Una macromolécula es una molécula de gran tamaño creada comúnmente a través de la polimerización de subunidades más pequeñas. Por lo general, se componen de miles, o más, de átomos. Pueden ser tanto orgánicas como inorgánicas y las más comunes en bioquímica son biopolímeros y grandes moléculas no poliméricas.
Sucesión de hongos en estiércol de vaca experimento
MACROMOLECULAS.pptx22.pptx
1. PRESENTADO POR: JENNIFER PAOLA HERRERA ESCORCIA
PRESENTANDO AL DOCENTE JAIME LUNA CARRASCAL ASIGNATURA DE
BIOQUIMICA
SEGUNDO SEMESTRE
ENFERMERIA
UNIVERSIDAD SIMON BOLIVAR
BARRANQUILLA-ATLANTICO
2. CARBOHIDRATOS FUNCIONES ESTRUCTURA IMPORTANCIA BIOMEDICA
Los carbohidratos son también
conocidos como glúcidos o
hidratos de carbono; son
biomoléculas que contienen
carbono, hidrógeno y oxígeno y
que están formados por
moléculas de azúcar que al
descomponerse crean glucosa, la
cual es una sustancia que funge
como combustible del cuerpo al
proporcionar energía y potencia
en todas sus funciones.
Fuente principal de energía al
organismo.
Estructural en paredes
celulares de vegetales y
bacterias.
Reconocimiento y adhesión
entre células.
Identificación celular.
Componentes de numerosas
rutas metabólicas.
Como todas las biomoléculas, los
carbohidratos tienen tres
elementos básicos: el carbono (C),
el hidrógeno (H) y el oxígeno (O).
Son dos los grupos químicos que
caracterizan a los carbohidratos:
el grupo carbonilo (-C=O) y el
grupo hidroxilo (-OH).
Son muy importantes porque
nuestro organismo los metaboliza
para producir glucosa, molécula
por la que obtiene energía. Son
importantes, además, porque
participan en el funcionamiento
de las células, tejidos y órganos,
Son fundamentales para la
actividad muscular, la cerebral o la
digestión.
También son ricos en fibra, por lo
que nos ayudan en la digestión,
evitan el estreñimiento y
previenen la excesiva acumulación
de grasa en el cuerpo.
3. MÉTODOS ANALÍTICOS PARA LA
DETERMINACIÓN DE
CARBOHIDRATOS, BASADOS EN LA
ESPECTROFOTOMETRÍA, la
cromatografía líquida de alta
resolución (HPLC), la refractometría.
La reacción de Molisch es una
reacción que tiñe cualquier
carbohidrato presente en una
disolución; Mide la presencia de
glúcidos en una muestra α-naftol al
5% en etanol de 96º.
DETERMINACIÓN DE
AZUCARES POR EL
MÉTODO ÓPTICO DE
POLARIMETRÍA: La
rotación óptica. Es la
suma algebraica de los
efectos predominantes
del contenido de
sacarosa de la muestra,
modificada por la
presencia de otros
componentes
ópticamente activos y
por el método de
clarificación.
DETERMINACIÓN DE
AZUCARES (GLUCOSA,
SACAROSA Y FRUCTUOSA) POR
HPLC: se utiliza
frecuentemente en bioquímica
y química analítica para
separar los componentes de
una mezcla basándose en
diferentes tipos de
interacciones químicas entre
las sustancias a analizar.
PRUEBA DE BENEDICT:
identifica azúcares reductores,
como la lactosa, la glucosa, la
maltosa y la celobiosa. En
disoluciones alcalinas pueden
reducir el Cu²⁺, que tiene color
azul, a Cu⁺, que en el medio
alcalino precipita como Cu₂O
de color rojo-naranja.
PRUEBA DE LUGOL: La prueba
del yodo, es la reacción entre
el yodo (presente en el
reactivo lugol) y el almidón,
que nos permite detectar la
presencia de almidón en
algunos alimentos.
PRUEBA DE BIAL: se usa para
detectar la presencia de
pentosas. El reactivo de Bial
está compuesto por orcinol,
acido clorhídrico y cloruro
férrico.
PRUEBA DE SELIWANOFF: es
una prueba química que se usa
para distinguir aldosas y
cetosas. Los azúcares son
distinguidos a través de su
función como cetona o
aldehído. Si el azúcar contiene
un grupo cetona, es una
cetosa, y si contienen un grupo
aldehído, es una aldosa.
PRUEBA DE BARFOED
27: es una prueba química que
se utiliza para detectar la
presencia de monosacáridos.
PRUEBA DE FEHLING: se utiliza
para la detección de sustancias
reductoras, particularmente
azúcares reductores.
TÉCNICAS DE ANÁLISIS DE LABORATORIO
4. LIPIDOS FUNCIONES ESTRUCTURA IMPORTANCIA BIOMEDICA
Los lípidos son biomoléculas orgánicas
formadas por C, H y O pudiendo
contener además N, P y S. Son un
grupo muy heterogéneo de moléculas
aunque tienen en común las siguientes
propiedades: Son insolubles en agua,
pero solubles en disolventes orgánicos,
es decir, no polares, como el éter,
cloroformo, benceno, acetona, y son
poco densos.
Segunda fuente de energía; además
pueden acumularse y ser utilizados
como material de reserva en las
células adiposas. Segunda fuente de
energía; además pueden acumularse
y ser utilizados como material de
reserva en las células adiposas.
Función biocatalizadora. En este
papel los lípidos favorecen o facilitan
las reacciones químicas que se
producen en los seres vivos.
constituyen la reserva energética de
uso tardío o diferido del organismo.
Su contenido calórico es muy alto (10
Kcal/gramo), y representan una
forma compacta y anhidra de
almacenamiento de energía.
Estructural: fosfolípidos y colesterol
forman parte de las membranas
celulares.
Comunicación celular: Las células se
comunican entre sí por medio de
diferentes sustancias que funcionan
como señales, como pueden ser
vitaminas, hormonas y glucolípidos.
Estructuras de algunos lípidos
comunes. En la parte superior es
colesterol[1] y ácido oleico.[2] La
estructura media es un triglicérido
compuesto de oleil, estearoil, y
palmitoil las cadenas sujetaron a
una estructura glicerol. En el fondo
es el común fosfolípido
fosfatidilcolina.
Los dos tipos principales de lípidos en
la sangre son el colesterol y los
triglicéridos. En cuanto a su propósito
en el cuerpo humano los lípidos son de
crucial importancia para el
almacenamiento de energía y el
desarrollo de la membrana celular.
Si los niveles de los lípidos llegan a ser
demasiado altos pueden acumularse
en las paredes de las arterias hasta
formar una placa que puede obstruir el
paso de la sangre.
El conocimiento de la bioquímica de
los lípidos es importante en la
compresión de muchas áreas
biomédicas de interés. Por ejemplo,
obesidad, aterosclerosis y la función de
varios ácidos grasos poliinsaturados en
la nutrición y la salud.
5. PERFIL LIPÍDICO: es una
prueba que mide los niveles
de grasas en la sangre, entre
ellas, los triglicéridos y el
colesterol, una sustancia
cerosa y grasa presente en
todas las células del cuerpo.
DETERMINACIÓN DE
COLESTEROL TOTAL: Para la
determinación de colesterol
total se utilizan reactivos
comerciales que incluyen las
enzimas y sustratos necesarios
para la cuantificación de todas
las formas de colesterol
presentes en el suero (Kit
comercial de LinearChemicals).
Determinación de triglicéridos
Para la determinación de
triglicéridos en suero se utilizan
reactivos comerciales (Kit
comercial de LinearChemicals)
que incluyen las enzimas y
sustratos necesarios para la
cuantificación por
espectrofotometría visible.
DETERMINACIÓN DE HDL-
COLESTEROL: Para la
determinación del colesterol
presente en las principales
lipoproteínas que lo contienen
como HDL (lipoproteínas de
alta densidad) y LDL
(lipoproteínas de baja
densidad), es necesario:
Primero, la separación
selectiva de la lipoproteína
correspondiente con agentes
precipitantes.
Segundo, la cuantificación del
colesterol presente en dicha
lipoproteína como se indicó
anteriormente. Entre estos
reactivos precipitantes están el
ácido fosfotungstico y
magnesio que precipitan a las
LDL y VLDL (lipoproteínas de
muy baja densidad) mientras
que las HDL permanecen en
solución.
La EXTRACCIÓN SOXHLET es la
técnica de separación sólido-
líquido comúnmente usada
para la determinación del
contenido graso en muestras
de diferente naturaleza.
TÉCNICAS DE ANÁLISIS DE LABORATORIO
6. PROTEINAS FUNCIONES ESTRUCTURA IMPORTANCIA BIOMEDICA
Las proteínas son una clase importante
de moléculas que se encuentran en
todas las células vivas. Una proteína se
compone de una o más cadenas largas
de aminoácidos, cuya secuencia
corresponde a la secuencia de ADN del
gen que la codifica.
Función ENZIMATICA: Las proteinas
con función enzimática son las más
numerosas y especializadas.
Actúan como biocatalizadores de
las reacciones químicas del
metabolismo celular.
Función HORMONAL: Algunas
hormonas son de naturaleza
protéica, como la insulina y el
glucagón (que regulan los niveles
de glucosa en sangre) o las
hormonas segregadas por la
hipófisis como la del crecimiento o
la adrenocorticotrópica.
Función REGULADORA
Algunas proteinas regulan la expresión
de ciertos genes y otras regulan la
división celular (como la ciclina).
Función HOMEOSTATICA
Algunas mantienen el equilibrio
osmótico y actúan junto con otros
sistemas amortiguadores para
mantener constante el pH del medio
interno.
Función DEFENSIVA
Las inmunoglogulinas actúan como
anticuerpos frente a posibles
antígenos.
Todas las proteínas poseen una misma
estructura química central, que
consiste en una cadena lineal de
aminoácidos. Lo que hace distinta a
una proteína de otra es la secuencia de
aminoácidos de que está hecha.
Las proteínas son macromoléculas
complejas desde los puntos de vista
físico y funcional, que desempeñan
múltiples funciones de importancia
crucial. Por ejemplo, una red de
proteína interna, el citoesqueleto,
mantiene la forma y la integridad física
celulares. Filamentos de actina y
miosina forman la maquinaria
contráctil del músculo, La hemoglobina
transporta oxígeno, mientras que los
anticuerpos circulantes defienden
contra invasores extraños. Las enzimas
catalizan reacciones que generan
energía, sintetizan biomoléculas y las
degradan, replican genes y los
transcriben, procesan mRNA. Los
receptores permiten a las células
detectar hormonas y otros indicios
ambientales, así como mostrar
respuesta a los mismos. Las proteínas
están sujetas a cambios físicos y
funcionales que reflejan el ciclo de vida
de los organismos en los cuales
residen.
7. La prueba de INMUNOFIJACIÓN, también
conocida como electroforesis de proteínas,
mide los niveles de ciertas proteínas en la
sangre: Este examen es realizado a partir de
una muestra de sangre, la cual pasa por un
proceso de centrifugación para obtener el
plasma sanguíneo, donde son encontradas las
proteínas. Estas proteínas sufren un proceso de
separación de acuerdo a su carga eléctrica y
peso molecular, generando un patrón de
bandas y, posteriormente, un gráfico, el cual es
fundamental para la interpretación del examen
por parte del médico
Cuantificación de proteínas totales:
1. Método del Biuret En solución
alcalina el Cu+2 reacciona con el
enlace peptídico de las proteínas
dando un color purpúreo que se
cuantifica
espectrofotométricamente
(540nm). Como estándar se utiliza
una solución de albúmina.
2. Lowry: Es un método
colorimétrico de valoración
cuantitativa de las proteínas.
3. Bradford: Es un ensayo
colorimétrico para la
medición de proteína total en
una solución dada.
4. Dumas: Es un método
primario de determinación
de nitrógeno y proteínas que
garantiza resultados rápidos,
facilidad de uso y seguridad.
Técnicas de separación y análisis de las
proteínas La proporción de las
fracciones proteicas individuales
cambia en el transcurso de un gran
número de enfermedades lo que
conlleva que, la cuantificación de las
mismas sea de valor considerable en el
diagnóstico clínico. Los procedimientos
más utilizados actualmente en el
laboratorio clínico para el estudio de
las proteínas son los siguientes:
1. Turbidimetría y nefelometría
2. Inmunodifusión
3. Electroforesis
4.Inmunoelectroforesis
5. Inmunoelectroforesis en cohete
6. Inmunofijación
7. Cromatografía.
TÉCNICAS DE ANÁLISIS DE LABORATORIO PROTEINAS
8. ELECTROFORESIS: Una de las técnicas más
sencillas para la separación (y posterior
cuantificación) de proteínas es la electroforesis
(técnica en la cual una partícula cargada se
hace desplazar a través de un medio aplicando
un campo eléctrico).
TURBIDIMETRIA: mide la
disminución de la luz
transmitida a través de una
suspensión de partículas
utilizando para ello un
espectrofotómetro (detector
en la misma dirección del haz
de luz, se mide A o T). ej.
determinación de proteínas
totales en suero, LCR u orina.
La NEFELOMETRÍA: mide la luz
dispersada en dirección
distinta a la luz emitida
(generalmente con ángulos
que oscilan entre 15 y 90º).
Utiliza como instrumento el
nefelómetro (en el que el
detector se ubica con un
ángulo que oscila entre 15 y
90º ej. a 90º). Se suele utilizar
para concentraciones más
diluidas.
INMUNODIFUSIÓN: La inmunodifusión
se basa en la formación de bandas de
precipitación Ag-Ac en medios
semisólidos (generalmente de
agarosa).
INMUNOELECTROFORESIS: La
inmunoelectroforesis es una
inmunodifusión en la que se aplica una
corriente eléctrica para separar las
proteínas de la muestra.
INMUNOELECTROFORESIS EN COHETE
La inmunoelectroforesis en cohete es
una técnica cuantitativa equivalente a
la inmunodifusión radial pero, a en la
que la placa se expone a un campo
eléctrico.
INMUNOFIJACIÓN La inmunofijación
consiste en la separación
electroforética de las proteínas de una
muestra seguida del contacto del gel
con una tira de acetato de celulosa
impregnada con antisuero. La unión
Ag-Ac da lugar a la formación de
bandas de precipitación visulalizadas
tras lavar y teñir. Es una técnica muy
rápida que se utiliza especialmente en
le detección de bandas oligoclonales
en líquido cefalorraquídeo.
TÉCNICAS DE ANÁLISIS DE LABORATORIO PROTEINAS
9. ACIDOS NUCLEICOS FUNCIONES ESTRUCTURA IMPORTANCIA BIOMEDICA
Los ácidos nucleicos son un tipo
importante de macromoléculas
presentes en todas las células y virus.
Las funciones de los ácidos nucleicos
tienen que ver con el almacenamiento
y la expresión de información genética.
El ADN contiene la información
genética, el ARN es el que permite que
esta sea comprendida por las células.
Duplicación del ADN
Expresión del mensaje genético:
Transcripción del ADN para formar
ARNm y otros
Traducción, en los ribosomas, del
mensaje contenido en
el ARN mensajero a proteinas.
ARNm. Copia la secuencia de bases
nitrogenadas del ADN.
Controlar todas las actividades
celulares (reproducción celular,
síntesis de proteínas)
ARNr. Interviene en la síntesis de
proteínas en la célula.
La unidad básica de los ácidos
nucleicos es el nucleótido, una
molécula orgánica compuesta por tres
componentes: Base nitrogenada, una
purina o pirimidina. Pentosa, una
ribosa o desoxirribosa según el ácido
nucleico.
La estructura del ácido nucleico se
refiere a la morfología de ácidos
nucleicos como el ADN y el ARN. Los
detalles de la estructura de los ácidos
nucleicos permitieron revelar el código
genético.
La base química de la herencia y de las
enfermedades genéticas se encuentra
en la estructura del DNA, La
importancia de estas macromoléculas
radica en sus funciones: el
almacenamiento, la expresión y la
transmisión de la información
genética, juegan un papel fundamental
para el estudio de los seres vivos y de
todos los procesos e información
genética que se llevan a cabo para su
formación y herencia.
10. ELECTROFORESIS: es una técnica que
emplean los cientificos en el
laboratorio utilizada para separar el
ADN, el ARN, o moléculas o proteínas
en base a su tamaño y carga
eléctrica. Se utiliza una corriente
eléctrica para mover las moléculas y
que se separen a través de un gel.
Secuenciación del ADN:
es una técnica de
laboratorio utilizada
para determinar la
secuencia exacta de las
bases (A, C, G y T) en
una molécula de ADN.
La secuencia de bases
de ADN lleva la
información que una
célula necesita para
ensamblar proteínas y
moléculas de ARN.
Clonación: consiste en hacer
copias idénticas de un
organismo, célula o secuencia
de ADN.
Hibridación y reacción en
cadena de la polimerasa: una
técnica de laboratorio utilizada
para amplificar secuencias de
ADN. El método utiliza
secuencias cortas de ADN
llamados cebadores para
seleccionar la parte del
genoma a amplificar.
Cuantificación directa de
ácidos nucleicos mediante
absorbancia:
La absorbancia de una muestra
de ADN medida a 260 nm en
un espectrofotómetro o lector
de microplacas puede
utilizarse para calcular su
concentración. La
cuantificación de la
absorbancia del ADN funciona
en muestras cuya
concentración oscila de
aproximadamente 0,25 µg/ml
a aproximadamente 125 µg/ml
en un formato de microplaca.
Cuantificación fluorimétrica de
ácidos nucleicos:
La cuantificación del ADN es
una etapa crítica en biología
molecular que requiere
exactitud, fiabilidad y el uso de
volúmenes cada vez más
pequeños para aplicaciones
como la secuenciación de
última generación. En
comparación con la
cuantificación
espectrofotométrica del ADN,
el método fluorimétrico
proporciona ventajas clave
como una sensibilidad
significativamente mayor, alta
selectividad por el ADN
bicatenario (ADNbc) por
encima del ADN
monocatenario (ADNmc) o del
ARN y mayor tolerancia a
contaminantes (proteínas e
hidratos de carbono).
TÉCNICAS DE ANÁLISIS DE LABORATORIO ACIDOS NUCLEICOS