2. 2
Apoenzyme
(amino acid portion)
metals coenzymes prosthetic group
Cofactor
Chemical component
(non-amino acid portion)
ENZYMES
(holoenzyme)
Ejemplos de metales usados
como cofactores
Nomenclatura
Nomenclatura
De acuerdo al número de la Comisión
Enzimática (Enzyme Commission number)
Primer #: tipo de reacción catalizada.
Segundo #: indica la subclase; dice el tipo
de sustrato o el enlace que se rompe en
forma mas precisa.
Tercer #: indica la sub-subclase; nos dice el
tipo de aceptador de electrones
(oxidoreductasas) o el tipo de grupo que se
remueve (liasas), etc.
Cuarto #: indica el número de serie de la
enzima en su sub-subclase.
3. 3
6.2 Como trabajan
las enzimas
ESPECIFICIDAD
ENZIMATICA
La especificidad enzimática puede
variar.
Pasos que ocurren durante la acción
enzimática:
Sustrato se enlaza a la enzima.
Ocurren alteraciones químicas que
incluyen rompimiento y formación de
enlaces.
La enzima libera el producto de la
reacción.
Teorías que explican la
actividad enzimática:
Llave y cerradura: específica; un sustrato y
una enzima.
Adaptación inducida: menos específica, el
centro activo se ajusta al sustrato que
interviene.
4. 4
Mecanismos de acción
Estado de transición: forma activa de una
molécula en la cual la molécula realiza una
reacción química parcial.
Energía libre: componente de la energía
total de un sistema que puede realizar
trabajo a temperatura y presión constante.
G reacción = G productos – G reactivos
Reacción exergónica: ΔG es negativo
G = H - T S
Mecanismos de acción
Energía de activación: cantidad de energía
necesaria para convertir todas las
moléculas de un mol de sustancia
reaccionando de su estado raso a su
estado de transición.
Las enzimas aumentan la velocidad de la
reacción disminuyendo la energía de
activación, pero no afectan los aspectos
termodinámicos de las reacciones.
5. 5
Interacciones son optimizadas
en el estado de transición
Factores que determinan la
catálisis (eficiencia)
Catálisis ácido-base: interacción entre
grupos ácidos y básicos.
Catálisis covalente: interacción entre
la enzima y el sustrato es inestable;
sustrato se convierte en producto con
más rapidez.
6. 6
Catálisis covalente
La amina (nucleofilo) ataca el
grupo carbonilo de acetoacetato
para producir la base Schiff.
BX + Enz E:B + X + Y Enz + BY
Catálisis ión metálico
Anhindrasa carbónica
1. Zn-agua
polarizada: se
ioniza a través de
catálisis básica.
2. Zn-OH ataca
nucleofilicamente
al CO2
produciendo
HCO3
-
3. Se regenera por
enlace a otra
molécula de agua
Catálisis a través del enlace
del estado de transición
La enzima acelera
la velocidad de la
reacción
estabilizando el
estado de
transición.
6.3 Cinética química
Cinética química
Reacciones elementales
A P
A I1 I2 P
Ordenes de reacción
Constante de rapidez
7. 7
La ecuación describe el
progreso de una reacción
como función del tiempo. La
pendiente nos da la constante
de velocidad.
Cinética de enzimas
Ecuación Michaelis-Menten
Paso #1
Ecuación Michaelis-Menten
Paso #2
8. 8
Ecuación Michaelis-Menten
Paso #3
Ecuación Michaelis-Menten
Paso #4
Significado Km y Vmax
KM es igual a la concentración de sustrato
cuando 50% de los centros activos de la
enzima están ocupados. También
representa cuán fuerte la enzima se enlaza
al sustrato.
VMAX está relacionado con el turnover
number: número de moles de sustrato
transformado en producto por mol de
enzima por segundo.
Mayor el “turnover number” mayor la
eficiencia.
Equivale a: Vmax/[Et]
9. 9
Turnover number
Constante catalítica equivale al
“turnover number”
La razón de kcat/Km representa una
medida de la eficiencia catalítica.
Gráfica Lineweaver-Burk
Reacciones de dos sustratos
Reacciones secuenciales: reacciones
de desplazamiento sencillo
Ordenado
Al azar
Reacciones Ping-pong: reacciones de
desplazamiento doble
Mecanismos para reacciones
con más de un sustrato
Al azar: no importa el orden de añadir
un sustrato.
Ordenado: el orden en que se añaden
los sustratos está definido.
Ping-pong: desplazamiento doble, no
hay formación de compuesto ternario.
10. 10
Tipos de inhibición
Inhibidores reversibles
• Competitivo: Compite con el sustrato por
el centro activo. Se parecen al sustrato.
• No competitivo: el inhibidor no compite
con el sustrato. Inhibidor tiene un punto
diferente de enlace. Puede enlazar la E o
el complejo ES.
• De incompetencia: el inhibidor se enlaza
directamente al complejo enzima-sustrato
y no a la enzima libre.
Inhibidor competitivo
Inhibidor competitivo
Aumenta el
Km y el Vmax
permanece
constante.
Inhibidor no-competitivo Inhibidor no-competitivo
11. 11
Disminuye Vmax
y Km permanece
constante
Disminuye Km y
Vmax
Disminuye Vmax y
Km puede
aumentar o
disminuir
Tipos de inhibición
Inhibidores irreversibles
Se combina con o destruye un grupo
funcional necesario para la actividad
enzimática. Se forma un enlace covalente.
• Ejemplo: Inhibidores de acetilcolinesterasa.
Interfiere con la secuencia del impulso nervioso.
• Diisopropylphosphofluoridate, tabun y sarin
(nerve gases)
• Parathion and malathion
12. 12
Actividad enzimática depende
del pH
6.5 Enzimas reguladoras
Modificación alostérica
Enlace de un efector positivo o negativo.
Enzimas alostéricas
Sufren cambios conformacionales en
respuesta a enlace de efectores o
moduladores.
Ejemplos:
• inhibidores
• activadores
Regulación actividad
enzimática
Mecanismos de retroalimentación
Una enzima actúa sobre un paso
determinado.
Modificación covalente
Formación o rompimiento de un
enlace covalente.