos, Pablo Zavala,
Heriberto Díaz, Mamerto Bracho y Rafael Campos todos ellos productores que hacen vida en
el sector la Piedra, iniciada la reunión se les explico a los presentes el perfil de las
investigadoras, apoyándonos de la técnica de la lluvia de ideas y para generar confianza y
ampliar la participación de los asistentes se procedió a escuchar la problemática existente en
sus unidades de producción.
Una vez jerarquizada las problemáticas, con los propietarios y empleados de las fincas, se
determinó que ninguno de los animales ha recibido inmunización contra Brucella Abortus,
además, de acuerdo al testimonio de las personas antes descritas se ha evidenciado abortos en
las unidades de producción, nacimientos de crías débiles y disminución de la producción
láctea. Considerando estos síntomas de la situación problema en el futuro, y teniendo en
cuenta que las hembras son quienes representan la rentabilidad de una finca, podemos deducir
una infección con brucelosis en los bovinos del sector, trayendo esto considerables pérdidas
en la producción afectando de manera directa a la economía del propietario y sus empleados
además de ser un foco infeccioso que podría instaurar el desencadenamiento de una epidemia
infecciosa con la bacteria incrementando su presencia y reduciendo a los propietarios la
probabilidad de convertirse en un productor cárnico y lechero de inocuidad sanitaria, además
de la gran probabilidad de zoonosis de la enfermedad con riesgo de contagio a las personas
encargadas del manejo del ganado bovino generándose así un problema de salud pública.
4
Por esta razón mediante el desarrollo de este proyecto de tesis se desea incentivar una
cultura de prevención en los ganaderos del sector y poner de manifiesto a las autoridades de
los ministerios respectivos, sobre las repercusiones que la brucelosis tiene, en la población
vacuna, generando pérdida económica en el sector pecuario, por la disminución en la
producción de carne como consecuencia de los abortos, nacimientos de crías débiles, muerte
perinatal de terneros, menor producción de leche, disminución de la fertilidad, esterilidad
entre otras., repercutiendo en las relaciones comerciales debido a las restricciones que provoca
la enfermedad, por lo tanto, resulta imperante que los datos aquí expuestos sean fidedignos y
tratando de cuidar el margen de error para sí ofrecer información pertinente que promueva una
producción bovina de óptima calidad.
La metodología a usar en este estudio epidemiológico está basada en la
investigación de campo de tipo descriptiva debido a que se intenta determinar la presencia de
brucelosis en ganado bovino, mediante la presencia o no de formación de grumos luego de
aplicado el reactivo en las muestras tomadas, utilizando como prueba tamiz la Técnica de
aglutinación con antígeno tamponado (BPA), como lo cita el Artículo 15 de las Normas sobre
la Vigilancia, Prevención, Control y Erradicación de la Brucelosis Bovina, publicada en la
Gaceta Oficial de la República Bolivariana de Venezuela N° 41.249 de fecha 3 de octubre de
2017.
Estructuralmente el trabajo está enmarcado de la manera siguiente: Capítulo I: El
problema donde se describe su planteamiento, se formula el problema mediante unas
interrogantes, se presenta el objetivo general y los objetivos específicos, la justificación y la
delimitación del estudio. El Capítulo II: Comprende el marco referencial, con los antecedentes
5
de la investigación, sus bases teóricas, y el cuadro de operacionalización de variables y la
hipótesis, el IV Capítulo corresponde al análisis y discusión de los resultados y, por último, en
el Capítulo V se incumbe las conclusiones y recomendaciones. Finalmente, se presentan las
referencias bibliográficas y los anexos.
6
CAPÍTULO I: EL PROBLEMA
Este capítulo se constituye por los siguientes aspectos: el planteamiento del problema, su
formulación, los objetivos de la investigación, la justificación, y la delimitación del mismo, es
importante resaltar que en toda investigación científica el problema es el punto de partida del
estudio. Para Aguírre (2016), el problema se manifiesta como obstáculo que podrían tener
múltiples manifestaciones: dificultades, dudas, disgustos, preocupaciones, vacíos
cognoscitivos, anomalías, conflictos cognitivos o contradicciones.
La presente investigación se basa en determinar la prevalencia de brucelosis bovina en el
sector la Piedra en el municipio Piritu, este inconveniente se fundamenta en que en el
municipio hasta la fecha no se cuenta con antecedentes sobre brucelosis bovina, lo que
implica que realizar un diagnóstico de la enfermedad resulta significativo para este sector en
donde la población comparte un mismo ecosistema con los bovinos, y que de existir la
patología sería un riesgo no solo para la actividad ganadera, sino también para la comunidad
en general que habita en el sector, considerando que la brucelosis ha sido estimada por la
Organización Mundial de la Salud (OMS) como una zoonosis preocupante para la sociedad
humana A continuación, se procede a plantear el problema de investigación.
1.1. Planteamiento del Problema
EL planteamiento del problema describe una situación en cuestión que debe ser resuelto,
es el punto de partida que da el enfoque y se obliga a centrarse en algo concreto. Para
7
identificar el problema es necesario considerar el contexto, antecedentes, especificidad y
relevancia de la investigación (Hernández y Olguín, 2020)
Siguiendo a Hernández y Olguín, plantear el problema significa enunciar en forma
descriptiva y en términos concretos y sencillos los elementos o características que se observan
en el problema: hechos relevantes, factores causales, efectos, propiedades, determinación de
cuanto, del cómo y del cuándo entre otros.
La brucelosis es una enfermedad zoonótica producida por la bacteria del género
Brucella (B.). Incluye especies como B. melitensis, B. abortus, B. suis, B. canis, B. ovis que
afectan a hembras y machos de caprinos, bovinos, porcinos, perros y ovinos respectivamente,
aunque algunos animales pueden ser reservorios de más de una especie (Acha y Szyfres,
2001, citado por Castro 2018).
La característica principal de la enfermedad es que provoca abortos, de este modo las
hembras preñadas que se infectan liberan al medio millones de bacterias a través del feto, la
placenta y flujo vaginal, contaminando el pasto, agua y corrales con brucellas (Robles, 2003,
citado por Castro 2018). De esta manera, el medio se transforma en el principal reservorio de la
enfermedad. Las personas y los animales la adquieren por ingestión de leche o lácteos crudos y
contaminados, y por el contacto directo con tejidos, sangre, descargas vaginales, fetos y
placentas provenientes de animales brucelosos.
Al respecto, la brucelosis ha sido clasificada y reconocida por la Organización de las
Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación (FAO) de la Organización Mundial de la
Salud (OMS) como una de las 166 zoonosis; resaltando el impacto en la calidad de vida de los
humanos y animales, así como en el desarrollo económico, agro cultural y del turismo. La
8
epidemiología de la brucelosis humana, es que afecta a cientos de miles de personas en todo el
mundo. Para prevenir la brucelosis, es útil evitar los productos lácteos crudos y tomar
precauciones al trabajar con animales o en un laboratorio (Mayo Clinic, 2021)
Por otra parte, el Institute for International Cooperation in Animal Biologics (2013),
señala que la brucelosis se encuentra en todo el mundo, pero está controlada en la mayoría de los
países desarrollados. La enfermedad clínica todavía es común en el Medio Oriente, Asia, África,
América Central y del Sur, Cuenca Mediterránea y el Caribe. Las especies de Brucella varían en
su distribución geográfica. B. abortus se encuentra en todo el mundo, en las regiones ganaderas
con excepción de Japón, Canadá, algunos países europeos, Australia, Nueva Zelanda e Israel,
donde ha sido erradicada. La erradicación de los rodeos domésticos es casi completa en EE. UU.
B. abortus permanece en huéspedes de la fauna silvestre en algunas regiones, como el Área
Mayor de Yellowstone de América del Norte.
De acuerdo con la Organización Mundial de Sanidad Animal (OIE, 2017), las brucelosis
del ganado bovino (B. abortus), ovino y caprino (B. melitensis) y de los porcinos (B. suis) son
enfermedades que figuran en el Código Sanitario para los Animales Terrestres y deben ser
notificadas de manera obligatoria a la OIE.
La brucelosis en Venezuela, se conoce desde el año 1930, pero no fue sino hasta el año
1968 cuando el Ministerio de Agricultura y Cría (MAC), a través de la Dirección de Ganadería,
publica la Resolución para la Campaña Nacional de Control de la Brucelosis. Es importante
destacar que en nuestro país la industria pecuaria y en especial la ganadería bovina, es de gran
importancia económica, ya que de ella se obtienen productos como carne y leche que son
indispensables para la nutrición poblacional. Las bacterias del género Brucella spp además de
9
afectar a un gran número de animales domésticos y salvajes, son un importante patógeno para el
ser humano; por esta condición sanitaria la brucelosis es vigilada en el ámbito nacional en
especies animales productivas como la bovina, bufalina, caprina, ovina, y porcina por medio del
Instituto Nacional de Salud Agrícola Integral (INSAI), con el fin de promover y proporcionar
seguridad e inocuidad alimentaria en las diferentes cadenas productivas. A pesar de que ésta
institución gubernamental cuenta con pruebas de laboratorio reglamentadas, las cuales se utilizan
para el diagnóstico de dicha patología en las especies animales anteriormente mencionadas, las
actividades de vigilancia epidemiológica se cumple parcialmente dando esto pie a que la
enfermedad permanezca constante, por ello se hace necesario conocer la prevalencia de
brucelosis bovina a nivel de fincas ya que es una zoonosis, de alta pertinencia para la salud
pública local y nacional.
De acuerdo con la Dirección General de Epidemiología y la Dirección de Vigilancia
Epidemiológica del Ministerio del Poder Popular para la Salud (2017), actualmente en
Venezuela la Brucelosis continúa siendo un problema tanto en salud pública como en salud
animal, esta zoonosis causa significativas pérdidas económicas, especialmente en el ganado
bovino La especie predominante en el país es la B. abortus, tanto en humanos como en animales,
produciendo en la población bovina altas tasas de abortos en hembras e infertilidad en machos,
siendo transmisible a humanos expuestos ocupacionalmente.
Ahora bien, el programa de erradicación y control de brucelosis bovina fue reactivado en
el año 2003 y creada una nueva resolución en el 2017 por las autoridades sanitarias a nivel
nacional. En visitada realizada al INSAI Falcón se contactó que en el municipio Piritu ni en el
estado Falcón existen datos actualizados sobre prevalencia de la brucelosis bovina, siendo esta
10
una importante enfermedad Zoonótica. La brucelosis en los seres humanos puede llegar a ser una
enfermedad incapacitante, debido a que, por su historia natural, de no ser tratada en su fase
aguda, tiende a cronificase en el tiempo. Entre las afecciones de mayor interés, destacan las
neurológicas, que se focalizan en las extremidades del paciente, conllevando secuelas de
parálisis. Este daño puede suceder al cabo de un año o más sin tratamiento adecuado (Mayo
Clinic, 2021).
De hecho, en Venezuela la Brucelosis está clasificada como una enfermedad ocupacional
y su impacto en la población humana tiene importantes repercusiones sociales, puesto que es una
enfermedad de curso crónico, que implica atención médica especializada y eventualmente
hospitalización (OIE, 2017)
El municipio Piritu se caracteriza por tener una alta explotación ganadera doble
propósito, donde el descenso de los índices de producción y productividad pueden estar
asociados a la presencia de la bacteria Brucella abortus. Desafortunadamente en el municipio y
específicamente en el sector la Piedra existe un bajo nivel de información sobre la enfermedad,
los ganaderos desconocen la gravedad y rapidez con la que se disemina esta patología, generando
riesgos para todos los habitantes del municipio por ser una enfermedad zoonótica; es necesario
llevar a cabo este proyecto de investigación que consiste en determinar la prevalencia de
brucelosis bovina en el sector la Piedra mediante la prueba oficial para el diagnóstico de
brucelosis bovina según lo cita la Gaceta oficial N° 41.249 de fecha 3 de octubre de 2017, en su
Artículo 15. Esto con el fin de que los resultados arrojen datos estadísticos fidedignos sobre la
problemática, para así; aplicar en las fincas las normas sanitarias correspondientes según los
resultados.
11
De la misma forma se pretende comunicar a los propietarios de las fincas que se
encuentran en el sector la Piedra el estado sanitario de las mismas e instaurar planes de control y
prevención de la enfermedad y así evitar la transmisión, diseminación del microorganismo por
toda la región. Para ello se ha formulado el siguiente problema, mismo que guio al desarrollo de
los objetivos.
1.2. Formulación del Problema
Analizando las causas y consecuencia que generaría la brucelosis bovina en el sector
la Piedra del Municipio Piritu Estado Falcón surgen las siguientes interrogantes que darían
respuesta a los objetivos que se plantean en la presente investigación.
❖ ¿Comprobar la existencia de brucelosis bovina?
❖ ¿Cuál es la prevalencia de brucelosis bovina en el sector la Piedra del
Municipio Piritu Estado Falcón?
1.3. Objetivos de la Investigación
1.3.1. Objetivo General
Determinar la prevalencia de Brucelosis bovina en el sector la Piedra del
municipio Piritu, estado Falcón.
1.3.2. Objetivos Específicos
❖ Realizar el diagnóstico para brucelosis bovina mediante la prueba de
aglutinación con antígeno tamponado (BPAT)
12
❖ Establecer la prevalencia de la brucelosis en los bovinos del sector la Piedra
para aplicar las normas sanitarias correspondientes según los resultados.
1.3. Justificación de la Investigación
De acuerdo con Samartino (2016), la enfermedad, llamada Brucelosis (Brucella)
Bovina, es una infección causada por una bacteria, es grave, sumamente contagiosa y afecta
principalmente al tracto genital de hembras y machos, así como también a diversos órganos y
sistemas del animal como es el caso del conducto galactóforo que sería una de las fuentes más
importantes de contaminación de tipo zoonótica, por consecuencia se puede presentar en
varias etapas de la vida del animal, así como también puede estar presente en otras especies de
mamíferos.
Sobre la base del autor, esta enfermedad es una patología con repercusión directa a
nivel social, económico y salubrista, además de ser un reflejo de lo que nuestra ciencia la
Medicina Veterinaria está marcando en nuestra sociedad pues son los Veterinarios los
encargados de controlar agentes patógenos que puedan disminuir la calidad de vida de la
población a la que se deben.
Es por esta razón que la intención del desarrollo de esta tesis es beneficiar a todos los
involucrados; de esta manera a los propietarios de la fincas objeto a estudio, ya que obtendrán
una monografía enmarcada en el método científico donde el productor y/o productores se
percate de la realidad de su finca además de brindarle información pertinente sobre causas y
las consecuencias que podría tener la brucelosis. Las medidas de prevención que tome el
13
ganadero producto de un conocimiento pleno ofrecido por la investigación, evitarán las
zoonosis de quienes se encargan del manejo del ganado tanto dentro de la hacienda y fuera de
esta, por ende, los familiares de estas personas.
Teniendo en cuenta que un solo bovino infectado puede trasmitir la infección a otros
y un diagnóstico oportuno ayudara a que se tome las medidas necesarias para así cortar la
cadena infecciosa. Consecuentemente el control de esta patología incide en un incremento de
la producción, en un aseguramiento de la calidad alimentaria y la disminución de problemas
de salud pública. Los datos estadísticos que arrojen los resultados serán una pauta
trascendental que podrían guiar a profundizar en la temática a instituciones gubernamentales y
no gubernamentales que decidan accionar con proyectos o programas que tengan como afán
reducir la prevalencia de la bacteria pues si el Municipio desea convertirse en exportador de
productos cárnicos, lácteos y sus derivados necesitara controlar las enfermedades que laceran
la calidad del producto.
La Medicina Veterinaria, quienes la estudian y los profesionales que la practican
reciben beneficios, pues el contenido que aquí se presenta en cuanto a material bibliográfico,
métodos, técnicas y análisis de laboratorio son de suma relevancia para el desarrollo de sus
actividades incluido en esto, que a partir del actual estudio se podrá profundizar en
conocimientos como por ejemplo causas y efecto de la brucelosis bovina entre otros. Es así,
entonces como queda demostrado la importancia del presente trabajo investigativo desde el
punto de vista de funcionalidad, relevancia social, valoración teórica, implicaciones prácticas,
utilidad metodológica entre otras.
14
1.4. Delimitación de la Investigación
Este Proyecto de Grado estará delimitado y desarrollado en el programa de Medicina
Veterinaria, en el aspecto investigativo del campo pecuario, bajo la línea de investigación de
Salud Animal Integral de la Universidad Nacional Experimental Francisco de Miranda y se
sustenta en la siguiente teoría; La brucelosis es una enfermedad infecciosa de los animales
que se transmite al hombre constituyendo una zoonosis. La misma es producida por
bacterias del género Brucella que afecta enormemente la economía pecuaria, constituyendo
una seria perturbación en la marcha normal de las explotaciones ganaderas por las pérdidas
que ocasiona y las implicancias en la salud pública (Samartino, 2016).
En el aspecto geográfico, la investigación será llevada a cabo en el sector la Piedra del
Municipio Piritu Parroquia San José De La Costa vía al encanto del Estado Falcón, en un
tiempo aproximado de 16 semanas.
1.5. Limitaciones de la Investigación
Las restricciones estarán relacionadas con pérdidas de las Muestras por mal manejo,
hemolisis y en algunos casos relacionadas al tamaño de la muestra a procesar, por poca
cantidad de reactivo o suero, factor tiempo, y el factor económico que trae como limitante no
poder procesar los sueros reaccionantes con otras pruebas complementarias.
15
CAPÍTULO II: MARCO REFERENCIAL CONTEXTUAL
El marco de referencia, es la parte del trabajo que permite al investigador plasmar los
diferentes conceptos y teorías que sobre el problema o tema de investigación han expuesto
previamente diferentes autores o investigadores (Hernández, 2015)
La estructura del Marco Referencial Contextual se presente a continuación.
2.1. Antecedentes de la Investigación
Con relacion a los antecedentes de la investigación Tamayo (2012) afirma … “Todo
hecho anterior a la formulación del problema que sirve para aclarar, juzgar e interpretar el
problema planteado constituye los antecedentes del problema” (p.149).
De acuerdo a lo anterior, se presentan los estudios que anteceden al nuestro dónde
se han manejado las mismas variables o se hallan propuestos objetivos similares, además
estos nos sirven de guía y permiten hacer comparaciones para tener ideas sobre cómo se trató
el problema en esa oportunidad.
Un primer trabajo corresponde a Cárdenas (2018), titulado La Brucelosis Bovina y
sus Factores de Riesgo: Evaluación a Nivel Mundial y en Colombia, presentado como Tesis
Doctoral en Medicina y Sanidad Animal cuyo propósito fue estudiar el comportamiento
epidemiológico de la brucelosis bovina, planteandose como objetivos especificos; analizar y
estimar la evolucion de la brucelosis bovina en el mundo y Colombia asi como indentificar los
factores de riesgo asociados a la infecccion por Brucella abortus en granjas bovinas de
Colombia, certificadas previamente como libres.
16
La metodología empleada para la investigación fue un diseño documental, y para
obtener los potenciales factores de riesgo se utilizó un cuestionario para cada granja que
contenía información del programa sanitario, características físicas de la granja, bioseguridad,
presencia de animales silvestres y estatus sanitario de granjas vecinas, entre otras. Se realizo
un análisis bivariado entre casos y controles de cada variable explicativa empleando un chi –
cuadrado, aquellas variables que presentaron un p-valor menor a 0.20 se emplearon en la
siguiente etapa, donde se realizó un modelo de regresión logística empleando la metodología
de Stepwise, para comparar los modelos se utilizó el criterio AIC.
Los resultados del modelo de regresión finalmente elegido indicaron que el ingreso
de animales de reemplazo, la monta natural y el contacto granjas infectadas o estatus sanitario
desconocido, fueron factores altamente significativos en la reinfección de la enfermedad en
las granjas.
Este trabajo se relaciona con la investigación en curso, ya que propuso un
cuestionario sobre información del programa sanitario en las granjas objetos a estudio y este
será tomado como modelo para diseñar el que se utilizará para la presente investigación.
En segundo lugar Maslucán (2018), desarrollo un proyecto de investigación entre
los meses de julio a diciembre de 2017, para conocer el grado de difusión y prevalencia de
Brucelosis bovina en los hatos ganaderos, del distrito de Pardo Miguel, Provincia de Rioja
Departamento de San Martín, mediante la prueba serológica Rosa de Bengala, determinó el
tamaño de muestra en base al registro del censo agropecuario 2012 donde indica que existe
alrededor de 4004 cabezas de ganado vacuno en dicho distrito, que están distribuidos en
diferentes localidades, de los cuales aplicando una fórmula se analizó 135 bovinos, a partir de
17
esta muestra y con una probabilidad de casos positivos de 10% y casos negativos de 90%, con
margen de error del 5% y nivel de confianza de 95%, los resultados evidencian que no existe
prevalencia de Brucelosis bovina en el distrito de Pardo Miguel y que no está relacionado con
la edad, raza, sexo, etapa reproductiva y habitad, como conclusión importante menciona que
en un sector hubo casos positivos en humanos (zoonosis), pero es posible que no fue por la
prevalencia de ganado bovino.
La referida investigación representa una contribución para el estudio actual que se
plantea, ya que en su metodología describe como debe hacerse el calculo de la muestra en
cuanto a la formula de tamaño de la muestra. Lo cual resulta un aporte importante, ya que
nosotros debemos aplicar tambien formulas y programas estadisticos para la correlación de
las variables.
Un tecer trabajo investigativo de Mainato (2017), realizado en la provincia del
Cañar, en 44 hatos de ganadería bovina, distribuidos aleatoriamente en los siete cantones de la
provincia, donde se consideró una población bovina actualizada, mediante el reporte de
vacunación contra la Fiebre Aftosa – Fase II 2014, según el cual existen 140.242 bovinos.
Bajo el estudio epidemiológico se consideró 447 bovinos (n = 447) mayores a 2 años de edad;
de las cuales el 93.74% de muestras correspondieron a vacas adultas y el 6.26% de las
muestras correspondieron a sementales de cada hato. A las muestras se les realizó el método
de diagnóstico AgP (Aglutinación en placa), y los casos positivos a esta prueba se enviaron al
laboratorio de Sanidad Animal AGROCALIDAD, Tumbaco y se aplicaron los métodos de
diagnósticos de; RB (Rosa de Bengala) y ELISA competitiva, para determinar y cuantificar
18
anticuerpos. La prevalencia de bovinos seropositivos a brucelosis bovina en la provincia del
Cañar, con las pruebas de diagnóstico de; Rosa de Bengala y ELISAc, se asemejan en 4.03 y
4.25% respectivamente y de 29,30% con el diagnóstico de Aglutinación en placa. La
prevalencia de hatos con animales seropositivos a brucelosis bovina en la provincia del Cañar,
es del 15.90% al diagnóstico de ELISAc y de 13.63 % a la prueba de Rosa de Bengala y 56.81
% con el diagnóstico de Aglutinación en placa. Como resultado determinó que los animales
pertenecientes a los hatos donde se presentaron problemas de metritis postparto y animales
con esterilidad permanente tienen un mayor riesgo de ser seropositivos a la prueba diagnóstica
de RB (13.78 y 5.19 Odds ratio, con un valor de p = o < 0.05), como factor de impacto en la
reproducción bovina. En conclusion se estimó las pérdidas económicas totales, por bovino
totales y por vacas infectadas con brucelosis bovina según la prevalencia obtenida en la
investigación.
Este trabajo es pertinente con la investigación aquí planteada, ya que aborda la
metodologia de campo utilizada y la realizacion de la prueba serológica utilizando como técnica
de diagnóstico la prueba de Card Test (Rosa Bengala). Aunque en esta investigacion se ha
planteado la prueba de aglutinación con antígeno tamponado (BPAT), esta técnica es similar a la
Prueba de Card Test por tal, se toma esta investigación como referencia y además dicha prueba
BPAT, es la prueba oficial para el diagnóstico de brucelosis bovina según lo cita la nueva
resolución sobre brucelosis en Gaceta oficial N° 41.249 de fecha 3 de octubre de 2017, en su
Artículo 15.
19
2.2. Bases Teóricas
La base teórica es una revisión bibliográfica o documental que se relacionan
directamente con las variables que se desarrollarán, además documenta la necesidad de
realizar el estudio, conduce al establecimiento de hipótesis o afirmaciones que después serán
comprobadas en la realidad, inspira a nuevas líneas y áreas de investigación (Cruz, 2015).
2.2.1 Historia de la brucelosis
La historia de la medicina considera que la Brucelosis es un padecimiento conocido
desde Hipócrates (400 años antes de cristo); pero esta enfermedad se describió por primera
vez entre 1.859 y 1.863, cuando los oficiales Médicos Británicos que servían en Malta notaron
un padecimiento febril que producía la muerte de soldados y civiles de la isla. Es así que el
Médico Inglés Jeffrey Alan Marston (1.831 – 1.911) describió por primera vez el síndrome de
una enfermedad a la que llamaron fiebre ondulante, fiebre mediterránea o fiebre gástrica
remitente. Wyatt. Posteriormente, el Médico Británico Australiano David Bruce (1.855 –
1.931) logró identificar y aislar la bacteria en 1.887 mientras se encontraba en la Valleta,
Malta, trabajando en el ejército británico. Con otro importante investigador del momento,
Themistocles Zammit, desmostraron que los humanos presentaban la enfermedad tras ingerir
leche de gandao enfrmo (Cook, Citado en Cárdenas, 2018).
En la actualidad, la brucelosis esta incluida dentro de la lista de enfermedades de
declaración obligatoria de la Organización Mundial de Sanidad Animal. Con este fin, los
países miembros, a través de sus servicios veterinarios, están obligados a reportar su estatus
sanitario cada seis meses con la siguiente información: incidencia de la enfermedad por país,
y las medidas de control aplicadas (OIE, 2017).
20
2.2.2. Importancia de la enfermedad
Para Mainato (2017), La brucelosis se mantiene como una de las principales
zoonosis a nivel mundial y es una de las causas de fiebre de origen desconocido en humanos,
con más de 500,000 nuevos casos anuales. Datos de la Organización mundial de sanidad
animal (OIE) considera tradicionalmente a América del Sur como un área endémica para
brucelosis humana. En la nueva distribución global de la enfermedad, según Pappas et al.,
2006 (citado en Mainato 2017)
Postula Villegas (2019), que la infección con brucelosis está en proceso de
erradicación. Ademas es una enfermedad con un fuerte impacto en la salud pública y en la
producción animal, por lo que afecta a los sistemas de salud y a la economía ganadera de todo
el mundo. Del mismo modo está relacionada con características socilaes y políticas; así, la
enfermedad esta especialmente presente en países con economías poco desarrolladas y
conlleva serias repercusiones en los intercambios comerciales.
2.2.3. Impacto economico, en la salud pública y presentacion de la
enfermedad en humanos
Las políticas sanitarias de prevención y control, además del impacto sobres la salud
pública, surgen a partir de las pérdidas económicas por disminución de la producción de leche
y carne, abortos, mortalidad perinatal, infertilidad, celos repetidos, incremento de reposición,
costos asociados con la asistencia veterinaria y perdidas en las industrias lácteas y cárnica
(Samartino, 2016).
21
Menciona Mainato (2017), que en el caso de la salud publica el impacto económico
se debe a los costos del tratamiento, el diagnóstico y las pérdidas laborales por el tiempo de
discapacidad.
Brucella abortus, B. susi y B. mellitensi son las tres principales especies capaces de
infectar al ser humano, ademas la brucelosis es una zoonosis de distribución mundial asociada
principalmente a la salud ocupacional. Su presentación en humanos en algunos países es
subestimada ya que no se incluye dentro del chequeo clínico rutinario y pasa daspercibida o se
confunde con otras patologías (Cárdenas, 2018)
Citando a Villegas (2019), la manifestacion clínica en humanos aparece tras un
periodo de incubación de entre una y cinco semanas, y se caracteriza por un cuadro clínico
sistémico que puede o no involucrar algún órgano. Se califica en tres fases evolucionando de
uno a otro, agudo (inferior a 8 semanas), subagudo (entr ocho y cincuenta y dos semanas) o
crónico (superior a un año). Sus sintomas pueden ser inespecíficos, ya que la mayorías de los
pacientes presentan malestar general que incvluye fiebre, sudoración, anorexia, artralgia y
dolor de espalda, algunas personas padecen infecciones asintomáitcas
Al respeto Benítez (2013), Destaca que entre los síntomas principales esta la
astenia, fiebre continua, intermitente e irregular con la presencia de escalofríos, sudores
profusos, insomnio, impotencia sexual, constipación, anorexia, cefalgia, artalgia y dolores
generalizados. Cuando afecta el sistema nervioso presenta irritación, depresión y nerviosismo.
Cuando hay afección del sistema ganglionar hay esplenomegalia, hepatoesplenomegalia,
hepatomegalia, rara vez con ictericia. Las recaídas suelen venir acompañadas de encefalitis,
22
meningitis, neuritis periférica, espondilitis, artritis supurativa, endocarditis vegetativa,
orquitis, vesiculitis seminal y prostatitis.
2.2.3. Sinonimia
Adecua Mainato (2017), de acuerdo a Blood y Radostits, quienes dan las siguientes
denominaciones: Fiebre ondulante, Fiebre de Malta, Fiebre del Mediterráneo (en el hombre),
Enfermedad de Bang, (en bovinos), Aborto contagioso, Aborto infeccioso, Aborto epizoótico
(en animales).
Confirma Guzmán (2017), en los animales se le ha conocido con distintas
denominaciones (aborto brucelar, aborto infeccioso o aborto epizoótico) aunque se
recomienda la denominación relacionada con la especie afectada (brucelosis bovina, caprina,
porcina). En el hombre se conoce como fiebre mediterránea, fiebre ondulante, fiebre de Malta
De acuerdo con los autores, la enfermedad es conocida con diversos nombres
alrededor del planeta según cada cultura y niveles de conocimiento sobre la misma. El tema a
desarrollarse esta enfocado en ganado bovino se propone detallar todas las características de
la Brucella abortus.
2.2.4. Generalidades de la Brucella abortus
Es una bacteria gran negativa, facultativa, intracelular, que afecta la especie bovina.
Varias especies de brucella pueden infectar al hombre en su labor profesional e incluso a
través de la leche, convirtiéndose en una enfermedad zoonótica llamada fiebre ondulante. La
importancia de la enfermedad en el hombre justifica ampliamente cualquier programa de
23
erradicación. La brucelosis es una zoonosis por excelencia ya que se transmite en forma
natural en los animales vertebrados al hombre (Mainato, 2017)
Destaca el mismo autor que la enfermedad se propaga en los hatos de bovinos,
reduciendo la fertilidad del rebaño, puede provocar abortos o muerte prematura de terneros
débiles. Es una de las enfermedades de mayor importancia dentro de la patología veterinaria
tanto desde el punto de vista económico como desde la salud pública.
2.2.5 Distribución geográfica
La brucelosis se encuentra ampliamente difundida en América del Sur; los perjuicios
ocasionados por las fallas reproductoras, traducidas por la reducción en la producción lechera
y de carne, son agravados por la devaluación comercial de los animales y de los hatos
afectados, aliada a la perspectiva de imposición de barreras sanitarias en el ámbito del
comercio nacional e internacional (OIE, 2017).
2.2.6. Taxonomía
La evidencia genética e inmunológica indica que todos los miembros del género
Brúcela están estrechamente relacionados (OIE, 2017), aunque resulta evidente la Presencia
de diferencias significativas entre las principales variantes en cuanto a preferencia para el
hospedador, epidemiologia, variaciones genómicas y moleculares, por ello el Comité
Internacional de Sistemática de Procariotas, Sub Comité de Taxonomía de Brucella, de
manera preponderante en el año 2005 resolvió posicionar las 6 especies de tipo de brucellas
con sus bio variedades reconocidas desde antes de 1986 publicadas en las listas Autorizadas
de nombres de bacterias de 1980. Cabe recalcar como menciona The Center For Food
24
Security and Public Health, algunos microbiólogos han propuesto que este género sea
reclasificado en una especie nueva causando controversia y haciendo que en la actualidad se
utilicen ambos sistemas Taxonómicos (Llaguno, 2015)
Con el propósito de brindar una referencia hacia la puntualización de la taxonomía
emplearemos la propuesta en el comité así tenemos:
❖ Reino: Proteobacteria
❖ Clase: Rodospirilla
❖ Orden: Rizobial
❖ Familia: Brucellaceae
❖ Género: Brucella
❖ Especie: Brucella abortus
2.2.7 Fuentes y vías de infección
2. 2.7.1. Fuentes
Las personas que están expuestas más a la enfermedad son los veterinarios que hacen
chequeos ginecológicos, inseminadores, vacunadores, vaqueros, familias de los trabajadores
de campo y personas en general que pueden tener contacto directo con los animales o ingerir
leche o agua contaminada. Si el agente causal de la infección es la cepa Brucella abortus
generalmente la brucelosis en el hombre tiene un curso crónico que puede durar años. El
hombre se infecta por Brucella por contacto directo o ingestión de productos de origen
animal, la leche y productos lácteos, las verduras crudas y agua contaminada con excreta de
animales infectados, siendo una enfermedad ocupacional de vaqueros, matarifes, carniceros y
médicos veterinarios, la infección se puede contraer por la manipulación de fetos, envolturas
25
fetales o al entrar en contacto con secreciones vaginales, excrementos y canales de animales
infectados (Benítez, 2013)
El periodo de incubación generalmente dura de una a tres semanas, pero puede
prolongarse a meses. Es una enfermedad septicémica, fiebre continua, intermitente o irregular
(Díaz, citado por Benítez, 2013)
2. 2.7.2. Vía digestiva
Describe Benítez (2013), que se trata de una vía de gran importancia epidemiológica.
Los alimentos contaminados por secreciones fetales y restos de placentas o abortos o del parto
normal de animales infectados constituyen vehículos de infección. La contaminación
ambiental está determinada por los restos de la placenta en el caso de abortos es muy intensa,
pudiendo el agente permanecer viable por varias semanas en los pastos, siempre y cuando, se
encuentre protegido de la luz solar. También puede ocurrir la contaminación de aguas y es allí
donde la Brucella tiene una considerable sobrevivencia. La bacteria también es eliminada por
la leche y el calostro que constituyen importantes fuentes de infección para los becerros que
no se contaminaron por la vía transplacentaria y también para los seres humanos. La
pasteurización de la leche y del calostro elimina de forma eficiente las brucellas. La
pasteurización del calostro no interfiere sensiblemente en la inmunidad pasiva de los becerros.
2.2.7.3. Vía transplacentaria
Junto a la vía digestiva son las más importantes vías de transmisión de la brucelosis.
La infección uterina generalmente ocurre en el tercio final de la gestación, determinando
26
lesiones en la placenta y en el feto, las cuales pueden ocasionar la muerte fetal seguida del
aborto, nacidos muertos o el nacimiento de becerros débiles (Benítez, 2013).
2.2.7.4. Vía sexual
Sostiene Guzmán (2017), sta vía tiene poca importancia en la diseminación de la
brucelosis en el hato, debido a que el macho deposita el semen en la vagina de la hembra
bovina y se ha mostrado que la macrobiótica vaginal tiene acción inhibitoria sobre la Brucella
abortus. Además de esto, fue encontrada una proteína en el moco cervicovaginal que protege
el útero de la invasión por la Brucella abortus. Aunque la vía sexual sea una vía de
importancia secundaria para la especie bovina, no significa que reproductores infectados
puedan ser utilizados sin riesgos. Se recomienda hacer el test de aglutinación del plasma
seminal para verificar si existe la presencia de anticuerpos en el semen, lo que constituye un
indicativo de comprometimiento de los órganos reproductores por la Brucella. En las
centrales de inseminación artificial se hace un control riguroso de los reproductores para que
se evite la diseminación por esta vía. La transferencia de embriones no presenta riesgo para la
receptora, pero si el embrión es implantado en una vaca infectada, podrá ser infectado por la
vía transplacentaria.
2.2.7.5 Contaminación por el material obstétrico
Todo el material utilizado para exámenes ginecológicos debe ser esterilizado antes de
ser utilizado en otro animal, de lo contrario, existe el riesgo de transmisión de enfermedades
27
venéreas (tricomoniasis bovina y campilobacteriosis genital bovina) y también de la
brucelosis. Después del parto o aborto la brucella abortus continúa siendo eliminada en las
secreciones uterinas hasta 30 días, lo que torna las intervenciones ginecológicas una actividad
de riesgo para los veterinarios y también para los animales cuando el equipo no es
debidamente esterilizado (Duran, citado por Benítez, 2013).
2.2.7.6. Vía transfusión sanguínea
Varios agentes infecciosos pueden ser transmitidos por medio de la sangre como la
Babesia, anaplasma, brucella, retrovirus, por esta razón hay que tener mucho cuidado con el
estado sanitario de los animales que serán utilizados como donadores de sangre (Guzmán,
2017).
2.2.8. Patogenia
Como señala Mainato (2017), B abortus tiene tropismo por útero grávido, glándula
mamaria, testículos, glándulas sexuales masculinas accesorias, nódulos linfáticos, bolsas
sinoviales, cápsulas articulares de animales sexualmente maduros; una vez que la brucella
ingresa al organismo se multiplica en los nódulos linfáticos periféricos y de allí se disemina a
través de la linfa y la sangre a los órganos de predilección del hospedero. En los terneros la
multiplicación de la bacteria se da en lo nódulos linfáticos, para después pasar a las órganos
emuntorios (eliminadores) que los llevan al exterior, por eso en la mayoría de terneros la
brucella es transitoria ya que no son sexualmente maduros, sin embargo, si pueden desarrollar
brucelosis franca (síndrome de la lactancia de los terneros).
28
Ademas el autor postula que en una vaca adulta no gestante la brucella migra al
útero, glándula mamaria y viseras, la infección no induce el desarrollo de algún signo clínico.
Cuando la vaca queda gestante se infecta a través de las fases bacterémica que inicia en la
glándula mamaria y en el útero por medio de sus paredes, la proliferación de las brucella se ve
favorecida por el Eritritol, que es un carbohidrato que produce la placenta, y se encuentra en
mayor concentración en los líquidos fetales y en el feto, lo que favorece la localización de la
infección en estos tejidos. Una vez multiplicadas las brucellas producen endometritis erosiva
grave de los espacios situados entre los cotiledones placentarios, luego invaden el
alantocorion, contaminan al feto y los líquidos fetales, producen la destrucción de las
vellosidades coriales que llevan a la muerte y expulsión del feto.
2.2.9. Síntomas
Desde el punto de vista conceptual Neppas (2013), la brucelosis afecta a bovinos de
todos las edades, pero persiste con mayor repetición en animales sexualmente adultos, la
infección da lugar a aborto y retención de la placenta, que puede ocasionar infertilidad, en las
vacas el signo principal de la enfermedad es frecuentemente el aborto al final del tercio medio
de la gestación de 5 a 7 meses o en cualquier etapa de la gestación; sin embargo se han
presentado casos en los que no hay aborto , sino solamente retención placentaria y
endometritis, en el toro la brucelosis causa inflamación de los testículos con posterior atrofia.
Al respecto Duran, (2012) destaca los sintomasn de la siguiente manera: Vacas:
básicamente aborto a partir de la segunda mitad de la gestación se caracteriza por retención
placentaria, el feto ya sale deformado y degenerado, aparece una inflamación
fibrinopurulenta y necrótica de cotiledones y alteración fetal: edema, congestión pulmonar y
29
hemorragias. La placenta se observa difusa y gruesa, los cotiledones con áreas de necrosis, el
feto edematoso y con petequias, contenido estomacal turbio la infección en la ubre es común e
intermitente, los animales jóvenes son bastante resistentes a la B. abortus, pero su
susceptibilidad aumenta con el desarrollo sexual y la preñez
Señala ademas el autor, en toros produce orquitis con presencia de abscesos,
inflamación del epidídimo y órganos accesorios reproductivos. La orquitis puede ser
unilateral o bilateral. Semen proveniente de animales infectados transmite la enfermedad al
usarlo en inseminación artificial; existen razas que son más susceptibles que otras
2.2.10. Respuesta inmune contra Brucella abortus.
2.2.10.1. Inmunidad innata.
El rol de esta respuesta inmune en estadios tempranos de la infección es disminuir la
cantidad de bacterias y de esta manera promover un ambiente favorable para desarrollar la
respuesta de linfocitos TH1 en el hospedador; y así complementar su trabajo junto con los
neutrófilos y macrófagos (Llaguno, 2015).
Postula Samartino (2016), que diversos autores describen que tanto la fagocitosis
como el estallido respiratorio en macrófagos son dependientes de la opsonización de las
bacterias por antígeno y complemento, así como la activación celular para el interferón
gamma (IFN-γ) y el factor de necrosis tumoral-α (TNF- α) que puedan producir otras células.
2.2.10.2. Inmunidad adaptativa.
En esta respuesta se involucra tres grandes mecanismos:
30
1) El IFN-γ producido por células T CD4+, CD8+ y γδ activa las funciones
bacterianas del macrófago y así inhibe la supervivencia intracelular de la bacteria.
2) El macrófago infectado puede ser destruido por la citotoxicidad de los linfocitos T
CD8+ y γδ puede destruir al macrófago infectado.
3) Los isotopos de Acs de tipo T “helper 1” (Th1) como IgG2a e IgG3 opsonizan al
patógeno y facilitan la fagocitosis (Llaguno, 2015).
2.2.11. Factores de riesgo
Sostiene Cárdenas (2018), en el ganado vacuno los animales más susceptibles son
los individuos más sexualmente activos; los jóvenes suelen ser más resistentes, pero pueden
presentar infecciones latentes hasta que alcanzan la madurez sexual. Además, describe el
autor que constituyen factores de riesgo la gestación, debido a que los abortos son la principal
fuente de contagios, por lo general las pérdidas del feto se producen una sola vez gracias a la
inmunidad adquirida durante la infección. No obstante, puede existir un segundo o tercer
aborto.
Hay que tener presente que, aunque un animal que ha sido diagnosticado con
brucelosis no presenta sintomatología o el ganadero crea que esta curada aun elimina la
bacteria contaminando el ambiente.
Son factores de riesgo entre otro los mencionados a continuación (Cárdenas, 2018):
❖ Incremento del tamaño de las explotaciones.
❖ Incorporación de animales sin el control apropiado
31
❖ Uso común de pastos.
❖ Manejo inadecuado de los partos.
❖ Ausencia de vacunación.
2.2.12. Control.
Todos los esfuerzos en cuestión al control están centrados en dos puntos: Detección y
prevención; esto se debe a que de acuerdo a Merck Sharp y Dohme Corp citado en Llaguno,
(2015), ningún tratamiento es viable. Cabe hacer énfasis en que para lograr la erradicación de
la B. abortus es imperante detectar los focos de infección y realizar pruebas de diagnóstico
oportunas cada cierto tiempo.
Desde el punto de vista de Cárdenas (2018), la enfermedad entra al ganado cuando se
introduce un nuevo bovino al hato, es por ellos que se debe tener en claro la procedencia del
animal, cerciorarse si existe historial de abortos y si está debidamente vacunado.
Sostiene Mainato (2017), que la vacunación es la herramienta más eficaz en cuanto a
la prevención de la enfermedad, pues de esta manera se prepara al sistema inmune para la
infección, las principales sepas son B. Abortus strain 19 ó RB51, sin embargo, sin un control
adecuado del entorno que posibilite una severa exposición al agente patógeno, podría
contraerse la bacteria.
32
2.2.13. Inmunización contra Brucelosis.
Preparadas en su mayoría con los mismos gérmenes que producen la enfermedad
pero muertos o disminuidos en su virulencia los inmunizadores son capaces de conseguir la
respuesta orgánica con la producción de anticuerpos específicos, sin embargo, estos no tiene
una duración indefinida por lo que es necesario una dosis de refuerzo los cuales se
administraran de acuerdo a la cepa que se esté empleando en el animal con esto se garantizara
la permanencia de niveles altos y útiles de anticuerpos, además menciona Llaguno (2015), es
importante que el ganadero establezca un esquema de vacunación que por ningún motivo
podrá ser alterado, cambiado u omitido.
2.2.13.1 Cepa 19.
Esta vacuna, que ha servido de base en todos los programas de erradicación de la
brucelosis bovina en varios países es un cultivo vivo de brucellas, cada dosis contiene entre
10-60 X 109 unidades formadoras de colonias (CFU), se presenta comercialmente en forma
liofilizada. Se trata de una vacuna que contiene microorganismos atenuados de morfología
lisa, incapaces de crecer en presencia del Eritritol. Las características más sobresalientes de la
cepa S19 de B. abortus son: baja virulencia, relativamente alta inmunogenicidad y buena
antigenicidad, se recomienda aplicar en terneras de 3-6 meses de edad en dosis de 2 ml, vía
subcutánea en la tabla del cuello (Mainato, 2017).
La efectividad en el ganado bovino depende de la edad de vacunación, dosis, vía de
administración y la prevalencia de la brucelosis en el rebaño vacunado (Neppas, 2013).
33
Por otro lado, Mainato (2017), refleja que las ventajas que presenta el uso de este
biológico es que requiere inoculación única en toda la vida del animal, alcanza una respuesta
inmunitaria rápida y no presenta reacciones locales. Entre las desventajas, presenta una
reacción aglutinogénica, una infección patogénica ocasional persistente y requiere para su
conservación una cadena de frío rigurosa
2.2.13.2. Cepa RB51.
Fue desarrollada por el investigador chileno Cerbardt Schurig en la universidad
tecnológica de Virginia en EEUU. La vacuna RB51 es una cepa mutante derivada de la cepa
virulenta estándar de brúcela abortus (s2308) la cual carece de la mayoría de LPS de la cadena
“o”, que se encuentra tanto en la cepa vacunal anterior y también en la cepa de campo brúcela
abortus virulenta (Llaguno, 2015)
2.2.14. Diagnóstico
Como parte integral en los programas de control de brucelosis el diagnóstico de la
enfermedad debería ser realizado a través de las técnicas aprobadas por el INSAI como lo cita
el Artículo 15 de las normas sobre la vigilancia, prevención, y control de la brucelosis,
además debemos tener en cuenta que el diagnóstico clínico no posee utilidad, para la
detección del agente patógeno en estudio, sin embargo, existen diversos métodos de
laboratorio, en este apartado describiremos los más preponderantes, enfocándonos en la
prueba empleada en este trabajo investigativo; prueba de aglutinación con antígeno
tamponado (BPAT).
34
2.2.14.1. Diagnóstico serológico
B. abortus se puede recuperar de la placenta, pero más convenientemente en cultivo
puro del estómago y pulmones del feto abortado. La mayoría de las vacas cesa de excretar el
microorganismo desde el tracto genital cuando la involución uterina se ha completado.
Quedan focos de infección en el sistema retículo endotelial y la ubre, en estos casos el
microorganismo se puede aislar a partir de la leche y secreciones de la ubre no lactante
(Mainato, 2017).
Actualmente, el esquema de diagnóstico de la brucelosis en países como Venezuela,
se basa en pruebas serológicas que determinan la presencia de anticuerpos mediante pruebas
de aglutinación (Normas sobre la vigilancia, prevención, y control de la brucelosis). Las más
utilizadas en suero sanguíneo son: Prueba serológica Rosa de Bengala (card test) o prueba de
aglutinación en placa con antígeno tamponado (BPAT) , que detecta anticuerpos IgG1 e IgM
contra cepas lisas de brucella; pueden ser realizada como prueba tamiz en bovinos, caprinos y
porcinos además de ser un procedimiento cualitativo y rápido.
La Organización mundial de sanidad animal, OIE, como reguladora de los procesos
de diagnóstico y control de brucelosis y otras enfermedades infecciosas aprueba seis
exámenes indirectos para su diagnóstico oficial: la prueba de Aglutinación en placa con
antígeno tamponado, Rosa de Bengala, Fluorescencia polarizada, ELISA indirecto, Fijación
del complemento y ELISA competitivo. Las cuatro primeras son consideradas pruebas tamiz
y las otras confirmatorias (Neppas, 2013)
Enfatiza Neppas (2013), que actualmente hay una amplia gama de pruebas
diagnósticas para evidenciar anticuerpos específicos antibrucelares en suero, plasma
35
sanguíneo, leche y en otros fluidos orgánicos como: plasma seminal y mucus vaginal, estas
técnicas varían en sensibilidad y especificidad.
Por su bajo costo y rapidez de realización, el diagnostico serológico, es el método
más oportuno pues se han desarrollado técnicas de laboratorio de una suficiente especificidad
en cuya aplicación no se necesita emplear equipos sofisticados. Están técnicas están basadas
en el principio de aglutinación de los anticuerpos con antígenos a pH bajo y se dividen en dos
tipos de pruebas: las pruebas primarias o de screening y las pruebas secundarias o de
confirmación (Maslucán, 2018)
La detección de anticuerpos en suero, plasma, plasma seminal, leche o descarga
uterina es indicativa de infección en la finca. Primero se utilizan pruebas de alta sensibilidad
(tamiz) y luego las confirmatorias de menor sensibilidad, pero mayor especificidad. A
continuación, se describirán las mismas enfocándonos en la prueba empleada en este trabajo
investigativo, está es la prueba de aglutinación con antígeno tamponado (BPAT).
2.2.14.1.1. Pruebas Primarias o de Screening.
Se utiliza como pruebas primarias:
❖ Antígeno tamponado o antígeno bufferado de placa
Pruebas de antígeno acidificado tamponado o técnica de aglutinación con antígeno
tamponado (BPA), se utilizan generalmente como pruebas para la detección de anticuerpos
contra Brucella, ya que su realización es sencilla y de fácil implementación, así como rápida,
práctica y económica. Para su implementación se utilizan antígenos a un pH entre 3,65 y 4,0
36
para favorecer la aglutinación de los anticuerpos del isotipo IgG y reducir las interacciones no
especificadas (Samartino, 2016).
La desventaja de esta prueba, es que no puede detectar los anticuerpos que se
producen en los animales vacunados con Brucella abortus, cepa S19, por lo cual, para
detectarla se recomienda otra prueba de respaldo, de acuerdo a Cárdenas, (2018) la prueba
se considera como positiva, si se presenta un evento de aglutinación, sin importar si es muy
sutil, aunque siempre es necesaria una prueba confirmatoria, pero se considera negativa,
cuando no hay rastros de aglutinación tras el ensayo.
Para la OIE (2017), el Fundamento para la BPA, es una prueba tamiz, rápida,
práctica y económica que reduce las aglutinaciones inespecíficas y es ligeramente más
sensible que la prueba de Rosa de Bengala. El bajo pH del antígeno favorece la aglutinación
de los anticuerpos del isotipo IgG, por su simpleza se puede realizar en pequeños laboratorios
clínicos ya que no requiere equipos costosos.
Entre sus especificaciones, es cualitativa y se interpreta como positiva o negativa. La
muestra requerida es suero cristalino, no hemolizado, conservarlos congelados a -20º C +/- 4º
C. Antígeno de BPA, debe cumplir con las especificaciones del USDA, volumen celular
11%, pH 3.65 +/-0.02. Suero control positivo y suero control negativo (OIE, 2017)
Especifica el manual de procedimiento de brucelosis de la OIE lo siguiente:
Materiales a usar:
• Aglutinoscopio (caja de lectura de 45cm de largo x 35 cm de ancho x 15 cm
de profundidad), con fondo pintado de negro y con tapa de vidrio.
37
• Mezclador
• Placa de vidrio marcada con cuadrados de 4x4 cm
• Gradillas
• Micropipetas 10-100µl
• Equipos
• Refrigeradora; Freezer; Estufa; Centrífuga; Timer; Vortex.
Drogas y soluciones:
• Alcohol 70%
• Hipoclorito de sodio al 0.1%
Precauciones generales
• Almacenar el antígeno entre 5º C+/-2. Si se congela queda inutilizado.
• Para realizar la prueba tanto el antígeno como el suero deben estar a
temperatura ambiente (22+/- 4º C).
• Antes de usar el antígeno, rotar suavemente el frasco para
homogeneizar la suspensión.
• Verificar la fecha de vencimiento del antígeno antes de realizar la
prueba.
• La placa de vidrio debe estar limpia, libre de detergentes y seca.
• Homogeneizar los sueros antes de realizar el ensayo
38
• Utilizar un suero control positivo y un suero control negativo.
Medidas de bioseguridad
• Al ingresar al laboratorio de serología vestir equipo de protección
personal (Bata, calzado cerrado, cabello recogido) de acuerdo a las
recomendaciones del Manual de Bioseguridad de la OMS, 2005.
• Al manipular muestras de sangre utilizar guantes.
• Descartar los tips en solución de hipoclorito de sodio al 2% de
preparación diaria.
• Limpiar el área de trabajo al finalizar la tarea con hipoclorito de
sodio al 0.1% de preparación diaria.
• Quitarse los guantes y lavarse las manos al terminar el trabajo.
• Quitarse la bata al dejar el laboratorio.
Técnica
• Colocar 80 µl del suero control positivo en uno de los cuadrados de la placa
de vidrio.
• Colocar 80 µl del suero control negativo en otro cuadrado de la placa de
vidrio.
• Colocar 80 µl de suero problema en el tercer cuadrado de la placa de vidrio.
39
• Colocar 30 µl de antígeno cerca del suero.
• Mezclar suero y antígeno con palillo o mezclador.
• La mezcla debe tener una forma de 27x25mm
• Rotar suavemente la placa de vidrio, colocarla en el aglutinoscopio y taparla.
• A los cuatro minutos rotar nuevamente la placa y continuar la incubación.
• A los 8 minutos encender la luz y efectuar la lectura inclinando ligeramente la
placa.
Lectura e interpretación de los resultados
• Positivo: El ensayo se clasifica como positivo cuando aparece cualquier
aglutinación, aunque sea fina. Si el resultado es positivo realizar una prueba
confirmatoria.
• Negativo: Cuando la mezcla suero-antígeno es de turbidez homogénea y sin
grumos. Estas muestras se informan como negativas y no se realizan las
pruebas complementarias
Criterio de aceptación del resultado
Realizar el ensayo a los sueros controles antes que a las muestras. Los resultados
deben ser los esperados, positivos o negativos. En caso de discrepancias repetir el ensayo
cambiando el lote de antígeno.
40
❖ Rosa de bengala
Es una de las más comúnmente usada para el diagnóstico de la brucelosis bovina,
utiliza células completas de B abortus cepa 19 o cepa 1199.3 coloreadas con Rosa de Bengala
a un pH de 3.65. El pH bajo previene alguna aglutinación por IgM, y estimula la aglutinación
por IgG1, reduciendo así alteraciones no específicas. Se considera útil para el tamizaje
individual de animales, aunque pueden aparecer falsos positivos (Mainato, 2017).
❖ Anillo de leche
Esta es una prueba recomendado por la OIE como prueba de tamizaje inicial para la
brucelosis bovina, es de bajo costo para la inspección de hatos lecheros, se debe tomar la
muestra de leche fresca del tanque recolector de leche de los predios o de los bidones, que no
procedan de más de 25 vacas y de acuerdo con los resultados obtenidos, el predio se clasifica
en sospechoso o negativo (OIE, 2017). Ademas, agrega la OIE, que esta es una variante en la
prueba de aglutinación, es muy sencilla, pero es muy difícil preparar el antígeno adecuado.
El principio de la prueba en que los anticuerpos antibrucelares contenidos en la
muestra reaccionan con el antígeno coloreado (Hematoxilina) de brucellas formando con él un
complejo antígeno anticuerpo que se adhieren a los glóbulos de la grasa de la leche y por su
menor densidad asciende a la superficie, formando una capa de crema a manera de un anillo
de color morado, que varía por su intensidad desde morado intenso positivo a blanco cremoso
negativo (Mainato, 2017).
41
2.2.14.1.2. Pruebas secundarias o confirmatorias
Como menciona Mainato (2017), estas pueden dar como resultados falsos negativos
o positivos. Para ello estos resultados deben ser confirmados por otras pruebas más
especializada, cita las normas sobre la vigilancia, prevención, control y erradicación de la
brucelosis bovina, para confirmación definitiva o pruebas complementarias se deben hacer las
siguientes: Prueba Lenta en Tubo, Prueba 2-Mercaptoetanol, ELISA Competitiva, ELISA
Indirecto, Fluorescencia Polarizada (FPA), Fijación de Complemento (FC), Reacción en
cadena de la polimerasa (PCR), y cualquier otra que determine el Instituto Nacional de Salud
Agrícola Integral (INSAI). Las pruebas de ELISA y FPA se consideran además las adecuadas
para el cribado de la enfermedad, pudiendo conducir directamente al diagnóstico definitivo
según el criterio clínico y epidemiológico correspondiente.
2.2.14.1.3. Diagnóstico diferencial
Maslucán (2018), cita que se debe considerar las siguientes enfermedades abortivas
para el diagnóstico diferencial: leptospirosis, rinotraqueitis infecciosa bovina (IBR),
tricomoniasis, campilobacteriosis, listeriosis, aborto epizoótico (espiroquetosis), vibriosis.
.
2.2.15. Control y erradicación.
Los aspectos epidemiológicos que determinan la dificultad de la erradicación de la
brucelosis se pueden concretar en los siguientes:
• El animal infectado elimina un gran número de bacterias en el aborto o el
parto.
42
• La eliminación de bacterias en leche se puede mantener en toda la vida del
animal.
• Existen animales nacidos de vacas infectadas con infecciones latentes que
manifiestan los síntomas de la enfermedad en el momento del parto o aborto
• También existen animales infectados con curación aparente que, sin embargo,
pueden permanecer eliminadores durante toda su vida.
• La bacteria presenta una gran resistencia en el medio ambiente.
La única forma de liberar de esta enfermedad a una explotación ganadera, es a través
de la ejecución de un programa sanitario adecuado, que contemple la vacunación, medidas
sanitarias de manejo en la finca y exámenes sanguíneos periódicos, para diagnosticar,
identificar y eliminar los animales infectados (Cárdenas, 2018).
Esta misma idea la plantea Llaguno (2015), cuando menciona que la eliminación de
los animales enfermos, la vigilancia epidemiológica, la vigilancia sanitaria en canales y
mataderos, el control de la movilización de animales, las pruebas serológicas y las campañas
de educación sanitaria son indispensables en un programa de control.
Además, los autores mencionados indican que para el control de brucelosis en áreas
enzoóticas con alta prevalencia se recomienda la vacunación, en zonas o países con baja
prevalencia se puede proceder a un programa de erradicación, que consiste principalmente en
aplicar al rebaño repetidas pruebas serológicas de diagnóstico, y eliminar los animales
reactores hasta la desaparición completa del foco de infección
43
2.2.15.1. Cuarentena
Medida sanitaria que se aplica a los predios infectados con el fin de controlar el
movimiento de hembras y machos, la brucelosis al transmitirse por contacto directo, por lo
tanto el libre desplazamiento de animales provenientes de predios infectados amenaza la
condición sanitaria de predios limpios de la enfermedad. Se levantara la restricción cuando el
predio cuarentenado se declare saneado o hasta cuando los animales puedan desarrollar la
enfermedad que corresponde a veces de 120 días a1 año (Llaguno, 2015)
2.2.15.2. Vacunas
Las vacunas utilizadas contra la brucelosis en general no protegen completamente
contra la infección y/o el aborto. Hasta el momento, se han desarrollado diversas vacunas para
el control de esta enfermedad en las distintas especies.
La vacuna cepa RB51 es una mutante de la cepa 2308 de Brucella abortus,
genéticamente estable y de morfología rugosa, que perdió la cadena lateral o de polisacárido
de la superficie de la bacteria, por lo que no induce la producción de anticuerpos contra el
LPS en los animales vacunados. Este hecho es de importancia en el control de la enfermedad
ya que permite diferenciar los animales vacunados de los infectados naturalmente (Cárdenas,
2018).
En el mismo orden de idea, cita ademas el autor que la vacunación con RB51 no da
como resultado títulos de anticuerpos post vacunales contra Brucella que puedan ser medidos
por las pruebas standard. Los terneros se vacunan subcutáneamente entre los 4 y 12 meses, y
44
la revacunación de 12 meses en adelante, esta vacuna cepa RB51, permite la revacunación y
posibilita la vacunación de adultos sin riesgos de falsos positivos.
La vacuna B. abortus Cepa 19 confiere protección completa contra la infección en
67-75% de los animales vacunados. En un porcentaje superior al 95% de la vacunación evita
el aborto en hembras que se han infectado. Se utiliza como una vacuna viva que por lo general
se suministra a terneras entre 3 y 6 meses. La presencia de la cadena O del LPS explica el
desarrollo y persistencia de anticuerpos post-vacunales en el suero (Cárdenas, 2018).
Para la OIE tanto la vacuna RB51 como la cepa 19 son estables no se propagan de un
animal a otro, la ventaja de la RB51 comparada con la Cepa 19 es que no induce la formación
de anticuerpos los cuales son detectados por las pruebas estándar de diagnóstico de brucelosis.
La vacunación de hembras en estado de preñez podría causar aborto. La vacunación de
hembras adultas induce protección inmediata contra la Brucelosis ya que los animales
obtienen inmunidad 3-4 semanas después de la vacunación, lo cual acelera el proceso de
control de la enfermedad.
Ambas cepas vacunales son patógenas para el hombre, desde el punto de vista de la
Salud Pública, la infección con cepa RB51 en el hombre no es detectada por las técnicas
convencionales (deben utilizarse tests serológicos que detecten proteínas de la bacteria y no el
LPS). Por otro lado, el tratamiento común contra brucelosis no puede ser utilizado, porque
esta cepa es resistente a la rifampicina (Maslucán, 2018)
45
2.3. Bases legales
Este proyecto de investigación está sustentado en un conjunto de leyes vigentes en
torno al sector agro productivo: Como principal soporte se presenta la Constitución de la
República Bolivariana de Venezuela (CRBV), publicada en Gaceta Oficial Nº 36.860, de
fecha 30 de diciembre de 1999: Promueve en su preámbulo y en el texto la política de la
sustentabilidad, como motor de toda la dinámica nacional. Según esta constitución; fue
promulgada la Ley sobre Defensas Sanitarias Vegetal y Animal el 15 de agosto de 1941. El 11
de septiembre 2003 se publicó en Gaceta Oficial Nº 37.773 la Resolución DM/Nº 127; y para
para el 03 de octubre de 2017 hubo una nueva resolución mediante la cual se dictan las
Normas sobre la. Vigilancia, Prevención, Control y Erradicación de la Brucelosis Bovina
(NVPCBB) ... Gaceta Oficial de la República Bolivariana de Venezuela N° 41.205.
Cita las NVPCBB, en su Artículo 1. Que tiene por objetivo establecer las normas para
vigilar, prevenir, controlar y erradicar la brucelosis bovina, causada por Brucella Abortus, en
las especies susceptibles que se encuentran en todo el territorio nacional, y está orientada a
mejorar la productividad pecuaria, a fin de garantizar la seguridad alimentaria y la salud
pública.
Además, las NVPCBB en su Artículo 2. El Instituto Nacional de Salud Agrícola
integral (INSAI), ente adscrito al Ministerio del Poder Popular para la Agricultura Productiva
y Tierras, seré el ente encargado para implementar, supervisar y coordinar el Programa
Nacional de Vigilancia, Prevención, Control y Erradicación de la Brucelosis Bovina
(PROBRUCE), en todo el territorio nacional, a través de la Dirección de Salud Animal
46
Integral, de acuerdo a los lineamientos técnicos establecidos en el marco la presente
Resolución.
En el mismo orden de idea el Artículo 3. Cita que el Programa de Vigilancia,
Prevención, Control y Erradicación de la Brucelosis Bovina (PROBRUCE), se orientará
principalmente a los bovinos y bufalinos, sin perjuicio de las medidas pertinentes para otras
especies susceptibles, tales como ovinos, caprinos, porcinos, equinos, entre otros.
Estas normas en su Artículo 15 expresa. Se utilizará como prueba oficial tamiz o
cribado (screening) para el diagnóstico de la brucelosis bovina, la prueba serológica Rosa de
Bengala (Card Test) o prueba de aglutinación en placa con antígeno tamponado (BPAT),
quedando para confirmación definitiva o pruebas complementarias las siguientes: Prueba
Lenta en Tubo, Prueba 2-Mercaptoetanol, ELISA Competitiva, ELISA Indirecto,
Fluorescencia Polarizada (FPA), Fijación de Complemento (FC), Reacción en cadena de la
polimerasa (PCR), y cualquier otra que determine el Instituto Nacional de Salud Agrícola
Integral (INSAI). Las pruebas de ELISA y FPA se consideran además las adecuadas para el
cribado de la enfermedad, pudiendo conducir directamente al diagnóstico definitivo según el
criterio clínico y epidemiológico correspondiente.
Otros aspectos propuestos en la resolución incluyen el uso de la prueba de anillo en
las receptorías de leche como vigilancia epidemiológica y la acreditación respectiva a los
veterinarios de campo para realizar la prueba diagnóstica.
47
Sustenta legalmente este proyecto la Ley de Salud Agrícola Integral. La misma
responde a la necesidad de contar con una correcta y oportuna ejecución de políticas de salud
agrícola con una perspectiva integral que no sólo se circunscriba al combate de las plagas y
enfermedades que atacan a los animales y vegetales, sino también a la interacción de todos los
seres vivos y su entorno. Incorpora la noción de una salud agrícola integral entendida como
una herramienta fundamental que garantiza la soberanía y seguridad agroalimentaria de la
nación, con un claro enfoque sustentable y atendiendo a las especificidades del medio rural
con sus respectivos condicionamientos ecológicos, demográficos, económicos y
socioculturales. Además, auspicia la idea de corresponsabilidad y división de funciones en
materia de salud agrícola integral.
Esta ley en su Artículo 5, cita que el Ejecutivo Nacional, a través de sus órganos y
entes competentes, prestará especial atención a los pequeños y medianos productores y
productoras vinculadas con los consejos comunales, pueblos, comunidades indígenas y
cualquier otra forma de organización y participación comunitaria cuya actividad principal esté
relacionada con el desarrollo agrario, para lograr la prevención, control y erradicación de
enfermedades y plagas que afecten a los rubros animal y vegetal.
Además, el artículo, señala que el Programa de Brucelosis comprenderá las
siguientes actividades básicas:
1. Vigilancia Epidemiológica.
2. Diagnóstico sistemático de la Brucelosis en los animales, adoptando criterios
epidemiológicos, clínicos y de laboratorio.
48
3. Identificación, aislamiento, seguimiento y remisión a matadero o frigorífico de los
positivos, en un lapso no mayor de quince (15) días.
4. Sacrificio de los animales positivos.
5. Aplicación de las actividades de control de la movilización y comercialización de
animales, productos y subproductos destinados a fortalecer el cumplimiento del Programa.
6. Caracterizar la enfermedad en cada entidad para establecer un sistema de
clasificación de predios y áreas libres de Brucelosis.
7. Vacunación antibrucélica obligatoria para las especies susceptibles e
inmunizarles.
8. Aplicación de medidas sanitarias profilácticas a nivel de predios.
9. Campaña de educación y divulgación sanitaria local, regional y nacional con
participación de los sectores interesados (oficial y privado).
10. Elaboración de un manual de normas y procedimientos para la creación y
funcionamiento de los centros veterinarios de procesamiento de muestras.
11. Producción y abastecimiento oportuno de Biológicos.
12. Un Sistema de Adiestramiento y Acreditación de médicos veterinarios en
general.
Así mismo en el Artículo 11, explica que los propietarios o propietarias, ocupantes,
administradores o administradoras, o responsables de los predios pecuarios o agrícolas, o
cualquier persona vinculada al sector productivo, que tenga conocimiento o presunción de que
49
sus animales o cultivos están afectados por enfermedades o plagas, deben informar de
inmediato, o dentro de las veinticuatro (24) horas siguientes, a los órganos y entes del
Ejecutivo Nacional, competentes, a fin de articular la aplicación de las medidas zoosanitarias
y fitosanitarias correspondientes.
Por su condición sanitaria la brucelosis es vigilada en el ámbito nacional en especies
animales productivas como la bovina, bufalina, caprina, ovina, y porcina por medio del
INSAI, con el fin de promover y proporcionar seguridad e inocuidad alimentaria en las
diferentes cadenas productivas. Para tal efecto este ente gubernamental entre sus exigencias
sanitarias para la movilización cita lo siguiente; Animales Vivos: Exigencia sanitaria: Aval
sanitario vigente expedido por un Médico Veterinario del INSAI que contenga el certificado
de vacunaciones contra (fiebre aftosa, brucelosis, rabia) y pruebas diagnósticas (brucelosis,
tuberculosis).
La Constitución Nacional de la República Bolivariana de Venezuela, en su artículo
83 apoya la propuesta internacional hecha por la FAO en el 2002 en cuanto a Salud Publica
Veterinaria, al encargase la Medicina Veterinaria de las Zoonosis, las enfermedades
profesionales y de la higiene del medio ambiente en relación con los animales. El artículo 84
demuestra la intención del gobierno en que el sistema de salud sea de carácter intersectorial,
descentralizado y participativo, dándole prioridad a la promoción de la salud y la prevención
de las enfermedades, pudiendo lograrse esto mediante charlas dirigidas a las comunidades. En
el mismo orden de idea, el artículo 85 muestra la preocupación del estado por formar
profesionales integrales en salud, incluyendo en ello los Médicos Veterinarios que velen por
la salud de los animales con los que vivimos y que también promuevan campañas de
50
prevención de enfermedades y saneamiento ambiental para proteger a las personas
perteneciente a las comunidades, que convivan directamente o no con los animales.
La ley Orgánica de Salud (2002), en su artículo 1, al garantizar el derecho a la Salud
como un erguido fundamental, apoya acciones particulares o conjuntas, orientadas a la
promoción de la salud y prevención de enfermedades, cualquiera que sea su origen. El
artículo 5 señala que promover y defender la salud es un deber de todos los ciudadanos,
profesionales al difundir conocimientos y no profesionales al apoyar acciones propuestas y
hacer que se cumplan provechosamente. Por otra parte, el artículo 20 hace énfasis en la
educación para la salud, prevención de enfermedades y la participación social en salud, en el
cual se encuentra la justificación jurídica de la difusión de la información. Y en su artículo 32
igualmente se tiene apoyo en cuanto a la promoción de la salud por medio de la difusión de la
información, especificando los procesos de salud y enfermedad que permitan el conocimiento
de los mecanismos de prevención.
La ley de Ejercicio de la Medicina Veterinaria (1968), en su artículo 7 demuestra la
integralidad del Médico Veterinario al incurrir este en procesos de extensión, siempre con
altos niveles de ética y profesionalismo, al mismo tiempo que su empeño y esmero se centran
en procúrale una mejor calidad de vida al paciente culturizando también al cliente.
Además, la Ley de Mercadeo Agrícola, cuyo planteamiento normativo establece que
esta ley está dirigido a la planificación, fomento, regulación y evaluación de todas las fases
comerciales del mercadeo de productos e insumos para la producción agrícola, y propicia el
incremento conjunto de la seguridad alimentaria y la producción agrícola interna; además de
51
contribuir a la organización del sistema de financiamiento, comercialización y distribución de
alimentos a nivel nacional.
En consecuencia, el propósito fundamental de este proyecto es determinar la
prevalencia de Brucelosis bovina en la finca Palmasola del sector la Piedra del municipio
Piritu, estado Falcón desde una perspectiva integral, considerando aspectos como el plan
sanitario, y sus posibles incidencias en la producción pecuaria.
Por otra parte, considerando la nueva realidad pecuaria venezolana el proyecto
deberá estar enmarcado en el logro de una mayor productividad en el sector, disminución del
déficit del sector externo pecuario y en fomentar una mejor calidad de vida del hombre del
campo.
En este sentido, y en consonancia con lo establecido por la Constitución de la
República Bolivariana de Venezuela en su artículo 307, este proyecto pretende identificar la
prevalencia de brucelosis en los bovinos de la finca Palmasola para aplicar las normas
sanitarias correspondientes según los resultados, para el aseguramiento de la protección y
seguridad ambiental, agroalimentaria y salud pública.
2.4. Sistema de Hipótesis
Esta investigación como se menciono tiene un alcance descriptivo por tal se formulan
hipótesis que, para Hernández, Fernández, y Baptista (2014), las hipótesis son explicaciones
tentativas del fenómeno investigado que se enuncian como proposiciones o afirmaciones y las
misma se derivan de la teoria existente. A continuacion se plantea la hipótesis.
2.4.1. Hipótesis Alternativa (Ha)
52
Probabilidad de que exista brucelosis bovina en el sector la Piedra
2.4.2. Hipótesis Nula (Ho)
Probabilidad de que no exista brucelosis bovina en el en el sector la Piedra
2.5. Operacionalización de Variables
En el presente proyecto de investigación trabajaremos con variables estadísticas que
otorgaran como resultado un valor numérico, para Arias (2012), una Variable es una
característica o cualidad; magnitud o cantidad, que puede sufrir cambios, y que es objeto de
análisis, medición, manipulación o control en una investigación. Por tal se representarán en un
cuadro de operacionalidad de las variables para medir las mismas.
2.5.1. Variable independiente: Diagnóstico de brucelosis bovina
2.5.2. Variable dependiente: Prevalencia, normas sanitarias
53
Cuadro 1. Operacionalización de variable para analizar las muestras serológicas mediante la técnica BPA
Fuente: Elaboración propia (2021)
Objetivo general: Determinar la prevalencia de Brucelosis bovina en la finca Palmasola del sector la Piedra del municipio Piritu,
estado Falcón.
Objetivo especifico Variable
(independiente)
Definición conceptual Dimensión Indicador
Realizar el diagnóstico
para brucelosis bovina
mediante la Técnica de
aglutinación con
antígeno tamponado
(BPA)
Diagnóstico
Brucelosis Bovina
Se puede realizar de
manera directa, aislando
el microorganismo a
partir de cultivos de
sangre, médula ósea u
otros tejidos o indirecta a
través de métodos
serológicos que detectan
anticuerpos (OIE, 2017).
Es una enfermedad
infectocontagiosa,
producida por la bacteria
Brucella abortus, que
afecta principalmente a
las hembras bovinas
(Cárdenas, 2018)
Abortos pasados el
quinto mes de
gestación.
Método de
aglutinación.
Positivo
Negativo
54
Cuadro 2. Operacionalización para establecer la prevalencia de brucelosis en los bovinos de la finca Palmasola
Fuente: Elaboración propia (2021)
Objetivo general: Determinar la prevalencia de Brucelosis bovina en la finca Palmasola del sector la Piedra del municipio Piritu, estado
Falcón.
Objetivo especifico Variable
(dependiente)
Definición conceptual Dimensión Indicador
Establecer la prevalencia
de brucelosis en los
bovinos de la finca
Palmasola para aplicar las
normas sanitarias
correspondientes según
los resultados.
Prevalencia
Normas Sanitarias
Mide la proporción de
animales que se encuentran
enfermos al momento de
evaluar el padecimiento en
la unidad de producción en
un momento determinado
(Cárdenas, 2018)
Son especificaciones
zoosanitarias para mejorar
la sanidad y el bienestar de
los animales, así como la
salud pública veterinaria
(OIE, 2017).
Descenso de la
fertilidad.
Reducción en la
producción de leche
Positivo
Negativo
55
CAPÍTULO III: MARCO METODOLÓGICO
3.1. Nivel y Diseño de la Investigación
El trabajo de investigación actual para determinar la prevalencia de brucelosis bovina
tiene un enfoque cuantitativo, debido que se medirán y analizarán cuantitativamente variables,
está dentro de un estudio epidemiológico descriptivo transversal, asimismo, se tratará de una
investigación de campo con carácter descriptivo, pues no se llevará a cabo ninguna
manipulación ni control de las variables sometidas a estudio. La clasificación para el tipo de
diseño de campo correspondiente, es de la investigación no experimental, durante el periodo
desde junio a octubre del 2021.
El estudio presenta un diseño de encuesta, donde se obtendrán en un momento
determinado los datos mediante la aplicación de la encuesta epidemiológica a los productores
del sector la Piedra.
3.2. Población y Muestra
La población considerada estuvo constituida en una primera etapa de la investigación
por los 7 productores del sector la Piedra que a continuación se mencionan: Héctor Bracho,
Ángel Bracho, Rafael Campos, Pablo Zavala, Heriberto Díaz, Mamerto Bracho y Rafael
Bracho.
En la segunda etapa solo se abordaron cuyos productores aceptaron su participación
en la investigación, según la encuesta epidemiológica aplicada a estos productores la
población está constituida por 154 bovinos, distribuidos de la siguiente manera:
56
Tabla 1. Productores
PRODUCTOR UNIDAD DE PRODUCCIÓN SEMOVIENTES BOVINOS
Ángel Bracho Valle Encantado 45
Heriberto Díaz Palmasola 48
Rafael Campos La Lora 61
154
TOTAL
Fuente: Elaboración propia (2021)
Cabe destacar, que con la encuesta dirigida a los propietarios y personal obrero de las
fincas del sector objeto a estudio se cuantifico la cantidad de semovientes en las unidades de
producción, para determinar posteriormente el tamaño de la muestra y proceder a la
extracción de la sangre y determinar presencia o no de brucelosis.
Tabla 2. Número de animales y fincas encuestadas
SEMOVIENTES VALLE ENCANTADO PALMASOLA LA LORA
Vacas en produccón 10 15 21
Vacas secas 5 2 3
Becerros 5 11 8
Becerras 6 4 13
Mautes 11 4 0
Novillas 7 10 15
Toro 1 2 1
Sub Total 45 48 61
TOTAL 154
Fuente: Elaboración propia (2021)
57
El muestreo o la muestra fue del tipo denominada a conveniencia, ya que de las tres
fincas cuyos propietarios estuvieron de acuerdo en participar en la investigación, se
seleccionó la finca Palmasola por la facilidad de acceso, y por el factor económico que
representaba una cantidad muestral muy grande. Además, de acuerdo a la encuesta aplicada
fue la finca con mayor historia de abortos, infertilidad, nacimiento de crías débiles, y
disminución de la producción de leche factores asociados a infección por Brucella, facilitando
disponibilidad de animales que cumplían con los criterios de inclusión para la muestra.
Tabla 3. Número de animales que conforman la población de la finca seleccionada
SEMOVIENTES PALMASOLA
Vacas en produccón 15
Vacas secas 2
Becerros 11
Becerras 4
Mautes 4
Novillas 10
Toro 2
TOTAL 48
Fuente: Elaboración propia (2021)
Los criterios de inclusión para la selección de los animales a muestrear en la finca
Palmasola son los considerados en el Artículo 23 de las normas sobre vigilancia, prevención y
control de brucelosis, donde cita que la toma de muestra para diagnóstico a hembras bovinas
es partir de los 20 meses de edad y los machos a partir de los 6 meses de edad, en esta
investigación se muestreo los toros reproductores ya que ellos también pueden infectarse
provocándoles perdida de fertilidad, constituyéndose así la muestra de la siguiente manera:
Prevalencia de brucelosis bovina en la Finca Palmasola, sector La Piedra, municipio Píritu, estado Falcón
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  • 1. REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA MINISTERIO DEL PODER POPULAR PARA EDUCACIÓN UNIVERSITARIA UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL “FRANCISCO DE MIRANDA” PROGRAMAS NACIONALES DE FORMACIÓN Y MUNICIPALIZADOS PROGRAMA CIENCIAS VETERINARIAS PREVALENCIA DE BRUCELOSIS BOVINA EN LA FINCA PALMASOLA, SECTOR LA PIEDRA, MUNICIPIO PÍRITU, ESTADO FALCÓN TUTORA: MED. VET. DRAIDETH MIQUILENA AUTORA: DÍAZ Q., EURIMAR Y. (C.I. 26.598.482) TOCÓPERO, NOVIEMBRE DE 2021
  • 2. ii AGRADECIMIENTO Finalizando mí trabajo agradezco, a la Universidad Nacional Experimental Francisco De Miranda por la preparación académica para poder ser una profesional y así contribuir con el país. A mis profesores de la universidad del programa ciencias veterinaria ya que todos aportaron un granito de arena compartiendo sus conocimientos y enseñanzas a lo largo de mi carrera; para llevar acabo la culminación de mis estudios Mi agradecimiento profundo a la tutora de mi trabajo de grado, Médico veterinario Draideth Miquilena; quien ha sido la persona que me guio desde el inicio de mi carrera hasta el final de una manera positiva y colaboradora la cual me brindo sus aporte y consejos profesionales que hoy en día son de gran importancia para mí.
  • 3. iii DEDICATORIA El presente trabajo es dedicado a mi dios todopoderoso ya que todo es posible gracias a él, a mi madre Marbelys Quero, a mi padre Heriberto Díaz, a mi hermano Elvis Díaz y a mi novio Gustavo Maldonado que han sido mi pilar fundamental, y que de alguna manera u otra han hecho posible que termine mis estudios en este caso mi trabajo de grado. A mi familia también, como lo es mi abuelo Heriberto Jesús Díaz Ordoñez “tico Díaz” que está en el cielo desde allá me cuida y me protege. Todo este esfuerzo y logro es para él, a mi abuela Hilda mujer luchadora de 81 años que mi dios le dio la oportunidad de verme crecer y terminar mis estudios, a mi sobrina hermosa Ivanna Díaz que con su alegría y carisma motiva a seguir adelante, en especial primo Leonardo Jesús Córdova muy colaborador. Y Amigos que de alguna forma también me motivaron para que culminara mis estudios y nunca dejara de soñar con mi profesión de Médico veterinario.
  • 4. iv REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA MINISTERIO DEL PODER POPULAR PARA EDUCACIÓN UNIVERSITARIA UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL “FRANCISCO DE MIRANDA” PROGRAMAS NACIONALES DE FORMACIÓN Y MUNICIPALIZADOS PROGRAMA CIENCIAS VETERINARIAS PREVALENCIA DE BRUCELOSIS BOVINA EN LA FINCA PALMASOLA, SECTOR LA PIEDRA, MUNICIPIO PÍRITU, ESTADO FALCÓN Autora: Eurimar Y. Díaz Q. Tutora: Med. Vet. Draideth Miquilena Año: 2022 RESUMEN La investigación tuvo como objetivo diagnosticar brucelosis en la población bovina de la finca Palmasola, sector la Piedra, mediante la prueba de aglutinación con antígeno tamponado (BPAT), se tomaron 29 muestras sanguíneas, de 27 hembras y 2 machos mayores a 1 año, dando un total de 29 bovinos. El método de campo comprendió la extracción de sangre de la vena coccígea, se utilizaron tubos sin anticoagulante, correctamente rotulados con la identificación de cada animal. En el laboratorio de la Agropecuaria Mis Abuelos se centrifugó, obteniendo el suero sanguíneo, utilizándose el antígeno bufferado para placa (BPA) como prueba tamiz. No se presentaron casos reactores por lo tanto se obtuvo una prevalencia del 0%. Así se demostró que la brucelosis bovina no es la enfermedad que está causando nacimiento de crías débiles, disminución de la producción y algunos abortos en la finca objeto a estudio, por tal se recomienda realizar diagnóstico diferencial para enfermedades como leptospirosis, rinotraqueitis infecciosa bovina (IBR), tricomoniasis, entre otras. Palabras claves: Brucelosis bovina, Brucella abortus, bovinos, antígeno bufferado para placa, pruebas serológicas.
  • 5. v REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA MINISTERIO DEL PODER POPULAR PARA EDUCACIÓN UNIVERSITARIA UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL “FRANCISCO DE MIRANDA” PROGRAMAS NACIONALES DE FORMACIÓN Y MUNICIPALIZADOS PROGRAMA CIENCIAS VETERINARIAS PREVALENCE OF BOVINE BRUCELLOSIS AT FINCA PALMASOLA, LA PIEDRA SECTOR, PÍRITU MUNICIPALITY, FALCÓN STATE Author: Eurimar Y. Díaz Q. Tutor: Med. Vet. Draideth Miquilena Date: 2022 ABSTRACT The objective of the research was to diagnose brucellosis in the bovine population of Palmasola farm, la Piedra Sector, Using the buffered antigen agglutination test (BPAT), 29 blood samples were taken from 27 females and 2 males older than 1 year, giving a total of 29 bovines. The field method included the extraction of blood from the coccygeal vein, tubes without anticoagulant were used, correctly labeled with the identification of each animal. In the laboratory of the Agropecuaria Mis Abuelos it was centrifuged, obtaining the blood serum, using the buffeted antigen for plaque (BPA) as a sieve test. There were no reactive cases, therefore a prevalence of 0% was obtained. Thus, it was demonstrated that bovine brucellosis is not the disease that is causing the birth of weak offspring, decreased production and some abortions on the farm under study, therefore it is recommended to perform a differential diagnosis for diseases such as leptospirosis, rhinotracheitisbovine infectious disease (IBR), trichomoniasis, among others. Key words: Bovine brucellosis, Brucella abortus, bovines, buffeted plaque antigen, serological tests.
  • 6. vi ÍNDICE GENERAL AGRADECIMIENTO ......................................................................................................ii DEDICATORIA..............................................................................................................iii RESUMEN ...................................................................................................................... iv ABSTRACT .................................................................................................................... iv INDICE GENERAL ........................................................................................................ vi INDICE DE CUADRO.................................................................................................... ix INDICE DE GRAFICOS.................................................................................................. x INDICE DE TABLAS..................................................................................................... xi INTRODUCCION............................................................................................................ 1 CAPÍTULO I: EL PROBLEMA ...................................................................................... 6 1.1. Planteamiento del Problema.............................................................................. 6 1.2. Formulación del Problema............................................................................... 11 1.3. Objetivos de la Investigación............................................................................... 11 1.3. Justificación de la Investigación...................................................................... 12 1.4. Delimitación de la Investigación ..................................................................... 14 1.5. Limitaciones de la Investigación..................................................................... 14 CAPÍTULO II: MARCO REFERENCIAL CONTEXTUAL ........................................ 15
  • 7. vii 2.1. Antecedentes de la Investigación......................................................................... 15 2.2. Bases Teóricas ..................................................................................................... 19 2.2.1 Historia de la brucelosis................................................................................. 19 2.2.2. Importancia de la enfermedad ...................................................................... 20 2.2.3. Impacto economico, en la salud pública y presentacion de la enfermedad en humanos................................................................................................................................ 20 2.2.3. Sinonimia...................................................................................................... 22 2.2.4. Generalidades de la Brucella abortus......................................................... 22 2.2.5 Distribución geográfica ................................................................................. 23 2.2.6. Taxonomía.................................................................................................... 23 2.2.7 Fuentes y vías de infección............................................................................ 24 2.2.8. Patogenia....................................................................................................... 27 2.2.9. Síntomas ...................................................................................................... 28 2.2.10. Respuesta inmune contra Brucella abortus. ............................................... 29 2.2.11. Factores de riesgo ...................................................................................... 30 2.2.12. Control....................................................................................................... 31 2.2.13. Inmunización contra Brucelosis. ............................................................... 32 2.2.14. Diagnóstico................................................................................................. 33 2.2.15. Control y erradicación. ............................................................................... 41
  • 8. viii 2.3. Bases legales........................................................................................................ 45 2.4. Sistema de Hipótesis............................................................................................ 51 2.5. Operacionalización de Variables ......................................................................... 52 CAPÍTULO III: MARCO METODOLÓGICO.............................................................. 55 3.1. Nivel y Diseño de la Investigación...................................................................... 55 3.2. Población y Muestra ............................................................................................ 55 3.3. Técnicas e Instrumentos de Recolección de Datos.............................................. 58 3.4. Validez y Confiabilidad de los Instrumentos de Recolección de Datos.............. 58 3.5. Fases de la Investigación ..................................................................................... 59 3.6. Tratamiento Estadístico de los Datos .................................................................. 63 CAPÍTULO IV: ANALISIS Y DISCUSION DE LOS RESULTADOS....................... 64 CAPÍTULO V: CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ................................... 68 5.1. Conclusiones........................................................................................................ 68 5.2. Recomendaciones ................................................................................................ 68 Bibliografía..................................................................................................................... 70 Anexos ............................................................................................................................ 75
  • 9. ix ÍNDICE DE CUADROS Cuadro 1. Operacionalización de variable para analizar las muestras serológicas mediante la técnica BPA............................................................................................................... 53 Cuadro 2. Operacionalización para establecer la prevalencia de brucelosis en los bovinos de la finca Palmasola....................................................................................................... 54
  • 10. x ÍNDICE DE GRÁFICOS Gráfico 1. Resultados del análisis por sexo de Brucella abortus en la población bovina de la finca Palmasola; casos positivos y negativos....................................................................... 64 Gráfico 2. Frecuencia de brucelosis bovina en la finca Palmasola................................. 65 Gráfico 3. Frecuencia proporcional de bovinos muestreados según la edad.................. 66 Gráfico 4. Bovinos vacunados y no vacunados contra la Brucella abortus en la finca Palmasola...................................................................................................................................... 67
  • 11. xi ÍNDICE DE TABLAS Tabla 1. Productores ....................................................................................................... 56 Tabla 2. Número de animales y fincas encuestadas ....................................................... 56 Tabla 3. Número de animales que conforman la población de la finca seleccionada .... 57 Tabla 4. Muestra según criterios de inclusión ................................................................ 58 Tabla 5. Resultados del análisis de Brucella abortus en la población bovina de la finca Palmasola; casos positivos y negativos......................................................................................... 64 Tabla 6. Frecuencia de brucelosis bovina en la finca Palmasola.................................... 65 Tabla 7. Frecuencia proporcional de bovinos muestreados según la edad..................... 66 Tabla 8. Bovinos vacunados y no vacunados contra la Brucella abortus en la finca Palmasola...................................................................................................................................... 67
  • 12. 1 INTRODUCCIÓN La brucelosis bovina es una enfermedad infectocontagiosa conocida como aborto infeccioso, afectando a bovinos de todas las edades, pero persiste con mayor frecuencia en animales sexualmente adultos, principalmente en ganaderías de cría y leche, conjuntamente, son susceptibles a la enfermedad otras especies como los porcinos, ovinos, caprinos, equinos y búfalos, produciendo en éstas variados signos. Además, es una enfermedad infecciosa de alto impacto en las ganaderías debido a las pérdidas económicas que causa por ser un padecimiento reproductivo, altamente contagiosa. Podemos incluir, que la brucelosis bovina es relevante desde el punto de vista sanitario no solo a nivel nacional sino internacional, pues está clasificada entre las enfermedades zoonóticas, que, a su vez, en nuestro territorio Nacional es considerada de declaración obligatoria ante el Instituto Nacional de Salud Agrícola Integral (INSAI). Por otro lado, la brucelosis es considerada una enfermedad ocupacional, representando un riesgo ocupacional a las personas involucradas en la manipulación de los animales contaminados ya que se pueden contagiar por contacto directo con los tejidos, sangre, orina, fetos abortados, líquidos fetales y placenta, así como también un problema de salud pública de gran impacto en la sociedad ya que se transmite en forma natural de los animales vertebrados al hombre, por el consumo de sus derivados (leche, carne cruda y productos lácteos no pasteurizados) así como de los consumidores de leche de animales enfermos.
  • 13. 2 Considerando que la brucelosis tiene una distribución mundial tanto para los animales como para el humano y que en el sector la Piedra del municipio Piritu no se tiene un control eficaz de la misma, decidimos el día 23 de septiembre del 2021 siendo las 10:00 am dirigirnos al INSAI donde fuimos atendidas por el Jefe de salud animal Médico Veterinario Blas Chirinos y este nos notifico que ese organismo no cuenta con la información actualizada sobre diagnostico de brucelosis bovina en el municipio Piritu ya que desde hace aproximadamente 10 años ningún médico veterinario de ejercicio libre, ni institucional realiza seguimiento de la brucelosis bovina, y la información sobre movilización de bovinos reposa en un computador que al momento de nuestra visita se encontraba dañado. Piritu es un municipio con grandes extensiones de tierras dedicadas a la producción ganadera, por ende, una parte significativa de la población se dedica a esta actividad, ya que genera mano de obra a las familias piriteñas, sin embargo, estas personas se enfrentan día a día a diferentes microorganismos y/o enfermedades provenientes de dichos animales, como lo es el caso de la Brucelosis Bovina. En virtud de la importancia que reviste esta enfermedad se tomó la determinación de realizar el presente trabajo investigativo para determinar la prevalencia de la brucelosis bovina en el sector la Piedra del municipio Piritu del estado Falcón, con la intención de beneficiar a todos los involucrados; de esta manera los propietarios de las fincas seleccionadas quienes obtendrán un estudio enmarcado en el método científico donde conocerán la realidad de su hato brindándoles información pertinente sobre las causas y consecuencias que podría tener la brucelosis.
  • 14. 3 De acuerdo a la metodología a seguir en el proceso investigativo el día 28 de mayo de 2021, a las 8:00 am con el fin de conocer a través de la observación directa y participativa la realidad existente en el sector la Piedra, y diagnosticar el o los problemas existentes nos reunimos con los señores Héctor Bracho, Ángel Bracho, Rafael Campos, Pablo Zavala, Heriberto Díaz, Mamerto Bracho y Rafael Campos todos ellos productores que hacen vida en el sector la Piedra, iniciada la reunión se les explico a los presentes el perfil de las investigadoras, apoyándonos de la técnica de la lluvia de ideas y para generar confianza y ampliar la participación de los asistentes se procedió a escuchar la problemática existente en sus unidades de producción. Una vez jerarquizada las problemáticas, con los propietarios y empleados de las fincas, se determinó que ninguno de los animales ha recibido inmunización contra Brucella Abortus, además, de acuerdo al testimonio de las personas antes descritas se ha evidenciado abortos en las unidades de producción, nacimientos de crías débiles y disminución de la producción láctea. Considerando estos síntomas de la situación problema en el futuro, y teniendo en cuenta que las hembras son quienes representan la rentabilidad de una finca, podemos deducir una infección con brucelosis en los bovinos del sector, trayendo esto considerables pérdidas en la producción afectando de manera directa a la economía del propietario y sus empleados además de ser un foco infeccioso que podría instaurar el desencadenamiento de una epidemia infecciosa con la bacteria incrementando su presencia y reduciendo a los propietarios la probabilidad de convertirse en un productor cárnico y lechero de inocuidad sanitaria, además de la gran probabilidad de zoonosis de la enfermedad con riesgo de contagio a las personas encargadas del manejo del ganado bovino generándose así un problema de salud pública.
  • 15. 4 Por esta razón mediante el desarrollo de este proyecto de tesis se desea incentivar una cultura de prevención en los ganaderos del sector y poner de manifiesto a las autoridades de los ministerios respectivos, sobre las repercusiones que la brucelosis tiene, en la población vacuna, generando pérdida económica en el sector pecuario, por la disminución en la producción de carne como consecuencia de los abortos, nacimientos de crías débiles, muerte perinatal de terneros, menor producción de leche, disminución de la fertilidad, esterilidad entre otras., repercutiendo en las relaciones comerciales debido a las restricciones que provoca la enfermedad, por lo tanto, resulta imperante que los datos aquí expuestos sean fidedignos y tratando de cuidar el margen de error para sí ofrecer información pertinente que promueva una producción bovina de óptima calidad. La metodología a usar en este estudio epidemiológico está basada en la investigación de campo de tipo descriptiva debido a que se intenta determinar la presencia de brucelosis en ganado bovino, mediante la presencia o no de formación de grumos luego de aplicado el reactivo en las muestras tomadas, utilizando como prueba tamiz la Técnica de aglutinación con antígeno tamponado (BPA), como lo cita el Artículo 15 de las Normas sobre la Vigilancia, Prevención, Control y Erradicación de la Brucelosis Bovina, publicada en la Gaceta Oficial de la República Bolivariana de Venezuela N° 41.249 de fecha 3 de octubre de 2017. Estructuralmente el trabajo está enmarcado de la manera siguiente: Capítulo I: El problema donde se describe su planteamiento, se formula el problema mediante unas interrogantes, se presenta el objetivo general y los objetivos específicos, la justificación y la delimitación del estudio. El Capítulo II: Comprende el marco referencial, con los antecedentes
  • 16. 5 de la investigación, sus bases teóricas, y el cuadro de operacionalización de variables y la hipótesis, el IV Capítulo corresponde al análisis y discusión de los resultados y, por último, en el Capítulo V se incumbe las conclusiones y recomendaciones. Finalmente, se presentan las referencias bibliográficas y los anexos.
  • 17. 6 CAPÍTULO I: EL PROBLEMA Este capítulo se constituye por los siguientes aspectos: el planteamiento del problema, su formulación, los objetivos de la investigación, la justificación, y la delimitación del mismo, es importante resaltar que en toda investigación científica el problema es el punto de partida del estudio. Para Aguírre (2016), el problema se manifiesta como obstáculo que podrían tener múltiples manifestaciones: dificultades, dudas, disgustos, preocupaciones, vacíos cognoscitivos, anomalías, conflictos cognitivos o contradicciones. La presente investigación se basa en determinar la prevalencia de brucelosis bovina en el sector la Piedra en el municipio Piritu, este inconveniente se fundamenta en que en el municipio hasta la fecha no se cuenta con antecedentes sobre brucelosis bovina, lo que implica que realizar un diagnóstico de la enfermedad resulta significativo para este sector en donde la población comparte un mismo ecosistema con los bovinos, y que de existir la patología sería un riesgo no solo para la actividad ganadera, sino también para la comunidad en general que habita en el sector, considerando que la brucelosis ha sido estimada por la Organización Mundial de la Salud (OMS) como una zoonosis preocupante para la sociedad humana A continuación, se procede a plantear el problema de investigación. 1.1. Planteamiento del Problema EL planteamiento del problema describe una situación en cuestión que debe ser resuelto, es el punto de partida que da el enfoque y se obliga a centrarse en algo concreto. Para
  • 18. 7 identificar el problema es necesario considerar el contexto, antecedentes, especificidad y relevancia de la investigación (Hernández y Olguín, 2020) Siguiendo a Hernández y Olguín, plantear el problema significa enunciar en forma descriptiva y en términos concretos y sencillos los elementos o características que se observan en el problema: hechos relevantes, factores causales, efectos, propiedades, determinación de cuanto, del cómo y del cuándo entre otros. La brucelosis es una enfermedad zoonótica producida por la bacteria del género Brucella (B.). Incluye especies como B. melitensis, B. abortus, B. suis, B. canis, B. ovis que afectan a hembras y machos de caprinos, bovinos, porcinos, perros y ovinos respectivamente, aunque algunos animales pueden ser reservorios de más de una especie (Acha y Szyfres, 2001, citado por Castro 2018). La característica principal de la enfermedad es que provoca abortos, de este modo las hembras preñadas que se infectan liberan al medio millones de bacterias a través del feto, la placenta y flujo vaginal, contaminando el pasto, agua y corrales con brucellas (Robles, 2003, citado por Castro 2018). De esta manera, el medio se transforma en el principal reservorio de la enfermedad. Las personas y los animales la adquieren por ingestión de leche o lácteos crudos y contaminados, y por el contacto directo con tejidos, sangre, descargas vaginales, fetos y placentas provenientes de animales brucelosos. Al respecto, la brucelosis ha sido clasificada y reconocida por la Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación (FAO) de la Organización Mundial de la Salud (OMS) como una de las 166 zoonosis; resaltando el impacto en la calidad de vida de los humanos y animales, así como en el desarrollo económico, agro cultural y del turismo. La
  • 19. 8 epidemiología de la brucelosis humana, es que afecta a cientos de miles de personas en todo el mundo. Para prevenir la brucelosis, es útil evitar los productos lácteos crudos y tomar precauciones al trabajar con animales o en un laboratorio (Mayo Clinic, 2021) Por otra parte, el Institute for International Cooperation in Animal Biologics (2013), señala que la brucelosis se encuentra en todo el mundo, pero está controlada en la mayoría de los países desarrollados. La enfermedad clínica todavía es común en el Medio Oriente, Asia, África, América Central y del Sur, Cuenca Mediterránea y el Caribe. Las especies de Brucella varían en su distribución geográfica. B. abortus se encuentra en todo el mundo, en las regiones ganaderas con excepción de Japón, Canadá, algunos países europeos, Australia, Nueva Zelanda e Israel, donde ha sido erradicada. La erradicación de los rodeos domésticos es casi completa en EE. UU. B. abortus permanece en huéspedes de la fauna silvestre en algunas regiones, como el Área Mayor de Yellowstone de América del Norte. De acuerdo con la Organización Mundial de Sanidad Animal (OIE, 2017), las brucelosis del ganado bovino (B. abortus), ovino y caprino (B. melitensis) y de los porcinos (B. suis) son enfermedades que figuran en el Código Sanitario para los Animales Terrestres y deben ser notificadas de manera obligatoria a la OIE. La brucelosis en Venezuela, se conoce desde el año 1930, pero no fue sino hasta el año 1968 cuando el Ministerio de Agricultura y Cría (MAC), a través de la Dirección de Ganadería, publica la Resolución para la Campaña Nacional de Control de la Brucelosis. Es importante destacar que en nuestro país la industria pecuaria y en especial la ganadería bovina, es de gran importancia económica, ya que de ella se obtienen productos como carne y leche que son indispensables para la nutrición poblacional. Las bacterias del género Brucella spp además de
  • 20. 9 afectar a un gran número de animales domésticos y salvajes, son un importante patógeno para el ser humano; por esta condición sanitaria la brucelosis es vigilada en el ámbito nacional en especies animales productivas como la bovina, bufalina, caprina, ovina, y porcina por medio del Instituto Nacional de Salud Agrícola Integral (INSAI), con el fin de promover y proporcionar seguridad e inocuidad alimentaria en las diferentes cadenas productivas. A pesar de que ésta institución gubernamental cuenta con pruebas de laboratorio reglamentadas, las cuales se utilizan para el diagnóstico de dicha patología en las especies animales anteriormente mencionadas, las actividades de vigilancia epidemiológica se cumple parcialmente dando esto pie a que la enfermedad permanezca constante, por ello se hace necesario conocer la prevalencia de brucelosis bovina a nivel de fincas ya que es una zoonosis, de alta pertinencia para la salud pública local y nacional. De acuerdo con la Dirección General de Epidemiología y la Dirección de Vigilancia Epidemiológica del Ministerio del Poder Popular para la Salud (2017), actualmente en Venezuela la Brucelosis continúa siendo un problema tanto en salud pública como en salud animal, esta zoonosis causa significativas pérdidas económicas, especialmente en el ganado bovino La especie predominante en el país es la B. abortus, tanto en humanos como en animales, produciendo en la población bovina altas tasas de abortos en hembras e infertilidad en machos, siendo transmisible a humanos expuestos ocupacionalmente. Ahora bien, el programa de erradicación y control de brucelosis bovina fue reactivado en el año 2003 y creada una nueva resolución en el 2017 por las autoridades sanitarias a nivel nacional. En visitada realizada al INSAI Falcón se contactó que en el municipio Piritu ni en el estado Falcón existen datos actualizados sobre prevalencia de la brucelosis bovina, siendo esta
  • 21. 10 una importante enfermedad Zoonótica. La brucelosis en los seres humanos puede llegar a ser una enfermedad incapacitante, debido a que, por su historia natural, de no ser tratada en su fase aguda, tiende a cronificase en el tiempo. Entre las afecciones de mayor interés, destacan las neurológicas, que se focalizan en las extremidades del paciente, conllevando secuelas de parálisis. Este daño puede suceder al cabo de un año o más sin tratamiento adecuado (Mayo Clinic, 2021). De hecho, en Venezuela la Brucelosis está clasificada como una enfermedad ocupacional y su impacto en la población humana tiene importantes repercusiones sociales, puesto que es una enfermedad de curso crónico, que implica atención médica especializada y eventualmente hospitalización (OIE, 2017) El municipio Piritu se caracteriza por tener una alta explotación ganadera doble propósito, donde el descenso de los índices de producción y productividad pueden estar asociados a la presencia de la bacteria Brucella abortus. Desafortunadamente en el municipio y específicamente en el sector la Piedra existe un bajo nivel de información sobre la enfermedad, los ganaderos desconocen la gravedad y rapidez con la que se disemina esta patología, generando riesgos para todos los habitantes del municipio por ser una enfermedad zoonótica; es necesario llevar a cabo este proyecto de investigación que consiste en determinar la prevalencia de brucelosis bovina en el sector la Piedra mediante la prueba oficial para el diagnóstico de brucelosis bovina según lo cita la Gaceta oficial N° 41.249 de fecha 3 de octubre de 2017, en su Artículo 15. Esto con el fin de que los resultados arrojen datos estadísticos fidedignos sobre la problemática, para así; aplicar en las fincas las normas sanitarias correspondientes según los resultados.
  • 22. 11 De la misma forma se pretende comunicar a los propietarios de las fincas que se encuentran en el sector la Piedra el estado sanitario de las mismas e instaurar planes de control y prevención de la enfermedad y así evitar la transmisión, diseminación del microorganismo por toda la región. Para ello se ha formulado el siguiente problema, mismo que guio al desarrollo de los objetivos. 1.2. Formulación del Problema Analizando las causas y consecuencia que generaría la brucelosis bovina en el sector la Piedra del Municipio Piritu Estado Falcón surgen las siguientes interrogantes que darían respuesta a los objetivos que se plantean en la presente investigación. ❖ ¿Comprobar la existencia de brucelosis bovina? ❖ ¿Cuál es la prevalencia de brucelosis bovina en el sector la Piedra del Municipio Piritu Estado Falcón? 1.3. Objetivos de la Investigación 1.3.1. Objetivo General Determinar la prevalencia de Brucelosis bovina en el sector la Piedra del municipio Piritu, estado Falcón. 1.3.2. Objetivos Específicos ❖ Realizar el diagnóstico para brucelosis bovina mediante la prueba de aglutinación con antígeno tamponado (BPAT)
  • 23. 12 ❖ Establecer la prevalencia de la brucelosis en los bovinos del sector la Piedra para aplicar las normas sanitarias correspondientes según los resultados. 1.3. Justificación de la Investigación De acuerdo con Samartino (2016), la enfermedad, llamada Brucelosis (Brucella) Bovina, es una infección causada por una bacteria, es grave, sumamente contagiosa y afecta principalmente al tracto genital de hembras y machos, así como también a diversos órganos y sistemas del animal como es el caso del conducto galactóforo que sería una de las fuentes más importantes de contaminación de tipo zoonótica, por consecuencia se puede presentar en varias etapas de la vida del animal, así como también puede estar presente en otras especies de mamíferos. Sobre la base del autor, esta enfermedad es una patología con repercusión directa a nivel social, económico y salubrista, además de ser un reflejo de lo que nuestra ciencia la Medicina Veterinaria está marcando en nuestra sociedad pues son los Veterinarios los encargados de controlar agentes patógenos que puedan disminuir la calidad de vida de la población a la que se deben. Es por esta razón que la intención del desarrollo de esta tesis es beneficiar a todos los involucrados; de esta manera a los propietarios de la fincas objeto a estudio, ya que obtendrán una monografía enmarcada en el método científico donde el productor y/o productores se percate de la realidad de su finca además de brindarle información pertinente sobre causas y las consecuencias que podría tener la brucelosis. Las medidas de prevención que tome el
  • 24. 13 ganadero producto de un conocimiento pleno ofrecido por la investigación, evitarán las zoonosis de quienes se encargan del manejo del ganado tanto dentro de la hacienda y fuera de esta, por ende, los familiares de estas personas. Teniendo en cuenta que un solo bovino infectado puede trasmitir la infección a otros y un diagnóstico oportuno ayudara a que se tome las medidas necesarias para así cortar la cadena infecciosa. Consecuentemente el control de esta patología incide en un incremento de la producción, en un aseguramiento de la calidad alimentaria y la disminución de problemas de salud pública. Los datos estadísticos que arrojen los resultados serán una pauta trascendental que podrían guiar a profundizar en la temática a instituciones gubernamentales y no gubernamentales que decidan accionar con proyectos o programas que tengan como afán reducir la prevalencia de la bacteria pues si el Municipio desea convertirse en exportador de productos cárnicos, lácteos y sus derivados necesitara controlar las enfermedades que laceran la calidad del producto. La Medicina Veterinaria, quienes la estudian y los profesionales que la practican reciben beneficios, pues el contenido que aquí se presenta en cuanto a material bibliográfico, métodos, técnicas y análisis de laboratorio son de suma relevancia para el desarrollo de sus actividades incluido en esto, que a partir del actual estudio se podrá profundizar en conocimientos como por ejemplo causas y efecto de la brucelosis bovina entre otros. Es así, entonces como queda demostrado la importancia del presente trabajo investigativo desde el punto de vista de funcionalidad, relevancia social, valoración teórica, implicaciones prácticas, utilidad metodológica entre otras.
  • 25. 14 1.4. Delimitación de la Investigación Este Proyecto de Grado estará delimitado y desarrollado en el programa de Medicina Veterinaria, en el aspecto investigativo del campo pecuario, bajo la línea de investigación de Salud Animal Integral de la Universidad Nacional Experimental Francisco de Miranda y se sustenta en la siguiente teoría; La brucelosis es una enfermedad infecciosa de los animales que se transmite al hombre constituyendo una zoonosis. La misma es producida por bacterias del género Brucella que afecta enormemente la economía pecuaria, constituyendo una seria perturbación en la marcha normal de las explotaciones ganaderas por las pérdidas que ocasiona y las implicancias en la salud pública (Samartino, 2016). En el aspecto geográfico, la investigación será llevada a cabo en el sector la Piedra del Municipio Piritu Parroquia San José De La Costa vía al encanto del Estado Falcón, en un tiempo aproximado de 16 semanas. 1.5. Limitaciones de la Investigación Las restricciones estarán relacionadas con pérdidas de las Muestras por mal manejo, hemolisis y en algunos casos relacionadas al tamaño de la muestra a procesar, por poca cantidad de reactivo o suero, factor tiempo, y el factor económico que trae como limitante no poder procesar los sueros reaccionantes con otras pruebas complementarias.
  • 26. 15 CAPÍTULO II: MARCO REFERENCIAL CONTEXTUAL El marco de referencia, es la parte del trabajo que permite al investigador plasmar los diferentes conceptos y teorías que sobre el problema o tema de investigación han expuesto previamente diferentes autores o investigadores (Hernández, 2015) La estructura del Marco Referencial Contextual se presente a continuación. 2.1. Antecedentes de la Investigación Con relacion a los antecedentes de la investigación Tamayo (2012) afirma … “Todo hecho anterior a la formulación del problema que sirve para aclarar, juzgar e interpretar el problema planteado constituye los antecedentes del problema” (p.149). De acuerdo a lo anterior, se presentan los estudios que anteceden al nuestro dónde se han manejado las mismas variables o se hallan propuestos objetivos similares, además estos nos sirven de guía y permiten hacer comparaciones para tener ideas sobre cómo se trató el problema en esa oportunidad. Un primer trabajo corresponde a Cárdenas (2018), titulado La Brucelosis Bovina y sus Factores de Riesgo: Evaluación a Nivel Mundial y en Colombia, presentado como Tesis Doctoral en Medicina y Sanidad Animal cuyo propósito fue estudiar el comportamiento epidemiológico de la brucelosis bovina, planteandose como objetivos especificos; analizar y estimar la evolucion de la brucelosis bovina en el mundo y Colombia asi como indentificar los factores de riesgo asociados a la infecccion por Brucella abortus en granjas bovinas de Colombia, certificadas previamente como libres.
  • 27. 16 La metodología empleada para la investigación fue un diseño documental, y para obtener los potenciales factores de riesgo se utilizó un cuestionario para cada granja que contenía información del programa sanitario, características físicas de la granja, bioseguridad, presencia de animales silvestres y estatus sanitario de granjas vecinas, entre otras. Se realizo un análisis bivariado entre casos y controles de cada variable explicativa empleando un chi – cuadrado, aquellas variables que presentaron un p-valor menor a 0.20 se emplearon en la siguiente etapa, donde se realizó un modelo de regresión logística empleando la metodología de Stepwise, para comparar los modelos se utilizó el criterio AIC. Los resultados del modelo de regresión finalmente elegido indicaron que el ingreso de animales de reemplazo, la monta natural y el contacto granjas infectadas o estatus sanitario desconocido, fueron factores altamente significativos en la reinfección de la enfermedad en las granjas. Este trabajo se relaciona con la investigación en curso, ya que propuso un cuestionario sobre información del programa sanitario en las granjas objetos a estudio y este será tomado como modelo para diseñar el que se utilizará para la presente investigación. En segundo lugar Maslucán (2018), desarrollo un proyecto de investigación entre los meses de julio a diciembre de 2017, para conocer el grado de difusión y prevalencia de Brucelosis bovina en los hatos ganaderos, del distrito de Pardo Miguel, Provincia de Rioja Departamento de San Martín, mediante la prueba serológica Rosa de Bengala, determinó el tamaño de muestra en base al registro del censo agropecuario 2012 donde indica que existe alrededor de 4004 cabezas de ganado vacuno en dicho distrito, que están distribuidos en diferentes localidades, de los cuales aplicando una fórmula se analizó 135 bovinos, a partir de
  • 28. 17 esta muestra y con una probabilidad de casos positivos de 10% y casos negativos de 90%, con margen de error del 5% y nivel de confianza de 95%, los resultados evidencian que no existe prevalencia de Brucelosis bovina en el distrito de Pardo Miguel y que no está relacionado con la edad, raza, sexo, etapa reproductiva y habitad, como conclusión importante menciona que en un sector hubo casos positivos en humanos (zoonosis), pero es posible que no fue por la prevalencia de ganado bovino. La referida investigación representa una contribución para el estudio actual que se plantea, ya que en su metodología describe como debe hacerse el calculo de la muestra en cuanto a la formula de tamaño de la muestra. Lo cual resulta un aporte importante, ya que nosotros debemos aplicar tambien formulas y programas estadisticos para la correlación de las variables. Un tecer trabajo investigativo de Mainato (2017), realizado en la provincia del Cañar, en 44 hatos de ganadería bovina, distribuidos aleatoriamente en los siete cantones de la provincia, donde se consideró una población bovina actualizada, mediante el reporte de vacunación contra la Fiebre Aftosa – Fase II 2014, según el cual existen 140.242 bovinos. Bajo el estudio epidemiológico se consideró 447 bovinos (n = 447) mayores a 2 años de edad; de las cuales el 93.74% de muestras correspondieron a vacas adultas y el 6.26% de las muestras correspondieron a sementales de cada hato. A las muestras se les realizó el método de diagnóstico AgP (Aglutinación en placa), y los casos positivos a esta prueba se enviaron al laboratorio de Sanidad Animal AGROCALIDAD, Tumbaco y se aplicaron los métodos de diagnósticos de; RB (Rosa de Bengala) y ELISA competitiva, para determinar y cuantificar
  • 29. 18 anticuerpos. La prevalencia de bovinos seropositivos a brucelosis bovina en la provincia del Cañar, con las pruebas de diagnóstico de; Rosa de Bengala y ELISAc, se asemejan en 4.03 y 4.25% respectivamente y de 29,30% con el diagnóstico de Aglutinación en placa. La prevalencia de hatos con animales seropositivos a brucelosis bovina en la provincia del Cañar, es del 15.90% al diagnóstico de ELISAc y de 13.63 % a la prueba de Rosa de Bengala y 56.81 % con el diagnóstico de Aglutinación en placa. Como resultado determinó que los animales pertenecientes a los hatos donde se presentaron problemas de metritis postparto y animales con esterilidad permanente tienen un mayor riesgo de ser seropositivos a la prueba diagnóstica de RB (13.78 y 5.19 Odds ratio, con un valor de p = o < 0.05), como factor de impacto en la reproducción bovina. En conclusion se estimó las pérdidas económicas totales, por bovino totales y por vacas infectadas con brucelosis bovina según la prevalencia obtenida en la investigación. Este trabajo es pertinente con la investigación aquí planteada, ya que aborda la metodologia de campo utilizada y la realizacion de la prueba serológica utilizando como técnica de diagnóstico la prueba de Card Test (Rosa Bengala). Aunque en esta investigacion se ha planteado la prueba de aglutinación con antígeno tamponado (BPAT), esta técnica es similar a la Prueba de Card Test por tal, se toma esta investigación como referencia y además dicha prueba BPAT, es la prueba oficial para el diagnóstico de brucelosis bovina según lo cita la nueva resolución sobre brucelosis en Gaceta oficial N° 41.249 de fecha 3 de octubre de 2017, en su Artículo 15.
  • 30. 19 2.2. Bases Teóricas La base teórica es una revisión bibliográfica o documental que se relacionan directamente con las variables que se desarrollarán, además documenta la necesidad de realizar el estudio, conduce al establecimiento de hipótesis o afirmaciones que después serán comprobadas en la realidad, inspira a nuevas líneas y áreas de investigación (Cruz, 2015). 2.2.1 Historia de la brucelosis La historia de la medicina considera que la Brucelosis es un padecimiento conocido desde Hipócrates (400 años antes de cristo); pero esta enfermedad se describió por primera vez entre 1.859 y 1.863, cuando los oficiales Médicos Británicos que servían en Malta notaron un padecimiento febril que producía la muerte de soldados y civiles de la isla. Es así que el Médico Inglés Jeffrey Alan Marston (1.831 – 1.911) describió por primera vez el síndrome de una enfermedad a la que llamaron fiebre ondulante, fiebre mediterránea o fiebre gástrica remitente. Wyatt. Posteriormente, el Médico Británico Australiano David Bruce (1.855 – 1.931) logró identificar y aislar la bacteria en 1.887 mientras se encontraba en la Valleta, Malta, trabajando en el ejército británico. Con otro importante investigador del momento, Themistocles Zammit, desmostraron que los humanos presentaban la enfermedad tras ingerir leche de gandao enfrmo (Cook, Citado en Cárdenas, 2018). En la actualidad, la brucelosis esta incluida dentro de la lista de enfermedades de declaración obligatoria de la Organización Mundial de Sanidad Animal. Con este fin, los países miembros, a través de sus servicios veterinarios, están obligados a reportar su estatus sanitario cada seis meses con la siguiente información: incidencia de la enfermedad por país, y las medidas de control aplicadas (OIE, 2017).
  • 31. 20 2.2.2. Importancia de la enfermedad Para Mainato (2017), La brucelosis se mantiene como una de las principales zoonosis a nivel mundial y es una de las causas de fiebre de origen desconocido en humanos, con más de 500,000 nuevos casos anuales. Datos de la Organización mundial de sanidad animal (OIE) considera tradicionalmente a América del Sur como un área endémica para brucelosis humana. En la nueva distribución global de la enfermedad, según Pappas et al., 2006 (citado en Mainato 2017) Postula Villegas (2019), que la infección con brucelosis está en proceso de erradicación. Ademas es una enfermedad con un fuerte impacto en la salud pública y en la producción animal, por lo que afecta a los sistemas de salud y a la economía ganadera de todo el mundo. Del mismo modo está relacionada con características socilaes y políticas; así, la enfermedad esta especialmente presente en países con economías poco desarrolladas y conlleva serias repercusiones en los intercambios comerciales. 2.2.3. Impacto economico, en la salud pública y presentacion de la enfermedad en humanos Las políticas sanitarias de prevención y control, además del impacto sobres la salud pública, surgen a partir de las pérdidas económicas por disminución de la producción de leche y carne, abortos, mortalidad perinatal, infertilidad, celos repetidos, incremento de reposición, costos asociados con la asistencia veterinaria y perdidas en las industrias lácteas y cárnica (Samartino, 2016).
  • 32. 21 Menciona Mainato (2017), que en el caso de la salud publica el impacto económico se debe a los costos del tratamiento, el diagnóstico y las pérdidas laborales por el tiempo de discapacidad. Brucella abortus, B. susi y B. mellitensi son las tres principales especies capaces de infectar al ser humano, ademas la brucelosis es una zoonosis de distribución mundial asociada principalmente a la salud ocupacional. Su presentación en humanos en algunos países es subestimada ya que no se incluye dentro del chequeo clínico rutinario y pasa daspercibida o se confunde con otras patologías (Cárdenas, 2018) Citando a Villegas (2019), la manifestacion clínica en humanos aparece tras un periodo de incubación de entre una y cinco semanas, y se caracteriza por un cuadro clínico sistémico que puede o no involucrar algún órgano. Se califica en tres fases evolucionando de uno a otro, agudo (inferior a 8 semanas), subagudo (entr ocho y cincuenta y dos semanas) o crónico (superior a un año). Sus sintomas pueden ser inespecíficos, ya que la mayorías de los pacientes presentan malestar general que incvluye fiebre, sudoración, anorexia, artralgia y dolor de espalda, algunas personas padecen infecciones asintomáitcas Al respeto Benítez (2013), Destaca que entre los síntomas principales esta la astenia, fiebre continua, intermitente e irregular con la presencia de escalofríos, sudores profusos, insomnio, impotencia sexual, constipación, anorexia, cefalgia, artalgia y dolores generalizados. Cuando afecta el sistema nervioso presenta irritación, depresión y nerviosismo. Cuando hay afección del sistema ganglionar hay esplenomegalia, hepatoesplenomegalia, hepatomegalia, rara vez con ictericia. Las recaídas suelen venir acompañadas de encefalitis,
  • 33. 22 meningitis, neuritis periférica, espondilitis, artritis supurativa, endocarditis vegetativa, orquitis, vesiculitis seminal y prostatitis. 2.2.3. Sinonimia Adecua Mainato (2017), de acuerdo a Blood y Radostits, quienes dan las siguientes denominaciones: Fiebre ondulante, Fiebre de Malta, Fiebre del Mediterráneo (en el hombre), Enfermedad de Bang, (en bovinos), Aborto contagioso, Aborto infeccioso, Aborto epizoótico (en animales). Confirma Guzmán (2017), en los animales se le ha conocido con distintas denominaciones (aborto brucelar, aborto infeccioso o aborto epizoótico) aunque se recomienda la denominación relacionada con la especie afectada (brucelosis bovina, caprina, porcina). En el hombre se conoce como fiebre mediterránea, fiebre ondulante, fiebre de Malta De acuerdo con los autores, la enfermedad es conocida con diversos nombres alrededor del planeta según cada cultura y niveles de conocimiento sobre la misma. El tema a desarrollarse esta enfocado en ganado bovino se propone detallar todas las características de la Brucella abortus. 2.2.4. Generalidades de la Brucella abortus Es una bacteria gran negativa, facultativa, intracelular, que afecta la especie bovina. Varias especies de brucella pueden infectar al hombre en su labor profesional e incluso a través de la leche, convirtiéndose en una enfermedad zoonótica llamada fiebre ondulante. La importancia de la enfermedad en el hombre justifica ampliamente cualquier programa de
  • 34. 23 erradicación. La brucelosis es una zoonosis por excelencia ya que se transmite en forma natural en los animales vertebrados al hombre (Mainato, 2017) Destaca el mismo autor que la enfermedad se propaga en los hatos de bovinos, reduciendo la fertilidad del rebaño, puede provocar abortos o muerte prematura de terneros débiles. Es una de las enfermedades de mayor importancia dentro de la patología veterinaria tanto desde el punto de vista económico como desde la salud pública. 2.2.5 Distribución geográfica La brucelosis se encuentra ampliamente difundida en América del Sur; los perjuicios ocasionados por las fallas reproductoras, traducidas por la reducción en la producción lechera y de carne, son agravados por la devaluación comercial de los animales y de los hatos afectados, aliada a la perspectiva de imposición de barreras sanitarias en el ámbito del comercio nacional e internacional (OIE, 2017). 2.2.6. Taxonomía La evidencia genética e inmunológica indica que todos los miembros del género Brúcela están estrechamente relacionados (OIE, 2017), aunque resulta evidente la Presencia de diferencias significativas entre las principales variantes en cuanto a preferencia para el hospedador, epidemiologia, variaciones genómicas y moleculares, por ello el Comité Internacional de Sistemática de Procariotas, Sub Comité de Taxonomía de Brucella, de manera preponderante en el año 2005 resolvió posicionar las 6 especies de tipo de brucellas con sus bio variedades reconocidas desde antes de 1986 publicadas en las listas Autorizadas de nombres de bacterias de 1980. Cabe recalcar como menciona The Center For Food
  • 35. 24 Security and Public Health, algunos microbiólogos han propuesto que este género sea reclasificado en una especie nueva causando controversia y haciendo que en la actualidad se utilicen ambos sistemas Taxonómicos (Llaguno, 2015) Con el propósito de brindar una referencia hacia la puntualización de la taxonomía emplearemos la propuesta en el comité así tenemos: ❖ Reino: Proteobacteria ❖ Clase: Rodospirilla ❖ Orden: Rizobial ❖ Familia: Brucellaceae ❖ Género: Brucella ❖ Especie: Brucella abortus 2.2.7 Fuentes y vías de infección 2. 2.7.1. Fuentes Las personas que están expuestas más a la enfermedad son los veterinarios que hacen chequeos ginecológicos, inseminadores, vacunadores, vaqueros, familias de los trabajadores de campo y personas en general que pueden tener contacto directo con los animales o ingerir leche o agua contaminada. Si el agente causal de la infección es la cepa Brucella abortus generalmente la brucelosis en el hombre tiene un curso crónico que puede durar años. El hombre se infecta por Brucella por contacto directo o ingestión de productos de origen animal, la leche y productos lácteos, las verduras crudas y agua contaminada con excreta de animales infectados, siendo una enfermedad ocupacional de vaqueros, matarifes, carniceros y médicos veterinarios, la infección se puede contraer por la manipulación de fetos, envolturas
  • 36. 25 fetales o al entrar en contacto con secreciones vaginales, excrementos y canales de animales infectados (Benítez, 2013) El periodo de incubación generalmente dura de una a tres semanas, pero puede prolongarse a meses. Es una enfermedad septicémica, fiebre continua, intermitente o irregular (Díaz, citado por Benítez, 2013) 2. 2.7.2. Vía digestiva Describe Benítez (2013), que se trata de una vía de gran importancia epidemiológica. Los alimentos contaminados por secreciones fetales y restos de placentas o abortos o del parto normal de animales infectados constituyen vehículos de infección. La contaminación ambiental está determinada por los restos de la placenta en el caso de abortos es muy intensa, pudiendo el agente permanecer viable por varias semanas en los pastos, siempre y cuando, se encuentre protegido de la luz solar. También puede ocurrir la contaminación de aguas y es allí donde la Brucella tiene una considerable sobrevivencia. La bacteria también es eliminada por la leche y el calostro que constituyen importantes fuentes de infección para los becerros que no se contaminaron por la vía transplacentaria y también para los seres humanos. La pasteurización de la leche y del calostro elimina de forma eficiente las brucellas. La pasteurización del calostro no interfiere sensiblemente en la inmunidad pasiva de los becerros. 2.2.7.3. Vía transplacentaria Junto a la vía digestiva son las más importantes vías de transmisión de la brucelosis. La infección uterina generalmente ocurre en el tercio final de la gestación, determinando
  • 37. 26 lesiones en la placenta y en el feto, las cuales pueden ocasionar la muerte fetal seguida del aborto, nacidos muertos o el nacimiento de becerros débiles (Benítez, 2013). 2.2.7.4. Vía sexual Sostiene Guzmán (2017), sta vía tiene poca importancia en la diseminación de la brucelosis en el hato, debido a que el macho deposita el semen en la vagina de la hembra bovina y se ha mostrado que la macrobiótica vaginal tiene acción inhibitoria sobre la Brucella abortus. Además de esto, fue encontrada una proteína en el moco cervicovaginal que protege el útero de la invasión por la Brucella abortus. Aunque la vía sexual sea una vía de importancia secundaria para la especie bovina, no significa que reproductores infectados puedan ser utilizados sin riesgos. Se recomienda hacer el test de aglutinación del plasma seminal para verificar si existe la presencia de anticuerpos en el semen, lo que constituye un indicativo de comprometimiento de los órganos reproductores por la Brucella. En las centrales de inseminación artificial se hace un control riguroso de los reproductores para que se evite la diseminación por esta vía. La transferencia de embriones no presenta riesgo para la receptora, pero si el embrión es implantado en una vaca infectada, podrá ser infectado por la vía transplacentaria. 2.2.7.5 Contaminación por el material obstétrico Todo el material utilizado para exámenes ginecológicos debe ser esterilizado antes de ser utilizado en otro animal, de lo contrario, existe el riesgo de transmisión de enfermedades
  • 38. 27 venéreas (tricomoniasis bovina y campilobacteriosis genital bovina) y también de la brucelosis. Después del parto o aborto la brucella abortus continúa siendo eliminada en las secreciones uterinas hasta 30 días, lo que torna las intervenciones ginecológicas una actividad de riesgo para los veterinarios y también para los animales cuando el equipo no es debidamente esterilizado (Duran, citado por Benítez, 2013). 2.2.7.6. Vía transfusión sanguínea Varios agentes infecciosos pueden ser transmitidos por medio de la sangre como la Babesia, anaplasma, brucella, retrovirus, por esta razón hay que tener mucho cuidado con el estado sanitario de los animales que serán utilizados como donadores de sangre (Guzmán, 2017). 2.2.8. Patogenia Como señala Mainato (2017), B abortus tiene tropismo por útero grávido, glándula mamaria, testículos, glándulas sexuales masculinas accesorias, nódulos linfáticos, bolsas sinoviales, cápsulas articulares de animales sexualmente maduros; una vez que la brucella ingresa al organismo se multiplica en los nódulos linfáticos periféricos y de allí se disemina a través de la linfa y la sangre a los órganos de predilección del hospedero. En los terneros la multiplicación de la bacteria se da en lo nódulos linfáticos, para después pasar a las órganos emuntorios (eliminadores) que los llevan al exterior, por eso en la mayoría de terneros la brucella es transitoria ya que no son sexualmente maduros, sin embargo, si pueden desarrollar brucelosis franca (síndrome de la lactancia de los terneros).
  • 39. 28 Ademas el autor postula que en una vaca adulta no gestante la brucella migra al útero, glándula mamaria y viseras, la infección no induce el desarrollo de algún signo clínico. Cuando la vaca queda gestante se infecta a través de las fases bacterémica que inicia en la glándula mamaria y en el útero por medio de sus paredes, la proliferación de las brucella se ve favorecida por el Eritritol, que es un carbohidrato que produce la placenta, y se encuentra en mayor concentración en los líquidos fetales y en el feto, lo que favorece la localización de la infección en estos tejidos. Una vez multiplicadas las brucellas producen endometritis erosiva grave de los espacios situados entre los cotiledones placentarios, luego invaden el alantocorion, contaminan al feto y los líquidos fetales, producen la destrucción de las vellosidades coriales que llevan a la muerte y expulsión del feto. 2.2.9. Síntomas Desde el punto de vista conceptual Neppas (2013), la brucelosis afecta a bovinos de todos las edades, pero persiste con mayor repetición en animales sexualmente adultos, la infección da lugar a aborto y retención de la placenta, que puede ocasionar infertilidad, en las vacas el signo principal de la enfermedad es frecuentemente el aborto al final del tercio medio de la gestación de 5 a 7 meses o en cualquier etapa de la gestación; sin embargo se han presentado casos en los que no hay aborto , sino solamente retención placentaria y endometritis, en el toro la brucelosis causa inflamación de los testículos con posterior atrofia. Al respecto Duran, (2012) destaca los sintomasn de la siguiente manera: Vacas: básicamente aborto a partir de la segunda mitad de la gestación se caracteriza por retención placentaria, el feto ya sale deformado y degenerado, aparece una inflamación fibrinopurulenta y necrótica de cotiledones y alteración fetal: edema, congestión pulmonar y
  • 40. 29 hemorragias. La placenta se observa difusa y gruesa, los cotiledones con áreas de necrosis, el feto edematoso y con petequias, contenido estomacal turbio la infección en la ubre es común e intermitente, los animales jóvenes son bastante resistentes a la B. abortus, pero su susceptibilidad aumenta con el desarrollo sexual y la preñez Señala ademas el autor, en toros produce orquitis con presencia de abscesos, inflamación del epidídimo y órganos accesorios reproductivos. La orquitis puede ser unilateral o bilateral. Semen proveniente de animales infectados transmite la enfermedad al usarlo en inseminación artificial; existen razas que son más susceptibles que otras 2.2.10. Respuesta inmune contra Brucella abortus. 2.2.10.1. Inmunidad innata. El rol de esta respuesta inmune en estadios tempranos de la infección es disminuir la cantidad de bacterias y de esta manera promover un ambiente favorable para desarrollar la respuesta de linfocitos TH1 en el hospedador; y así complementar su trabajo junto con los neutrófilos y macrófagos (Llaguno, 2015). Postula Samartino (2016), que diversos autores describen que tanto la fagocitosis como el estallido respiratorio en macrófagos son dependientes de la opsonización de las bacterias por antígeno y complemento, así como la activación celular para el interferón gamma (IFN-γ) y el factor de necrosis tumoral-α (TNF- α) que puedan producir otras células. 2.2.10.2. Inmunidad adaptativa. En esta respuesta se involucra tres grandes mecanismos:
  • 41. 30 1) El IFN-γ producido por células T CD4+, CD8+ y γδ activa las funciones bacterianas del macrófago y así inhibe la supervivencia intracelular de la bacteria. 2) El macrófago infectado puede ser destruido por la citotoxicidad de los linfocitos T CD8+ y γδ puede destruir al macrófago infectado. 3) Los isotopos de Acs de tipo T “helper 1” (Th1) como IgG2a e IgG3 opsonizan al patógeno y facilitan la fagocitosis (Llaguno, 2015). 2.2.11. Factores de riesgo Sostiene Cárdenas (2018), en el ganado vacuno los animales más susceptibles son los individuos más sexualmente activos; los jóvenes suelen ser más resistentes, pero pueden presentar infecciones latentes hasta que alcanzan la madurez sexual. Además, describe el autor que constituyen factores de riesgo la gestación, debido a que los abortos son la principal fuente de contagios, por lo general las pérdidas del feto se producen una sola vez gracias a la inmunidad adquirida durante la infección. No obstante, puede existir un segundo o tercer aborto. Hay que tener presente que, aunque un animal que ha sido diagnosticado con brucelosis no presenta sintomatología o el ganadero crea que esta curada aun elimina la bacteria contaminando el ambiente. Son factores de riesgo entre otro los mencionados a continuación (Cárdenas, 2018): ❖ Incremento del tamaño de las explotaciones. ❖ Incorporación de animales sin el control apropiado
  • 42. 31 ❖ Uso común de pastos. ❖ Manejo inadecuado de los partos. ❖ Ausencia de vacunación. 2.2.12. Control. Todos los esfuerzos en cuestión al control están centrados en dos puntos: Detección y prevención; esto se debe a que de acuerdo a Merck Sharp y Dohme Corp citado en Llaguno, (2015), ningún tratamiento es viable. Cabe hacer énfasis en que para lograr la erradicación de la B. abortus es imperante detectar los focos de infección y realizar pruebas de diagnóstico oportunas cada cierto tiempo. Desde el punto de vista de Cárdenas (2018), la enfermedad entra al ganado cuando se introduce un nuevo bovino al hato, es por ellos que se debe tener en claro la procedencia del animal, cerciorarse si existe historial de abortos y si está debidamente vacunado. Sostiene Mainato (2017), que la vacunación es la herramienta más eficaz en cuanto a la prevención de la enfermedad, pues de esta manera se prepara al sistema inmune para la infección, las principales sepas son B. Abortus strain 19 ó RB51, sin embargo, sin un control adecuado del entorno que posibilite una severa exposición al agente patógeno, podría contraerse la bacteria.
  • 43. 32 2.2.13. Inmunización contra Brucelosis. Preparadas en su mayoría con los mismos gérmenes que producen la enfermedad pero muertos o disminuidos en su virulencia los inmunizadores son capaces de conseguir la respuesta orgánica con la producción de anticuerpos específicos, sin embargo, estos no tiene una duración indefinida por lo que es necesario una dosis de refuerzo los cuales se administraran de acuerdo a la cepa que se esté empleando en el animal con esto se garantizara la permanencia de niveles altos y útiles de anticuerpos, además menciona Llaguno (2015), es importante que el ganadero establezca un esquema de vacunación que por ningún motivo podrá ser alterado, cambiado u omitido. 2.2.13.1 Cepa 19. Esta vacuna, que ha servido de base en todos los programas de erradicación de la brucelosis bovina en varios países es un cultivo vivo de brucellas, cada dosis contiene entre 10-60 X 109 unidades formadoras de colonias (CFU), se presenta comercialmente en forma liofilizada. Se trata de una vacuna que contiene microorganismos atenuados de morfología lisa, incapaces de crecer en presencia del Eritritol. Las características más sobresalientes de la cepa S19 de B. abortus son: baja virulencia, relativamente alta inmunogenicidad y buena antigenicidad, se recomienda aplicar en terneras de 3-6 meses de edad en dosis de 2 ml, vía subcutánea en la tabla del cuello (Mainato, 2017). La efectividad en el ganado bovino depende de la edad de vacunación, dosis, vía de administración y la prevalencia de la brucelosis en el rebaño vacunado (Neppas, 2013).
  • 44. 33 Por otro lado, Mainato (2017), refleja que las ventajas que presenta el uso de este biológico es que requiere inoculación única en toda la vida del animal, alcanza una respuesta inmunitaria rápida y no presenta reacciones locales. Entre las desventajas, presenta una reacción aglutinogénica, una infección patogénica ocasional persistente y requiere para su conservación una cadena de frío rigurosa 2.2.13.2. Cepa RB51. Fue desarrollada por el investigador chileno Cerbardt Schurig en la universidad tecnológica de Virginia en EEUU. La vacuna RB51 es una cepa mutante derivada de la cepa virulenta estándar de brúcela abortus (s2308) la cual carece de la mayoría de LPS de la cadena “o”, que se encuentra tanto en la cepa vacunal anterior y también en la cepa de campo brúcela abortus virulenta (Llaguno, 2015) 2.2.14. Diagnóstico Como parte integral en los programas de control de brucelosis el diagnóstico de la enfermedad debería ser realizado a través de las técnicas aprobadas por el INSAI como lo cita el Artículo 15 de las normas sobre la vigilancia, prevención, y control de la brucelosis, además debemos tener en cuenta que el diagnóstico clínico no posee utilidad, para la detección del agente patógeno en estudio, sin embargo, existen diversos métodos de laboratorio, en este apartado describiremos los más preponderantes, enfocándonos en la prueba empleada en este trabajo investigativo; prueba de aglutinación con antígeno tamponado (BPAT).
  • 45. 34 2.2.14.1. Diagnóstico serológico B. abortus se puede recuperar de la placenta, pero más convenientemente en cultivo puro del estómago y pulmones del feto abortado. La mayoría de las vacas cesa de excretar el microorganismo desde el tracto genital cuando la involución uterina se ha completado. Quedan focos de infección en el sistema retículo endotelial y la ubre, en estos casos el microorganismo se puede aislar a partir de la leche y secreciones de la ubre no lactante (Mainato, 2017). Actualmente, el esquema de diagnóstico de la brucelosis en países como Venezuela, se basa en pruebas serológicas que determinan la presencia de anticuerpos mediante pruebas de aglutinación (Normas sobre la vigilancia, prevención, y control de la brucelosis). Las más utilizadas en suero sanguíneo son: Prueba serológica Rosa de Bengala (card test) o prueba de aglutinación en placa con antígeno tamponado (BPAT) , que detecta anticuerpos IgG1 e IgM contra cepas lisas de brucella; pueden ser realizada como prueba tamiz en bovinos, caprinos y porcinos además de ser un procedimiento cualitativo y rápido. La Organización mundial de sanidad animal, OIE, como reguladora de los procesos de diagnóstico y control de brucelosis y otras enfermedades infecciosas aprueba seis exámenes indirectos para su diagnóstico oficial: la prueba de Aglutinación en placa con antígeno tamponado, Rosa de Bengala, Fluorescencia polarizada, ELISA indirecto, Fijación del complemento y ELISA competitivo. Las cuatro primeras son consideradas pruebas tamiz y las otras confirmatorias (Neppas, 2013) Enfatiza Neppas (2013), que actualmente hay una amplia gama de pruebas diagnósticas para evidenciar anticuerpos específicos antibrucelares en suero, plasma
  • 46. 35 sanguíneo, leche y en otros fluidos orgánicos como: plasma seminal y mucus vaginal, estas técnicas varían en sensibilidad y especificidad. Por su bajo costo y rapidez de realización, el diagnostico serológico, es el método más oportuno pues se han desarrollado técnicas de laboratorio de una suficiente especificidad en cuya aplicación no se necesita emplear equipos sofisticados. Están técnicas están basadas en el principio de aglutinación de los anticuerpos con antígenos a pH bajo y se dividen en dos tipos de pruebas: las pruebas primarias o de screening y las pruebas secundarias o de confirmación (Maslucán, 2018) La detección de anticuerpos en suero, plasma, plasma seminal, leche o descarga uterina es indicativa de infección en la finca. Primero se utilizan pruebas de alta sensibilidad (tamiz) y luego las confirmatorias de menor sensibilidad, pero mayor especificidad. A continuación, se describirán las mismas enfocándonos en la prueba empleada en este trabajo investigativo, está es la prueba de aglutinación con antígeno tamponado (BPAT). 2.2.14.1.1. Pruebas Primarias o de Screening. Se utiliza como pruebas primarias: ❖ Antígeno tamponado o antígeno bufferado de placa Pruebas de antígeno acidificado tamponado o técnica de aglutinación con antígeno tamponado (BPA), se utilizan generalmente como pruebas para la detección de anticuerpos contra Brucella, ya que su realización es sencilla y de fácil implementación, así como rápida, práctica y económica. Para su implementación se utilizan antígenos a un pH entre 3,65 y 4,0
  • 47. 36 para favorecer la aglutinación de los anticuerpos del isotipo IgG y reducir las interacciones no especificadas (Samartino, 2016). La desventaja de esta prueba, es que no puede detectar los anticuerpos que se producen en los animales vacunados con Brucella abortus, cepa S19, por lo cual, para detectarla se recomienda otra prueba de respaldo, de acuerdo a Cárdenas, (2018) la prueba se considera como positiva, si se presenta un evento de aglutinación, sin importar si es muy sutil, aunque siempre es necesaria una prueba confirmatoria, pero se considera negativa, cuando no hay rastros de aglutinación tras el ensayo. Para la OIE (2017), el Fundamento para la BPA, es una prueba tamiz, rápida, práctica y económica que reduce las aglutinaciones inespecíficas y es ligeramente más sensible que la prueba de Rosa de Bengala. El bajo pH del antígeno favorece la aglutinación de los anticuerpos del isotipo IgG, por su simpleza se puede realizar en pequeños laboratorios clínicos ya que no requiere equipos costosos. Entre sus especificaciones, es cualitativa y se interpreta como positiva o negativa. La muestra requerida es suero cristalino, no hemolizado, conservarlos congelados a -20º C +/- 4º C. Antígeno de BPA, debe cumplir con las especificaciones del USDA, volumen celular 11%, pH 3.65 +/-0.02. Suero control positivo y suero control negativo (OIE, 2017) Especifica el manual de procedimiento de brucelosis de la OIE lo siguiente: Materiales a usar: • Aglutinoscopio (caja de lectura de 45cm de largo x 35 cm de ancho x 15 cm de profundidad), con fondo pintado de negro y con tapa de vidrio.
  • 48. 37 • Mezclador • Placa de vidrio marcada con cuadrados de 4x4 cm • Gradillas • Micropipetas 10-100µl • Equipos • Refrigeradora; Freezer; Estufa; Centrífuga; Timer; Vortex. Drogas y soluciones: • Alcohol 70% • Hipoclorito de sodio al 0.1% Precauciones generales • Almacenar el antígeno entre 5º C+/-2. Si se congela queda inutilizado. • Para realizar la prueba tanto el antígeno como el suero deben estar a temperatura ambiente (22+/- 4º C). • Antes de usar el antígeno, rotar suavemente el frasco para homogeneizar la suspensión. • Verificar la fecha de vencimiento del antígeno antes de realizar la prueba. • La placa de vidrio debe estar limpia, libre de detergentes y seca. • Homogeneizar los sueros antes de realizar el ensayo
  • 49. 38 • Utilizar un suero control positivo y un suero control negativo. Medidas de bioseguridad • Al ingresar al laboratorio de serología vestir equipo de protección personal (Bata, calzado cerrado, cabello recogido) de acuerdo a las recomendaciones del Manual de Bioseguridad de la OMS, 2005. • Al manipular muestras de sangre utilizar guantes. • Descartar los tips en solución de hipoclorito de sodio al 2% de preparación diaria. • Limpiar el área de trabajo al finalizar la tarea con hipoclorito de sodio al 0.1% de preparación diaria. • Quitarse los guantes y lavarse las manos al terminar el trabajo. • Quitarse la bata al dejar el laboratorio. Técnica • Colocar 80 µl del suero control positivo en uno de los cuadrados de la placa de vidrio. • Colocar 80 µl del suero control negativo en otro cuadrado de la placa de vidrio. • Colocar 80 µl de suero problema en el tercer cuadrado de la placa de vidrio.
  • 50. 39 • Colocar 30 µl de antígeno cerca del suero. • Mezclar suero y antígeno con palillo o mezclador. • La mezcla debe tener una forma de 27x25mm • Rotar suavemente la placa de vidrio, colocarla en el aglutinoscopio y taparla. • A los cuatro minutos rotar nuevamente la placa y continuar la incubación. • A los 8 minutos encender la luz y efectuar la lectura inclinando ligeramente la placa. Lectura e interpretación de los resultados • Positivo: El ensayo se clasifica como positivo cuando aparece cualquier aglutinación, aunque sea fina. Si el resultado es positivo realizar una prueba confirmatoria. • Negativo: Cuando la mezcla suero-antígeno es de turbidez homogénea y sin grumos. Estas muestras se informan como negativas y no se realizan las pruebas complementarias Criterio de aceptación del resultado Realizar el ensayo a los sueros controles antes que a las muestras. Los resultados deben ser los esperados, positivos o negativos. En caso de discrepancias repetir el ensayo cambiando el lote de antígeno.
  • 51. 40 ❖ Rosa de bengala Es una de las más comúnmente usada para el diagnóstico de la brucelosis bovina, utiliza células completas de B abortus cepa 19 o cepa 1199.3 coloreadas con Rosa de Bengala a un pH de 3.65. El pH bajo previene alguna aglutinación por IgM, y estimula la aglutinación por IgG1, reduciendo así alteraciones no específicas. Se considera útil para el tamizaje individual de animales, aunque pueden aparecer falsos positivos (Mainato, 2017). ❖ Anillo de leche Esta es una prueba recomendado por la OIE como prueba de tamizaje inicial para la brucelosis bovina, es de bajo costo para la inspección de hatos lecheros, se debe tomar la muestra de leche fresca del tanque recolector de leche de los predios o de los bidones, que no procedan de más de 25 vacas y de acuerdo con los resultados obtenidos, el predio se clasifica en sospechoso o negativo (OIE, 2017). Ademas, agrega la OIE, que esta es una variante en la prueba de aglutinación, es muy sencilla, pero es muy difícil preparar el antígeno adecuado. El principio de la prueba en que los anticuerpos antibrucelares contenidos en la muestra reaccionan con el antígeno coloreado (Hematoxilina) de brucellas formando con él un complejo antígeno anticuerpo que se adhieren a los glóbulos de la grasa de la leche y por su menor densidad asciende a la superficie, formando una capa de crema a manera de un anillo de color morado, que varía por su intensidad desde morado intenso positivo a blanco cremoso negativo (Mainato, 2017).
  • 52. 41 2.2.14.1.2. Pruebas secundarias o confirmatorias Como menciona Mainato (2017), estas pueden dar como resultados falsos negativos o positivos. Para ello estos resultados deben ser confirmados por otras pruebas más especializada, cita las normas sobre la vigilancia, prevención, control y erradicación de la brucelosis bovina, para confirmación definitiva o pruebas complementarias se deben hacer las siguientes: Prueba Lenta en Tubo, Prueba 2-Mercaptoetanol, ELISA Competitiva, ELISA Indirecto, Fluorescencia Polarizada (FPA), Fijación de Complemento (FC), Reacción en cadena de la polimerasa (PCR), y cualquier otra que determine el Instituto Nacional de Salud Agrícola Integral (INSAI). Las pruebas de ELISA y FPA se consideran además las adecuadas para el cribado de la enfermedad, pudiendo conducir directamente al diagnóstico definitivo según el criterio clínico y epidemiológico correspondiente. 2.2.14.1.3. Diagnóstico diferencial Maslucán (2018), cita que se debe considerar las siguientes enfermedades abortivas para el diagnóstico diferencial: leptospirosis, rinotraqueitis infecciosa bovina (IBR), tricomoniasis, campilobacteriosis, listeriosis, aborto epizoótico (espiroquetosis), vibriosis. . 2.2.15. Control y erradicación. Los aspectos epidemiológicos que determinan la dificultad de la erradicación de la brucelosis se pueden concretar en los siguientes: • El animal infectado elimina un gran número de bacterias en el aborto o el parto.
  • 53. 42 • La eliminación de bacterias en leche se puede mantener en toda la vida del animal. • Existen animales nacidos de vacas infectadas con infecciones latentes que manifiestan los síntomas de la enfermedad en el momento del parto o aborto • También existen animales infectados con curación aparente que, sin embargo, pueden permanecer eliminadores durante toda su vida. • La bacteria presenta una gran resistencia en el medio ambiente. La única forma de liberar de esta enfermedad a una explotación ganadera, es a través de la ejecución de un programa sanitario adecuado, que contemple la vacunación, medidas sanitarias de manejo en la finca y exámenes sanguíneos periódicos, para diagnosticar, identificar y eliminar los animales infectados (Cárdenas, 2018). Esta misma idea la plantea Llaguno (2015), cuando menciona que la eliminación de los animales enfermos, la vigilancia epidemiológica, la vigilancia sanitaria en canales y mataderos, el control de la movilización de animales, las pruebas serológicas y las campañas de educación sanitaria son indispensables en un programa de control. Además, los autores mencionados indican que para el control de brucelosis en áreas enzoóticas con alta prevalencia se recomienda la vacunación, en zonas o países con baja prevalencia se puede proceder a un programa de erradicación, que consiste principalmente en aplicar al rebaño repetidas pruebas serológicas de diagnóstico, y eliminar los animales reactores hasta la desaparición completa del foco de infección
  • 54. 43 2.2.15.1. Cuarentena Medida sanitaria que se aplica a los predios infectados con el fin de controlar el movimiento de hembras y machos, la brucelosis al transmitirse por contacto directo, por lo tanto el libre desplazamiento de animales provenientes de predios infectados amenaza la condición sanitaria de predios limpios de la enfermedad. Se levantara la restricción cuando el predio cuarentenado se declare saneado o hasta cuando los animales puedan desarrollar la enfermedad que corresponde a veces de 120 días a1 año (Llaguno, 2015) 2.2.15.2. Vacunas Las vacunas utilizadas contra la brucelosis en general no protegen completamente contra la infección y/o el aborto. Hasta el momento, se han desarrollado diversas vacunas para el control de esta enfermedad en las distintas especies. La vacuna cepa RB51 es una mutante de la cepa 2308 de Brucella abortus, genéticamente estable y de morfología rugosa, que perdió la cadena lateral o de polisacárido de la superficie de la bacteria, por lo que no induce la producción de anticuerpos contra el LPS en los animales vacunados. Este hecho es de importancia en el control de la enfermedad ya que permite diferenciar los animales vacunados de los infectados naturalmente (Cárdenas, 2018). En el mismo orden de idea, cita ademas el autor que la vacunación con RB51 no da como resultado títulos de anticuerpos post vacunales contra Brucella que puedan ser medidos por las pruebas standard. Los terneros se vacunan subcutáneamente entre los 4 y 12 meses, y
  • 55. 44 la revacunación de 12 meses en adelante, esta vacuna cepa RB51, permite la revacunación y posibilita la vacunación de adultos sin riesgos de falsos positivos. La vacuna B. abortus Cepa 19 confiere protección completa contra la infección en 67-75% de los animales vacunados. En un porcentaje superior al 95% de la vacunación evita el aborto en hembras que se han infectado. Se utiliza como una vacuna viva que por lo general se suministra a terneras entre 3 y 6 meses. La presencia de la cadena O del LPS explica el desarrollo y persistencia de anticuerpos post-vacunales en el suero (Cárdenas, 2018). Para la OIE tanto la vacuna RB51 como la cepa 19 son estables no se propagan de un animal a otro, la ventaja de la RB51 comparada con la Cepa 19 es que no induce la formación de anticuerpos los cuales son detectados por las pruebas estándar de diagnóstico de brucelosis. La vacunación de hembras en estado de preñez podría causar aborto. La vacunación de hembras adultas induce protección inmediata contra la Brucelosis ya que los animales obtienen inmunidad 3-4 semanas después de la vacunación, lo cual acelera el proceso de control de la enfermedad. Ambas cepas vacunales son patógenas para el hombre, desde el punto de vista de la Salud Pública, la infección con cepa RB51 en el hombre no es detectada por las técnicas convencionales (deben utilizarse tests serológicos que detecten proteínas de la bacteria y no el LPS). Por otro lado, el tratamiento común contra brucelosis no puede ser utilizado, porque esta cepa es resistente a la rifampicina (Maslucán, 2018)
  • 56. 45 2.3. Bases legales Este proyecto de investigación está sustentado en un conjunto de leyes vigentes en torno al sector agro productivo: Como principal soporte se presenta la Constitución de la República Bolivariana de Venezuela (CRBV), publicada en Gaceta Oficial Nº 36.860, de fecha 30 de diciembre de 1999: Promueve en su preámbulo y en el texto la política de la sustentabilidad, como motor de toda la dinámica nacional. Según esta constitución; fue promulgada la Ley sobre Defensas Sanitarias Vegetal y Animal el 15 de agosto de 1941. El 11 de septiembre 2003 se publicó en Gaceta Oficial Nº 37.773 la Resolución DM/Nº 127; y para para el 03 de octubre de 2017 hubo una nueva resolución mediante la cual se dictan las Normas sobre la. Vigilancia, Prevención, Control y Erradicación de la Brucelosis Bovina (NVPCBB) ... Gaceta Oficial de la República Bolivariana de Venezuela N° 41.205. Cita las NVPCBB, en su Artículo 1. Que tiene por objetivo establecer las normas para vigilar, prevenir, controlar y erradicar la brucelosis bovina, causada por Brucella Abortus, en las especies susceptibles que se encuentran en todo el territorio nacional, y está orientada a mejorar la productividad pecuaria, a fin de garantizar la seguridad alimentaria y la salud pública. Además, las NVPCBB en su Artículo 2. El Instituto Nacional de Salud Agrícola integral (INSAI), ente adscrito al Ministerio del Poder Popular para la Agricultura Productiva y Tierras, seré el ente encargado para implementar, supervisar y coordinar el Programa Nacional de Vigilancia, Prevención, Control y Erradicación de la Brucelosis Bovina (PROBRUCE), en todo el territorio nacional, a través de la Dirección de Salud Animal
  • 57. 46 Integral, de acuerdo a los lineamientos técnicos establecidos en el marco la presente Resolución. En el mismo orden de idea el Artículo 3. Cita que el Programa de Vigilancia, Prevención, Control y Erradicación de la Brucelosis Bovina (PROBRUCE), se orientará principalmente a los bovinos y bufalinos, sin perjuicio de las medidas pertinentes para otras especies susceptibles, tales como ovinos, caprinos, porcinos, equinos, entre otros. Estas normas en su Artículo 15 expresa. Se utilizará como prueba oficial tamiz o cribado (screening) para el diagnóstico de la brucelosis bovina, la prueba serológica Rosa de Bengala (Card Test) o prueba de aglutinación en placa con antígeno tamponado (BPAT), quedando para confirmación definitiva o pruebas complementarias las siguientes: Prueba Lenta en Tubo, Prueba 2-Mercaptoetanol, ELISA Competitiva, ELISA Indirecto, Fluorescencia Polarizada (FPA), Fijación de Complemento (FC), Reacción en cadena de la polimerasa (PCR), y cualquier otra que determine el Instituto Nacional de Salud Agrícola Integral (INSAI). Las pruebas de ELISA y FPA se consideran además las adecuadas para el cribado de la enfermedad, pudiendo conducir directamente al diagnóstico definitivo según el criterio clínico y epidemiológico correspondiente. Otros aspectos propuestos en la resolución incluyen el uso de la prueba de anillo en las receptorías de leche como vigilancia epidemiológica y la acreditación respectiva a los veterinarios de campo para realizar la prueba diagnóstica.
  • 58. 47 Sustenta legalmente este proyecto la Ley de Salud Agrícola Integral. La misma responde a la necesidad de contar con una correcta y oportuna ejecución de políticas de salud agrícola con una perspectiva integral que no sólo se circunscriba al combate de las plagas y enfermedades que atacan a los animales y vegetales, sino también a la interacción de todos los seres vivos y su entorno. Incorpora la noción de una salud agrícola integral entendida como una herramienta fundamental que garantiza la soberanía y seguridad agroalimentaria de la nación, con un claro enfoque sustentable y atendiendo a las especificidades del medio rural con sus respectivos condicionamientos ecológicos, demográficos, económicos y socioculturales. Además, auspicia la idea de corresponsabilidad y división de funciones en materia de salud agrícola integral. Esta ley en su Artículo 5, cita que el Ejecutivo Nacional, a través de sus órganos y entes competentes, prestará especial atención a los pequeños y medianos productores y productoras vinculadas con los consejos comunales, pueblos, comunidades indígenas y cualquier otra forma de organización y participación comunitaria cuya actividad principal esté relacionada con el desarrollo agrario, para lograr la prevención, control y erradicación de enfermedades y plagas que afecten a los rubros animal y vegetal. Además, el artículo, señala que el Programa de Brucelosis comprenderá las siguientes actividades básicas: 1. Vigilancia Epidemiológica. 2. Diagnóstico sistemático de la Brucelosis en los animales, adoptando criterios epidemiológicos, clínicos y de laboratorio.
  • 59. 48 3. Identificación, aislamiento, seguimiento y remisión a matadero o frigorífico de los positivos, en un lapso no mayor de quince (15) días. 4. Sacrificio de los animales positivos. 5. Aplicación de las actividades de control de la movilización y comercialización de animales, productos y subproductos destinados a fortalecer el cumplimiento del Programa. 6. Caracterizar la enfermedad en cada entidad para establecer un sistema de clasificación de predios y áreas libres de Brucelosis. 7. Vacunación antibrucélica obligatoria para las especies susceptibles e inmunizarles. 8. Aplicación de medidas sanitarias profilácticas a nivel de predios. 9. Campaña de educación y divulgación sanitaria local, regional y nacional con participación de los sectores interesados (oficial y privado). 10. Elaboración de un manual de normas y procedimientos para la creación y funcionamiento de los centros veterinarios de procesamiento de muestras. 11. Producción y abastecimiento oportuno de Biológicos. 12. Un Sistema de Adiestramiento y Acreditación de médicos veterinarios en general. Así mismo en el Artículo 11, explica que los propietarios o propietarias, ocupantes, administradores o administradoras, o responsables de los predios pecuarios o agrícolas, o cualquier persona vinculada al sector productivo, que tenga conocimiento o presunción de que
  • 60. 49 sus animales o cultivos están afectados por enfermedades o plagas, deben informar de inmediato, o dentro de las veinticuatro (24) horas siguientes, a los órganos y entes del Ejecutivo Nacional, competentes, a fin de articular la aplicación de las medidas zoosanitarias y fitosanitarias correspondientes. Por su condición sanitaria la brucelosis es vigilada en el ámbito nacional en especies animales productivas como la bovina, bufalina, caprina, ovina, y porcina por medio del INSAI, con el fin de promover y proporcionar seguridad e inocuidad alimentaria en las diferentes cadenas productivas. Para tal efecto este ente gubernamental entre sus exigencias sanitarias para la movilización cita lo siguiente; Animales Vivos: Exigencia sanitaria: Aval sanitario vigente expedido por un Médico Veterinario del INSAI que contenga el certificado de vacunaciones contra (fiebre aftosa, brucelosis, rabia) y pruebas diagnósticas (brucelosis, tuberculosis). La Constitución Nacional de la República Bolivariana de Venezuela, en su artículo 83 apoya la propuesta internacional hecha por la FAO en el 2002 en cuanto a Salud Publica Veterinaria, al encargase la Medicina Veterinaria de las Zoonosis, las enfermedades profesionales y de la higiene del medio ambiente en relación con los animales. El artículo 84 demuestra la intención del gobierno en que el sistema de salud sea de carácter intersectorial, descentralizado y participativo, dándole prioridad a la promoción de la salud y la prevención de las enfermedades, pudiendo lograrse esto mediante charlas dirigidas a las comunidades. En el mismo orden de idea, el artículo 85 muestra la preocupación del estado por formar profesionales integrales en salud, incluyendo en ello los Médicos Veterinarios que velen por la salud de los animales con los que vivimos y que también promuevan campañas de
  • 61. 50 prevención de enfermedades y saneamiento ambiental para proteger a las personas perteneciente a las comunidades, que convivan directamente o no con los animales. La ley Orgánica de Salud (2002), en su artículo 1, al garantizar el derecho a la Salud como un erguido fundamental, apoya acciones particulares o conjuntas, orientadas a la promoción de la salud y prevención de enfermedades, cualquiera que sea su origen. El artículo 5 señala que promover y defender la salud es un deber de todos los ciudadanos, profesionales al difundir conocimientos y no profesionales al apoyar acciones propuestas y hacer que se cumplan provechosamente. Por otra parte, el artículo 20 hace énfasis en la educación para la salud, prevención de enfermedades y la participación social en salud, en el cual se encuentra la justificación jurídica de la difusión de la información. Y en su artículo 32 igualmente se tiene apoyo en cuanto a la promoción de la salud por medio de la difusión de la información, especificando los procesos de salud y enfermedad que permitan el conocimiento de los mecanismos de prevención. La ley de Ejercicio de la Medicina Veterinaria (1968), en su artículo 7 demuestra la integralidad del Médico Veterinario al incurrir este en procesos de extensión, siempre con altos niveles de ética y profesionalismo, al mismo tiempo que su empeño y esmero se centran en procúrale una mejor calidad de vida al paciente culturizando también al cliente. Además, la Ley de Mercadeo Agrícola, cuyo planteamiento normativo establece que esta ley está dirigido a la planificación, fomento, regulación y evaluación de todas las fases comerciales del mercadeo de productos e insumos para la producción agrícola, y propicia el incremento conjunto de la seguridad alimentaria y la producción agrícola interna; además de
  • 62. 51 contribuir a la organización del sistema de financiamiento, comercialización y distribución de alimentos a nivel nacional. En consecuencia, el propósito fundamental de este proyecto es determinar la prevalencia de Brucelosis bovina en la finca Palmasola del sector la Piedra del municipio Piritu, estado Falcón desde una perspectiva integral, considerando aspectos como el plan sanitario, y sus posibles incidencias en la producción pecuaria. Por otra parte, considerando la nueva realidad pecuaria venezolana el proyecto deberá estar enmarcado en el logro de una mayor productividad en el sector, disminución del déficit del sector externo pecuario y en fomentar una mejor calidad de vida del hombre del campo. En este sentido, y en consonancia con lo establecido por la Constitución de la República Bolivariana de Venezuela en su artículo 307, este proyecto pretende identificar la prevalencia de brucelosis en los bovinos de la finca Palmasola para aplicar las normas sanitarias correspondientes según los resultados, para el aseguramiento de la protección y seguridad ambiental, agroalimentaria y salud pública. 2.4. Sistema de Hipótesis Esta investigación como se menciono tiene un alcance descriptivo por tal se formulan hipótesis que, para Hernández, Fernández, y Baptista (2014), las hipótesis son explicaciones tentativas del fenómeno investigado que se enuncian como proposiciones o afirmaciones y las misma se derivan de la teoria existente. A continuacion se plantea la hipótesis. 2.4.1. Hipótesis Alternativa (Ha)
  • 63. 52 Probabilidad de que exista brucelosis bovina en el sector la Piedra 2.4.2. Hipótesis Nula (Ho) Probabilidad de que no exista brucelosis bovina en el en el sector la Piedra 2.5. Operacionalización de Variables En el presente proyecto de investigación trabajaremos con variables estadísticas que otorgaran como resultado un valor numérico, para Arias (2012), una Variable es una característica o cualidad; magnitud o cantidad, que puede sufrir cambios, y que es objeto de análisis, medición, manipulación o control en una investigación. Por tal se representarán en un cuadro de operacionalidad de las variables para medir las mismas. 2.5.1. Variable independiente: Diagnóstico de brucelosis bovina 2.5.2. Variable dependiente: Prevalencia, normas sanitarias
  • 64. 53 Cuadro 1. Operacionalización de variable para analizar las muestras serológicas mediante la técnica BPA Fuente: Elaboración propia (2021) Objetivo general: Determinar la prevalencia de Brucelosis bovina en la finca Palmasola del sector la Piedra del municipio Piritu, estado Falcón. Objetivo especifico Variable (independiente) Definición conceptual Dimensión Indicador Realizar el diagnóstico para brucelosis bovina mediante la Técnica de aglutinación con antígeno tamponado (BPA) Diagnóstico Brucelosis Bovina Se puede realizar de manera directa, aislando el microorganismo a partir de cultivos de sangre, médula ósea u otros tejidos o indirecta a través de métodos serológicos que detectan anticuerpos (OIE, 2017). Es una enfermedad infectocontagiosa, producida por la bacteria Brucella abortus, que afecta principalmente a las hembras bovinas (Cárdenas, 2018) Abortos pasados el quinto mes de gestación. Método de aglutinación. Positivo Negativo
  • 65. 54 Cuadro 2. Operacionalización para establecer la prevalencia de brucelosis en los bovinos de la finca Palmasola Fuente: Elaboración propia (2021) Objetivo general: Determinar la prevalencia de Brucelosis bovina en la finca Palmasola del sector la Piedra del municipio Piritu, estado Falcón. Objetivo especifico Variable (dependiente) Definición conceptual Dimensión Indicador Establecer la prevalencia de brucelosis en los bovinos de la finca Palmasola para aplicar las normas sanitarias correspondientes según los resultados. Prevalencia Normas Sanitarias Mide la proporción de animales que se encuentran enfermos al momento de evaluar el padecimiento en la unidad de producción en un momento determinado (Cárdenas, 2018) Son especificaciones zoosanitarias para mejorar la sanidad y el bienestar de los animales, así como la salud pública veterinaria (OIE, 2017). Descenso de la fertilidad. Reducción en la producción de leche Positivo Negativo
  • 66. 55 CAPÍTULO III: MARCO METODOLÓGICO 3.1. Nivel y Diseño de la Investigación El trabajo de investigación actual para determinar la prevalencia de brucelosis bovina tiene un enfoque cuantitativo, debido que se medirán y analizarán cuantitativamente variables, está dentro de un estudio epidemiológico descriptivo transversal, asimismo, se tratará de una investigación de campo con carácter descriptivo, pues no se llevará a cabo ninguna manipulación ni control de las variables sometidas a estudio. La clasificación para el tipo de diseño de campo correspondiente, es de la investigación no experimental, durante el periodo desde junio a octubre del 2021. El estudio presenta un diseño de encuesta, donde se obtendrán en un momento determinado los datos mediante la aplicación de la encuesta epidemiológica a los productores del sector la Piedra. 3.2. Población y Muestra La población considerada estuvo constituida en una primera etapa de la investigación por los 7 productores del sector la Piedra que a continuación se mencionan: Héctor Bracho, Ángel Bracho, Rafael Campos, Pablo Zavala, Heriberto Díaz, Mamerto Bracho y Rafael Bracho. En la segunda etapa solo se abordaron cuyos productores aceptaron su participación en la investigación, según la encuesta epidemiológica aplicada a estos productores la población está constituida por 154 bovinos, distribuidos de la siguiente manera:
  • 67. 56 Tabla 1. Productores PRODUCTOR UNIDAD DE PRODUCCIÓN SEMOVIENTES BOVINOS Ángel Bracho Valle Encantado 45 Heriberto Díaz Palmasola 48 Rafael Campos La Lora 61 154 TOTAL Fuente: Elaboración propia (2021) Cabe destacar, que con la encuesta dirigida a los propietarios y personal obrero de las fincas del sector objeto a estudio se cuantifico la cantidad de semovientes en las unidades de producción, para determinar posteriormente el tamaño de la muestra y proceder a la extracción de la sangre y determinar presencia o no de brucelosis. Tabla 2. Número de animales y fincas encuestadas SEMOVIENTES VALLE ENCANTADO PALMASOLA LA LORA Vacas en produccón 10 15 21 Vacas secas 5 2 3 Becerros 5 11 8 Becerras 6 4 13 Mautes 11 4 0 Novillas 7 10 15 Toro 1 2 1 Sub Total 45 48 61 TOTAL 154 Fuente: Elaboración propia (2021)
  • 68. 57 El muestreo o la muestra fue del tipo denominada a conveniencia, ya que de las tres fincas cuyos propietarios estuvieron de acuerdo en participar en la investigación, se seleccionó la finca Palmasola por la facilidad de acceso, y por el factor económico que representaba una cantidad muestral muy grande. Además, de acuerdo a la encuesta aplicada fue la finca con mayor historia de abortos, infertilidad, nacimiento de crías débiles, y disminución de la producción de leche factores asociados a infección por Brucella, facilitando disponibilidad de animales que cumplían con los criterios de inclusión para la muestra. Tabla 3. Número de animales que conforman la población de la finca seleccionada SEMOVIENTES PALMASOLA Vacas en produccón 15 Vacas secas 2 Becerros 11 Becerras 4 Mautes 4 Novillas 10 Toro 2 TOTAL 48 Fuente: Elaboración propia (2021) Los criterios de inclusión para la selección de los animales a muestrear en la finca Palmasola son los considerados en el Artículo 23 de las normas sobre vigilancia, prevención y control de brucelosis, donde cita que la toma de muestra para diagnóstico a hembras bovinas es partir de los 20 meses de edad y los machos a partir de los 6 meses de edad, en esta investigación se muestreo los toros reproductores ya que ellos también pueden infectarse provocándoles perdida de fertilidad, constituyéndose así la muestra de la siguiente manera: