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PRUEBAS
BIOQUIMICAS
TSI
TSI: Triple Azúcar Hierro
Glucosa 1%
Lactosa 10%
Sacarosa 10%
Pico de Flauta:
Fermentación aerobia y anaerobia
1. Anaerobia:
Glucosa Acido Piruvico
1. Aerobia:
Acido Piruvico CO2 + H2O + Energía
Capa Profunda:
Anaerobiosis:
Glucosa Acido Piruvico + ATP
Ácidos orgánicos, Aldehídos, Alcoholes,
CO2, H2, Energía
Embden Meyerhof
Ciclo de Krebs
Embden Meyerhof
TSI
REACCIONES
1. Fermentación de los tres Azucares
2. Fermentación de glucosa
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4. Producción de H2S
5. Producción de gas: aerogenicas/
anaerogenicas.
Lecturas:
A/A, GAS (+), H2S(-)
K/A, Gas (-), H2S(-)
K/A, Gas (-), H2S(+)
K/K
LIA
 LISINA HIERRO AGAR
Descarboxilación de la Lisina
Desaminación de la lisina
Descarboxilación:
Glucosa: fermentación → amarillo (fondo)
Lisina: descarboxilada → aminas (amarilo → violeta, pH basico)
Desaminación:
Lisina: desaminada → acido carboxilico + NH3 (superficie: rojo)
Producción de H2S
CITRATO
 Citrato: fuente de carbono
 Alcalinización del medio
 Indicador: Azul de Bromotimol → Azul.
UREASA
 UREA + H2O E:ureasa
CO2+ H2O+ 2 NH3
 NH3: Forma Carbonato de Amonio → pH
básico: Viraje a Rosado.
SIM
 Sulfuro Indol Movilidad
 Indol: producto de la degradación del Triptofano.
Triptofano Indol+Acido piruvico+ NH3
Indol+ p aminobenzaldehido Anillo rojo
E: Triptofanasa
MR- VP
 Rojo de Metilo
 Voges Proskauer
1. Rojo de Metilo:
Producción de Acido a partir de la fermentación de la glucosa
Producción de Acido: estable → Medio rojo (Rojo de Metilo)
Si no hay Producción de Acido: RM (-)
2. Voges Proskauer:
Productos de la fermentación de la glucosa → Acetoína → Diacetilo + Naftol
→ color rojo fucsia
CATALASA
 Bacterias aerobias obligadas y anaerobias
facultativas: catalasa positivas.
 Contienen flavoproteínas que reducen el O2
produciéndose H2O2 o O2
-
(compuestos tóxicos).
 Compuestos tóxicos: matan a las bacterias.
 Enzimas: superoxido bismutasa y catalasa, destruyen
compuestos tóxicos.
COAGULASA
 Enzima que coagula el plasma.
 Indicador del potencial patógeno del
Staphylococcus aureus.
Estafilocoagulasa + protrombina → estafilotrombina
Fibrinógeno Fibrina (coagulo)
OXIDASA
 Habilidad de producción de citocromo
oxidasa.
 Bacterias que utilizan O2 como aceptor de
electrones: oxidasa positiva.
 La presencia de oxidasa es determinada por el
reactivo tetrametil fenilendiamina
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oscuro.
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Pruebas bioquimicas

  • 2. TSI TSI: Triple Azúcar Hierro Glucosa 1% Lactosa 10% Sacarosa 10%
  • 3. Pico de Flauta: Fermentación aerobia y anaerobia 1. Anaerobia: Glucosa Acido Piruvico 1. Aerobia: Acido Piruvico CO2 + H2O + Energía Capa Profunda: Anaerobiosis: Glucosa Acido Piruvico + ATP Ácidos orgánicos, Aldehídos, Alcoholes, CO2, H2, Energía Embden Meyerhof Ciclo de Krebs Embden Meyerhof TSI
  • 4. REACCIONES 1. Fermentación de los tres Azucares 2. Fermentación de glucosa 3. No fermentación de azucares. 4. Producción de H2S 5. Producción de gas: aerogenicas/ anaerogenicas.
  • 5. Lecturas: A/A, GAS (+), H2S(-) K/A, Gas (-), H2S(-) K/A, Gas (-), H2S(+) K/K
  • 6. LIA  LISINA HIERRO AGAR Descarboxilación de la Lisina Desaminación de la lisina Descarboxilación: Glucosa: fermentación → amarillo (fondo) Lisina: descarboxilada → aminas (amarilo → violeta, pH basico) Desaminación: Lisina: desaminada → acido carboxilico + NH3 (superficie: rojo) Producción de H2S
  • 7.
  • 8. CITRATO  Citrato: fuente de carbono  Alcalinización del medio  Indicador: Azul de Bromotimol → Azul.
  • 9.
  • 10.
  • 11. UREASA  UREA + H2O E:ureasa CO2+ H2O+ 2 NH3  NH3: Forma Carbonato de Amonio → pH básico: Viraje a Rosado.
  • 12.
  • 13. SIM  Sulfuro Indol Movilidad  Indol: producto de la degradación del Triptofano. Triptofano Indol+Acido piruvico+ NH3 Indol+ p aminobenzaldehido Anillo rojo E: Triptofanasa
  • 14.
  • 15.
  • 16. MR- VP  Rojo de Metilo  Voges Proskauer 1. Rojo de Metilo: Producción de Acido a partir de la fermentación de la glucosa Producción de Acido: estable → Medio rojo (Rojo de Metilo) Si no hay Producción de Acido: RM (-) 2. Voges Proskauer: Productos de la fermentación de la glucosa → Acetoína → Diacetilo + Naftol → color rojo fucsia
  • 17.
  • 18.
  • 19.
  • 20. CATALASA  Bacterias aerobias obligadas y anaerobias facultativas: catalasa positivas.  Contienen flavoproteínas que reducen el O2 produciéndose H2O2 o O2 - (compuestos tóxicos).  Compuestos tóxicos: matan a las bacterias.  Enzimas: superoxido bismutasa y catalasa, destruyen compuestos tóxicos.
  • 21.
  • 22.
  • 23. COAGULASA  Enzima que coagula el plasma.  Indicador del potencial patógeno del Staphylococcus aureus. Estafilocoagulasa + protrombina → estafilotrombina Fibrinógeno Fibrina (coagulo)
  • 24.
  • 25. OXIDASA  Habilidad de producción de citocromo oxidasa.  Bacterias que utilizan O2 como aceptor de electrones: oxidasa positiva.  La presencia de oxidasa es determinada por el reactivo tetrametil fenilendiamina dihidrocloruro. Producción de color purpura oscuro.