Este documento describe varias técnicas inmunológicas y bioquímicas utilizadas en laboratorios clínicos, incluyendo ELISA, western blot, radioinmunoensayo, citometría de flujo e inmunohistoquímica. Estas técnicas se usan para cuantificar proteínas, detectar anticuerpos y antígenos, y ayudar en el diagnóstico de enfermedades. También describe pruebas de hematología y química sanguínea que miden parámetros como glóbulos rojos

2. Enzimo-Inmuno-Ensayo
Es la técnica mas utilizada en la actualidad para cuantificar casi
cualquier proteína soluble en la mayor parte de los fluidos
corporales o medios de cultivo en el laboratorio.
Es un inmunoensayo en medio liquido, donde uno
de los componentes (Ag o Ab) está adsorbido
sobre un plástico.
Múltiples Variantes
ELISA indirecto ELISA en sándwich
(Ag-Ab): Antígeno- Anticuerpo.

3. ELISA indirecto:
Es la modalidad a utilizar cuando lo que queremos es cuantificar anticuerpos
específicos en un suero.
El antígeno debe estar fijado en los pocillos de plásticos.
Sobre dichos pocillos se añadirá una dilución del suero del paciente en
estudio, lo que permite la unión de los anticuerpos presentes en el suero con
los antígenos de la placa.
Si hay anticuerpos, se producirá la reacción Ag-Ab en unos 15 a 60 min.
 Se lavan muy bien los pocillos para retirar las proteínas no adheridas al
antígeno.
 Consiste, en añadir anticuerpos anti-Ig humana conjugados a una enzima.
 Si hubo anticuerpos en el suero del paciente, este segundo anticuerpo
quedara unido a ellos.
 Se lava energéticamente para retirar las proteínas no adheridas al antígeno.
 Se añade sustrato de la enzima conjugada con el segundo anticuerpo.
Se generara una sustancia colorada.
 La intensidad del color será proporcional a la cantidad de anticuerpo que tenia el
paciente.

5. ELISA en sándwich
Cuando se va a cuantificar una proteína sérica (no un anticuerpo).
 Cuantificar una Citocina; se pega al plástico
del pocillo un anticuerpo anti-citocina.
 Se repite el mismo proceso que en el caso anterior, la única
diferencia es que al añadir el suero en estudio la reacción Ag-Ab se
producirá entre los anticuerpos fijados al plástico del pocillo y la
citocina presente en el suero.

7. Los resultados aportan elementos
diagnósticos, información de una
enfermedad y coadyuvan en la
planificación del tratamiento
 Medición de Hormonas:
Progesterona, estrógenos, cortisol, insulina, testosterona,
gonadotropina coriónica humana, TSH.
 Detección de antígenos tumorales:
Antígeno prostáticoAlfa-fetoproteína.
Antígeno del ovario
Antígeno carcinoembrionario.

8. VIH:

9.  Sensibilidad: 90%
 Especificad: 50%

11. Método Western:
Se realiza sobre los soportes sólidos (papeles de nylon) sobre los que
se han transferido e inmovilizado proteínas antigénicas previamente
separadas por electroforesis en geles de acrilamida.
 La identificación de las proteínas a estudiar se realiza por
incubación de las membranas o soportes con anticuerpos específicos
marcados habitualmente con enzimas y posterior adición del sustrato
específico de dicha enzima, que producirá un viraje de color.

12. WESTERN BLOT

13. Prueba confirmatoria, que se utiliza para hacer un segundo análisis a
la prueba de ELISA.
Negativo: significa que no se detectaron anticuerpos
específicos para el VIH. Sin embargo, no se descarta la
posibilidad de infección, así que debe practicarse
nuevamente cada tres meses, durante un año.
Positivo: se confirma la presencia del VIH.

17. Radioinmunoensayo (RIA)
Es el inmunoensayo más sensible basado en el
marcaje radioactivo de anticuerpos o antígenos.
RIA competitivo
La sustancia a cuantificar en este caso compite con cantidades
radiactivas conocidas de esa misma sustancia para unirse con su
anticuerpo específico.
Cuanto menos antígeno-problema tengamos, mayor será la
cantidad de antígeno radioactivo unido al anticuerpo y viceversa.
Se medirá la radioactividad del antígeno marcado unido al
anticuerpo y la del antígeno marcado libre.
 Si el antígeno o anticuerpo se fijan a una superficie plástica será mas
sencilla la separación entre el isótopo libre y el unido al anticuerpo.

18. Inmunoprecipitación:
En un extracto celular se precipita la proteína de interés y tras la
electroforesis se revela mediante el uso de anticuerpo radioactivo.
Permite saber si un determinado tipo celular expresa dicha proteína de
modo basal o tras la inducción por algún estímulo.
Electroforesis: técnica mediante la cual se
separan las biomoléculas en disolución
cuando se ven sometidas a un campo
eléctrico.

30.  Para tipificar los glóbulos rojos (GR) o eritrocitos
suelen llevarse a cabo reacciones de aglutinación.
 La hemaglutinación se usa para determinar el grupo
sanguíneo ABO de donadores de sangre y
receptores de transfusión.

35.  Hemoaglutinación viral
Algunos virus son capaces de aglutinar eritrocitos de mamíferos o
aves, y esto puede utilizarse para caracterizar un virus desconocido, o
medir [Ac] en suero.Ejemplos :
Orthomyxovirus (Influenza), Paramyxovirus (Parotiditis), Parvovirus

37. Permite la identificaci6n, sobre muestras tisulares o citológicas, de
determinantes antigénicos característicos de distintas líneas de
diferenciación y función celular
El anticuerpo específico se une a una enzima que convierte un
sustrato incoloro en un producto teñido in situ.

38.  Este método es análogo a Elisa; la diferenciación en
la detección yace principalmente en que en la
inmunohistoquímica los productos teñidos son
insolubles y se precipitan en el sitio en donde se
forman.
El anticuerpo se une de manera estable a su
antígeno, lo que permite que el anticuerpo no
unido se elimine mediante lavado meticuloso.

39. Peroxidasa de
rábano picante
oxida el sustrato
diaminobenzidina
produce un precipitado de
color pardo
Fosfatasa alcalina
producir colorantes de color
rojo o azul
sustancia común es el 5-
bromo-4-cloro- 3-indolil
fosfato más nitroazul
tetrazolio

40. Biometría hemática o citrometria hemática

41. Serie roja
hemoglobina: se mide en g/dl
mujeres: 12.5 g/dl
Hombres:15.5 g/dl.
Hematocrito : se mide en % en
mujeres:39-50%
Hombres:46-56%.
Globulos rojos:millones/ul
mujeres:4.1-5.7 millones /ul
Hombres:5.0-6.3 millones/ ul

42. VGM (volumen globular medio) se
mide en femtolitros o micras cubicas.
Mujeres:78-103 fl
Hombres:83-98 fl
HCM (hemoglobina corpuscular media) se
mide en pico gramos hb/GRx10
Valor normal :27-34 pg
CmHb (concentración media de
hemoglobina): se mide en %
Varones: 32-34%
Mujeres: 30-34%.

43. Coeficiente de
variación del VGM
(CV-VGM):se mide
en%. Valor normal: 12-
15%.
Curvas de distribución
de frecuencias del
VGM puede calcularse
apartir de curvas de
distribución
frecuencias del VGM.
Valor normal:91.4
Cuenta corregida de reticulocitos (CCR): se expresa % y se refiere ala
proporción porcentual de células rojas inmaduras recientemente
imprevistas del nucleo que han sido emitidas ala sangre por la medula
osea.se calcula
CCR=CR(%)X hematocrito del paciente / 45.
CR: es la cuenta porcentual de reticulocitos en un extendido de sangre
periférica

44. Globulos blancos (GB): valor
normal de 4000 a 12000/ul
Cuenta diferencial de glóbulos
blancos pueden encontrarse
los siguientes tipos de
leucocitos:
neutrofilos:40-85%
Meta mielocitos: 0-2%
En banda: 0-11%
Segmentados:40-74%
Eosinofilos:0-7%
Basofilos:0-3%
Monocitos:1-13
Linfocitos:12-46%
Serie blanca
Otras células en sangre
periférica como los plasmocitos
se encuentran en algunas virosis
como mononucleosis infecciosa
,rubeola,varicela,sarampion, y
meningitis linfocítica benigna.
Blastos o bastones de auer :es
muy sugestiva de leucemia
aguda.

45. Serie trombocitica
Plaquetas:
150000 a 500000/ul
Valores normales del
volumen plaquetario: 8-12
/fl.

46. Hemoglobina: valores por deba bajo de lo normal =anemia
Valores arriba de los normal=policitemia
Hematocrito=se diagnostica anemia
Glóbulos rojos: anemia
VGM:si la anemia es macrocitica o microcitica.
HCM=se diagnostica hipocromía y normocromia
CmHb=se diagnostica anemias y se valora la hemoglobina hematocrito y glóbulos rojos
CV-VGM=se diagnostica anemias y talasemias
Curvas de distribución de frecuencias del VGM anemias anemia microcitica hipocromica.
Neutrofilos por arriba de lo normal neutrofilia y por debajo de lo normal neutropenia
Eosinofilos por arriba de lo normal esosinofilia y por debajo de lo normal eosinopenia
Basofilos por arriba de lo normal basofilia por debajo de lo normal basopenia.
Monocitos= para diagnosticar leucemias
Plasmocitos=para diagnosticar virosis
Blastos=para diagnosticar leucemia aguda
Valores de plaquetas por arriba de lo normal trombositosis y por debajo trombocitopenia
Linfocitos por arriba de lo normal linfocitosis y por debajo linfopenia

47. La Química sanguínea es una serie de pruebas que
suministra información al médico de las condiciones
del metabolismo en el cuerpo humano y además
como funcionan ciertos órganos como el hígado ,el
riñón etc.
Existen diversos parámetros de químicas
sanguíneas de 5, 6, 12, 24 y la más
completa de 27 elementos.

48. Es un grupo de exámenes de sangre que
suministran información acerca del
metabolismo del cuerpo
Se evalúan los electrolitos, es decir, los minerales
que mantienen equilibradas las concentraciones
de los distintos fluidos corporales y que son
necesarios para ayudar a los músculos, el corazón
y otros órganos a funcionar adecuadamente. Para
evaluar la función renal y el azúcar en sangre, se
analizan otras sustancias.

49. Se analizan diversas cantidades de elementos, según sea
requerido por el médico. En una química sanguínea algunas
sustancias son analizadas mediante el suero sanguíneo y entre
otras cosas, se revisan electrolitos como el potasio, sodio, cloro
etc.
En una Química sanguínea de seis elementos Incluye seis
estudios en uno, es decir, con una sola muestra de sangre,
recibe seis estudios diferentes: glucosa,urea,ácido úrico,
creatinina, colesterol y triglicéridos.
El paciente, antes de practicarse el análisis, debe cumplir con los
siguientes requisitos: Haber mantenido un ayuno mínimo de 12
horas previas a la toma y Suspender cualquier medicamento
que este tomando.

50. GLUCOSA:
Mide la cantidad de azúcar en la sangre.
Valor normal 70- 109 mg/dL.
Valor Alto >120mg/dL
Valores bajos > de 60 mg/dL:
Valor Alto: Puede indicar Diabetes,
enfermedades renales, hipertiroidismo,
pancreatitis aguda, tumores de
páncreas
Valor Bajo: Puede indicar Hipoglicemia,
exceso de insulina, hipotiroidismo.
UREA: Se hace para evaluar la función renal y ver el
nivel de nitrógeno en la sangre.
VALOR NORMAL: 6 -20 mg/dL.
VALOR ALTO: 100 mg/dl
Un valor alto Pueden deberse a deshidratación o
deficiencia renal o cardiaca.

51. ACIDO URICO:
Valor normal 3,4-7 mg/dL
Un valor alto indica: Acidosis metabólica, diabetes,
alcoholismo.
Valores bajos indican poco consumo de purinas, síndrome
de faconi.
COLESTEROL:
El cuerpo necesita un poco de colesterol para
funcionar adecuadamente; pero demasiado
colesterol puede obstruir las arterias y llevar a
cardiopatía.
Valor normal: Menor de 170mg/dl.
Valor Alto:Mayor de 200mg/dL
HDL:
lipoproteína de alta densidad y también
denominado colesterol "bueno".
Valor normal: >55 mg/dl hombre y
>65mg/dl mujer.
LDL:
lipoproteína de baja densidad y también se le denomina
colesterol "malo". Ellas transportan el colesterol ylos
triglicéridos en la sangre a diversas partes del cuerpo.
Valor normal: <130 mg/dl hombres y <70mg/dl mujeres,
los valores mayores a esto Pueden indicar o deberse a
arterioesclerosis.

52. ALBUMINA
Es la principal proteína del
suero y sus valores normales en g/100 ml están
comprendidos entre:
— 2,9 y 5,5 en recién nacidos.
— 3,8 y 5,5 en niños.
— 3,3 y 6,1 en hombres.
— 2,7 y 5,6 en mujeres.

53. ALBUMINA:
El examen de albúmina en suero mide la cantidad de
esta proteína en la parte líquida y transparente de la
sangre.
Valor normal: 3.9 a 5.0 mg/dL.
Sirve para descartar enfermedad hepática o renal.
Valores anormales Pueden indicar hepatitis, cirrosis o
ascitis.
FOSFATASA ALCALINA:
Es una proteína que se encuentra en todos los
tejidos corporales. Este examen se hace para
diagnosticar enfermedad del hígado y del hueso o
para ver si los tratamientos para dichas
enfermedades están funcionando.
Valor normal 44 a 147 UI/L.

54. EGO (Examen General de Orina)
Consiste en una serie de exámenes efectuados
sobre la orina, constituyendo uno de los métodos
más comunes de diagnóstico médico.
En el adulto normal , cerca de 1200mL de
sangre recorren los riñones cada minuto ,el
glomérulo recibe este flujo sanguíneo a
través de las arteriolas aferentes .
Una vez obtenido el ultra
filtrado pasa al espacio de
bowman y ahí a los túbulos
renales donde se lleva a cabo
la reabsorción y que se
caracteriza por ser selectiva.

55. Para el análisis de la orina se prefiere la primera muestra de
orina matinal.
ORINA
Color: Una
orina normal es
amarilla y
transparente ,
otros colores
indican una
enfermedad.
Olor: En
condiciones
normales la
orina presenta
un olor
característico.
Volumen: En
condiciones
Normales solo es
influido por la
ingesta de agua,
el adulto puede
orinar entre 600 a
1200mL por día.
PH: Es de 6,
pero puede
variar entre
4.5 a 8.

56. COLOR POSIBLE CAUSA
Pálido Orina diluida
Obscuro Fosfatos,uratos,Oxalatos y
contaminación fecal.
Blanquecino Leucocituria,lipiduria y quiluria
Amarillo-Naranja Orina concentrada o presencia
de bilirrubina
Amarillo-Verdoso Presencia de bilirrubina-
Biliverdina
Rojizo Hemoglobina ,eritrocituria o
contaminación menstrual.
Café-Negruzco Metahemoglobina ,Acido
Homogentisico y melanina.

57. Glucosuría: Presencia de cantidades
detectables de glucosa cuando los
valores de la glucosa en sangre superan
la capacidad de reabsorción tubular,
suele presentarse cundo se encuentra
por arriba de los 180 mg/dL.
Cetonas: La presencia de estas
sustancias en la orina se asocia a
diabetes mellitus descontrolada.
Hematuria: Es la presencia de un
numero anormal de células sanguíneas
en la orina.
Urobilinogeno: Deriva principalmente
de la bilirrubina transformada por
acción de bacterias intestinales .
Acido Úrico: Estos cristales se encuentran
en orinas con un ph acido(5- 5.5) y
pueden observarse en grandes
cantidades durante las quimioterapias y
en el síndrome de lesch-nyhan.
Electrolitos en orina: La determinación de
cloro se encuentra relacionada con la
determinación de sodio y está tiene
utilidad en estados de retención hídrica .

58. Sirven para controlar la cantidad de agua en el
cuerpo y la ácidez.

59. Agua corporal
total=50%-60%
del peso
orgánico
Volumen Intracelular (40%
del peso)
Volumen Extracelular (20%
del peso)
Volumen
Plasmático
Volumen
Intersticial
La concentración de solutos en
los líquidos corporales se conoce
como osmolalidad (mosm/kg)
En abundancia:
Na, HCO3 y Cl
En abundancia: K y
compuestos orgánicos
de fosfato.

60. Los solutos restringidos
a cada compartimiento
determina la osmolalidad
Tonicidad
La osmolalidad
plasmática normal oscila
entre 275 y 290
mosm/kg.
Para mantener un
equilibrio la ingesta de
agua y sodio debe
corresponder a su
Ingesta excresión
Sed,
disminución
del volumen
extracelular
Excreción
Hormona
antidiuretica,
embarazo.

61. Concentración normal
de Na= 135-145 mEq/L
Se asocia con la infusión o
retención en el espacio
extracelular de soluciones
isotónicas de glucosa,
manitol, sorbitol lo cual
ocasiona la expansión del
volumen extracelular
Con osmolalidad sérica
aumentada se debe al paso de
líquido libre del espacio
intracelular al extracelular, esto
ocurre en caso de
hiperglicemia.
Con osmolalidad sérica
disminuida o hipotónica
se divide en:
•Hipovolémica
•Normovolémica
•Hipervólemica

62. Sodio mayor: 145 mEq/L
Estimula la sed.
Hipovolémica
• Pérdida de
agua
mayormente
que de
sodio
Normovolémica
• Pérdida
exclusiva
de agua
Hipervolémica
• Ganancia
neta de
sodio.

63. 1. Es el catión de mayor
concentración en el
líquido intracelular (150
mEq/L).
2. Líquido extracelular 3-5
mEq/L.
Corporal Total= 40-50 mEq/Kg
Equilibrio
ácido-base
Niveles de
Insulina
Osmolalidad
Concentraci
ón de
glucosa

64. Incremento en la
concentración sérica
mayor ( 5 MeQ/l)
Resulta por un aumento en la liberación de
potasio por las células hacia el espacio
extracelular o una disminución de su excresión.
Seudohipercaliemia Elevación artificial por el uso prolongado del
torniquete en la punción venosa
Hipercalemia Fenomenos de
Redistribución
Acidosis
metabolica,
efecto de B
bloqueadores.
Hipercalemia
asociada a un
aumento de
potasio
Secundaria a un
aumento en la
ingesta o
liberación de
potasio
Defectos en el
eje renina-angiotensina-aldosterona

65. Potasio menos
3.5 mEq/L
Incremento
en la pérdida
(renal o no
renal)
Distribución
a las células
(acidosis
metabólica,
respuesta a
la insulina)
Disminución
de la ingesta

66. 1. Es el tercer ion más
abundante en el organismo.
2. 99% se encuentra en los
huesos y .03% en plasma
3. La concentración
plasmatica 8.5 y 10 mg/dl
4. 40% unido a la albumina y
60% difusible.
5. La concentración NORMAL
4.6 y 5.1 mg/dl

67. Reabsorción
renal
Efectos de
la hormona
paratiroidea
y vitamina
D3
Ciclo de
calcio
esquelético
Absorción
intestinal

68. Generada por la entrada de calcio al líquido
extracelular proveniente de los huesos, la absorción
inestinal y la disminución de la depuracióm renal.
Asociado a enfermedades malginas: la fuente de
calcio se encuentra en los huesos secundaria a
metástasis óseas con cavidad osteolítica.
Otras causas: Intoxicación por vitamina D3,
hipertiroidismo, administración de litio.

69. 1. Necesario medir el calcio libre
2. Más de .8mg/dl por cada 1g/dl por debajo 4g/dl en el nivel de albúmina
hipoparatiroidismo
Hipermagnesenia
Medicamentos
antineoplásicos
Insuficiencia
Sindrome de lisis
tumoral
Transfusión de sangre
Deficiencia de
vitamina D
renal

70. 60% se encuentra en hueso
39% en el espacio intracelular
1% extracelular
Concentración sérica
NORMAL: 1.3 y 2.2 mEq/L

71. Insuficiencia
Renal
Compuestos
que incluyen
amgnesio
Hipermagnese
mia

72. Hipomagnesemia
Mala absorción
intestinal
Desnutrición
Diuresis
osmótica
Aspiración
gástrica
Diarreas
prolongadas
Diuréticos
Aminoglicósidos
Trastornos del
alcoholismo

73. 102 - 109 meq/L (102 - 109 mmol/L)
Se encuentra en mayor concentración en la sangre y en
el líquido extracelular.
La mayor parte del tiempo, las concentraciones de
cloruro correlacionan con las de sodio, aumentando y
disminuyendo al mismo tiempo.
Sin embargo, cuando hay un desequilbrio ácido-base, la
concentración de cloruro en la sangre puede cambiar
independientemente de la concentración de sodio ya que
el cloruro actúa como tampón; ayuda a mantener la
neutralidad eléctrica a nivel celular entrando y saliendo de
las células cuando se requiere.

74. Intoxicación con
bromuro
Alcalosis
respiratoria
compensada
Acidosis
tubular
renal

75. Vómitos
Enfermedad de
Addison
Succión gàstrica
Hiperaldosterismo
Deshidratación
Alcalosis
Metabólica
Sudoración
excesiva
Quemaduras

76. BIBLIOGRAFIA
KENNETH MURPHY, P. T. (2008). Deteccion, medicion e
identificacion de anticuerpos, y su uso como instrumentos de
investigacion. En P. T. KENNETH MURPHY, INMUNOLOGIA DE
JANEWAY (págs. 751-753). mexico D.F: Mc Graw Hill.