Este documento describe los conceptos básicos de la serología para el diagnóstico de enfermedades infecciosas. Explica que la serología mide los anticuerpos producidos en respuesta a bacterias, virus, parásitos y hongos mediante pruebas como ELISA, inmunoflorescencia y fijación de complemento. También resume los objetivos del diagnóstico serológico y algunas enfermedades que se diagnostican comúnmente de esta manera, como la sífilis, toxoplasmosis y leptospirosis.
3. ¿QUÉ ES UN DIAGNOSTICO
SEROLÓGICO?
o Análisis que mide el número de anticuerpos que se
producen ante la presencia de un virus o bacteria en
el suero.
o Valoración de los anticuerpos (antiVHA, antiVHB y
antiVHC).
o Diagnóstico realizado mediante examenes en el
laboratorio de las reacciones antígeno-anticuerpo en
suero.
4. OBJETIVOS DEL DIAGNÓSTICO
SEROLÓGICO:
Diagnóstico de la enfermedad actual
Conocimiento del estado inmunitario de un individuo
previo a una vacunación
Conocimiento del estado inmunitario de una población
Diagnostico de infecciones por microorganismos que
no se pueden cultivar
Para diagnosticar infecciones en pacientes con
tratamiento antibiótico
Diagnostico retrospectivo (seroconversión)
5. Un microorganismo patógeno
contiene y produce muchos
ANTÍGENOS diferentes que el
huésped reconocerá como
extraños, de modo que la
infección con un agente
provocará la aparición de
varios ANTICUERPOS
específicos diferentes.
Esta especificidad es la base de la
mayoría de las técnicas inmunológicas
para detección de Ag o Ac.
6. Las técnicas
destinadas a la
búsqueda de
anticuerpos
necesitan del
tiempo necesario
para que se
produzca un
aumento
significativo del
título de
anticuerpos
Los antígenos en
cambio, pueden
ser detectados
desde el
comienzo de la
enfermedad.
Constituye una
ventaja el que
aún durante el
tratamiento con
antibióticos, los
antígenos sean
detectables
10. Aglutinación
Se basan en la unión de antígenos
particulados a los anticuerpos.
Suele tratarse de pruebas
muy sensibles pero con poca
especificidad
Ejemplos de este tipo de pruebas es
la aglutinación con rosa de Bengala
empleada en el diagnóstico de la
brucelosis.
En casos de meningitis, se puede
detectar en el LCR la presencia de
antígenos de Haemophilus
influenzae, Streptococcus
pneumoniae, Neisseria
meningiditis y de Streptococcus
beta hemolítico grupo B.
11. FIJACIÓN DEL COMPLEMENTO
Se basa en la capacidad del complemento para
unirse a los complejos antígeno-anticuerpo.
la prueba se desarrolla en dos fases, una primera
que es una reacción antígeno anticuerpo en un
medio líquido y una segunda consistente en la
adición de complemento, una hemolisina
dependiente de complemento y eritrocitos.
Si se ha producido reacción antígeno-anticuerpo, es
decir, si el suero analizado contenía anticuerpos
frente al antígeno, el complemento queda fijado y no
puede activar la hemólisis de los glóbulos rojos.
12. INMUNOFLUORESCENCIA
Pueden utilizarse para detectar
anticuerpos o para detectar la presencia
de un patógeno.
En ambos casos la reacción finaliza
mediante la adición de un anticuerpo
conjugado a una sustancia
fluorescente, habitualmente
fluoresceína.
Se usa en la detección de virus
respiratorios (influenza, parainfluenza,
adenovirus, virus sincicial respiratorio),
virus herpes, sarampión y parotiditis,
así como en bacterias como Bordetella
pertussis, Rickettsia rickettsia y
Chlamydia trachomatis.
13. ELISA (ENZIMOINMUNOANALISIS)
Las pruebas inmunoenzimáticas se basan en una reacción
antígeno anticuerpo que tiene lugar sobre un soporte sólido
(normalmente una microplaca de plástico) a la que se ha
adsorbido un antígeno o un anticuerpo.
La prueba puede desarrollarse en diferentes modalidades
pero en todas ellas la reacción final se revela mediante un
enzima que modifica un substrato que adquiere color.
El color que se produce es proporcional a la cantidad de
anticuerpo específico que se fija al antígeno.
Se trata de pruebas muy sensibles y específicas.
El método se utiliza en la detección de virus sincial
respiratorio. Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae,
rotavirus, adenovirus, virus hepatitis, virus varicela-zóster,
etcétera.
16. Serologia
Tecnica utilizada para la deteccion
de anticuerpos especificos contra
parasitos y hongos, constituyendo
el diagnostico serologico
Identificar problemas de
salud
Determinar la distribucion
de una enfermedad
Determinas la incidencia
y la prevalecencia de una
enfermedad
calendario de vacunacion
objetivos
17. Utilidad en
parasitologia
Establecer diagnostico diferenciales entre diferentes patologias
infecciosas: paracitarias , fungicas, bacterianes.
Eleccion de la mejor conducta terapeutica
Establecer politicas sanitarias de prevencion
Estudios epidemiologicos
Algunas aplicaciones
Paracitosis hemotesiduales:
• Toxoplasmosis
• Chagas
• Toxocariosis
• Hidatidosis
• Cistecercosis
• Amebiasis
• Leishmaniasis
• Paludismo
18. Parasitos como antigenos
• Somaticos o estructurales:
superficie citoplasmaticos
• Metabolicos: productos de la
actividad fisiologica, antigenos
de secrecion – excresion.
• Proteinas, glicoproteinas,
polisacaridos, lipidos.
Tecnicas
Floculacion
Aglutinacion
Presipitacion
Fluorecencia
Inmunoenzimoanalisis
19. CONDICIONES PRE
ANALÍTICAS EN SEROLOGIA
Información
Solicitud
Obtención de muestra 6hrs
de ayuno, extracción de
sangre venosa, tubos
secos sin anticoagulante
Transporte: separadas y
refrigeradas
Conservación: a 4°c,-20°c
20.
21. Pruebas serológicas :
Se usan varias pruebas
serológicas para detectar
anticuerpos anti-leishmania
a) Prueba de
inmunofluorescencia indirecta
b) Enzimoinmunoensayo
c) Prueba de aglutinación directa
d) Prueba inmunocromatográfica
rápida (en varilla o tira)
Serología para
Leishmaniosis
22.
23. El método mas sencillo de diagnostico es el frotis y la
gota gruesa, tomados preferentemente del estado febril
y coloreados con derivados del Romanowsky, siendo la
coloración de Giemsa la mas usada. Este método
puede emplearse en postas o establecimientos de
salud locales que cuenten con microscopio.
se ha
recomendado el
uso de naranja de
acridina, que tiñe el
núcleo para
detectar mejor a los
parásitos.
Pruebas serológica para
malaria
24. se coloca una gota de sangre en un
portaobjetos limpio y con la esquina de
otro, se disemina la sangre hasta llegar a
un diámetro de más o menos 1 cm. El
espesor debe ser tal que permita leer a
través de la preparación.
GOTA GRUESA
Las preparaciones se dejan
secar y se colorean con la
técnica de Giemsa
25. DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO:
se aplican las técnicas que
detectan anticuerpos específicos
contra el parásito ya que tienen la
capacidad de evidenciarlos a partir
de la tercera semana de ocurrida la
infección .
con por lo menos dos técnicas de
principio diferente, empleamos las
técnicas de ELISA e IFI, ratifique el
resultado reactivo obtenido en el
tamizaje. En conjunto ambas
pruebas alcanzan el 95-98% de
PRUEBA SELOGICA PARA EL MAL DE
CHAGAS
26. • La hemaglutinación indirecta
emplea glóbulos rojos de
carnero, previamente
tratados con ácido tánico,
como soporte de extractos
solubles del parásito
(antígeno). Es una prueba
altamente sensible y
específica. En la
• Los kits comerciales
simplifican la ejecución de la
técnica, proporcionando el
antígeno absorbido a los
glóbulos rojos.
HEMAGLUTINACIÓN
INDIRECTA (HAI)
27. • Las micosis profundas son enfermedades infecciosas
causadas por un grupo heterogéneo de hongos, que,
desde
• su hábitat natural, el medio ambiente, penetran
accidentalmente en el organismo.
• La puerta de entrada más frecuente es el aparato
respiratorio, especialmente en los casos de
Histoplasmosis y Coccidioidomicosis en los cuales el
hongo puede permanecer, originando lesiones
pulmonares o puede diseminarse a través de vasos
sanguíneos o linfáticos al tejido cutáneo, visceral y óseo
PRUEBAS
SEROLOGICAS
PARA DIAGNOSTICO
DE MICOSIS
PROFUNDAS
28. Pruebas serológicas para hongos
Técnica de doble difusión
en gel
Se utilizó el equipo
comercial fabricado por
M. A. Bioproducts de
Whittaker Corporation de
U.S.A., basado en los
principios. De
inmunodifusión o doble
difusión descrito por
Oudin y Ouchterlony.
Se utilizaron los antígenos
y sueros
controles de Histoplasma
capsulatum,
Coccidioides immitis y
Aspergillus spp.
del equipo comercial y el
antígeno y
suero control de
Paracoccidioides
brasiliensis suministrado
por Yarzábal y
col
Antígenos y sueros
controles:
29. Técnica de aglutinación de látex
para Criptococcus neoformans
Esta es una prueba cualitativa y semi-
cuantitativa que permite detectar en
suero y L.C.R., la presencia del antígeno
capsular polisacárido de Criptococcus
neoformans. Esta técnica utiliza
partículas de látex impregnadas con
Globulinas normales, estas últimas nos
permiten detectar las aglutinaciones no
específicas que pueden ocurrir debido a
la presencia de ciertas Macroglobulinas
(Ej: factor reumatoideo).
Se utilizó el equipo comercial Crip-
tococcal Antigen Latex Agglutination
System de M. A. Bioproducts, Whittaker
U.S.A.
30. HISTOPLASMOSIS
Enfermedad de Darling, Fiebre de las cavernas, Fiebre de las
minas abandonadas oreticuloendoteliosis) -----------------
Histoplasma Capsulatum
Pruebas
serologicas
Dentro de los estudios serológicos para
histoplasmosis se encuentran: la aglutinación de
partículas de látex, precipitación e
inmunodifusión; éstas pruebas resultan positivas en
2 o 5 semanas después de lainfección.
La prueba de fijación del complemento en la
enfermedad positiva permanece positiva en un título
de 1:32 o más; en las pruebas de inmunodifusión dos
bandas de precipitación son de valor diagnóstico en
ala histoplasmosis activa. Otra prueba diagnóstica es