TIPOLOGÍA TEXTUAL- EXPOSICIÓN Y ARGUMENTACIÓN.pptx
ESTABLECIMIENTO DE YEMAS DE GUAYABA AL SISTEMA DE CULTIVO IN-VITRO
1. PRACTICA 3
Tema: Establecimiento de yemas de Guayaba (Psidium guajava)
Objetivo: Introducir yemas apicales y axilares de Guayaba (Psidium guajava) al sistema de
cultivo in vitro.
Procedimiento
Se preparó, previamente, un medio MS enriquecido con: 3% azúcar, 0,6% agar, 0.5
mg/L de BAP, las soluciones stock de la hormona contenía 1mg/ml de BAP.
Se extrajeron los explantes de la muestras realizando cortes con una tijera.
Img.02. Explantesobtenidos
Se preparó una solución de detergente al 2% en 500 ml de agua, en un frasco.
Cálculosde la solución:
1% 𝑑𝑒 𝑑𝑒𝑡𝑒𝑟𝑔𝑒𝑛𝑡𝑒 =
2𝑔 𝑑𝑒𝑡𝑒𝑟𝑔𝑒𝑛𝑡𝑒
100 𝑚𝑙 𝑑𝑒𝑙 𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜
5𝑜𝑜 𝑚𝑙 𝑑𝑒𝑙 𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜∗
2𝑔 𝑑𝑒𝑡𝑒𝑟𝑔𝑒𝑛𝑡𝑒
100 𝑚𝑙 𝑑𝑒𝑙 𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜
= 10𝑔 𝑑𝑒𝑡𝑒𝑟𝑔𝑒𝑛𝑡𝑒
2. Img. 03. Aplicando los 10g de detergente (a), preparacion de la solucion de detergente
(b)
Se añadió la solución de detergente a los explantes y se mantuvo en agitación por 15
minutos.
Img. 04. Añadiendo la solución de detergente (a), agitación de los explantes más solución de
detergente (b)
Se realizaron 3 enjuagues con agua destilada estéril por 3 min c/u, en agitación para eliminar
el detergente desechando el agua después de cada enjuague.
A B
A B
3. Img.05. Aplicando agua para realizar los enjuagues
Se preparó una solución de cloro al 1.25% con 500 ml de agua. Teniendo en cuenta que la
concentración del cloro comercial es de 5.25%.
Cálculos de la solución
𝐶1𝑉1 = 𝐶2𝑉2
𝐶1:5,25 𝑦 𝑉1: ? ; 𝐶2:1,25% 𝑦 𝑉2:500𝑚𝑙
𝑉1: 1,25% ∗
500𝑚𝑙
5,25 %
=
1000𝑚𝑙
5,25
= 119 𝑚𝑙
Se terminó la solución de cloro, aplicando primero los 119 ml y luego se completó
con agua hasta llegar a un volumen de 500 ml.
Img. 06. Aplicando los 119 ml de cloro (a), completando con agua hasta un volumen
de 500 ml (b)
Se añadió la solución de cloro a las muestras y se mantuvo en agitación por 10
minutos.
A B
4. Img. 07. Añadiendo la solución de cloro.
Se eliminó la solución de cloro y se realizaron 3 enjuagues con agua destilada,
estéril por 3 min c/u, manteniendo en agitación, se desecharon el agua de los dos
primeros enjuagues y se dejaron las muestras en el agua del último enjuague.
Img. 08. Ultima agua del enjuague
Siembra de las yemas
Se sacaron las Yemas del agua y se eliminó las partes más externas del tallo, los cuales
presentaban quemadura por la acción del cloro.
5. Imagen. 09. Eliminado partes externas quemadas por el cloro
Se flameo los frascos que contenía el medio de cultivo en el mechero.
Img. 10. Flameo del frasco con medio Ms (a), Siembra de las yemas (b)
Se sembró 4 yemas por frasco.
Img. 11. Siembra de las yemas
Se flameo el frasco y se le coloco la tapa.
Img. 12. Flameo del frasco sembrado (a), frasco sembrado y sellado con tapa (b)
A B
A B