nemátodos

1. Universidad de Buenos Aires
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental
Fitopatología
Nematodos fitopatógenos
(decimoquinta edición)
MATERIAL DE DOCENCIA
SÓLO USO INTERNO
por Daniel E. Nahabedian D.C.B.,
denaha@bg.fcen.uba.ar 2012 =

2. Nematodos fitopatógenos 01
Introducción
Hasta aproximadamente mediados del siglo pasado (siglo XX), el estudio de
los nematodos no constituyen una materia coherente, debido a que su
estudio estaba condicionado al hábitat. Así encontramos estudios sobre
especies edáficas, marinas, zooparásitas, fitoparásitas, por separado.
Estos animales eran
estudiados en forma
separada por cada grupo
de investigadores.
Alrededor
de 1950
Varios autores reúnen los
conocimientos básicos y se
comienza el estudio racional
de estos animales.
Tres acontecimientos acrecentaron la necesidad de estudio sobre nematodos.
1) Especialización regional de cultivo de plantas (monocultivos)
=> esto hizo más evidente el ataque de nematodos.
2) Selección y mejoramiento de variedades de plantas más productivas
=> pero menos resistentes a nematodos.
3) La circulación de plantas y productos vegetales sin control
=> dispersión de distintas especies de nematodos.
Consecuencias:
Las especies de nematodos se volvieron cosmopolitas y muy bien adaptadas a
cultivos específicos. =
Homogeneidad
morfológica
En la segunda mitad del siglo XX se descubren la mayoría de las especies fitoparásitas.

3. Morfología básica: 02
Repaso: Animales bilaterales, triploblásticos,
protostomiados, pseudocelomados.
Son gusanos filiformes, no segmentados, de sección
cilíndrica, que miden entre 0,3 y 4 milímetros de
largo por 0,01 por 0,5 milímetros de ancho.
Boca
Cavidad
bucal
Faringe
muscular
Glándulas
faríngeas
Intestino
Recto
Ano
Glándulas
excretoras
Sistema
reproductor
Intestino
Sistema excretor
glandular con canales de
drenaje laterales.
Anillo nervioso
circumentérico
Vulva
Cloaca
=
Hembra
Macho
Phylum: Nematoda (Gusanos cilíndricos)

4. Morfología básica: 03
Anatomía
Cutícula gruesa con papilas sensitivas y
órganos quimiorreceptores.
Sistema nervioso: anillo nervioso
circumentérico y cordones nerviosos
dorsal y ventral, por dentro de pliegues
longitudinales epidérmicos.
Corte transversal de Ascaris sp.
Sistema excretor
glandular con
canales de
drenaje laterales,
por dentro de
pliegues
longitudinales
epidérmicos.
Peculiaridad anatómica:
las células musculares
(sólo longitudinales),
poseen proyecciones
citoplasmáticas hacia los
cordones nerviosos
longitudinales, ventral y
dorsal.
H – E
60X
Intestino
Pseudoceloma
Epidermis
Con cuatro cordones o pliegues epidérmicos
=
P

5. 04
=
Músculo retractor
Sistema
reproductor
macho
Intestino
Recto
Testículo (1)
Espermiducto
muscular
Espermiducto glandular
Espermatogonias
Vesícula seminal
Cloaca
Espículas
(2)
Gobernáculo
Estructuras
sensoriales
Sistema reproductor
hembra
Ovarios (2) Oogonias
Intestino Huevos (cigota
encapsulada)
Puede haber uno o
generalmente dos
ovarios.
Receptáculo seminal
Útero
Gonoporo femenino (vulva)
Oviducto
Hembra con tres orificios:
boca, vulva y ano
Macho con dos
orificios: boca
y cloaca
Sistema reproductor:

6. Adaptaciones I 05
¿Qué hace a un nematodo fitoparásito?
Nematodos
parásitos de
vertebrados
Nematodos marinos
B)
Adaptaciones
en el ciclo de
vida
Las adaptaciones se
pueden enmarcar en
dos características:
A)
Modificación
del sistema
de obtención
del alimento.
=
El grupo es de abolengo marino
Nematodos
parásitos de
plantas
Nematodos de
vida libre
(tierra – agua)
Nematodos que pueden aparecer
en la tierra (fitoparásitos + los de
vida libre + los zooparásitos)
Porcentajes
de especies
Nematodos
parásitos de
invertebrados
8360
4070
6610
4110
3500
Pueden llegar
hasta un 40%
Adaptación

7. Clase Adenophorea,
Orden DORYLAIMIDA
Clase Secernentea
Orden TYLENCHIDA
A1) Estilete bucal (dos sistemas).
Adaptaciones II 06
A) Modificación del sistema de obtención del alimento.
A1b) Aguja
A1a) Tubo hueco
Musculatura
protractora
¿Cómo comen?
Los estiletes sólo se encuentran
en los nematodos fitoparásitos.
Sólo tubo hueco Sólo tipo aguja
Musculatura
protractora
Trichodorus
Dorylaimus
=
P

8. A2a) Musculatura Faríngea.
Adaptaciones III 07
A) Modificación del sistema de obtención del alimento.
Procorpus
Metacorpus
(bulbo
medio)
Istmo
Postcorpus
Glándulas faríngeas
(una dorsal y dos
ventrolaterales).
Anillo nervioso
circumesofágico
Intestino
Estilete
Faringe
Doble
bomba
Ditylenchus, ataca a la cebolla,
y produce una licuefacción de
los tejidos.
A2b) Glándulas faríngeas.
No sólo los fitoparásitos
presentan glándulas faríngeas.
Estilete
Bulbo
faríngeo
medio
A2) Faringe (esófago).
Secreción “salivar”: posee auxinas,
enzimas digestivas (celulasa, quitinasa,
invertasa) y enzima proteolíticas
(protopectinasa).
Existe una muy estrecha vinculación
entre la composición “salivar” y la
relación planta - huésped.
La faringe como las
glándulas faríngeas
no son considerados
como elementos
diferenciadores
para la taxonomía. =
P

9. B1) Modificación del ciclo de vida:
Adaptaciones IV 08
B) Adaptaciones en el ciclo de vida
¿Cómo viven?
Ciclo de vida normal general:
1° juvenil
2° juvenil
3° juvenil
4° juvenil
Adulto
Huevo
1° Muda 2° Muda
3° Muda
4° Muda
Reproducción
sexual
Eclosión
El ciclo evolutivo de especies de vida libre esta entre: uno corto de
aproximadamente 1 mes de duración, hasta largo de 3 o 4 meses de duración.
En las especies parásitas de plantas se encuentran ciclos de vida cercanos
al año de duración, coincidentes con el ciclo anual de los hospedadores.
La fecundidad de los nematodos fitoparásitos es generalmente
superior a la fecundidad de las formas de vida libres, pero inferior
a la fecundidad de las especies zooparásitas.
Huevo
embrionado
=
Objetivo: Conservación y sobrevida
B1a) Alargamiento:
B1b) Aumento de
la producción de
huevos.

10. La conservación de la especie durante la ausencia de la planta - vector esta
favorecida por adaptaciones particulares.
B2) Enquistamiento larvario:
Adaptaciones V 09
¿Cómo se defienden?
En 1743 Turberville Needham (1713 - 1781), descubre en granos de trigo,
unos gusanos que llamó “anguilas”. Primera cita de nematodos fitoparásitos.
Explicación: Los juveniles
quedan envueltos en la muda
del estado anterior.
En 1771, Baker, trabajando sobre los mismo granos de trigo, del herbario de
Needham, encuentra los mismos animales descriptos y los llama Anguina
tritici. 27 años después.
Se ha contado hasta 39 años en
Tylenchus polyhyonus. Sólo los
juveniles son los que sobreviven.
Muda anterior
Juvenil
enquistado
=
Anhidrobiosis
o Anabiosis.

11. Retención de huevos por la hembra.
B3: Enquistamiento de la hembra.
Adaptaciones VII 10
¿Quién más se enquista?
Meloidogyne
Heterodera
Hembra
madura
Pasa de una forma filiforme
a una forma globosa
Hembra grávida
Hembra
grávida
Se produce por una oxidación
de los polifenoles de la cutícula.
6 años, con una
apreciable sobrevida
Protección
de huevos
=
Quiste

12. B4: La protección de los huevos.
Glándula rectal
Adaptaciones VIII 11
¿De qué otra forma
protegen a los huevos?
Los huevos pueden ser puestos, por la hembra, en un saco de protección,
llamado matriz, saco o masa gelatinosa.
Está formada por la secreción de un mucoide, que lo
secreta las glándulas rectales.
Se presenta en Heterodera spp., Meloidogyne spp. y en
los tilénquidos nacóbidos.
Matriz, saco o
masa gelatinosa
Saco de
protección
Aísla al
embrión del
medio en
forma eficaz,
lo protege
de la
desecación y
hasta del
sulfuro de
carbono.
=

13. Resumen: Adaptaciones 12
B) Adaptaciones en el ciclo de vida.
A) Modificación del sistema de obtención del alimento.
A1) Estilete bucal (dos sistemas).
A1a) Tubo hueco.
A1b) Aguja.
A2b) Glándulas faríngeas (esofágicas).
Conservación y
sobrevida.
B1a) Alargamiento.
B2a) Enquistamiento larvario.
B2b) Enquistamiento de la hembra.
B2c) La protección de los huevos.
A2a) Musculatura faríngea (esofágica).
A2) Faringe (esófago).
=
B1) Modificación del ciclo de vida
B2) Protección.
B1b) Aumento de la producción de huevos.
Perforación de la
pared celular
Absorción de
fluidos

14. Nutrición: 13
1) Saprófagos:
3) Fitoparásitos:
2) Depredadores:
Tres formas alimentación:
Especies que necesitan alimento líquido, contenido celular o
Nematodos que ingieren partículas de materia orgánica.
Especies que se alimentan de bacteria, hongos y algas
Desde el punto de vista del tipo de materia orgánica consumida, se pueden
dividir en: Materia orgánica no estructurada.
Materia orgánica estructurada.
Saprófagos
Depredadores
Fitoparásitos
=
Aspectos Ecológicos:
pequeñas (la mayoría de los nematodos del suelo) (Devoradores de
microbios) y las que se alimentan de organismos relativamente grande como
protozoos, nematodos, rotíferos, etc. (Depredadores, propiamente dichos).
jugos vegetales obtenidos por perforación de las raíces o de las paredes
celulares.
(viva o muerta)
Humedad: Capacidad
de campo
Punto de marchitamiento
permanente Seco total
Vida normal
Anhidrobiosis
Inundado
Enquistado
Hay una relación ajustada entre la cantidad de nematodos y la proporción de humedad.
La cantidad de agua que rodea las partículas del suelo, debe estar presente en
cantidades que permita el desplazamiento de los animales.

15. Importancia Ecológica:
- Producción primaria
- Descomposición primaria
- Nivel de depredación
14
Los fitoparásitos puede alcanzar 50% del total de nematodos del suelo.
Se encuentran en los primeros 15 centímetros de profundidad del suelo.
Decayendo el número cerca de la superficie y con la profundidad.
Generalmente, los que se alimentan de bacterias se presentan en gran
número en los campos con estratos arbóreos, en los montones en
descomposición (compost) y los que se alimentan de plantas se presentan
generalmente en los prados y otros hábitat con vegetación densa.
Dependiendo de las condiciones ambientales, se puede encontrar entre 4 y 16
gramos de nematodo, por metro cuadrado de suelo; las cifras calculadas de
nematodos, puede trepar hasta los 12 millones de individuos. Los nematodos
no pueden cambiar las propiedades físicas de los suelos como hacen las
lombrices.
Bajan efectos de otras especies de metazoos.
Destruyen una parte de materia orgánica
formada.
Consumen organismos muertos
(aceleran procesos de degradación).
Consumen bacterias y hongos degradadores
(detienen los procesos de degradación).
=
Distribución:
Acción:
Es debida a la estructura y composición química
del suelo, temperatura, humedad y pH.

16. Ciclos de Vida I 15
(hacia una clasificación general)
Lugar
Sistema radicular
Partes aéreas
Elementos a tener en cuenta:
=
Condición
Ectoparásitos
Semiendoparásito
Endoparásito
Endoparásito
Secundariamente Semiendoparásito
Actitud en la dispersión
Juveniles Sedentarios
Juveniles Migradores
Hembras
Forma filiformes
Forma globosas
Puesta
Fuera del hospedador
Dentro del hospedador
Hembra enquistada

17. Ciclos de Vida II
Ectoparásito Endoparásito
Semiendoparásito
Puesta externa
Semiendoparásito
Endoparásito
Puesta externa
Endoparásito
Puesta interna
Puesta
externa
16
Formas
Ejemplos:
Hembra
“enquistada”
=
Estilos
parasitarios
Lugar de la
puesta
Endoparásito, secundariamente semiendoparásito

18. Ciclos de Vida III 17
A clasificar
1: Ectoparásitos
1.1.: Sistema radicular
1.1.1.: Migradores
Doriláimidos
(todos):
(Xiphinema,
Longidorus y
Trichodorus)
legumbres de
huerta.
Tilénquidos:
(Dolichodorus y
Belonolaimus)
pinos, árboles
frutales y cultivos
diversos.
Estiletes muy largos
Son polífagos, no específicos
Ciclos de vida cortos (meses)
No quedan
estacionarios
Daños
generalizados
Atacan los
distintos
estados del
ciclo de vida
Nivel de
Orden
=
Adultos
Juveniles
Este Orden es
indicador de suelos
no modificados

19. Tilénquidos:
Familia CRICONEMATIDAE
(Criconema,
Criconemoides,
Hemicycliophora,
Cacopaurus)
hortalizas, florales y
leñosas.
y PARATYLENCHIDAE
(Paratylenchus pulula)
plantas de ananá
Rodean a las radículas y
quedan estacionarios
Ciclos de Vida IV 18
Más quietos
1: Ectoparásitos
1.1.: Sistema radicular
1.1.2.: Sedentarios
Tendencia a perder el estilete, en
machos y juveniles
No son polífagos, son algo específicos
Ciclos de vida largos (meses)
Nivel de
Familia
=
Esta Familia es
indicadora de
suelos modificados
antrópicamente

20. Anguina tritici
(trigo)
Anguina agrostis,
A. pustulicola y
A. graminophila
El adulto se puede
desplazar por la
planta (cereal)
Migradores juveniles obligados en
el segundo estadio larval.
Ciclos de Vida V 19
Hacia arriba
1: Ectoparásitos
1.2.: Partes aéreas
1.2.1.: Migradores
Eventualmente
(madurez sexual)
penetran y hacen
“agalla” aéreas.
Distribución pasiva de las larvas por
rotulación del hombre.
Suben por
plántulas y
permanecen como
ectoparásitos.
Un sólo Género
Ciclo sincronizado con
el ciclo de vida de la
planta
Muy
específico
“agalla”
=

21. El adulto no se
desplaza por la planta
Ditylenchus spp.
(alfalfa, arroz y plantas
con bulbos).
Aphelenchoides spp.
(crisantemo, narciso,
fresias, orquídeas y
arroz). Tylenchus spp.
(cítricos, muguete).
Rhadinaphelenchus
cocophilus (cocoteros).
Bursaphelenchus
xylophilus (nematodo
de la madera de pino).
No
desarrollan
agallas.
Migradores juveniles no obligados.
Ciclos de Vida VI 20
específicos y no tan específicos
1: Ectoparásitos
1.2.: Partes aéreas
1.2.2.: Sedentarios
Son polífagos, no
específicos.
Muchas generaciones
en un año.
Se ubican en
región subcortical
Producen
pudriciones,
cortan la
circulación
Varios
Género =
El juvenil es
temporalmente
ectoparásito,
penetra en la planta

22. Subfamilia HOPLOLAIMINAE:
Hoplolaimus (cereal, caña de
azúcar, alfalfa);
Rotylenchus (plantas
tropicales);
Scutellonema y
Helicotylenchus (plantas
bajas).
Tylenchorhynchus
(tabaco, cereal, algodón).
Ciclos de Vida VII 21
Empezamos otra vez
2: Semiendoparásitos
2.1.: Migradores
Estos animales penetran parcialmente en los
tejidos del hospedador para nutrirse. Se
localizan especialmente en la zona epidérmica
(cortical) del sistema radicular.
Hay una tendencia al
endoparasitismo.
Las hembras son filiformes y sólo penetran la corteza de las
raíces cuando están maduras. Cambian de lugar.
Son polífagos en general.
Cuando son juveniles migran y viven
prácticamente como ectoparásitos.
Cuando las condiciones son adecuadas se multiplican por
miles rápidamente.
=

23. TYLENCHULIDAE:
Tylenchulus semi-penetrans
(cítricos); Rotylenchulus
reniformis (leguminosas);
También Heterodera spp. y
Meloidogyne spp.
Ciclos de Vida VIII 22
¿Más polífagas?
2: Semiendoparásitos
2.2.: Sedentarios
Cosmopolitas.
La parte
posterior se
hipertrofia
Con puesta de
huevos en el
exterior de la
corteza
Son polífagas
dentro de un
grupo de plantas
similares
Luego de la cópula, la hembra
penetra en el tejido vegetal
para alimentarse por poco
tiempo, pierde la forma
filiforme y sale para colocar la
puesta.
Masa
gelatinosa
=
F!

24. Nacobbus (maní)
Con modificaciones del cuerpo.
La hembra saca sólo el extremo
posterior del cuerpo en el momento
de poner los huevos.
Ciclos de Vida IX 23
¿No son semiendoparásitos?
3: Endoparásitos
3.1.: Puestas externas
Masa gelatinosa =

25. Tilénquidos:
Pratylenchus,
Pratylenchoides y
Radopholus similis
(banana).
sin modificación
del cuerpo.
Ciclos de Vida X 24
¿Otra vez filiformes?
3: Endoparásitos
3.2.: Puestas internas
Específicos
=
Hembras filiformes

26. Meloidogyne sp.
La hembra pasa mucho tiempo como endoparásito.
Las hembras pueden ser notadas en las agallas o
nódulos de la raíz antes de poner.
Ciclos de Vida XI 25
¿Cómo, salen otra vez?
4: Endoparásitos, secundariamente semiendoparásitos
4.1.: Puestas externas
Masa gelatinosa
=
(sobre hortalizas, vid, cereales)

27. Heterodera glycines
(soja)
Heterodera spp.
(papa)
Ciclos de Vida XII 26
Al fin
4: Endoparásitos, secundariamente semiendoparásitos
4.2.: Enquistamiento
Los tejidos vegetales pueden desarrollar agallas
La larva infectiva es el
segundo estadio larvario
Las hembras son
fecundadas y aumentan
de tamaño, quedando
como pequeños quistes,
en la zona cortical o
subcortical.
=

28. Resumen: Ciclos de Vida 27
1: Ectoparásitos
1.1.: Sistema radicular
1.1.1.: Migradores
1.1.2.: Sedentarios
1.2.: Partes aéreas
1.2.1.: Migradores
1.2.2.: Sedentarios
2: Semiendoparásitos
2.1.: Migradores
2.2.: Sedentarios
3: Endoparásitos
3.1.: Puestas externas
3.2.: Puestas internas
4: Endoparásitos,
secundariamente semiendoparásitos
4.1.: Puestas externas
4.2.: Enquistamiento =
.
.
.

29. Síntomas I (daño).
1) Alteraciones en las partes aéreas:
CLOROSIS
28
¿Qué hacen?
DIRECTO INDIRECTO
Aphelenchoides spp.
Anguina spp.
Asociado con
animales que
atacan desde el
suelo.
Necrosis locales por falta de
irrigación, formación de
agallas y ataque directa a
meristemas.
=
Hoja atacada en
las nervaduras
Hoja
normal

30. d) Malformaciones:
Síntomas II (daño). 29
¿Y en la raíces?
2) Alteraciones del sistema radicular (directo):
No confundir
Raíces erizadas
(stubby root)
Raíces rugosas
(coarse root)
Raíces curvadas
(curly tip)
a) Raíces con nódulos (Meloidogyne, Nacobbus)
b) Pudriciones o Necrosis superficial (Xiphinema, Tylenchus,
Helicotylenchus)
c) Pudriciones o Lesiones internas (Platylenchus, Rodophorus)
Nódulos de Rhizobium
Soja
Agallas de nematodos
=

31. Tejido atacado
Raíz atacada
Raíz normal
Delaminación
Tejido hipertrofiado
b
a
Síntomas III (daño). 30
¿Y en los tejidos?
3) Reacciones histológicas de los vegetales:
a) Reacciones de defensa y aislamiento.
b) Hipertrofia del tejido parenquimal.
=

32. c
Masa de nematodos
Necrosis
Meristema
modificado
Síntomas IV (daño). 31
Más
3) Reacciones histológicas de los vegetales:
=
c) Necrosis.
d) Formación de agallas en
tejido diferenciado.
d

33. Hoja
modificada
Hoja
normal
Nervadura
modificada
Nervadura
normal
Hipertrofia
Síntomas V (daño). 32
Y más
3) Reacciones
histológicas en
los vegetales:
=

34. Resumen: Síntomas 33
1) Alteraciones en las partes aéreas:
DIRECTO
INDIRECTO
2) Alteraciones del sistema radicular:
d) Malformaciones:
a) Raíces con nódulos
b) Pudriciones o Necrosis
superficial
c) Pudriciones o Lesiones
internas
d) Formación de agallas en tejido diferenciado.
3) Reacciones histológicas de los vegetales:
a) Reacciones de defensa y aislamiento.
b) Hipertrofia del tejido parenquimal.
=
c) Necrosis.
Raíces erizadas
Raíces rugosas
Raíces curvadas

35. Síntomas en cultivos: 33
2) Raleo:
=
2) Manchas de secado:
1) Debilitamiento:

36. Ejemplo:
Se ha demostrado la inoculación
del Virus del tabaco es debido a
Trichodorus spp. y a Xiphinema
spp. El Virus del anillo negro del
tomate, que también ataca a la
lechuga y a la remolacha es
transmitida por Longidorus spp.
Modificaciones en la fisiología del hospedador
CLOROSIS
1) Disminución de la posibilidad de absorber ciertos minerales.
Interacciones con otros agentes patógenos.
34
¿Cómo actúan?
El ataque directo al sistema radicular trae aparejado
problemas en el transporte de sustancias.
Falta de agua
Falta de nutrientes
Daño mecánico
Camino para la infección
De virus, bacterias,
hongos y otros nematodo.
SINERGISMO
Tamaños
=
2) Disminución de la vitalidad de reproducción.
1. Virus
2. Bacterias
3. Micoplasmas
4. Protistas
5. Hifa de hongos
6. Nematodos
1
2
3
4
5
6
Pared
celular
Núcleo
Pérdidas: entre el
10% (países
desarrollados) y 15%
(no desarrollados)
(complejos patogénicos)

37. Acción del hospedador sobre los nematodos. 35
=
Primero hay que definir tres palabras utilizadas indistintamente:
Resistencia: es la acción de la planta sobre la reproducción del nematodo. Una planta
resistente no permite la reproducción del nematodo.
Tolerancia: se limita a los perjuicios medidos como los síntomas y daños producidos.
Una planta tolerante no muestra señales, ni síntomas, ni daños, de la infección por
nematodos.
Incompatibilidad: son los mecanismo fisiológicos que impiden el normal desarrollo de
los nematodos. Una planta incompatible no admite el desarrollo de los nematodos en
su medio interno.
¿Cómo
resisten?
1) Plantas absolutamente resistentes.
2) Plantas parcialmente resistente.
a) las larvas no se desarrollan.
b) las larvas se desarrollan pero se arrestan en un estadio.
c) las hembras son poco numerosas y poco prolíficas.
3) Plantas sensibles, las hembras son prolíficas.
Resistencia:
Tolerancia:
Incompatibilidad:
El hospedador puede incidir sobre el desarrollo de los parásitos, mediante su fisiología,
regulación metabólica, la producción de sustancias tóxicas o por vía inmunitaria.
La tolerancia se debe en forma directa
al daño producido, dependiendo en
forma directa de la relación planta -
nematodo.

38. Métodos de control: 36
¿Cómo se “lucha”?
Control biológico: otros nematodos, protistas (microsporidios) y hongos (hipomicetes).
Control gubernamental: regulación de la introducción y la diseminación de granos y
plantas por medio de leyes internacionales.
Control químico: Se aplican en cultivos de alto valor. A. fumigantes del suelo (gas):
[1,3 dicloropropeno (Telone II), cloropicrina (gas lacrimógeno), y dazomet (Basamid)
bromuro de metilo]. B. no fumigantes (líquido o sólido): fenamifos (Nemacur) y
aldicarb (Temik); son insecticidas (venenos nerviosos), no son tan efectivos.
Control Físico (tratamiento por calor): inyección de vapor a altas temperaturas.
Métodos culturales: cuarentenas; barbecho; desecación; rotación de cultivo; utilización
de razas resistentes; aislamiento del borde; inundación; eliminación de otras plantas;
recuperación del suelo, etc.
Problemática actual:
Siembra directa.
Sebos vegetales.
A. Límites de tolerancia: nemátodos por 100 g de suelo.
B. Umbral económico (UE): cantidad de nematodos donde se debe iniciar el control.
C. Nivel de Daño Económico (NDE): cantidad de nematodos, cuando el rinde es igual a
los gastos. Realizar el tratamiento es aumentar los gastos. =
.
.
.
Solarización, secado.
Biofumigación, aumento de la
materia orgánica.
Plantas nematicidas.
Portainjertos resistentes, para
nematodos que atacan raíces.
UE
NDE
n°
t

39. Muestreo I 37
¿Cómo se muestrea?
Muestreo en campo:
Sacabocado
Se debe hacer una cuadrícula de muestreo, teniendo
presente que los lugares deben estar distribuidos en
forma pareja sobre el total del terreno y estar
dispuestos al azar. Se pueden agregar muestreos
pilotos, indicativos o siguiendo un interés particular.
La muestra se debe mantener “viva”, no fijarla y protegerla del exceso
de calor o frío. Se puede mantener a 4 °C (heladera).
Se puede considerar muestra a
restos vegetales, o raíces de plantas
supuestamente atacadas.
Levantar los datos necesarios
(fecha, lugar, especie,
ubicación, etc.).
Estas se tomarán en forma delicada,
tratando que los terrones de tierra
queden adheridos a ellas.
Lo ideal es acondicionar la muestra en bolsitas
de plástico, herméticas; tratando de dejarles
una “trampa de aire”, para que no se consuma
el oxígeno y pueda protegerse de accidentes
mecánicos =
¿Qué busco?
Se trata de encontrar los daño característicos, agallas o
nódulos típicos, los nematodos mismos o los quistes
(hembras enquistadas).

40. Muestreo II 38
Orden !!!!!!!!!
Muestreo en campos cultivados:
Patrón para el
muestreo doble en
cultivos frutales y
forestales.
Detalle
Una muestra
cercana al tronco y
otra en el borde de
la cobertura de
hojas.
Guarda recta y en zig-zag.
=
P

41. Embudo de
Baermann
Separación 39
Luego del muestreo
Embudo de
vidrio o
plástico
Manguera
de goma
Muñeca
Estativo
Líquido
Pinza
Caja de
Petri
De 24 o 48 horas
Lámpara
(Con tierra o
raíces)
También, en el
embudo se
puede colocar
un vaso de
precipitado
invertido,
cubierto con
una red y
ajustado con
una banda de
goma.
=

42. Observación
in vivo
Lavado y
filtrado
fijado
Aparato de
Baermann
Separación de nematodos vivos del suelo y
confección de preparados temporales.
t
Aclarado en
lactofenol puro
Montado
y sellado
Observación
in toto
40
Procedimiento general
Ver el apartado
de Concentración
=
Determinación

43. 2) Filtrado grueso
1) Preparación de la muestra
Concentración I 41
Filtrado diferencial
3) Filtrado fino
Muestra de
tierra o raíces.
Morterear
levemente
con agua
Descartar
Filtro de 4
milímetros de
diámetro
Descartar
Filtro de 150
micrómetros
de diámetro
4) Lavado del filtro
Se acondiciona
en un vaso de
precipitado
=
Conservación a
4°C

44. 1) 1° centrifugación
Concentración II 42
Centrifugado diferencial
Centrifugar a
3000 R.P.M. 4
minutos.
Descartar el
sobrenadante
Resuspender el
precipitado
con una
solución de
45,5 % de
azúcar
2) 2° centrifugación
Centrifugar a
3000 R.P.M. 2
minutos.
Nematodos
limpios
Filtro de 150
micrómetros
de diámetro
Descartar el
precipitado
Luego del 1° y 2° paso del filtrado diferencial, de la pantalla
anterior: muestra sin tierra gruesa.
Conservación a
4°C
=
Filtrado
y lavado
del filtro

45. 43
Para planta
supuestamente enferma
Mantenimiento y verificación de
la presencia de fitoparásitos.
dilacerado filtrado
lavado
4 °C
t
t
dilacerado filtrado
lavado
Conservación a 4°C
Inóculo
Determinación
Planta
de soja
t = no mayor a
una semana
Filtro de 150 micrómetros
de diámetro =

46. Estudio de la penetración y ubicación de
los fitoparásitos en la planta huésped.
Observación in vivo
t
Inóculo
1 hora
Semilla de
tomate
Lámina de
plástico gruesa
Lámina de
plástico fina
44
Para tomate u
otra planta
Caja de Petri
=

47. Anestesiado.
Dos gotas de éter etílico en 50 mililitros de agua declorada, en frasco cerrado.
Desanestesiar en agua declorada.
Fijación.
- FAA: 2 mililitros de alcohol etílico; 6 de formol solución comercial;
1 de ácido acético glacial; 40 de agua destilada.
- Ácido acético glacial al 0,5%, entre 60 y 80 °C. Pasar a solución de formaldehído al
5%, salado (36 por mil) y neutralizado pH 7.
Procedimientos 45
Los nematodos admiten ser lavados dentro del tamaño del tamiz correspondiente, por
soluciones de hipoclorito de sodio al 2,5 % en solución acuosa (agua lavandina diluida
11 veces), durante 5 minutos.
Lavado.
Observación.
En cajas de Petri, para microscopio estereoscópico.
“En masa", con verde luz, azul de Nilo o azul de anilina.
Para preparados semidefinitivos: azul de algodón - lactofenol.
Coloración.
Soluciones
=
Verificación de quistes (hembras grávidas).
Método del vaso: se disgrega el suelo en agua y se mezcla bien. Se deja reposar y se
coloca y se saca verticalmente y de forma rápida, un papel de diario junto a la pared
del vaso. Los quistes quedan adheridos a él.
Método de la botella: mediante un embudo se llena una botella con la muestra, se llena
de agua hasta un 75% y se agita durante 5 minutos. Se deja reposar. Se agrega agua
hasta el borde. Los quistes flotan en la superficie.

48. Clave I 46
Determinación (nivel alto)
Estilete
Ausente Presente
Bulbo faríngeo medio
Ausente
Presente
Nematodos no parásitos
Nematodos parásitos de plantas
SECERNENTEA
TYLENCHIDA
ADENOPHOREA
DORYLAIMIDA
=

49. Clave II 47
Determinación (nivel bajo)
Tamaño
Pequeño (menos a 1 mm)
Estilete corto y curvo
Grande (mayor a 1 mm)
Estilete largo y recto
Engrosamiento basal del estilete
Presente Ausente
Trichodorus
Xiphinema Longidorus
ADENOPHOREA
DORYLAIMIDA
doriláimidos
=

50. Clave III 48
Determinación (nivel bajo)
tilénquidos
SECERNENTEA
TYLENCHIDA
Forma del cuerpo
Globoso Filiforme
Meloidogyne
Heterodera
Globodera
“Anillación”
Presente Ausente
Forma de la cola
Redondeada Aguzada
Raíz del estilete
Presente Ausente
Cricconemella
Hoplolaimus
Belonolaimus
Scutellonema
Aphelenchus
Tamaño
Grande
(> a 1 mm)
Pequeño
(< a 1 mm)
Hemicycliophora
Ditylenchus
Paratylenchus
Pratylenchus
Radopholus =
.
.
.

51. Postulados de Koch:
1. El agente patológico debe estar presente en
cada caso de la enfermedad en las condiciones
apropiadas y ausente en los organismos sanos.
2. El agente no debe aparecer en otra
enfermedad de manera fortuita o saprófita.
3. El agente debe ser aislado del cuerpo en un
cultivo puro a partir de las lesiones de la
enfermedad.
4. El agente debe provocar la enfermedad en un
organismo susceptible al ser inoculado.
5. El agente debe ser aislado de nuevo de las
lesiones producidas en los organismos de
experimentación.
Louis Pasteur
(1822-1895)
Robert Koch
(1843-1910)
La Argentina tiene un déficit
acentuado de estudios sobre
nematodos.
Fitopatología
Nematodos
fitopatógenos
(decimoquinta edición)
Gracias
=
por Daniel E. Nahabedian D.C.B.
MATERIAL DE DOCENCIA
SÓLO USO INTERNO
En sí, en la Argentina se desconoce sobre la microfauna del
suelo, su composición y su acción; cuál es la incidencia mutua
entre los organismos del suelo y los cultivos; etc.