lab 3 de analisis

1. UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE NICARAGUA
UNAN-LEÓN
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS
CARRERA DE FARMACIA
DEPARTAMENTO DE FARMACIA INDUSTRIAL
COMPONENTE CURRICULAR: Análisis farmacéutico II
PRACTICA No. 3.
TEMA: Validación del método analítico espectrofotometría UV-vis Para la cuantificación
de Ciprofloxacina tabletas.
INTEGRANTES:
 Br. Donald Alberto Ponce Santana.
 Br. Delmiss Aniuska Martínez Talavera.
 Br. Melisa Mercedes Oviedo Castellón.
 Br. Cinthya Carolina Mejía.
 Br. Isaac Fernando Mercado Ramos
DOCENTE: Cesar Peralta.
CURSO: III “B4”.
LEÓN, 17 DE octubre, 2016.

2. INTRODUCCIÓN
La validación incluye dos aspectos fundamentales por una una parte la evaluación de los
parámetros de calidad del método (algunas veces denominada validación intrínseca) y la otra
adecuación de los mismos, a unos requerimientos analíticos concretos enfocados a la
resolución de un problema (validación)
La validación de un procedimiento analítico es el proceso que establece, mediante estudios
en laboratorio, que las características de desempeño del procedimiento cumplen los requisitos
para las aplicaciones analíticas previstas.
La validación consta de tres etapas
 Diseño: plan de lo que se quiere elaborar.
 Ejecución: implementar el proceso.
 Documentación: Informe de validación.
Características Analíticas Típicas Utilizadas para la Validación de Métodos
 Exactitud
 Precisión
 Especificidad
 Límite de Detección
 Límite de Cuantificación
 Linealidad
 Intervalo
 Robustez
Requisitos para llevar a cabo la validación.
 Utilizar equipo y material que
Funcionen adecuadamente
Calibrados
Cumplan con las especificaciones del método
Personal capacitado para aplicar el método analítico

3. OBJETIVOS.
General.
 Llevar a cabo la validación del método analítico espectrofotometría UV-vis Para la
cuantificación de Ciprofloxacina tabletas.
Específicos.
 Desarrollar nuestras habilidades como analistas en el proceso de validación del
método analítico espectrofotometría UV-vis.
 Aplicar las diferentes características analíticas típicas de la validación en este método
analítico.
 Determinar si el método analíticas es adecuado para las aplicaciones analíticas
deseadas

4. PRECISIÓN:
Respetabilidad del método
Ciprofloxacina mcg/ml Ciprofloxacina mcg/ml (
espectrofotómetro)
80%
4.4 mcg/ml
4.82680
4.81140
4.81290
100%
5,5 mcg/ml
5.86840
5.86230
5.87300
120%
6.6mcg/ml
7.36880
7.35000
7.34370
Resultados de los % de principio activo recuperado
𝐱̅=108.77% > 103.0%
S=2.0486
RSD= 2.0486/108.77*100=1.88% < 3%
Precisión intermedia:
Analista N° 1
# nombre Factor de
disolución
Ciprofloxacina
(mcg/ml)
Abs<276nm<
1 Analista1 1.00000 5.56750 0.65372
2 Vaso1 1.00000 5.56940 0.65394
3 1.00000 5.58110 0.65532
4 Vaso2 1.00000 5.67250 0.66606
5 1.00000 5.66490 0.66516
6 1.00000 5.68390 0.66739
7 Vaso3 1.00000 5.83940 0.68564
8 1.00000 5.82440 0.68383
9 1.00000 5.82760 0.68427
% p.a recuperado
80% 100% 120%
109% 106% 111%
109% 106% 111%
109% 107% 111%

5. Tabla de los % de P.A recuperado.
S: 2.08832735.
Χ: 103.111111. > 103%
RDS: 2.02531747< 3%
Analista N°2
# Nombre Factor de dilución Cipro (mcg/ml) Abs <276nm>
1 Analista 2 1.00000 5.6989 0.66915
2 Vaso 1 1.00000 5.7230 0.67198
3 1.00000 5.7193 0.67154
4 Vaso 2 1.00000 5.6696 0.66571
5 1.00000 5.6799 0.66692
6 1.00000 5.6745 0.66629
7 Vaso 3 1.00000 5.5833 0.65558
8 1.00000 5.5866 0.65597
9 1.00000 5.6057 0.65820
% de principio activo recuperado.
VASO 1 (100%) VASO 2 (100%) VASO 3 (100%)
103.6% 103.08% 101.51%
104.05% 103.27% 101.57%
103.98% 103.17% 101.92%
S: 0.9858893.
Χ: 102.884444. < 103%
RDS: 0.95824917. < 3%
Resultados en conjunto de los ambos analistas para determinar la precisión
intermedia.
S: 1.58848635.
Χ: 102.997778 < 103%
RDS: 1.54225303 < 3%
Analista 1
Día S1 100% S2 100% S3 100%
1 101% 102% 106%
2 101% 103% 105%
3 101% 103% 106%

6. EXACTITUD
# Nombre Factor de
dilución
Cipro (mcg/ml) Abs <276nm>
1 80% 1.00000 4.3532 0.51113
2 80% 1.00000 4.3622 0.51219
3 80% 1.00000 4.3280 0.50819
4 100% 1.00000 5.5103 0.64701
5 100% 1.00000 5.5140 0.64744
6 100% 1.00000 5.5123 0.64724
7 120% 1.00000 6.4855 0.76151
8 120% 1.00000 6.4723 0.75996
9 120% 1.00000 6.4838 0.76131
% de principio activo recuperado.
80% 100% 120%
98.93% 100.18% 98.27%
99.14% 100.25% 98.06%
98.36% 100.22% 98.24%
Cada uno de los porcentajes de principio activo recuperado está en el rango de (97% - 103%
Tc: 3.01351342 > 7.86 Tt

7. Parámetro de linealidad en la validación del método analítico Espectrofotometría UV-
Vis; Tabla de resultados.
Gráfico de los resultados (concentración vs Absorbancia)
Nombre del estándar Ciprofloxacina
(mcg/mL)
Abs<276nm % de
error
Criterios de evaluación
Sln estándar al 80% 4.40000 0.53093 -2.69 R2≤ 0.995%
Sln estándar al 80% 4.40000 0.53068 -2.65 R≤ 0.999%
Sln estándar al 80% 4.40000 0.52944 -2.42 RDS≥ 2%
Sln estándar al 90% 4.95000 0.60887 -4.54 Una line recta diferente de 0
Sln estándar al 90% 4.95000 0.59382 -2.12 Resultados
Sln estándar al 90% 4.95000 0.59329 -2.03
Sln estándar al 100% 5.50000 0.66043 -2.22 R2: 0.989 < 0.995%
Sln estándar al 100% 5.50000 0.66287 -2.58 R: 0.978 < 0.999%
Sln estándar al 100% 5.50000 0.66173 -2.41 RDS: 12.5048888 > 2%
Sln estándar al 110% 6.05000 0.68497 3.71
Sln estándar al 110% 6.05000 0.68551 3.63
Sln estándar al 110% 6.05000 0.68441 3.79
Sln estándar al 120% 6.60000 0.76088 1.85
Sln estándar al 120% 6.60000 0.75996 1.97
Sln estándar al 120% 6.60000 0.76113 1.82
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0 1 2 3 4 5 6 7
VALORESDEADSORVANCIA
VALORES DE CONCENTRACION DE ESTANDAR
Grafico de la linealidad

8. ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS
Parámetro de repetibilidad del método
El método analítico de cuantificación por espectrofotometría UV-Vis, Ciprofloxacina
tabletas 500mg cumple solo con un criterio de aceptación RSD=1.88% < 3% (criterios
presentados en información anexa) del parámetro de precisión atreves de repetibilidad del
método (según la USP) por el cual se está validando por lo tanto podemos concluir que el
método de espectrofotometría UV-Vis Para la cuantificación de Ciprofloxacina tabletas no
es preciso.
Parámetro de precisión intermedia.
Para este parámetro analizamos a los analistas de forma individual, obteniendo mejores
resultados el analista N°2 con una Χ: 102.884444. Y una RDS: 0.95824917. La cual eta
dentro del rango de los criterios de evaluación según la USP descritos en información anexa;
Por otro lado el analista N°1 obtuvo los siguientes resultados Χ: 103.111111. Y una RDS:
2.02531747 en el cual el promedio no cumple con un criterio de aceptación para este
parámetro (Χ % de P.A recuperado: 100% ± 3%) por lo cual podemos concluir que posible
mente el analista cometió algún error al momento de preparar la soluciones.
Los resultados en general de ambos analista (19 soluciones al 100%), son Χ: 102.997778;
RDS: 1.54225303. Por lo cual podemos decir que el que el método de espectrofotometría
UV-Vis Para la cuantificación de Ciprofloxacina tabletas pasa la prueba de precisión
intermedia según los criterios de aceptación de la USP por lo cual podemos concluir que el
método es preciso.
Parámetro de linealidad.
Según los resultados obtenidos en los caculos del parámetro de linealidad por el cual se está
validando el método analítico de espectrofotometría UV-Vis, cumple con los criterios de
aceptación (según la USP); Los resultados fueron los siguientes expuestos R2: 0.989 <
0.999%; R: 0.978 < 0.999%; RDS: 12.5048888 > 2% y el grafico presentaba una línea recta
diferente de 0 ; Por lo cual podemos concluir que método de espectrofotometría UV-Vis Para
la cuantificación de Ciprofloxacina tabletas es lineal

9. Parámetro de exactitud
De acuerdo a los resultados obtenidos sobre los % de principio activo recuperado, cumplen
cada uno de ellos y sobre el Tc: 3.01351342 > 1.78 Tt no cumple con los criterios de
aceptación; La USP indica que cada uno de los porcentajes de principio activo deben de estar
en el ranjo 97% - 103% y el Tc ≤ Tt; Como el método no cumple el segundo criterio de
aceptación podemos concluir que el método analítico de espectrofotometría UV-Vis Para la
cuantificación de Ciprofloxacina tabletas no es exacto.

10. Información anexa.
Ecuaciones para calcular el coeficiente de correlación.
𝑠𝑐( 𝑦) = ∑ 𝑦2
−
(∑ 𝑦)2
𝑛
𝑠𝑐(𝑥) = ∑ 𝑥2
−
(∑ 𝑥)
2
𝑛
𝑠𝑐(𝑥𝑦) = ∑ 𝑥𝑦 −
∑(𝑥) ∗ ∑(𝑦)
𝑛
𝑟 =
𝑠𝑐(𝑥𝑦)
√ 𝑠𝑐 ( 𝑥) ∗ 𝑠𝑐(𝑦)
Tabal de resultados en el cálculo del coeficiente de correlación.
X Y XY Y2 X2
80 0.53093 42.4744 0.28188666 6400
80 0.53068 42.4544 0.28162126 6400
80 0.52944 42.3552 0.28030671 6400
90 0.60887 54.7983 0.37072268 8100
90 0.59382 53.4438 0.35262219 8100
90 0.59329 53.3961 0.35199302 8100
100 0.66043 66.043 0.43616778 10000
100 0.66287 66.287 0.43939664 10000
100 0.66173 66.173 0.43788659 10000
110 0.68497 75.3467 0.4691839 12100
110 0.68551 75.4061 0.46992396 12100
110 0.68441 75.2851 0.46841705 12100
120 0.76088 91.3056 0.57893837 14400
120 0.75996 91.1952 0.5775392 14400
120 0.76113 91.3356 0.57931888 14400
∑X=1,500 ∑Y=9.70892 ∑XY=987.2995 ∑ Y2=6.37592491 ∑ X2=153,000
Se aplicaron las formulas anteriormente señaladas con los resultados obtenidos en la tabla
para el cálculo del coeficiente de correlación lineal

11. Criterios de aceptación para cada parámetro realizado según la USP 32 NF 25.
Repetibilidad del método.
Criterios:
Χ % de P.A recuperado: 100% ± 3%
RDS ≤ 3%
Precisión intermedia
Χ % de P.A recuperado: 100% ± 3%
RDS ≤ 3%
Linealidad.
R2≤ 0.995% R≤ 0.999%
RDS ≥ 2%
Una line recta diferente de 0
Exactitud:
% de P.A recuperado 100% ± 3%
Que el Tc < Tt:
Formulas adicionales:
 Para la exactitud
𝑇𝑐 =
| 𝒙̅ − 𝝁|
𝒔/√ 𝒏
Tt: grados de libertad (n-1), nivel de significancia (α) =7.86
 Para él % de principio activo recuperado
% 𝑃. 𝐴 𝑅𝑒𝑐𝑢𝑝𝑒𝑟𝑎𝑑𝑜 =
𝐸𝑛𝑐𝑜𝑛𝑡𝑟𝑎𝑑𝑜
𝐷𝑒𝑐𝑙𝑎𝑟𝑎𝑑𝑜
∗ 100%
 Medios estadísticos.
Desviación estándar: RDS o CDV: Promedio:

12. BIBLIOGRAFÍA
1. USP 32. NF25. (Pag 749)