Habla un poco sobre en ambiente

1. REPLICACIÓN POR DESPLAZAMIENTO
DE CADENA EN PLÁSMIDOS
ANA MARCHENA
AVRIL BRITO
JOSE GÓMEZ
GABRIEL LOPERA
MIGUEL MARRUGO
GRUPO B

2. CONTENIDO
01 Definición de plásmidos
02 Estructura de los plásmidos
03 Replicación por desplazamiento de cadena

3. ¿QUÉ SON LOS
PLASMIDOS?
Los plásmidos son moléculas de ADN
de doble cadena extracromosómico,
con información genética que se
encuentran dentro de la mayoría de
bacterias. Estas estructuras circulares,
que son independientes del ADN
bacteriano.

4. CARACTERISTICAS
DE LOS PLASMIDOS
Dependiendo de su tamaño pueden
codificar desde unas cuantas proteínas
hasta cientos de ellas. Sin embargo,
raramente codifican productos
esenciales para el crecimiento celular,
tales como ARN polimerasas o enzimas
del ciclo de los ácidos tricarboxílicos.
Los productos de sus genes
generalmente dan a las bacterias una
ventaja selectiva sólo bajo ciertas
condiciones. La resistencia a antibióticos
como la ampicilina, tetraciclina y
kanamicina.

5. CARACTERISTICAS
DE LOS PLASMIDOS
La transferencia de la información
genética contenida en el plásmido de
una bacteria donadora a una
receptora se conoce con el nombre de
conjugación. Este proceso requiere de
la expresión de genes y de la
presencia de regiones en el ADN del
plásmido necesarios para su
movilización. El plásmido se moviliza a
través de un puente de conjugación
entre las células.

6. 01
ESTRUCTURA DEL
PLASMIDO
Sitio de marcador seleccionable
Esta región consta de genes de resistencia a antibióticos
que son útiles en la identificación y selección de bacterias
que contienen plásmidos.
02
Origen de replicación (OR)
Se refiere a una ubicación específica en la hebra donde
comienza el proceso de replicación. En los plásmidos, esta
región es rica en A=T ya que es más fácil separar las hebras
durante la replicación.
03
Sitio de unión del cebador
Esta es la secuencia corta de ADN monocatenario que es
útil en la amplificación y secuenciación del ADN.
04
Región promotora
Esta es la región donde se carga la maquinaria
transcripcional.
05
Múltiples sitios de clonación
Este sitio contiene varias secuencias donde las enzimas de
restricción pueden unirse y escindir la estructura de doble
cadena.

7. REPLICACIÓN POR
DESPLAZAMIENTO DE CADENA

8. DESPLAZAMIENTO
DE CADENA
La replicación por desplazamiento de
cadena es propia de los plásmidos del
grupo de incompatibilidad Q (InQ)
MODELO RSF1010
Rep A (Helicasa)
Rep B (Primasa)
Rep C (Proteína de unión
específica de ADN)
Este replicón consta de 3
proteínas:

9. I
DESPLAZAMIENTO
DE CADENA
II
Parte de una cadena doble parental (lineas
negras continuas) que representan los dos
sitios de iniciación de replicación
monocatenarios (ssiA y ssiB).
III
La cadena doble de ADN se separa por la unión
de RepC dentro del origen de replicación OriV
junto a la helicasa RepA, lo que permite que los
dos sitios formen horquillas de replicación.
La base de la horquilla es reconocida por RepB,
que inicia la síntesis de un cebador de ARN, y la
extensión del 3´-OH libre es llevado a cabo por
la ADN polimerasa III. Se forman dos bucles D,
uno a cada dirección de síntesis.

10. IV
DESPLAZAMIENTO
DE CADENA
V
La síntesis continúa en ambas direcciones,
extendiendo el área de formación del
bucle D.
VI
Se completa la elongación y se produce la
terminación de la replicación en ambas hebras
en los sitios ssi en los que comenzó la
replicación. En este punto, se restauran los sitios
ssi en las hebras hijas recién sintetizadas.
Las dos hebras hijas se ligan, lo que da como
resultado dos dúplex de ADN, cada uno de
los cuales contiene una hebra parental y una
hebra hija.

11. DESPLAZAMIENTO
DE CADENA RESULTADO
Cadenas sencillas de ADN circular
covalentemente cerrado.
Corresponden a las cadenas
desplazadas durante la
replicación, que contienen
cualquiera de los sitios ssi y que
serán usados como punto de inicio
para la síntesis de su cadena
complementaria y su conversión
de moléculas de doble cadena.
Moléculas de ADN de doble
cadena, súper-enrollado por la
actividad de la helicasa.
Cualquier estadio intermedio,
como círculos con solo una parte
de su secuencia de doble cadena.
1.
2.
3.

12. MUCHAS GRACIAS
POR VER ESTA PRESENTACIÓN