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Tipos de
microscopios
electrónicos
Lic. Yuri Villalobos
SUMARIO
• Tipos de microscopios electrónicos
• Partes del microscopios electrónico
• Manipulación de los microscopios
• Cuidados generales
• Captura y análisis de imagen
• Usos y aplicación
• Preguntas
Tipos de microscopios electrónicos
• Los microscopios electrónicos son instrumentos que utilizan haces de electrones en lugar de luz visible para obtener imágenes de alta resolución de muestras. Hay varios tipos de microscopios electrónicos, cada uno con sus propias características y aplicaciones específicas. Aquí
hay una breve descripción de algunos de los tipos más comunes:
• Microscopio Electrónico de Transmisión (TEM):
• Este microscopio utiliza un haz de electrones que atraviesa una muestra extremadamente delgada.
• Los electrones transmitidos son recogidos para formar una imagen.
• Proporciona detalles a nivel subcelular y estructuras internas de las células.
• Microscopio Electrónico de Barrido (SEM):
• En lugar de atravesar la muestra, el haz de electrones se escanea sobre la superficie.
• Los electrones retrodispersados se recogen para crear una imagen tridimensional de la muestra.
• Ofrece una excelente profundidad de campo y es útil para observar la topografía de la superficie.
• Microscopio Electrónico de Barrido de Transmisión (STEM):
• Combina elementos del TEM y el SEM.
• Utiliza un haz de electrones transmitidos para obtener imágenes de alta resolución de la muestra ultrafina, similar al TEM, pero también puede proporcionar información sobre la composición química.
• Microscopio Electrónico de Reflectancia (REM):
• Utilizado para estudiar materiales reflectantes.
• Se basa en la reflexión de electrones en lugar de su transmisión a través de la muestra.
• Microscopio Crioelectrónico:
• Se utiliza para observar muestras biológicas y materiales sensibles al calor.
• La muestra se congela rápidamente y se observa en condiciones de baja temperatura.
• Microscopio Electrónico Holográfico (EHHM):
• Utiliza la holografía electrónica para obtener información tridimensional de las muestras.
• Permite visualizar la estructura tridimensional de las partículas y objetos.
• Microscopio Electrónico de Transmisión de Energía (E-TEM):
• Permite estudiar procesos dinámicos en tiempo real a nivel atómico y subatómico.
• Combina la capacidad de un TEM con la capacidad de aplicar cambios controlados en la muestra durante la observación.
• Cada tipo de microscopio electrónico tiene sus propias ventajas y limitaciones, y la elección del tipo adecuado depende de la naturaleza específica de la muestra y de los detalles que se deseen observar. Estos microscopios han sido fundamentales en el avance de la investigación
en diversas disciplinas, incluyendo la biología, la física, la química y la nanotecnología.
Partes del microscopios electrónico
•
Los microscopios electrónicos, tanto de transmisión (TEM) como de barrido (SEM), constan de varias partes esenciales que trabajan conjuntamente para producir imágenes detalladas a nivel microscópico. A continuación, se describen las partes comunes de un microscopio
electrónico:
• Fuente de Electrones:
• En un TEM y un SEM, la fuente de electrones emite un haz de electrones. En el TEM, este haz atraviesa la muestra, mientras que en el SEM, se escanea sobre la superficie de la muestra.
• Columna Electrónica:
• La columna electrónica dirige y enfoca el haz de electrones hacia la muestra. Incluye elementos como la lente condensadora y la apertura de condensación.
• Muestras:
• Las muestras para un TEM deben ser extremadamente delgadas, ya que los electrones deben atravesarlas. En un SEM, las muestras pueden ser más gruesas, ya que los electrones solo escanean la superficie.
• Portamuestras:
• Un portamuestras sostiene y posiciona la muestra en la posición adecuada para la observación.
• Bobina de Enfoque:
• Ayuda a ajustar y enfocar el haz de electrones para lograr una imagen nítida.
• Lentes Electrónicas:
• En lugar de lentes ópticas, los microscopios electrónicos utilizan lentes magnéticas para enfocar el haz de electrones.
• Apertura de Objetivo:
• En un TEM, esta apertura determina el ángulo bajo el cual los electrones pasan a través de la muestra.
• Sistema de Enfriamiento (en el caso de microscopios crioelectrónicos):
• Permite observar muestras a temperaturas muy bajas para preservar estructuras biológicas.
• Detector de Electrones:
• En un SEM, el detector de electrones recoge los electrones retrodispersados para crear una imagen de la superficie.
• Pantalla o Cámara de Visualización:
• Muestra la imagen resultante para que el usuario la pueda observar. En muchos casos, las imágenes se capturan digitalmente para su análisis posterior.
• Sistema de Enfoque Automático (en algunos modelos):
• Ayuda a mantener el enfoque durante la observación, especialmente en el caso de muestras más gruesas o en movimientos dinámicos.
• Estas partes trabajan en conjunto para generar imágenes de alta resolución que permiten a los científicos y investigadores estudiar la estructura y composición de las muestras a niveles microscópicos. La tecnología y los componentes pueden variar según el tipo específico de
microscopio electrónico.
Manipulación de los microscopios
•
La manipulación adecuada de los microscopios es esencial para obtener imágenes claras y precisas. Aquí hay una guía general sobre cómo manipular un microscopio de luz, que es el tipo más común, y algunos consejos adicionales para microscopios electrónicos:
• Microscopio de Luz:
• Encendido y Ajuste Básico:
• Encendido:
• Enciende la fuente de luz.
• Ajuste de la Intensidad de Luz:
• Ajusta la intensidad de la luz para obtener una iluminación adecuada.
• Colocación de la Muestra:
• Coloca la muestra en el platina del microscopio y sujétala con los clips.
• Ajuste del Objetivo de Baja Potencia:
• Gira el objetivo de baja potencia (generalmente 4x) en posición.
• Enfoque Grueso:
• Utiliza el ajuste grueso para acercar la lente objetiva a la muestra.
• Enfoque Fino:
• Refina el enfoque utilizando el ajuste fino.
• Cambio de Objetivos:
• Gira la Torreta de Objetivos:
• Gira la torreta para cambiar a objetivos de mayor potencia.
• Ajuste de Enfoque:
• Reajusta el enfoque con el ajuste fino después de cambiar el objetivo.
• Ajuste de la Platina y Desplazamiento de la Muestra:
• Ajuste de la Platina:
• Utiliza los controles de la platina para mover la muestra en la dirección deseada.
• Microscopio Electrónico:
• La manipulación de un microscopio electrónico puede variar según el tipo específico, ya sea TEM, SEM, o algún otro. Sin embargo, algunos principios generales incluyen:
• Preparación de la Muestra:
• Las muestras para microscopios electrónicos requieren preparación especial, como la fijación, deshidratación y recubrimiento con metales conductores.
• Carga de la Muestra:
• Coloca cuidadosamente la muestra en el portamuestras y asegúrala según las especificaciones del microscopio.
Cuidados generales
• El cuidado adecuado de los microscopios es esencial para garantizar su funcionamiento óptimo y prolongar su vida útil. Aquí tienes algunas pautas generales para el cuidado de los microscopios, tanto de luz como electrónicos:
• Microscopio de Luz:
• Manejo con Cuidado:
• Manipula el microscopio con suavidad para evitar golpes y caídas.
• Limpieza Regular:
• Limpia las lentes objetivas y oculares con papel de lente y líquidos de limpieza específicos para microscopios.
• Evitar Toques Directos:
• Evita tocar las lentes con las manos. Usa pinzas o papel de lente para manipularlas.
• Cuidado de la Lámpara:
• Apaga la lámpara cuando no esté en uso para evitar el calentamiento excesivo y prolongar la vida de la bombilla.
• Almacenamiento AdeCuado:
• Guarda el microscopio en un lugar seco y libre de polvo cuando no esté en uso.
• Ajuste de Enfoque:
• Ajusta primero el enfoque utilizando la lente objetiva de menor potencia.
• Apagado Seguro:
• Apaga el microscopio antes de desconectarlo de la fuente de alimentación.
• Microscopio Electrónico:
• Protección de la Muestra:
• Maneja las muestras con cuidado durante la preparación y carga en el microscopio electrónico.
• Mantenimiento del Vacío:
• Si trabajas con un microscopio electrónico de transmisión (TEM), asegúrate de seguir los procedimientos adecuados para mantener el vacío.
• Limpieza Específica:
• Limpia las partes externas del microscopio electrónico utilizando métodos y materiales recomendados por el fabricante.
• Manipulación de la Columna Electrónica:
• Evita ajustar manualmente la columna electrónica sin conocimiento y autorización, ya que esto puede afectar su alineación.
• Apagado Correcto:
• Apaga el microscopio electrónico según las instrucciones específicas del fabricante.
• Seguridad con Electrones:
• Si trabajas con un TEM o SEM, sigue las normas de seguridad para la manipulación de electrones de alta energía.
• Consejos Generales:
Captura y análisis de imagen
•
La captura y análisis de imágenes son partes fundamentales en el uso de microscopios, ya que permiten documentar y estudiar detalladamente las muestras observadas. A continuación, se describen los pasos generales para la captura y análisis de imágenes utilizando un
microscopio:
• Captura de Imágenes:
• Ajuste de la Iluminación:
• Asegúrate de que la iluminación sea adecuada para la muestra. Ajusta la intensidad según sea necesario.
• Enfoque:
• Utiliza los controles de enfoque para obtener una imagen clara y nítida.
• Selección del Objetivo:
• Elije el objetivo adecuado según la magnificación deseada.
• Alineación de la Muestra:
• Asegúrate de que la muestra esté correctamente alineada en el campo de visión.
• Ajuste de Contraste y Brillo:
• Realiza ajustes en el contraste y brillo para resaltar las características de la muestra.
• Utilización de Filtros (si es necesario):
• Aplica filtros específicos para realzar ciertos detalles, como los filtros de contraste de fase o polarización.
• Uso de Retículas (si es necesario):
• Si se requiere medición, considera el uso de retículas en el ocular o en el software de captura para escalas de referencia.
• Captura de Imágenes:
• Utiliza la cámara incorporada o conecta una cámara digital al ocular para capturar imágenes de la muestra.
• Guardado de Imágenes:
• Guarda las imágenes en un formato compatible con el software de análisis posterior.
• Análisis de Imágenes:
• Importación de Imágenes:
• Importa las imágenes capturadas al software de análisis de imágenes.
• Calibración:
• Calibra el software utilizando las escalas de referencia para realizar mediciones precisas.
• Mediciones Dimensionales:
• Realiza mediciones de dimensiones utilizando las herramientas de medición del software.
• Análisis de Color:
• Si la imagen es a color, realiza análisis de color para identificar y cuantificar diferentes componentes.
Usos y aplicación
• Los microscopios tienen una amplia variedad de usos y aplicaciones en diversos campos científicos, médicos, industriales y de investigación. Aquí se describen algunos de los principales usos y aplicaciones de los microscopios:
• 1. Biología y Medicina:
• Observación Celular: Los microscopios permiten estudiar la estructura y función de células y tejidos biológicos.
• Patología: Se utilizan para el diagnóstico de enfermedades a través del estudio de tejidos patológicos.
• Microbiología: Facilitan la observación de microorganismos, como bacterias, virus y hongos.
• 2. Investigación Científica:
• Investigación en Biomedicina: Ayudan a comprender procesos biológicos y estudiar enfermedades a nivel molecular.
• Nanotecnología: Se utilizan para visualizar y manipular materiales a escala nanométrica.
• 3. **Industria:
• Control de Calidad: En la fabricación para inspeccionar la calidad de productos, como la electrónica y materiales.
• Metalurgia: Para analizar estructuras metálicas y examinar la composición de materiales.
• 4. Ciencias de los Materiales:
• Análisis de Materiales: Se emplean para estudiar la estructura y propiedades de diversos materiales.
• 5. Educación:
• Enseñanza: Utilizados en aulas para la observación práctica de estructuras microscópicas.
• 6. Astronomía:
• Microscopios Electrónicos de Barrido (SEM): Pueden utilizarse para estudiar superficies de meteoritos y partículas cósmicas.
• 7. Microscopía Electrónica en Ciencias de la Vida:
• Cryo-EM: Permite estudiar estructuras biológicas a nivel molecular, como proteínas y complejos celulares.
• 8. Entomología:
• Estudio de Insectos: Se utilizan para observar estructuras detalladas de insectos y otros artrópodos.
• 9. Cristalografía:
• Estudio de Estructuras Cristalinas: Permite visualizar la disposición atómica en cristales.
• 10. Investigación Ambiental:

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  • 2. SUMARIO • Tipos de microscopios electrónicos • Partes del microscopios electrónico • Manipulación de los microscopios • Cuidados generales • Captura y análisis de imagen • Usos y aplicación • Preguntas
  • 3.
  • 4. Tipos de microscopios electrónicos • Los microscopios electrónicos son instrumentos que utilizan haces de electrones en lugar de luz visible para obtener imágenes de alta resolución de muestras. Hay varios tipos de microscopios electrónicos, cada uno con sus propias características y aplicaciones específicas. Aquí hay una breve descripción de algunos de los tipos más comunes: • Microscopio Electrónico de Transmisión (TEM): • Este microscopio utiliza un haz de electrones que atraviesa una muestra extremadamente delgada. • Los electrones transmitidos son recogidos para formar una imagen. • Proporciona detalles a nivel subcelular y estructuras internas de las células. • Microscopio Electrónico de Barrido (SEM): • En lugar de atravesar la muestra, el haz de electrones se escanea sobre la superficie. • Los electrones retrodispersados se recogen para crear una imagen tridimensional de la muestra. • Ofrece una excelente profundidad de campo y es útil para observar la topografía de la superficie. • Microscopio Electrónico de Barrido de Transmisión (STEM): • Combina elementos del TEM y el SEM. • Utiliza un haz de electrones transmitidos para obtener imágenes de alta resolución de la muestra ultrafina, similar al TEM, pero también puede proporcionar información sobre la composición química. • Microscopio Electrónico de Reflectancia (REM): • Utilizado para estudiar materiales reflectantes. • Se basa en la reflexión de electrones en lugar de su transmisión a través de la muestra. • Microscopio Crioelectrónico: • Se utiliza para observar muestras biológicas y materiales sensibles al calor. • La muestra se congela rápidamente y se observa en condiciones de baja temperatura. • Microscopio Electrónico Holográfico (EHHM): • Utiliza la holografía electrónica para obtener información tridimensional de las muestras. • Permite visualizar la estructura tridimensional de las partículas y objetos. • Microscopio Electrónico de Transmisión de Energía (E-TEM): • Permite estudiar procesos dinámicos en tiempo real a nivel atómico y subatómico. • Combina la capacidad de un TEM con la capacidad de aplicar cambios controlados en la muestra durante la observación. • Cada tipo de microscopio electrónico tiene sus propias ventajas y limitaciones, y la elección del tipo adecuado depende de la naturaleza específica de la muestra y de los detalles que se deseen observar. Estos microscopios han sido fundamentales en el avance de la investigación en diversas disciplinas, incluyendo la biología, la física, la química y la nanotecnología.
  • 5. Partes del microscopios electrónico • Los microscopios electrónicos, tanto de transmisión (TEM) como de barrido (SEM), constan de varias partes esenciales que trabajan conjuntamente para producir imágenes detalladas a nivel microscópico. A continuación, se describen las partes comunes de un microscopio electrónico: • Fuente de Electrones: • En un TEM y un SEM, la fuente de electrones emite un haz de electrones. En el TEM, este haz atraviesa la muestra, mientras que en el SEM, se escanea sobre la superficie de la muestra. • Columna Electrónica: • La columna electrónica dirige y enfoca el haz de electrones hacia la muestra. Incluye elementos como la lente condensadora y la apertura de condensación. • Muestras: • Las muestras para un TEM deben ser extremadamente delgadas, ya que los electrones deben atravesarlas. En un SEM, las muestras pueden ser más gruesas, ya que los electrones solo escanean la superficie. • Portamuestras: • Un portamuestras sostiene y posiciona la muestra en la posición adecuada para la observación. • Bobina de Enfoque: • Ayuda a ajustar y enfocar el haz de electrones para lograr una imagen nítida. • Lentes Electrónicas: • En lugar de lentes ópticas, los microscopios electrónicos utilizan lentes magnéticas para enfocar el haz de electrones. • Apertura de Objetivo: • En un TEM, esta apertura determina el ángulo bajo el cual los electrones pasan a través de la muestra. • Sistema de Enfriamiento (en el caso de microscopios crioelectrónicos): • Permite observar muestras a temperaturas muy bajas para preservar estructuras biológicas. • Detector de Electrones: • En un SEM, el detector de electrones recoge los electrones retrodispersados para crear una imagen de la superficie. • Pantalla o Cámara de Visualización: • Muestra la imagen resultante para que el usuario la pueda observar. En muchos casos, las imágenes se capturan digitalmente para su análisis posterior. • Sistema de Enfoque Automático (en algunos modelos): • Ayuda a mantener el enfoque durante la observación, especialmente en el caso de muestras más gruesas o en movimientos dinámicos. • Estas partes trabajan en conjunto para generar imágenes de alta resolución que permiten a los científicos y investigadores estudiar la estructura y composición de las muestras a niveles microscópicos. La tecnología y los componentes pueden variar según el tipo específico de microscopio electrónico.
  • 6. Manipulación de los microscopios • La manipulación adecuada de los microscopios es esencial para obtener imágenes claras y precisas. Aquí hay una guía general sobre cómo manipular un microscopio de luz, que es el tipo más común, y algunos consejos adicionales para microscopios electrónicos: • Microscopio de Luz: • Encendido y Ajuste Básico: • Encendido: • Enciende la fuente de luz. • Ajuste de la Intensidad de Luz: • Ajusta la intensidad de la luz para obtener una iluminación adecuada. • Colocación de la Muestra: • Coloca la muestra en el platina del microscopio y sujétala con los clips. • Ajuste del Objetivo de Baja Potencia: • Gira el objetivo de baja potencia (generalmente 4x) en posición. • Enfoque Grueso: • Utiliza el ajuste grueso para acercar la lente objetiva a la muestra. • Enfoque Fino: • Refina el enfoque utilizando el ajuste fino. • Cambio de Objetivos: • Gira la Torreta de Objetivos: • Gira la torreta para cambiar a objetivos de mayor potencia. • Ajuste de Enfoque: • Reajusta el enfoque con el ajuste fino después de cambiar el objetivo. • Ajuste de la Platina y Desplazamiento de la Muestra: • Ajuste de la Platina: • Utiliza los controles de la platina para mover la muestra en la dirección deseada. • Microscopio Electrónico: • La manipulación de un microscopio electrónico puede variar según el tipo específico, ya sea TEM, SEM, o algún otro. Sin embargo, algunos principios generales incluyen: • Preparación de la Muestra: • Las muestras para microscopios electrónicos requieren preparación especial, como la fijación, deshidratación y recubrimiento con metales conductores. • Carga de la Muestra: • Coloca cuidadosamente la muestra en el portamuestras y asegúrala según las especificaciones del microscopio.
  • 7. Cuidados generales • El cuidado adecuado de los microscopios es esencial para garantizar su funcionamiento óptimo y prolongar su vida útil. Aquí tienes algunas pautas generales para el cuidado de los microscopios, tanto de luz como electrónicos: • Microscopio de Luz: • Manejo con Cuidado: • Manipula el microscopio con suavidad para evitar golpes y caídas. • Limpieza Regular: • Limpia las lentes objetivas y oculares con papel de lente y líquidos de limpieza específicos para microscopios. • Evitar Toques Directos: • Evita tocar las lentes con las manos. Usa pinzas o papel de lente para manipularlas. • Cuidado de la Lámpara: • Apaga la lámpara cuando no esté en uso para evitar el calentamiento excesivo y prolongar la vida de la bombilla. • Almacenamiento AdeCuado: • Guarda el microscopio en un lugar seco y libre de polvo cuando no esté en uso. • Ajuste de Enfoque: • Ajusta primero el enfoque utilizando la lente objetiva de menor potencia. • Apagado Seguro: • Apaga el microscopio antes de desconectarlo de la fuente de alimentación. • Microscopio Electrónico: • Protección de la Muestra: • Maneja las muestras con cuidado durante la preparación y carga en el microscopio electrónico. • Mantenimiento del Vacío: • Si trabajas con un microscopio electrónico de transmisión (TEM), asegúrate de seguir los procedimientos adecuados para mantener el vacío. • Limpieza Específica: • Limpia las partes externas del microscopio electrónico utilizando métodos y materiales recomendados por el fabricante. • Manipulación de la Columna Electrónica: • Evita ajustar manualmente la columna electrónica sin conocimiento y autorización, ya que esto puede afectar su alineación. • Apagado Correcto: • Apaga el microscopio electrónico según las instrucciones específicas del fabricante. • Seguridad con Electrones: • Si trabajas con un TEM o SEM, sigue las normas de seguridad para la manipulación de electrones de alta energía. • Consejos Generales:
  • 8. Captura y análisis de imagen • La captura y análisis de imágenes son partes fundamentales en el uso de microscopios, ya que permiten documentar y estudiar detalladamente las muestras observadas. A continuación, se describen los pasos generales para la captura y análisis de imágenes utilizando un microscopio: • Captura de Imágenes: • Ajuste de la Iluminación: • Asegúrate de que la iluminación sea adecuada para la muestra. Ajusta la intensidad según sea necesario. • Enfoque: • Utiliza los controles de enfoque para obtener una imagen clara y nítida. • Selección del Objetivo: • Elije el objetivo adecuado según la magnificación deseada. • Alineación de la Muestra: • Asegúrate de que la muestra esté correctamente alineada en el campo de visión. • Ajuste de Contraste y Brillo: • Realiza ajustes en el contraste y brillo para resaltar las características de la muestra. • Utilización de Filtros (si es necesario): • Aplica filtros específicos para realzar ciertos detalles, como los filtros de contraste de fase o polarización. • Uso de Retículas (si es necesario): • Si se requiere medición, considera el uso de retículas en el ocular o en el software de captura para escalas de referencia. • Captura de Imágenes: • Utiliza la cámara incorporada o conecta una cámara digital al ocular para capturar imágenes de la muestra. • Guardado de Imágenes: • Guarda las imágenes en un formato compatible con el software de análisis posterior. • Análisis de Imágenes: • Importación de Imágenes: • Importa las imágenes capturadas al software de análisis de imágenes. • Calibración: • Calibra el software utilizando las escalas de referencia para realizar mediciones precisas. • Mediciones Dimensionales: • Realiza mediciones de dimensiones utilizando las herramientas de medición del software. • Análisis de Color: • Si la imagen es a color, realiza análisis de color para identificar y cuantificar diferentes componentes.
  • 9. Usos y aplicación • Los microscopios tienen una amplia variedad de usos y aplicaciones en diversos campos científicos, médicos, industriales y de investigación. Aquí se describen algunos de los principales usos y aplicaciones de los microscopios: • 1. Biología y Medicina: • Observación Celular: Los microscopios permiten estudiar la estructura y función de células y tejidos biológicos. • Patología: Se utilizan para el diagnóstico de enfermedades a través del estudio de tejidos patológicos. • Microbiología: Facilitan la observación de microorganismos, como bacterias, virus y hongos. • 2. Investigación Científica: • Investigación en Biomedicina: Ayudan a comprender procesos biológicos y estudiar enfermedades a nivel molecular. • Nanotecnología: Se utilizan para visualizar y manipular materiales a escala nanométrica. • 3. **Industria: • Control de Calidad: En la fabricación para inspeccionar la calidad de productos, como la electrónica y materiales. • Metalurgia: Para analizar estructuras metálicas y examinar la composición de materiales. • 4. Ciencias de los Materiales: • Análisis de Materiales: Se emplean para estudiar la estructura y propiedades de diversos materiales. • 5. Educación: • Enseñanza: Utilizados en aulas para la observación práctica de estructuras microscópicas. • 6. Astronomía: • Microscopios Electrónicos de Barrido (SEM): Pueden utilizarse para estudiar superficies de meteoritos y partículas cósmicas. • 7. Microscopía Electrónica en Ciencias de la Vida: • Cryo-EM: Permite estudiar estructuras biológicas a nivel molecular, como proteínas y complejos celulares. • 8. Entomología: • Estudio de Insectos: Se utilizan para observar estructuras detalladas de insectos y otros artrópodos. • 9. Cristalografía: • Estudio de Estructuras Cristalinas: Permite visualizar la disposición atómica en cristales. • 10. Investigación Ambiental: