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Bethesda System
2001
SISTEMA DE BETHESDA
Cambio la terminología
• NIC I = Lesion Intraepitelial Escamosa
BajoGrado (LIE) [LBG] (LSIL)
• NIC II = Lesion Intraepitelial bajo grado [LI E]
• ( HSIL )
• NIC III = Lesion Alto Grado [LAG] ( HSIL)
Elimino el koilocitosis porque llego las pruebas
para VPH.
Bajo Grado (LIE) Incluye NIC I y Koilocitosis
Alto grado (LIE) (HSIL) incluye NIC II y NIC III
DIAGNOSTICO DESCRIPTIVO
1. Modificaciones celulares benignas : Infección y Modificaciones reactivas
2. Anomalías de las células epiteliales
Pavimentosas: - Atípicas de significado incierto
- De bajo grado: - HPV ( asociado a VPH)
- NIC I / Displasia leve
- De alto grado: - NIC II / Displasia Moderada
- NIC III / Displasia Severa
- NIC III / CIS ( Carcinoma. in-situ)
- Ca escamoso
Glandulares: - Endometriales en postmenopausia
- Atípicas de significado incierto ( ASCUS)
- Adenocarcinoma
- Otras neoplasias epiteliales
- Neoplasias no epiteliales
3. Valoración hormonal
Neoplasia intraepitelial cervical (NIC) (CIN siglas en inglés)
Características morfológicas y Biológicas del NIC
• En todos los casos de NIC, el epitelio normal del cuello uterino es
reemplazado por células epiteliales anormales que muestran diferentes
grados de diferenciación.
• Células neoplásicas indiferenciadas de apariencia basaloide o parabasaloide
pueden ocupar la totalidad del epitelio (NIC 3) o éstas pueden diferenciarse a
medida que se acercan a la superficie (NIC 1, NIC 2)
• El núcleo de las células es grande, irregular y varía en tamaño y forma. o de
cromatina se incrementa y es de estructura anormal , la relación
núcleo/citoplasma es alta.
• A medida que las células neoplásicas se diferencian, el volumen
citoplasmático aumenta. Las irregularidades nucleares, el polimorfismo, y la
anisonucleosis persisten a pesar de que el tamaño nuclear usualmente
disminuye.
• La actividad mitótica no permanece confinada a las capas basales del
epitelio, y pueden verse mitosis atípicas a cualquier nivel.
• No es infrecuente encontrar focos de NIC 1, NIC 2, y NIC 3 en el mismo
cuello uterino.
CIN (displasia leve): Note las célula indiferenciadas
ocupando el tercio inferior del epitelio, luego comienzan a
diferenciarse de tal forma que las células epiteliales en los dos
tercios superiores aparecen con más citoplasma y núcleo más
pequeño (pero anormal). Las mitosis son raras.
CIN2 (displasia moderada): Note las células indiferenciadas ocupando dos
tercios del epitelio y luego comenzado a diferenciarse de tal forma que las
células epiteliales en el tercio superior del epitelio aparecen con mas citoplasma
y con núcleos más pequeños (pero anormales). Las mitosis están confinadas a
los dos tercios inferiores del epitelio.
CIN3 (carcinoma in situ): Las células neoplásticas indiferenciadas
ocupan la totalidad del epitelio. Las mitosis incluidas las mitosis
anormales se pueden ver por todo el epitelio. Note que en cáncer
intraepitelial la membrana basal se mantiene intacta y el estroma
no está invadido por células tumorales.
Las células anormales encontradas en el frotis derivan de la superficie de la lesión intraepitelial NIC.
Las células anormales pueden aparecer sueltas o en hileras o sábanas. Las siguientes características
diferencian las células normales de las anormales:
La morfología de las células de un foco de neoplasia intraepitelial cervical o displasia, como aparece en
frotis cervicales
* Aumento nuclear desproporcionado resultando en la alteración del ratio núcleo/citoplasma
(n/c) normal
* Variación del tamaño y forma del núcleo
* Irregularidades del contorno nuclear
* Hipercromasia del núcleo y patrón de cromatina anormal
* Núcleos largos, irregulares y algunas veces múltiples (no en NIC I)
* Los grados de NIC (NIC 1, 2, ó 3) pueden ser deducidos dependiendo el grado de aumento
del tamaño nuclear y la alteración de la relación n/c.
* Los tres cuadros expandibles a continuación describen e ilustran con una biblioteca de
láminas las características citológicas de los diferentes grados de NIC
Cytological diagnosis of CIN1 - La definición de CIN1 por el sistema Bethesda (LSIL, displacia leve)
CIN 1 requiere que el núcleo ocupe menos de la mitad del área total de la célula
• El núcleo es 3 ó más veces el tamaño de un núcleo de célula intermedia
normal.
• El ratio núcleo/citoplasma puede o no estar alterado pues el
citoplasma es usualmente abundante y puede estar queratinizado.
Los bordes celulares son usualmente definidos
• Variación moderada en el tamaño y forma del núcleo
• Las células binucleadas o multinucleadas no son comunes
• Hipercromasia con cromatina uniformemente distribuida. La
cromatina puede aparecer degenerada o borrosa si se asocia con
cambios por VPH
• Los nucléolos son poco frecuentes o poco llamativos
• La membrana nuclear puede o no estar bien definida
• Las células con un halo perinuclear bien definido y ópticamente
vacío y citoplasma periférico denso (los llamados Koilocitos)
también deben mostrar las anormalidades nucleares descritas
anteriormente para ser clasificados como CIN 1 (LSIL)
CIN 1 (LSIL) Note el aumento leve del núcleo y el
citoplasma abundante. Los núcleos varían en
tamaño y forma ( presente koilocitos)
IN 1 (LSIL) Aumento leve del núcleo y citoplasma abundante. Los núcleos
varían en tamaño y forma. Note el citoplasma altamente queratinizado sugestivo
de infección por VPH a pesar que no se ven Koilocitos en este campo.
CIN 1 (LSIL) Note slight nuclear enlargement and abundant
cytoplasm. Nuclei vary in size and shape.
CIN 1 (LSIL) Slight nuclear enlargement and
abundant cytoplasm. Nuclei vary in size and shape.
Note koilocytotic atypia
CIN 1 (LSIL) Note slight nuclear enlargement
and abundant cytoplasm. Nuclei vary in size and
shape.
NIC 2 : Bethesda System definition of CIN 2 (HSIL) CIN 2 requiere
que el núcleo ocupe entre la mitad y dos terceras partes del área de la célula.
• Las células aparecen de forma individual o en sábanas o en grupos sincitiales
con núcleos apiñados.
• Las células generalmente tienen un citoplasma delicado o denso;
ocasionalmente el citoplasma se encuentra densamente queratinizado
• El aumento nuclear es 3 ó más veces mayor que el núcleo de la célula
intermedia normal
• El área de citoplasma puede disminuir. Por esta razón, en una célula con un
ratio núcleo/citoplasma muy alto el tamaño del núcleo puede ser más
pequeño que en el LSIL
• Los bordes nucleares son irregulares
• La anisonucleosis es marcada
• Hay hipercromasia en los núcleos y la cromatina es granular y está
uniformemente distribuida (fina o gruesa)
• El tamaño general de la célula puede ser más pequeño que en LSIL
CIN 2 (HSIL) Los núcleos ocupan más de la mitad del
área celular y son hipercromáticos y varían en tamaño y
forma
CIN 2 (HSIL) Los núcleos ocupan más de la mitad del
área celular y son hipercromáticos y varían en tamaño y
forma
CIN 2 (HSIL) Los núcleos ocupan más de la mitad del
área celular y son hipercromáticos y varían en tamaño y
forma
CIN 2 (HSIL) Los núcleos ocupan más de la mitad del
área celular y son hipercromáticos y varían en tamaño y
forma
CIN 2 (HSIL) Los núcleos ocupan más de la
mitad del área celular y son hipercromáticos y
varían en tamaño y forma
CIN 2 (HSIL) Los núcleos ocupan más de la mitad
del área celular y son hipercromáticos y varían en
tamaño y forma
CIN 2 (HSIL) Los núcleos ocupan más de la mitad del
área celular y son hipercromáticos y varían en tamaño y
forma
CIN 3 requiere que el núcleo ocupe más de dos
terceras partes del área de la célula
• La definición de CIN 3 (HSIL) del sistema Bethesda
• . Las células aparecen de forma individual o agrupadas en láminas o en grupos
similares al sincitio.
• . Los núcleos anormales generalmente se encuentran en células con citoplasma
"inmaduros", delicados o densos; Ocasionalmente el citoplasma se encuentra
densamente queratinizado
• . El aumento nuclear es 3 ó más veces el área del núcleo de la célula intermedia
normal *
• . El área del citoplasma se encuentra disminuido. Por esta razón en células con un
ratio núcleo/citoplasma muy alto, el tamaño del núcleo puede se más pequeño que en
el LSIL
• . El tamaño general de la célula es frecuentemente más pequeño que en LSIL
• . Los núcleos son hipercromáticos usualmente con cromatina granular gruesa
• . Los bordes nucleares son irregulares y la anisonucleosis es una característica
prominente
• . Cuando las células anormales aparecen en láminas, los núcleos están apiñados y
sobrepuestos, y se pueden ver figuras mitóticas.
CIN 3 (HSIL) Los núcleos ocupan más de dos
terceras partes del área celular. Note la
variación en el tamaño y forma de los núcleos
y el aumento de la cromatina con distribución
irregular.
La definición citológica del WHO de CIN 3 requiere que el núcleo ocupe más
de dos terceras partes del área de la célula
CIN 3 (HSIL) Los núcleos ocupan más de dos terceras partes
del área celular. Note la variación en el tamaño y forma de los
núcleos y el aumento de la cromatina con distribución irregular
CIN 3 (HSIL) Los núcleos ocupan más de dos terceras partes del área
celular. Note la variación en el tamaño y forma de los núcleos y el
aumento de la cromatina con distribución irregular
CIN 3 (HSIL) Los núcleos ocupan más de dos terceras
partes del área celular. Note la variación en el tamaño y
forma de los núcleos y el aumento de la cromatina con
distribución irregular en este grupo denso de células.
CIN 3 (HSIL) En este frotis se ven dos núcleos
desnudos grandes e hipercromáticos. Varían en
tamaño y forma y sugieren la presencia de un
foco de CIN 3.
• La tinción de Papanicolaou utiliza tres colorantes: la Hematoxilina que tiñe selectivamente los núcleos, el Orange G y la Eosina Alcohol 50 que tiñe los
citoplas- mas.
• Que significa coloración de PAP
• La tinción de Papanicolaou se aplica a exudados vaginales para la detección de cáncer uterino o vaginal. La técnica utiliza un elevado número de
colorantes en su procedimiento. (inmaduras o a parcialmente maduras).
• Qué significa Clase 1 de Papanicolaou.: Cuando Papanicolaou describió su método, propuso clasificar el material en 5 clases: 1, 2, 3, 4 y 5: el 1 era el
normal absoluto, el 2 mostraba inflamación con células normales, el 3 era dudoso y el 4 y 5 francamente patológicos
¿Qué estructuras tiñe el colorante naranja g6 : El orange G y la solución EA (eosina amarillenta) se utilizan para teñir los citoplasmas. Ambas son soluciones
alcohólicas y el alcohol hace más transparentes a los citoplasmas.
Orange G: Es el segundo colorae pueden conservar y transportar las muestras hasta 2 semanas a temperatura ambiente. El transporte al laboratorio de
análisis NO requiere refrigeración.nte de la batería y es un colorante proteico ácido de color amarillo-anaranjado. Se utiliza por su capacidad de competir con
la eosina y en menor medida con el Light Green. Tiñe principalmente proteínas del citoplasma, y en menor medida al núcleo, sobre todo si este es picnótico
:: .
e pueden conservar y transportar las muestras hasta 2 semanas a temperatura ambiente. El transporte al laboratorio de análisis NO requiere refrigeración.
• ¿Cómo fijar la muestra de citología?
• Para fijar la muestra se puede hacer introduciéndola di- rectamente en un recipiente con tapa y alcohol de 96% (fig. 8), por 30 minutos
como mínimo para su fijación total.

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  • 2. 2001 SISTEMA DE BETHESDA Cambio la terminología • NIC I = Lesion Intraepitelial Escamosa BajoGrado (LIE) [LBG] (LSIL) • NIC II = Lesion Intraepitelial bajo grado [LI E] • ( HSIL ) • NIC III = Lesion Alto Grado [LAG] ( HSIL) Elimino el koilocitosis porque llego las pruebas para VPH. Bajo Grado (LIE) Incluye NIC I y Koilocitosis Alto grado (LIE) (HSIL) incluye NIC II y NIC III
  • 3.
  • 4. DIAGNOSTICO DESCRIPTIVO 1. Modificaciones celulares benignas : Infección y Modificaciones reactivas 2. Anomalías de las células epiteliales Pavimentosas: - Atípicas de significado incierto - De bajo grado: - HPV ( asociado a VPH) - NIC I / Displasia leve - De alto grado: - NIC II / Displasia Moderada - NIC III / Displasia Severa - NIC III / CIS ( Carcinoma. in-situ) - Ca escamoso Glandulares: - Endometriales en postmenopausia - Atípicas de significado incierto ( ASCUS) - Adenocarcinoma - Otras neoplasias epiteliales - Neoplasias no epiteliales 3. Valoración hormonal
  • 5.
  • 6. Neoplasia intraepitelial cervical (NIC) (CIN siglas en inglés) Características morfológicas y Biológicas del NIC • En todos los casos de NIC, el epitelio normal del cuello uterino es reemplazado por células epiteliales anormales que muestran diferentes grados de diferenciación. • Células neoplásicas indiferenciadas de apariencia basaloide o parabasaloide pueden ocupar la totalidad del epitelio (NIC 3) o éstas pueden diferenciarse a medida que se acercan a la superficie (NIC 1, NIC 2) • El núcleo de las células es grande, irregular y varía en tamaño y forma. o de cromatina se incrementa y es de estructura anormal , la relación núcleo/citoplasma es alta. • A medida que las células neoplásicas se diferencian, el volumen citoplasmático aumenta. Las irregularidades nucleares, el polimorfismo, y la anisonucleosis persisten a pesar de que el tamaño nuclear usualmente disminuye. • La actividad mitótica no permanece confinada a las capas basales del epitelio, y pueden verse mitosis atípicas a cualquier nivel. • No es infrecuente encontrar focos de NIC 1, NIC 2, y NIC 3 en el mismo cuello uterino. CIN (displasia leve): Note las célula indiferenciadas ocupando el tercio inferior del epitelio, luego comienzan a diferenciarse de tal forma que las células epiteliales en los dos tercios superiores aparecen con más citoplasma y núcleo más pequeño (pero anormal). Las mitosis son raras.
  • 7. CIN2 (displasia moderada): Note las células indiferenciadas ocupando dos tercios del epitelio y luego comenzado a diferenciarse de tal forma que las células epiteliales en el tercio superior del epitelio aparecen con mas citoplasma y con núcleos más pequeños (pero anormales). Las mitosis están confinadas a los dos tercios inferiores del epitelio. CIN3 (carcinoma in situ): Las células neoplásticas indiferenciadas ocupan la totalidad del epitelio. Las mitosis incluidas las mitosis anormales se pueden ver por todo el epitelio. Note que en cáncer intraepitelial la membrana basal se mantiene intacta y el estroma no está invadido por células tumorales.
  • 8.
  • 9. Las células anormales encontradas en el frotis derivan de la superficie de la lesión intraepitelial NIC. Las células anormales pueden aparecer sueltas o en hileras o sábanas. Las siguientes características diferencian las células normales de las anormales: La morfología de las células de un foco de neoplasia intraepitelial cervical o displasia, como aparece en frotis cervicales * Aumento nuclear desproporcionado resultando en la alteración del ratio núcleo/citoplasma (n/c) normal * Variación del tamaño y forma del núcleo * Irregularidades del contorno nuclear * Hipercromasia del núcleo y patrón de cromatina anormal * Núcleos largos, irregulares y algunas veces múltiples (no en NIC I) * Los grados de NIC (NIC 1, 2, ó 3) pueden ser deducidos dependiendo el grado de aumento del tamaño nuclear y la alteración de la relación n/c. * Los tres cuadros expandibles a continuación describen e ilustran con una biblioteca de láminas las características citológicas de los diferentes grados de NIC
  • 10. Cytological diagnosis of CIN1 - La definición de CIN1 por el sistema Bethesda (LSIL, displacia leve) CIN 1 requiere que el núcleo ocupe menos de la mitad del área total de la célula • El núcleo es 3 ó más veces el tamaño de un núcleo de célula intermedia normal. • El ratio núcleo/citoplasma puede o no estar alterado pues el citoplasma es usualmente abundante y puede estar queratinizado. Los bordes celulares son usualmente definidos • Variación moderada en el tamaño y forma del núcleo • Las células binucleadas o multinucleadas no son comunes • Hipercromasia con cromatina uniformemente distribuida. La cromatina puede aparecer degenerada o borrosa si se asocia con cambios por VPH • Los nucléolos son poco frecuentes o poco llamativos • La membrana nuclear puede o no estar bien definida • Las células con un halo perinuclear bien definido y ópticamente vacío y citoplasma periférico denso (los llamados Koilocitos) también deben mostrar las anormalidades nucleares descritas anteriormente para ser clasificados como CIN 1 (LSIL) CIN 1 (LSIL) Note el aumento leve del núcleo y el citoplasma abundante. Los núcleos varían en tamaño y forma ( presente koilocitos)
  • 11. IN 1 (LSIL) Aumento leve del núcleo y citoplasma abundante. Los núcleos varían en tamaño y forma. Note el citoplasma altamente queratinizado sugestivo de infección por VPH a pesar que no se ven Koilocitos en este campo. CIN 1 (LSIL) Note slight nuclear enlargement and abundant cytoplasm. Nuclei vary in size and shape.
  • 12. CIN 1 (LSIL) Slight nuclear enlargement and abundant cytoplasm. Nuclei vary in size and shape. Note koilocytotic atypia CIN 1 (LSIL) Note slight nuclear enlargement and abundant cytoplasm. Nuclei vary in size and shape.
  • 13. NIC 2 : Bethesda System definition of CIN 2 (HSIL) CIN 2 requiere que el núcleo ocupe entre la mitad y dos terceras partes del área de la célula. • Las células aparecen de forma individual o en sábanas o en grupos sincitiales con núcleos apiñados. • Las células generalmente tienen un citoplasma delicado o denso; ocasionalmente el citoplasma se encuentra densamente queratinizado • El aumento nuclear es 3 ó más veces mayor que el núcleo de la célula intermedia normal • El área de citoplasma puede disminuir. Por esta razón, en una célula con un ratio núcleo/citoplasma muy alto el tamaño del núcleo puede ser más pequeño que en el LSIL • Los bordes nucleares son irregulares • La anisonucleosis es marcada • Hay hipercromasia en los núcleos y la cromatina es granular y está uniformemente distribuida (fina o gruesa) • El tamaño general de la célula puede ser más pequeño que en LSIL CIN 2 (HSIL) Los núcleos ocupan más de la mitad del área celular y son hipercromáticos y varían en tamaño y forma
  • 14. CIN 2 (HSIL) Los núcleos ocupan más de la mitad del área celular y son hipercromáticos y varían en tamaño y forma CIN 2 (HSIL) Los núcleos ocupan más de la mitad del área celular y son hipercromáticos y varían en tamaño y forma
  • 15. CIN 2 (HSIL) Los núcleos ocupan más de la mitad del área celular y son hipercromáticos y varían en tamaño y forma CIN 2 (HSIL) Los núcleos ocupan más de la mitad del área celular y son hipercromáticos y varían en tamaño y forma
  • 16. CIN 2 (HSIL) Los núcleos ocupan más de la mitad del área celular y son hipercromáticos y varían en tamaño y forma CIN 2 (HSIL) Los núcleos ocupan más de la mitad del área celular y son hipercromáticos y varían en tamaño y forma
  • 17. CIN 3 requiere que el núcleo ocupe más de dos terceras partes del área de la célula • La definición de CIN 3 (HSIL) del sistema Bethesda • . Las células aparecen de forma individual o agrupadas en láminas o en grupos similares al sincitio. • . Los núcleos anormales generalmente se encuentran en células con citoplasma "inmaduros", delicados o densos; Ocasionalmente el citoplasma se encuentra densamente queratinizado • . El aumento nuclear es 3 ó más veces el área del núcleo de la célula intermedia normal * • . El área del citoplasma se encuentra disminuido. Por esta razón en células con un ratio núcleo/citoplasma muy alto, el tamaño del núcleo puede se más pequeño que en el LSIL • . El tamaño general de la célula es frecuentemente más pequeño que en LSIL • . Los núcleos son hipercromáticos usualmente con cromatina granular gruesa • . Los bordes nucleares son irregulares y la anisonucleosis es una característica prominente • . Cuando las células anormales aparecen en láminas, los núcleos están apiñados y sobrepuestos, y se pueden ver figuras mitóticas. CIN 3 (HSIL) Los núcleos ocupan más de dos terceras partes del área celular. Note la variación en el tamaño y forma de los núcleos y el aumento de la cromatina con distribución irregular.
  • 18. La definición citológica del WHO de CIN 3 requiere que el núcleo ocupe más de dos terceras partes del área de la célula CIN 3 (HSIL) Los núcleos ocupan más de dos terceras partes del área celular. Note la variación en el tamaño y forma de los núcleos y el aumento de la cromatina con distribución irregular CIN 3 (HSIL) Los núcleos ocupan más de dos terceras partes del área celular. Note la variación en el tamaño y forma de los núcleos y el aumento de la cromatina con distribución irregular
  • 19. CIN 3 (HSIL) Los núcleos ocupan más de dos terceras partes del área celular. Note la variación en el tamaño y forma de los núcleos y el aumento de la cromatina con distribución irregular en este grupo denso de células. CIN 3 (HSIL) En este frotis se ven dos núcleos desnudos grandes e hipercromáticos. Varían en tamaño y forma y sugieren la presencia de un foco de CIN 3.
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  • 24. • La tinción de Papanicolaou utiliza tres colorantes: la Hematoxilina que tiñe selectivamente los núcleos, el Orange G y la Eosina Alcohol 50 que tiñe los citoplas- mas. • Que significa coloración de PAP • La tinción de Papanicolaou se aplica a exudados vaginales para la detección de cáncer uterino o vaginal. La técnica utiliza un elevado número de colorantes en su procedimiento. (inmaduras o a parcialmente maduras). • Qué significa Clase 1 de Papanicolaou.: Cuando Papanicolaou describió su método, propuso clasificar el material en 5 clases: 1, 2, 3, 4 y 5: el 1 era el normal absoluto, el 2 mostraba inflamación con células normales, el 3 era dudoso y el 4 y 5 francamente patológicos ¿Qué estructuras tiñe el colorante naranja g6 : El orange G y la solución EA (eosina amarillenta) se utilizan para teñir los citoplasmas. Ambas son soluciones alcohólicas y el alcohol hace más transparentes a los citoplasmas. Orange G: Es el segundo colorae pueden conservar y transportar las muestras hasta 2 semanas a temperatura ambiente. El transporte al laboratorio de análisis NO requiere refrigeración.nte de la batería y es un colorante proteico ácido de color amarillo-anaranjado. Se utiliza por su capacidad de competir con la eosina y en menor medida con el Light Green. Tiñe principalmente proteínas del citoplasma, y en menor medida al núcleo, sobre todo si este es picnótico :: . e pueden conservar y transportar las muestras hasta 2 semanas a temperatura ambiente. El transporte al laboratorio de análisis NO requiere refrigeración.
  • 25. • ¿Cómo fijar la muestra de citología? • Para fijar la muestra se puede hacer introduciéndola di- rectamente en un recipiente con tapa y alcohol de 96% (fig. 8), por 30 minutos como mínimo para su fijación total.