Este documento compara métodos clásicos y moleculares para identificar especies de Enterococcus. Evaluó 305 cepas usando técnicas bioquímicas y PCR multiplex. Los resultados mostraron que E. faecalis y E. faecium son las especies más comunes. La PCR confirmó los resultados fenotípicos y permitió identificar especies en casos donde los métodos bioquímicos no fueron concluyentes. El documento concluye que la PCR es útil para identificar Enterococcus, especialmente especies de difícil identificación fenotípica.

11. Ejemplo

12. Protocolo General PCR Multiplex

13. PCR de bacterias en identificación 2 colonias 200uL de agua Centrifugar 10s 2uL sobrenadante 1uL de MgCl 2 (50mM) 2.5uL dNTP’s (1.25mM) 2uL de c/u De los primers (20p/mol) 2.5uL buffer 10X 0.15uL (5U/uL)

15. Primers utilizados

16. RESULTADOS E.Faecalis  89.2% E.faecium  10.2% E. hirae  1.2% E.gallinarum  0.4%, E.raffinosus  0.4%, E.avium  0.4% , E. durans  0.4% No identificada  0.4% 272 25 3