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Unidad III:
Pericias Químicas de Manchas de Sangre
Parte 2
28/03/2015 1
Al buscar evidencia de sangre se debe
tener en mente las siguientes
interrogantes:
• ¿Es sangre?
• ¿Es humana o animal?
• ¿A cuál clasificación pertenece?
• ¿Cuál es la edad de la mancha?
• ¿De qué parte del cuerpo es?
28/03/2015 2
4. Si se trata de sangre o no
• Métodos de Screening
Reacciones catalíticas u oxidásicas
a) H2O2 u O activo
b) Fenolftaleína
c) Bencidina
d) Verde de malaquita
28/03/2015 3
a)H2O2 u O activo
Basadas en la capacidad potencial que
posee el grupo “hemo” de la hemoglobina
de ejercer actividad peroxidasa.
Aportando al sistema reaccionante
H2O2, se induce el desprendimiento de
O2 por descomposición del peróxido. Se
observa desprendimiento de O2, o
burbujeo
H2O2 + Hemo H2O + O
28/03/2015 4
Grupo Hemo de la Hemoglobina
28/03/2015 5
Reacciones catalíticas u oxidásicas:
Basadas en la capacidad potencial que
posee el grupo “hemo” de la hemoglobina
de ejercer actividad peroxidasa.
Aportando al sistema reaccionante H2O2,
se induce el desprendimiento de O2 por
descomposición del peróxido, el cual actúa
sobre un sustrato orgánico reducido
(bencidina, fenolftaleína, luminol, etc.)
transformándolo en su forma oxidada
cromática.
H2O2 + Hemo H2O + O
28/03/2015 6
Ensayos Preliminares
H2O2 Reactivo oxidado
Peroxidasa
Color o luminiscencia
H2O + O Reactivo reducido
Reacciones catalíticas u oxidásicas
28/03/2015 7
b) fenolftaleína:
Test de Kastle-Meyer
Fenolf: acido débil que pierde cationes en
solución.
La molécula de fenolftaleína es incolora, en
cambio el anión derivado es de color rosa.
fenolftaleína HO- fenolftalina- (rosa)
La fenolftaleína es un indicador de pH( 8,2-10)
que en soluciones ácidas permanece incoloro,
pero en presencia de bases se torna rosa o
violeta
28/03/2015 8
2. fenolftaleína:
Fenolftaleína= 2 gr
KOH= 20 gr
Zn(polvo)= 20 gr
H2Od= 100 ml
muestra reactivo H2O2
(+)
(-)
reactivo
28/03/2015 9
2. fenolftaleína:
También se puede usar perborato de
sodio= 10 ml Rvo + 0,14 gr de PBNa
Falsos positivos: Cu
28/03/2015 10
3. Bencidina
Ensayo de Adler:
Solución saturada de Bencidina en medio
acético ó etílico, (de reciente preparación).
Bencidina + H2O2 azul de bencidina
El uso de este reactivo está casi
totalmente descartado debido a sus
características cancerígenas.
hemo
28/03/2015 11
3. Bencidina
muestra 3 rvo
3 H2O2
(+)
(-)
28/03/2015 12
5. Verde de Malaquita
Ensayo de Pierre Medeinger
Verde de Malaquita= 1g
AcAc glacial = 100ml
H2O d= 150ml
reactivo
+
H2O2
(+)
(-)
28/03/2015 13
6. Piramidón
• Ensayo de Thévenon- Rolland
reactivo Piramidón = 5 g
EtOH csp 100 mlmuestra
reactivo
AcAcg H2O2
(+)
(+)
28/03/2015 14
En Criminalística.net se hace
referencia a una prueba de campo
que ayuda al investigador a
identificar si la mancha es de sangre
y a conservar intacta la evidencia
para entregarla al laboratorio.
El producto químico para la identificación
se conoce como Hemident.
28/03/2015 15
28/03/2015 16
28/03/2015 17
Para recoger muestras de la sangre del
sospechoso, la misma se extrae y se
deposita en tubos de ensayo que
contienen anticoagulantes. Esto es
necesario para compararla con la
encontrada en la escena del crimen.
• Todo esto es función del técnico del
laboratorio.
28/03/2015 18
1. Ensayo del Luminol
28/03/2015 19
1. Ensayo del Luminol
Esta pericia es altamente sensible
a la presencia de manchas que han
sido limpiadas.
También se emplea para visualizar
huellas sanguinolentas de zapatos
dejadas en la escena del delito.
28/03/2015 20
1. Ensayo del Luminol
Se aplica por aspersión sobre la zona
donde se cree puede existir un rastro
de sangre, de donde viene su principal
ventaja: se puede aplicar en extensas
superficies, detectando sangre hasta a
nivel de trazas.
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  • 1. Unidad III: Pericias Químicas de Manchas de Sangre Parte 2 28/03/2015 1
  • 2. Al buscar evidencia de sangre se debe tener en mente las siguientes interrogantes: • ¿Es sangre? • ¿Es humana o animal? • ¿A cuál clasificación pertenece? • ¿Cuál es la edad de la mancha? • ¿De qué parte del cuerpo es? 28/03/2015 2
  • 3. 4. Si se trata de sangre o no • Métodos de Screening Reacciones catalíticas u oxidásicas a) H2O2 u O activo b) Fenolftaleína c) Bencidina d) Verde de malaquita 28/03/2015 3
  • 4. a)H2O2 u O activo Basadas en la capacidad potencial que posee el grupo “hemo” de la hemoglobina de ejercer actividad peroxidasa. Aportando al sistema reaccionante H2O2, se induce el desprendimiento de O2 por descomposición del peróxido. Se observa desprendimiento de O2, o burbujeo H2O2 + Hemo H2O + O 28/03/2015 4
  • 5. Grupo Hemo de la Hemoglobina 28/03/2015 5
  • 6. Reacciones catalíticas u oxidásicas: Basadas en la capacidad potencial que posee el grupo “hemo” de la hemoglobina de ejercer actividad peroxidasa. Aportando al sistema reaccionante H2O2, se induce el desprendimiento de O2 por descomposición del peróxido, el cual actúa sobre un sustrato orgánico reducido (bencidina, fenolftaleína, luminol, etc.) transformándolo en su forma oxidada cromática. H2O2 + Hemo H2O + O 28/03/2015 6
  • 7. Ensayos Preliminares H2O2 Reactivo oxidado Peroxidasa Color o luminiscencia H2O + O Reactivo reducido Reacciones catalíticas u oxidásicas 28/03/2015 7
  • 8. b) fenolftaleína: Test de Kastle-Meyer Fenolf: acido débil que pierde cationes en solución. La molécula de fenolftaleína es incolora, en cambio el anión derivado es de color rosa. fenolftaleína HO- fenolftalina- (rosa) La fenolftaleína es un indicador de pH( 8,2-10) que en soluciones ácidas permanece incoloro, pero en presencia de bases se torna rosa o violeta 28/03/2015 8
  • 9. 2. fenolftaleína: Fenolftaleína= 2 gr KOH= 20 gr Zn(polvo)= 20 gr H2Od= 100 ml muestra reactivo H2O2 (+) (-) reactivo 28/03/2015 9
  • 10. 2. fenolftaleína: También se puede usar perborato de sodio= 10 ml Rvo + 0,14 gr de PBNa Falsos positivos: Cu 28/03/2015 10
  • 11. 3. Bencidina Ensayo de Adler: Solución saturada de Bencidina en medio acético ó etílico, (de reciente preparación). Bencidina + H2O2 azul de bencidina El uso de este reactivo está casi totalmente descartado debido a sus características cancerígenas. hemo 28/03/2015 11
  • 12. 3. Bencidina muestra 3 rvo 3 H2O2 (+) (-) 28/03/2015 12
  • 13. 5. Verde de Malaquita Ensayo de Pierre Medeinger Verde de Malaquita= 1g AcAc glacial = 100ml H2O d= 150ml reactivo + H2O2 (+) (-) 28/03/2015 13
  • 14. 6. Piramidón • Ensayo de Thévenon- Rolland reactivo Piramidón = 5 g EtOH csp 100 mlmuestra reactivo AcAcg H2O2 (+) (+) 28/03/2015 14
  • 15. En Criminalística.net se hace referencia a una prueba de campo que ayuda al investigador a identificar si la mancha es de sangre y a conservar intacta la evidencia para entregarla al laboratorio. El producto químico para la identificación se conoce como Hemident. 28/03/2015 15
  • 18. Para recoger muestras de la sangre del sospechoso, la misma se extrae y se deposita en tubos de ensayo que contienen anticoagulantes. Esto es necesario para compararla con la encontrada en la escena del crimen. • Todo esto es función del técnico del laboratorio. 28/03/2015 18
  • 19. 1. Ensayo del Luminol 28/03/2015 19
  • 20. 1. Ensayo del Luminol Esta pericia es altamente sensible a la presencia de manchas que han sido limpiadas. También se emplea para visualizar huellas sanguinolentas de zapatos dejadas en la escena del delito. 28/03/2015 20
  • 21. 1. Ensayo del Luminol Se aplica por aspersión sobre la zona donde se cree puede existir un rastro de sangre, de donde viene su principal ventaja: se puede aplicar en extensas superficies, detectando sangre hasta a nivel de trazas. 28/03/2015 21