3. El azul de metileno se sintetizó originalmente en 1876 como un
tinte a base de anilina para la industria textil (Berneth, 2008),
pero científicos como Robert Koch y Paul Ehrlich se dieron
cuenta rápidamente de su potencial para usarlo como tinción
en microscopía.
La observación de la tinción selectiva e inactivación de especies
microbianas condujo a hacer pruebas con tintes a base de
anilina contra enfermedades tropicales. El azul de metileno fue
el primer compuesto de este tipo que se administró a humanos,
y se demostró que era efectivo en el tratamiento de la malaria.
El azul de metileno también fue el primer compuesto sintético
usado como antiséptico en la terapia clínica, y el primer
colorante antiséptico que se usó terapéuticamente. De hecho, el
uso del azul de metileno y sus derivados fue generalizado antes
del advenimiento de las sulfonamidas y la penicilina
HISTORIA.
4. Es la búsqueda de leucocitos polimorfonucleares y
mononucleares en una muestra líquida coloreada
con azul metileno lo que permite identificar si se
trata de un proceso viral o bacteriano.
PROPOSITO.
5. 5gr. de heces frescas y líquidas, instruir al paciente
sobre la forma de colectar la muestra.
MUESTRA REQUERIDA.
6. - Lámina portaobjeto.
- Aplicadores de madera.
- Aceite de inmersión.
- Papel filtro.
- Embudo.
- Bandeja o soporte de coloración.
- Colorante de azul metileno 0.1%.
- Guantes descartables.
- Marcador de vidrio.
- Papel toalla.
- Fósforos.
- Papel lente.
MATERIALES Y REACTIVOS.
9. - Filtrar el colorante antes de utilizar.
- Identificar el portaobjeto a utilizar.
- Realizar el extendido de muestra en las dos terceras partes de la
lámina.
- Dejar secar a temperatura ambiente.
- Fijar al calor pasándolo rápidamente sobre la llama de un mechero
tres veces en forma
horizontal.
- Cubrir la lámina con azul de metileno de 30 a 60 segundos.
- Eliminar el azúl de metileno tomando el portaobjeto por el
extremo numerado inclinándolo
hacia delante, y lavar dejando caer una corriente de agua a baja
presión sobre la parte en
que no hay extendido, la que escurrirá suavemente sobre la película.
- Dejar secar a temperatura ambiente.
- Observar al microscopio con objetivo de inmersión 100x.
- Contar 100 células blancas o leucocitos diferenciando los
polimorfonucleares de los
mononucleares.
PROCEDIMIENTO.
10. - Extendidos gruesos.
- Fijación con excesivo calor.
- Láminas sucias o grasosas.
- Arrastrar la prepración con un lavado brusco
FUENTES DE ERROR.
11. Reportar el porcentaje de leucocitos encontrados con el
predominio del que tenga mayor
porcentaje.
Polimorfonucleares ................................... por ciento.
Mononucleares .................................. por ciento.
Interpretación:
Predominio de polimorfonucleares se asume que existe un
proceso infeccioso de origen
bacteriano.
Predominio de Mononucleares se asume que el proceso
infeccioso es de origen viral.
FORMA DE REPORTE.
13. El Sudán III es un tinte diazol del tipo lisocromo
Utilizado para el reconocimiento de lípidos, porque es
insoluble en agua y en cambio es soluble en las grasas.
Se basa en el método de Drummey para la detección
cualitativa de grasas neutras (triglicéridos). Es una
técnica utilizada generalmente para demostrar la
presencia de triglicéridos u otros lípidos y
lipoproteínas mediante una tinción.
Cuando se efectúa el procedimiento de búsqueda de
lípidos: tiñe las grasas de color rojo-anaranjado
SUDAN III
14. Cuando se efectúa el procedimiento de búsqueda de
lípidos: tiñe las grasas de color rojo-anaranjado
15. La tincion de heces con Sudan III es una prueba
cualitativa, sencilla, rápida y muy económica para
la detección de esteatorrea.
Cuando se efectúa adecuadamente presenta
unasensibilidad del 80% - 90% para detectar la
presencia de esteatorrea clínicamente significativa.
En las heces de las personas normales es posible
observar siempre una pequeña cantidad de grasa,
que es de origen endógeno, formada por las
bacterias y las células epiteliales exfoliadas.
VENTAJAS
16. La cantidad de grasa en la dieta puede afectar el
resultado de esta prueba; personas normales que
ingieren alimentos ricos en grasas pueden tener una
cantidad elevada de grasa neutra en esta prueba;
Esta es una prueba de tamizado bastante confiable
para descartar esteatorrea en la mayoría de casos; sin
embargo, puede ocurrir un resultado negativo en una
persona con malabsorción si está ingiriendo muy
poca grasa en su dieta
DESVENTAJAS
17. Heces fresca , congelada o
refrigerada en recipiente apropiado.
Lamina laminilla y Palillo de
madera.
Reactivo , sudan III
MUETRAS.
18.
19. En la lamina portaobjetos agregar 2 gotas de sudan
III.
Tomamos con un palillo de madera o aplicador
una pequena muestra de heces y se mezcla.
Colocamos una laminilla cubreobjetos .
Se observa al microscopio.
PROCEDIMIENTO.