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292	 XIX Congreso de la Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica (SEIMC)
mayores resultados discordantes mostró fue cefuroxima. La sensibi‑
lidad (S), especificidad (E), valor predictivo positivo (VPP) y valor
predictivo negativo (VPN) del método B para cada uno de los antibió‑
ticos estudiados, utilizando como gold standard el método A, se mues‑
tra en la tabla. La sensibilidad fue alta para cefotaxima, norfloxacino,
fosfomicina, gentamicina, nitrofurantoína y cotrimoxazol. La especi‑
ficidad fue excelente para ampicilina, fosfomicina y gentamicina, y
nula para cefotaxima y nitrofurantoína. El VPP fue elevado en todos
los casos. Una de las limitaciones del método B fue la falsa fluores‑
cencia observada cuando se analizan antibióticos conteniendo un
inhibidor de b‑lactamasas.
Descriptivos del método B para cada uno de los antibióticos estudiados
S (%) E (%) VPP (%) VPN (%)
Ampicilina 71 100 100 86,7
Cefuroxima 75 50 85,7 33,3
Cefotaxima 89,5 0 94,4 0
Norfloxacino 90,9 88,9 90,9 88,9
Fosfomicina 94,7 100 100 50
Gentamicina 100 100 100 100
Nitrofurantoína 100 0 95 100
Cotrimoxazol 100 85,7 92,9 100
Conclusiones: La utilización del fluoróforo MUG en las pruebas de
sensibilidad antibiótica permite acortar el tiempo de obtención de
resultados. No obstante, se requieren estudios adicionales con el ob‑
jeto de investigar sobre otros tipos de fluoróforos y de mejorar la
fiabilidad de los resultados obtenidos.
608. MÉTODO DE DIFUSIÓN CON DISCO
DE OXIMINO‑CEFALOSPORINAS CON O SIN CLOXACILINA PARA
DETECCIÓN DE ENTEROBACTER CLOACAE COMPLEX PRODUCTOR
DE BETALACTAMASA DE ESPECTRO EXTENDIDO (BLEE)
I. Angulo López, J. Calvo Montes, E. Román Paucar
y L. Martínez Martínez
Hospital Universitario Marqués de Valdecilla. Santander.
Introducción y objetivos: La detección de enzimas BLEE en bacterias
productoras de betalactamasas de tipo AmpC cromosómica inducible
supone un auténtico reto para los microbiólogos clínicos. El documen‑
to “EUCAST guideline for the detection of resistance mechanisms and
specific resistances of clinical and/or epidemiological importance”
(versión 1.0, diciembre de 2013) recomienda diferentes estrategias
específicas para este grupo de microorganismos. En nuestro centro,
un hospital de tercer nivel en el Norte de España, E. cloacae complex
productor de BLEE es muy prevalente, por lo que nos brinda la opor‑
tunidad de evaluar diferentes métodos para detector BLEEs en este
complejo.
Material y métodos: Se evaluaron un total de 117 E. cloacae complex
productores de BLEEs (un único aislamiento por paciente) recogidos
en nuestro centro durante 2005‑2011. Se incluyeron las siguientes
cepas de E. cloacae complex en nuestro estudio: portadoras de
CTX‑M‑15 (n = 71), CTX‑M‑9 (n = 28), SHV‑12 (n = 11), CTX‑M‑3
(n = 4), SHV‑12 y CTX‑M‑9 (n = 1), CTX‑M‑15 y CTX‑M‑9 (n = 1) y
TEM‑12 (n = 1). La prueba de discos combinados con inhibidor se
realizó con discos de cefotaxima 30 mg (CTX), ceftazidima 30 mg
(CAZ) y cefepime 30 mg (FEP) sólos y combinados con ácido clavulá‑
nico (10 mg) en agar Mueller‑Hinton (MH) estándar y en MH suple‑
mentado con 250 mg/L de cloxacilina. El incremento del diámetro de
inhibición de CAZ, CTX o FEP en presencia de ácido clavulánico mayor
o igual a 5 mm respecto al de la cefalosporina correspondiente sin
ácido clavulánico, se consideró como un aislamiento BLEE positivo.
Resultados: Se muestran en la tabla.
AMP AMC CFL FUR
EUCAST CLSI EUCAST CLSI CLSI EUCAST CLSI CLSI
(parenteral) (oral)
ACC1
(%) 99,5 90,6 NA5
88,2 82,1 98,6 98 71
% mE4
0,0 9,4 NA5
11,3 14,6 0,0 1,4 28,3
% ME5
1,2 0,0 NA5
0,0 0,9 1,0 0,0 0,7
% VME6
0,0 0,0 NA5
10,0 14,6 7,7 11,1 11,1
1
ACC: concordancia en la categoría clínica. 2
mE: error menor (nº de aislamientos con
sensibilidad intermedia por un método y sensibles o resistentes por el otro/nº total de
aislamientos) × 100). 3
ME: error mayor (nº de aislamientos sensibles por el MR y resis‑
tentes por Vitek/nº total de aislamientos sensibles por el MR) × 100). 4
VME: error máxi‑
mo (nº de aislamientos resistentes por el MR y sensibles por Vitek/nº total de aisla‑
mientos resistentes por el MR) × 100). 5
NA: no aplicable, la tarjeta AST‑N244 de Vitek2®
contiene AMC en concentración 2:1; EUCAST recomienda una concentración fija de
ácido clavulánico (2 mg/L).
Conclusiones: Mientras que la correlación de la tarjeta AST‑N244 de
Vitek 2®
con el método de referencia respecto a la ampicilina es muy
buena, este sistema sobreestima la sensibilidad a la amoxicilina‑ácido
clavulánico, cefalotina y cefuroxima, tal y como se evidencia en el alto
porcentaje de VME. Debido a la repercusión terapéutica que los erro‑
res en el estudio de sensibilidad antimicrobiana tienen en el trata‑
miento de ITU, se recomienda confirmar los resultados de la CMI de
AMC, CFL y FUR obtenidos con la tarjeta de Vitek 2®
AST‑N244 AMC
mediante otros métodos de referencia.
607. UTILIZACIÓN DE UN FLUORÓFORO PARA LA DETECCIÓN
RÁPIDA DE LA SENSIBILIDAD BACTERIANA A ANTIBIÓTICOS
J. Colomina‑Rodríguez1
, J.J. Gil‑Tomás1
, V. Pérez‑Doñate1
,
M. Borrás‑Máñez1
, S. Droguett2
y M. Soto2
1
Hospital de la Ribera. Alzira. 2
Diagnochip SpA. Santiago de Chile.
Introducción y objetivos: La rapidez en la identificación bacteriana
y estudios de sensibilidad antimicrobiana son esenciales en el mane‑
jo de las enfermedades infecciosas. Durante la última década se han
desarrollado aparatos semiautomatizados que permiten obtener re‑
sultados en unas 8‑10h, en comparación con las 18‑24 h que habitual‑
mente requieren los métodos tradicionales. El objetivo del presente
trabajo ha sido evaluar la utilidad del fluoróforo 4‑metil‑umbelife‑
ril‑b‑D‑glucurónido (MUG), sustrato del enzima b‑glucuronidasa es‑
pecífico de Escherichia coli, en la obtención de resultados rápidos de
las pruebas de sensibilidad antibiótica.
Material y métodos: Se ha realizado un estudio piloto en el que se
seleccionaron, al azar, 20 cepas de E. coli, procedentes de pacientes
con bacteriuria significativa y con sensibilidad variable a diversos
antibióticos de uso común. En todas las cepas se realizó el estudio de
sensibilidad antibiótica mediante dos procedimientos pareados: A)
método estándar (gold standard) = paneles NUC52 del sistema Mi‑
croScan WalkAway (Siemens), procesados según indicaciones del
fabricante, incubados en el sistema y con lectura a las 18 h, y B) mé‑
todo a estudio = paneles NUC52 pero con la adición de 10 µL/pocillo
de MUG al 1%, incubados en aerobiosis a 37 o
C y lecturas cada hora
bajo luz UV. Se realizó un análisis comparativo de los resultados de
sensibilidad antibiótica obtenidos por los dos procedimientos.
Resultados: El tiempo medio de detección de la fluorescencia en el
método B (a estudio) fue de 6 horas. Los resultados de sensibilidad
antibiótica utilizando el método A y el método B fueron coincidentes
en todos los antibióticos analizados en 11 cepas (55%). En 1 cepa el
sustrato fluorogénico no fue hidrolizado (resultados no interpretables),
mientras que en las 8 cepas restantes se detectaron discrepancias:
una en 1 cepa, dos en 6 cepas y tres en 1 cepa. El antibiótico que
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Descriptivos del método B para cada uno de los antibióticos estudiados S (%) E (%) VPP (%) VPN (%) Ampicilina 71 100 100 86,7 Cefuroxima 75 50 85,7 33,3 Cefotaxima 89,5 0 94,4 0 Norfloxacino 90,9 88,9 90,9 88,9 Fosfomicina 94,7 100 100 50 Gentamicina 100 100 100 100 Nitrofurantoína 100 0 95 100 Cotrimoxazol 100 85,7 92,9 100 Conclusiones: La utilización del fluoróforo MUG en las pruebas de sensibilidad antibiótica permite acortar el tiempo de obtención de resultados. No obstante, se requieren estudios adicionales con el ob‑ jeto de investigar sobre otros tipos de fluoróforos y de mejorar la fiabilidad de los resultados obtenidos. 608. MÉTODO DE DIFUSIÓN CON DISCO DE OXIMINO‑CEFALOSPORINAS CON O SIN CLOXACILINA PARA DETECCIÓN DE ENTEROBACTER CLOACAE COMPLEX PRODUCTOR DE BETALACTAMASA DE ESPECTRO EXTENDIDO (BLEE) I. Angulo López, J. Calvo Montes, E. Román Paucar y L. Martínez Martínez Hospital Universitario Marqués de Valdecilla. Santander. Introducción y objetivos: La detección de enzimas BLEE en bacterias productoras de betalactamasas de tipo AmpC cromosómica inducible supone un auténtico reto para los microbiólogos clínicos. El documen‑ to “EUCAST guideline for the detection of resistance mechanisms and specific resistances of clinical and/or epidemiological importance” (versión 1.0, diciembre de 2013) recomienda diferentes estrategias específicas para este grupo de microorganismos. En nuestro centro, un hospital de tercer nivel en el Norte de España, E. cloacae complex productor de BLEE es muy prevalente, por lo que nos brinda la opor‑ tunidad de evaluar diferentes métodos para detector BLEEs en este complejo. Material y métodos: Se evaluaron un total de 117 E. cloacae complex productores de BLEEs (un único aislamiento por paciente) recogidos en nuestro centro durante 2005‑2011. Se incluyeron las siguientes cepas de E. cloacae complex en nuestro estudio: portadoras de CTX‑M‑15 (n = 71), CTX‑M‑9 (n = 28), SHV‑12 (n = 11), CTX‑M‑3 (n = 4), SHV‑12 y CTX‑M‑9 (n = 1), CTX‑M‑15 y CTX‑M‑9 (n = 1) y TEM‑12 (n = 1). La prueba de discos combinados con inhibidor se realizó con discos de cefotaxima 30 mg (CTX), ceftazidima 30 mg (CAZ) y cefepime 30 mg (FEP) sólos y combinados con ácido clavulá‑ nico (10 mg) en agar Mueller‑Hinton (MH) estándar y en MH suple‑ mentado con 250 mg/L de cloxacilina. El incremento del diámetro de inhibición de CAZ, CTX o FEP en presencia de ácido clavulánico mayor o igual a 5 mm respecto al de la cefalosporina correspondiente sin ácido clavulánico, se consideró como un aislamiento BLEE positivo. Resultados: Se muestran en la tabla. AMP AMC CFL FUR EUCAST CLSI EUCAST CLSI CLSI EUCAST CLSI CLSI (parenteral) (oral) ACC1 (%) 99,5 90,6 NA5 88,2 82,1 98,6 98 71 % mE4 0,0 9,4 NA5 11,3 14,6 0,0 1,4 28,3 % ME5 1,2 0,0 NA5 0,0 0,9 1,0 0,0 0,7 % VME6 0,0 0,0 NA5 10,0 14,6 7,7 11,1 11,1 1 ACC: concordancia en la categoría clínica. 2 mE: error menor (nº de aislamientos con sensibilidad intermedia por un método y sensibles o resistentes por el otro/nº total de aislamientos) × 100). 3 ME: error mayor (nº de aislamientos sensibles por el MR y resis‑ tentes por Vitek/nº total de aislamientos sensibles por el MR) × 100). 4 VME: error máxi‑ mo (nº de aislamientos resistentes por el MR y sensibles por Vitek/nº total de aisla‑ mientos resistentes por el MR) × 100). 5 NA: no aplicable, la tarjeta AST‑N244 de Vitek2® contiene AMC en concentración 2:1; EUCAST recomienda una concentración fija de ácido clavulánico (2 mg/L). Conclusiones: Mientras que la correlación de la tarjeta AST‑N244 de Vitek 2® con el método de referencia respecto a la ampicilina es muy buena, este sistema sobreestima la sensibilidad a la amoxicilina‑ácido clavulánico, cefalotina y cefuroxima, tal y como se evidencia en el alto porcentaje de VME. Debido a la repercusión terapéutica que los erro‑ res en el estudio de sensibilidad antimicrobiana tienen en el trata‑ miento de ITU, se recomienda confirmar los resultados de la CMI de AMC, CFL y FUR obtenidos con la tarjeta de Vitek 2® AST‑N244 AMC mediante otros métodos de referencia. 607. UTILIZACIÓN DE UN FLUORÓFORO PARA LA DETECCIÓN RÁPIDA DE LA SENSIBILIDAD BACTERIANA A ANTIBIÓTICOS J. Colomina‑Rodríguez1 , J.J. Gil‑Tomás1 , V. Pérez‑Doñate1 , M. Borrás‑Máñez1 , S. Droguett2 y M. Soto2 1 Hospital de la Ribera. Alzira. 2 Diagnochip SpA. Santiago de Chile. Introducción y objetivos: La rapidez en la identificación bacteriana y estudios de sensibilidad antimicrobiana son esenciales en el mane‑ jo de las enfermedades infecciosas. Durante la última década se han desarrollado aparatos semiautomatizados que permiten obtener re‑ sultados en unas 8‑10h, en comparación con las 18‑24 h que habitual‑ mente requieren los métodos tradicionales. El objetivo del presente trabajo ha sido evaluar la utilidad del fluoróforo 4‑metil‑umbelife‑ ril‑b‑D‑glucurónido (MUG), sustrato del enzima b‑glucuronidasa es‑ pecífico de Escherichia coli, en la obtención de resultados rápidos de las pruebas de sensibilidad antibiótica. Material y métodos: Se ha realizado un estudio piloto en el que se seleccionaron, al azar, 20 cepas de E. coli, procedentes de pacientes con bacteriuria significativa y con sensibilidad variable a diversos antibióticos de uso común. En todas las cepas se realizó el estudio de sensibilidad antibiótica mediante dos procedimientos pareados: A) método estándar (gold standard) = paneles NUC52 del sistema Mi‑ croScan WalkAway (Siemens), procesados según indicaciones del fabricante, incubados en el sistema y con lectura a las 18 h, y B) mé‑ todo a estudio = paneles NUC52 pero con la adición de 10 µL/pocillo de MUG al 1%, incubados en aerobiosis a 37 o C y lecturas cada hora bajo luz UV. Se realizó un análisis comparativo de los resultados de sensibilidad antibiótica obtenidos por los dos procedimientos. Resultados: El tiempo medio de detección de la fluorescencia en el método B (a estudio) fue de 6 horas. Los resultados de sensibilidad antibiótica utilizando el método A y el método B fueron coincidentes en todos los antibióticos analizados en 11 cepas (55%). En 1 cepa el sustrato fluorogénico no fue hidrolizado (resultados no interpretables), mientras que en las 8 cepas restantes se detectaron discrepancias: una en 1 cepa, dos en 6 cepas y tres en 1 cepa. El antibiótico que Documento descargado de http://www.elsevier.es el 10/06/2015. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato.